胃炎飲對胃潰瘍大鼠血清內皮素-1和一氧化氮含量的影響

于文濤鄧國興楊牧祥方朝義王少賢

(河北中醫(yī)學院基礎醫(yī)學院，河北石家莊050091)

摘要〔〕目的探討胃炎飲對胃潰瘍模型大鼠血清內皮素1(ET-1)、一氧化氮(NO)含量的影響。方法采用冰醋酸腐蝕法建立實驗性胃潰瘍大鼠模型，以奧美拉唑為對照，觀察胃炎飲對實驗性胃潰瘍大鼠胃粘膜潰瘍面積和血清ET-1、NO含量的影響。結果與假手術組相比，模型組的血清ET-1含量明顯升高，NO含量明顯降低(P<0.01)；與模型組相比，各用藥組潰瘍面積均明顯縮小(P<0.01或P<0.05)，血清ET-1含量明顯下降(P<0.01)，胃炎飲高、低劑量組的血清NO含量明顯升高(P<0.01或P<0.05)。結論胃炎飲可調節(jié)血管舒縮因子，改善胃黏膜循環(huán)，從而促進潰瘍愈合。

關鍵詞〔〕胃炎飲；實驗性胃潰瘍；內皮素-1；一氧化氮

中圖分類號〔〕R256.33〔文獻標識碼〕A〔

基金項目：國家中醫(yī)藥管理局全國名老中醫(yī)傳承工作室建設項目〔國中醫(yī)藥人教發(fā)(2011)41號〕；河北省中醫(yī)藥管理局科研計劃資助項目(No.2011008)

通訊作者：鄧國興(1971-)，男，醫(yī)學碩士，教授，主要從事消化系統(tǒng)疾病的中醫(yī)證治研究。

第一作者：于文濤(1971-)，男，醫(yī)學博士，副教授，碩士生導師，主要從事消化系統(tǒng)疾病的中醫(yī)證治研究。

胃潰瘍是由于胃酸分泌過多、幽門螺桿菌感染和胃黏膜保護作用減弱等多種因素導致胃酸和胃蛋白酶消化自身的胃壁，致使黏膜組織受損的疾病。課題組前期研究表明，該方藥治療多種慢性胃病均取得了理想療效〔1，2〕。為進一步探討其治療胃潰瘍的作用機制，本文觀察該藥對胃潰瘍大鼠血清內皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)含量的影響。

1材料與方法

1.1 動物、藥物及儀器、試劑選取清潔級雄性Wistar大鼠50只，體重200～220 g，由河北醫(yī)科大學實驗動物中心提供。動物合格證編號：1205094。胃炎飲方：由柴胡、香附、川楝子、元胡、炒白術、茯苓、炙甘草、川連、陳皮、枳殼、姜半夏、姜竹茹等藥物組成，使用前水煎分別濃縮成含量為2.14 g生藥/ml(高劑量組)和1.07 g生藥/ml(低劑量組)的藥液。奧美拉唑腸溶膠囊：由哈藥集團三精制藥諾捷有限責任公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號：1111304，批準文號：國藥準字H20064032，規(guī)格：每粒20 mg。使用前用蒸餾水配制成濃度為0.368 mg/ml的藥液。HM-200電子天平(日本生產(chǎn))；1-15K高速冷凍離心機：美國Sigma公司；FJ-2021γ-放射免疫計數(shù)器：西安二六二廠。ET-1、NO試劑盒，均由南京建成生物工程研究所提供。

1.2方法

1.2.1 模型建立50只大鼠隨機抽取8只作為假手術組，其余參與正式造模。造模參照文獻〔3〕。大鼠術前禁食24 h，10%水合氯醛按每3 ml/kg體重腹腔注射麻醉，待大鼠失去意識后，于劍突下腹中線打開腹腔，暴露出胃，在胃前壁近幽門處，用浸有100%冰醋酸、直徑為5 mm的圓形濾紙接觸2次(注意避開血管)，每次30 s，棉簽吸干，生理鹽水沖洗，逐層縫合切口，手術過程按無菌操作。假手術組麻醉開腹，暴露胃壁，用生理鹽水代替冰醋酸浸濕濾紙接觸2次，每次30 s，縫合切口。

