趙崢嶸，孔　丹，劉彥明

(1.河南農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院，河南 鄭州 451450；　2.信陽師范學(xué)院 化學(xué)化工學(xué)院，河南 信陽 464000)

流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光檢測(cè)鹽酸異丙嗪

趙崢嶸1，孔丹1，劉彥明2

(1.河南農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院，河南 鄭州 451450；2.信陽師范學(xué)院 化學(xué)化工學(xué)院，河南 信陽 464000)

摘要：在堿性介質(zhì)中，鹽酸異丙嗪對(duì)luminol-KMnO4發(fā)光體系有顯著的增強(qiáng)作用.基于此增強(qiáng)作用，建立了一種FI-CL檢測(cè)鹽酸異丙嗪的新方法.在最優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，鹽酸異丙嗪的ΔICL強(qiáng)度與其濃度在7.0 × 10-9~ 9.0 × 10-7mol/L濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系.線性方程為ΔICL= 35.19 + 1.19 × 10-10c，相關(guān)系數(shù)r = 0.998 4，檢出限為4.9 × 10-9mol/L.對(duì)7.0 × 10-9mol/L的鹽酸氯丙嗪標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行11次平行測(cè)定，其RSD為2.4%.鹽酸異丙嗪加標(biāo)回收率在89.1%~96.1%之間.

關(guān)鍵詞：流動(dòng)注射；化學(xué)發(fā)光；鹽酸異丙嗪

鹽酸異丙嗪是一種鎮(zhèn)靜、抗過敏類藥物，主要具有強(qiáng)化麻醉以及使動(dòng)物安靜等功能，可以用于治療動(dòng)物變態(tài)反應(yīng)性疾病，如蕁麻疹、血清病等，也可用于防治動(dòng)物疾病和促進(jìn)長膘，提高飼料中營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，但是過量的使用會(huì)導(dǎo)致該藥品在動(dòng)物組織中產(chǎn)生殘留.因而，尋求一種簡便快捷的檢驗(yàn)、提純鹽酸氯丙嗪的方法，對(duì)中毒個(gè)體進(jìn)行臨床診斷并實(shí)施急救是至關(guān)重要的.中國藥典曾記載用紫外分光光度法測(cè)定其含量[1-2]，此外還有熒光光度法[3-4]、原子吸收分光光度法[5]、化學(xué)發(fā)光法[6-7]以及某些可見分光光度法，如鈀與鹽酸異丙嗪絡(luò)合物法[8]、高碘酸鉀氧化顯色法[9]、2-碘酰苯甲酸鹽比色法[10]、氯胺-T分光光度法[1]等.與上述檢測(cè)方法相比，化學(xué)發(fā)光檢測(cè)法具有線性范圍寬、靈敏度高、儀器設(shè)備簡單等優(yōu)點(diǎn).同時(shí)流動(dòng)注射技術(shù)因具有分析時(shí)間短、重現(xiàn)性好、耗樣量少等多種優(yōu)點(diǎn)，被廣泛的應(yīng)用于蛋白質(zhì)、氨基酸等多種生命活性物質(zhì)的檢測(cè)以及金屬離子、有機(jī)化合物等的分析測(cè)定.而將流動(dòng)注射分析法與化學(xué)發(fā)光分析法聯(lián)合應(yīng)用形成的流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光分析法既保留了一般化學(xué)發(fā)光分析法的優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)還具備流動(dòng)注射的優(yōu)點(diǎn)，從而得到了國內(nèi)外許多分析化學(xué)家的重視，并且越來越多的被用于對(duì)吩噻嗪類藥物的分析測(cè)定.

本文作者利用luminol-KMnO4發(fā)光體系在堿性介質(zhì)中可以產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，并且鹽酸異丙嗪對(duì)上述體系化學(xué)發(fā)光信號(hào)有強(qiáng)烈的增敏作用，提出了一種快速靈敏的檢測(cè)鹽酸異丙嗪的新方法.在實(shí)驗(yàn)過程中，對(duì)該發(fā)光體系的發(fā)光條件進(jìn)行了一系列的檢測(cè)并對(duì)流動(dòng)注射運(yùn)行參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化.在此基礎(chǔ)上，對(duì)鹽酸異丙嗪試劑進(jìn)行加標(biāo)回收，效果令人滿意.

1實(shí)驗(yàn)部分

1.1　儀器和試劑

IFFM-E型FI-CL分析儀(西安瑞邁分析儀器有限公司)；聚四氟乙烯管(內(nèi)徑0.8 mm).

鹽酸異丙嗪注射液購于當(dāng)?shù)厮幍辏霍斆字Z購于陜西師范大學(xué)；所用其他試劑均為分析純.實(shí)驗(yàn)所需溶液均采用18.2 MΩ·cm超純水中(臺(tái)灣艾柯-成都康寧實(shí)驗(yàn)專用純水設(shè)備廠)配制.0.01 mol/L魯米諾儲(chǔ)備液用0.1 mol/L NaOH稀釋.儲(chǔ)備液均保存于4 ℃的冰箱中.實(shí)驗(yàn)中所需各種試劑均為每日新配.

1.2　實(shí)驗(yàn)方法

根據(jù)鹽酸異丙嗪對(duì)luminol-KMnO4體系有很強(qiáng)的增敏作用，設(shè)計(jì)了如圖1所示的發(fā)光反應(yīng)流路圖.

按圖1所示安裝好管道，啟動(dòng)儀器，在設(shè)定的工作參數(shù)下預(yù)熱和走基線，待基線穩(wěn)定后，注入待測(cè)溶液進(jìn)行化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度測(cè)定，以相對(duì)峰高定量.用水作空白實(shí)驗(yàn)，將其發(fā)光強(qiáng)度減去樣品測(cè)定時(shí)的發(fā)光強(qiáng)度得到相對(duì)發(fā)光強(qiáng)度ΔI，并據(jù)此繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后在同等條件下用同樣方式測(cè)定實(shí)際樣品鹽酸異丙嗪注射液中鹽酸異丙嗪的含量.

a-Hb樣品/空白樣品溶液；b-水；c-魯米諾溶液；d-KMnO4溶液；P1，P2-蠕動(dòng)泵；S-六通閥進(jìn)樣器；Y1，Y2-混合器；F-流通池；W-廢液；PMT-光電倍增管；NHV-負(fù)高壓；PC-計(jì)算機(jī).圖1　FI-CL實(shí)驗(yàn)流路圖Fig.1　Scheme of FI-CL system

2結(jié)果與討論

為了獲得高的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度和檢測(cè)靈敏度，我們對(duì)影響化學(xué)發(fā)光的檢測(cè)條件(NaOH、luminol、KMnO4濃度)和運(yùn)行參數(shù)進(jìn)行了詳細(xì)優(yōu)化.

2.1　反應(yīng)體系優(yōu)化

2.1.1緩沖溶液的影響

預(yù)實(shí)驗(yàn)表明，當(dāng)luminol儲(chǔ)備液用超純水配制時(shí)，luminol-KMnO4體系的發(fā)光信號(hào)較弱.為了增強(qiáng)發(fā)光信號(hào)強(qiáng)度，需將luminol用緩沖介質(zhì)配制.分別考察了Na2CO3、PBS、NaHCO3、NaOH、Na2B4O7·10H2O和Na2HPO4·12H2O等幾種緩沖介質(zhì)對(duì)luminol-KMnO4體系發(fā)光信號(hào)的影響.結(jié)果表明，將luminol儲(chǔ)備液用NaOH緩沖溶液稀釋時(shí)，獲取發(fā)光信號(hào)最強(qiáng).

以NaOH溶液為緩沖溶液，考察了在0.15～0.4 mol/L濃度范圍內(nèi)，NaOH對(duì)發(fā)光信號(hào)的影響.結(jié)果表明，在0.15～0.3 mol/L濃度范圍內(nèi)，體系產(chǎn)生的發(fā)光信號(hào)隨NaOH濃度的增大而增強(qiáng)；在0.3 mol/L時(shí)產(chǎn)生的發(fā)光信號(hào)最強(qiáng)；其后，在0.3～0.4 mol/L濃度范圍內(nèi)，體系產(chǎn)生的發(fā)光信號(hào)隨NaOH濃度增大而減弱(圖2).所以，以下實(shí)驗(yàn)均將luminol儲(chǔ)備液配置在0.3 mol/L NaOH介質(zhì)中.

圖2　 NaOH濃度對(duì)ΔICL的影響Fig.2　Effect of NaOH concentration on ΔICL

2.1.2Luminol濃度的影響

測(cè)試了濃度在1.0 × 10-6～8 × 10-5mol/L范圍內(nèi)luminol對(duì)發(fā)光信號(hào)的影響.如圖3所示，在1.0 × 10-6～3.0 × 10-5mol/L范圍內(nèi)，隨著luminol濃度增加ΔICL增大，3.0 × 10-5mol/L時(shí)發(fā)光強(qiáng)度達(dá)到最大值，之后在3.0 × 10-5～8 × 10-5mol/L范圍內(nèi)ΔICL隨luminol濃度的增加而減小.因此，本實(shí)驗(yàn)選取濃度為3.0 × 10-5mol/L luminol進(jìn)行實(shí)驗(yàn).

圖3　luminol濃度對(duì)ΔICL的影響Fig.3　Effect of luminol concentration on ΔICL

2.1.3KMnO4濃度的影響

考察了KMnO4濃度(1.0 × 10-6～6.0 × 10-5mol/L)對(duì)ΔICL的影響.如圖4所示，在1.0 × 10-6～1.0 × 10-5mol/L范圍內(nèi)，隨著KMnO4濃度的增加ΔICL增大，之后在1.0 × 10-5～4.0 × 10-5mol/L范圍內(nèi)，ΔICL隨KMnO4濃度的增加逐漸減小.因此，本實(shí)驗(yàn)選取KMnO4濃度為1.0 × 10-5mol/L.