1.2.2 分組及給藥在造模術后第3天，剔除死亡大鼠，將造模成功存活大鼠隨機抽取32只，分為模型組、胃炎飲高劑量組、胃炎飲低劑量組、奧美拉唑組，每組8只。各藥物治療組按體重分別灌胃給藥，胃炎飲高劑量組灌服濃度為2.14 g生藥/ml的胃炎飲方藥液10 ml/kg(相當于21.4 g生藥/kg體重)，胃炎飲低劑量組灌服濃度為1.07 g生藥/ml胃炎飲方藥液10 ml/kg(相當于10.7 g生藥/kg體重)，奧美拉唑組灌服濃度為0.368 mg/ml(相當于3.68 mg/kg體重)。各用藥組從造模術后第3天開始治療，假手術組、模型組灌胃等容積的生理鹽水，1次/d，治療天數(shù)為14 d。

1.3 檢測指標及方法

1.3.1 潰瘍面積檢測最后1次灌胃給藥后禁食24 h，斷頭處死，無菌操作剖腹取胃，沿胃大彎剪開，冰生理鹽水漂洗胃內容物，把胃黏膜展平于平板上，濾紙吸干，肉眼觀察胃前壁近幽門的冰醋酸腐蝕處大體形態(tài)，用游標卡尺測量潰瘍的最大長徑和垂直最大寬徑，計算潰瘍面積和潰瘍抑制率。

1.3.2 血清ET-1和NO檢測大鼠斷頭取血3 ml，加入消炎痛EDTA-Na2液0.2 ml，顛倒混勻，3 500 r/min離心5 min提取上清。用于放射免疫法測定血清ET-1的含量，采用硝酸還原酶法測定NO含量。

2結果

2.1 大體形態(tài)觀察模型組大鼠胃黏膜潰瘍處呈圓形或橢圓形凹陷，狀若火山口，邊緣整齊，潰瘍底部覆蓋有灰白色炎性滲出物和壞死物，潰瘍周圍黏膜組織皺襞變粗，部分潰瘍組織與周圍組織存在粘連。各治療組大鼠潰瘍形態(tài)與模型組相似，但面積較小，滲出物和壞死物較少。假手術組大鼠胃黏膜未見異常。

2.2 各組大鼠潰瘍面積及潰瘍抑制率比較與模型組比較，各用藥組潰瘍面積均明顯縮小(P<0.01或P<0.05)；與奧美拉唑組比較，胃炎飲高劑量組潰瘍面積明顯縮小(P<0.05)；與胃炎飲低劑量組比較，胃炎飲高劑量組潰瘍面積明顯縮小(P<0.05)；胃炎飲高劑量組潰瘍抑制率為62.7%，高于胃炎飲低劑量組和奧美拉唑組，說明高劑量胃炎飲對潰瘍療效優(yōu)于低劑量組和奧美拉唑。見表1。

組別大鼠潰瘍面積(mm2)潰瘍抑制率(%)假手術組--模型組26.8±9.99-胃炎飲高劑量組10.0±4.622)3)62.7胃炎飲低劑量組19.5±6.022)4)27.2奧美拉唑組17.5±6.181)34.7

與模型組比較：1)P<0.05，2)P<0.01；與奧美拉唑組比較：3)P<0.05；與胃炎飲高劑量組比較：4)P<0.05

2.3 各組大鼠血清ET-1、NO含量比較與假手術組相比，模型組的血清ET-1含量明顯升高，NO含量明顯降低(P<0.01)。而與模型組相比，各給藥組的血清ET-1含量明顯減少(P<0.01)；胃炎飲高、低劑量組的血清NO含量明顯升高(P<0.01，P<0.05)。與奧美拉唑組相比，胃炎飲高劑量組的NO含量有明顯升高(P<0.05)。見表2。

組別ET-1(pg/ml)NO(μmol/ml)假手術組64.58±9.102)26.83±4.832)模型組78.57±13.4118.56±3.31胃炎飲高劑量組67.59±17.412)26.23±5.202)3)胃炎飲低劑量組67.73±15.852)23.64±3.691)奧美拉唑組66.91±15.012)22.13±2.18