圖4　KMnO4濃度對(duì)ΔICL的影響Fig.4　Effect of KMnO4 concentration on ΔICL

2.2FI-CL流路參數(shù)優(yōu)化

為了獲得較高的發(fā)光強(qiáng)度和檢測(cè)靈敏度，對(duì)流動(dòng)注射運(yùn)行參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化.優(yōu)化結(jié)果見表1.

表1　運(yùn)行參數(shù)優(yōu)化及結(jié)果Table 1　Effect of run parameters of FI-CL systemand the optimum values

2.3　線性范圍、檢出限和重現(xiàn)性

在上述優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，鹽酸異丙嗪的ΔICL強(qiáng)度與其濃度在7.0 × 10-9~ 9.0 × 10-7mol/L濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系，線性方程為ΔICL= 35.19 + 1.19 × 10-10c，相關(guān)系數(shù)r= 0.998 41，檢出限為4.9 × 10-9mol/L.對(duì)7.0 × 10-9mol/L 的鹽酸氯丙嗪標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行11次平行測(cè)定，其RSD為2.4%.

2.4　干擾實(shí)驗(yàn)

當(dāng)鹽酸異丙嗪的濃度為1.0 × 10-8mol/L時(shí)，考察了樣品中可能的共存物對(duì)鹽酸氯丙嗪測(cè)定結(jié)果的影響.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明(見表2)，本實(shí)驗(yàn)提出的新方法可用于實(shí)際樣品的測(cè)定.

2.5　實(shí)際樣品分析

對(duì)鹽酸異丙嗪注射液(購于當(dāng)?shù)刂行尼t(yī)院)取樣分析.并在3個(gè)不同濃度下對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行加標(biāo)回收測(cè)試，結(jié)果見表3.結(jié)果表明，鹽酸異丙嗪的加標(biāo)回收率在89.1%～96.1%之間，RSD為4.2%.

表2　干擾試驗(yàn)Table 2　Tolerable concentration ratios ofsome interfering species

表3　鹽酸異丙嗪注射液中鹽酸異丙嗪含量測(cè)試及加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)Table 3　Detection of Promethazine Hydrochloride Injectionpromethazine in content and standard recovery test

3結(jié)論

利用鹽酸異丙嗪對(duì)luminol-KMnO4發(fā)光體系有顯著的增強(qiáng)作用(圖5)建立了一種流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光檢測(cè)鹽酸異丙嗪的新方法.鹽酸異丙嗪加標(biāo)回收率在89.1%～96.1%之間.該方法體系簡單、測(cè)定迅速、靈敏度高、選擇性好，可以用于鹽酸異丙嗪的分析檢測(cè).

反應(yīng)條件：cluminol=3.0 × 10-5 mol/L; cKMnO4=1.0 × 10-5 mol/L; cNaOH=0.3 mol/L.圖5　鹽酸異丙嗪對(duì)luminol-KMnO4 發(fā)光體系的增強(qiáng)作用Fig.5　Promethazine hydrochloride on the luminescence of luminol-KMnO4 system

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[責(zé)任編輯：任鐵鋼]

Detection of promethazine hydrochloride by flow-injection

chemiluminescence

ZHAO Zhengrong1,KONG Dan1,LIU Yanming2

(1.HenanVocationalCollegeofAgriculture,Zhengzhou451450,Henan,China;

2.CollegeofChemistryandChemicalEngineering,XinyangNormalUniversity,Xinyang464000,Henan,China)

Abstract:The main purpose of this study was to develop an inexpensive,rapid,simple and sensitive CL method for the determination of promethazine hydrochloride using a FI system.Promethazine hydrochloride was found the remarkable enhancement function to the luminol-KMnO4system in NaOH solution.Based on this,we have established one new method.Parameters affecting the reproducibility and CL detection were optimized systematically.Under the optimized experimental condition.The relative standard deviation (RSD) was found to be 2.4% for 11 replicate determinations of 7.0 × 10-9mol/L promethazine hydrochloride.This proposed method has been satisfactorily applied for the determination of promethazine hydrochloride in real samples with recoveries in the range of 89.1% to 96.1%.

Keywords:flow-injection; chemiluminescence; promethazine hydrochloride

作者簡介：趙崢嶸(1979-)，女，講師，研究方向?yàn)榉治龌瘜W(xué)和應(yīng)用化學(xué).E-mail:zzrgyl@163.com.

基金項(xiàng)目：河南省高等學(xué)校重點(diǎn)科研項(xiàng)目(15B150005).

收稿日期：2014-09-04.

中圖分類號(hào)：O657.3

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1008-1011(2015)02-0175-04