與模型組比較：1)P<0.05，2)P<0.01；與奧美拉唑組比較：3)P<0.05

3討論

胃潰瘍，按照其臨床表現(xiàn)屬于中醫(yī)“胃痛”病癥范疇。中醫(yī)學認為，本病多由于飲食所傷，情志不遂，外邪侵襲，脾胃虛弱等因素所致。胃潰瘍的病位在胃，與肝脾等臟腑功能失調密切相關，主要病機為肝郁脾虛，胃失和降，故以疏肝健脾，和胃降逆為主要治法?！拔秆罪嫛庇刹窈?、香附、川楝子、元胡、炒白術、茯苓、炙甘草、川連、陳皮、枳殼、姜半夏、姜竹茹等藥物組成。方中柴胡疏肝解郁，理氣止痛，為君藥；香附、川楝子、元胡行氣止痛，并增強柴胡疏肝解郁作用，為臣藥；炒白術、茯苓、炙甘草健脾益氣，扶土抑木，川連善清胃火，兼清肝火，并佐制香附辛烈太過，四藥共為佐藥；枳殼、陳皮理氣和中，姜竹茹、姜半夏和胃降逆，四藥共為使藥。諸藥合用，共奏疏肝健脾，和胃降逆等功效。

ET-1是一種具有強烈、持久的縮血管和促血管平滑肌增殖的作用的活性多肽。ET-1的縮血管作用可導致胃黏膜血流量下降，具有強烈的致潰瘍性〔4〕。該作用可被血管內皮分泌的舒血管小分子活性物質NO拮抗。NO舒血管作用與ET的縮血管作用構成了胃腸黏膜局部血流動力學重要的平衡機制。臨床研究表明，老年活動性胃潰瘍患者血清NO水平明顯低于健康體檢者，提示在潰瘍的形成和愈合過程中存在NO的黏膜保護作用不足〔5〕。劉俊平等〔6〕報道，胃潰瘍患者血清ET-1水平高于無潰瘍患者，運用星狀神經(jīng)節(jié)阻滯技術能使胃潰瘍患者的ET-1降低，使其血清水平接近無消化潰瘍者，同時胃潰瘍的臨床治愈率、總有效率顯著增加，說明ET-1水平異常升高在胃潰瘍的形成和復發(fā)機制中占據(jù)重要作用。

本研究表明血管舒縮因子ET-1和NO的失衡參與了胃潰瘍的形成；與模型組比較，胃炎飲高、低劑量組均能升高NO含量，降低血清ET-1含量，說明該藥可調節(jié)血管舒縮因子，改善胃黏膜循環(huán)，從而促進潰瘍愈合。

4參考文獻

1楊牧祥，于文濤，王秉岳，等.胃炎飲治療膽汁反流性胃炎116例臨床療效觀察〔J〕.中國現(xiàn)代藥物應用，2009;3(15)：73-4.

2田元祥.楊牧祥教授對胃脘痛的認識及診治經(jīng)驗〔J〕.河北中醫(yī)，2007;29(4)：293-6.

3鄢順琴. 胃痛靈保護胃黏膜作用及對胃潰瘍愈合質量的影響〔J〕.中國中西醫(yī)結合雜志，1998；15(10)：612-4.

4馮好彬.中醫(yī)藥對胃黏膜細胞因子調節(jié)作用的研究進展〔J〕.白求恩軍醫(yī)學院學報，2009;7(3):175-6.

5尹會格，孟惠茹，黃一茜，等.大黃對老年胃潰瘍患者血清一氧化氮的影響〔J〕.中國藥業(yè)，2012;21(8)：27-8.

6劉俊平，王巖英，郭青梅，等.星狀神經(jīng)節(jié)阻滯對胃潰瘍患者血漿ET-1、CGRP水平的影響〔J〕.山東醫(yī)藥，2009;49(40)：77-9.

〔2013-09-03修回〕

(編輯趙慧玲/曹夢園)