南瓜多糖對D-半乳糖致腦老化模型小鼠SOD、CAT、GSH-PX、MDA的影響

高鵬，顏國華

(鄭州澍青醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校,鄭州 450064)

摘要：目的探討南瓜多糖對D-半乳糖致腦老化模型小鼠SOD、CAT、GSH-PX、MDA的影響。方法將小鼠隨機(jī)分為6組,分別為空白組、模型組、維生素E組，南瓜多糖大、中、小劑量組?？瞻捉M每鼠每天頸背部皮下注射生理鹽水0.5 mL，其余各組每鼠每天頸背部皮下注射5%D-半乳糖生理鹽水液0.5 mL造腦老化模型,連續(xù)給D-半乳糖45 d。從第10天開始，分別灌服大、中、小劑量南瓜多糖水溶液、維生素E混懸液和同體積生理鹽水,1次/d，連續(xù)35 d，于最后1次給D-半乳糖和灌藥后2 h，小鼠眼球取血，測定SOD、CAT、GSH-PX、MDA。結(jié)果與模型組相比，南瓜多糖大劑量組可顯著提高小鼠SOD活力(P<0.01)，南瓜多糖中、小劑量組可明顯提高小鼠SOD活力(P<0.05)；南瓜多糖大劑量組可明顯提高小鼠CAT活力(P<0.05);南瓜多糖大、中、小劑量組均可顯著提高小鼠GSH-PX活力(P<0.01);與模型組相比，南瓜多糖大、中、小劑量組均可顯著降低小鼠血漿、肝勻漿中MDA水平(P<0.01);南瓜多糖中、小劑量組均可顯著降低小鼠腦勻漿中MDA水平(P<0.01),南瓜多糖大劑量組可明顯降低小鼠MDA水平(P<0.05)。結(jié)論南瓜多糖能夠提高SOD、CAT、GSH-PX活力，降低MDA水平，具有一定的抗氧化作用。

關(guān)鍵詞：南瓜多糖；D-半乳糖；腦老化；小鼠

DOI::10.13463/j.cnki.jlzyy.2015.07.020

中圖分類號：R339.3文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號：1003-5699(2015)07-0713-03

基金項(xiàng)目:鄭州澍青醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校重點(diǎn)課題(12002)。

作者簡介:高鵬(1982-)，男，大學(xué)本科，講師，主要從事基礎(chǔ)中醫(yī)學(xué)的教學(xué)與研究工作。

收稿日期:(責(zé)任編輯：張瑞彬2014-10-25)

Effect of Pumpkin polysaccharide on SOD,CAT,GSH-PX and MDA in

aging mice model induced by D-galactose

GAO Peng,YAN Guohua

(Zhengzhou Shuqing Medical College,Zhengzhou 450064,China)

Abstract:ObjectiveTo observe the effect of Pumpkin polysaccharide on SOD，CAT，GSH-PX and MDA in aging mice model induced by D-galactose.MethodMice were randomly divided into 6 groups,respectively for the blank group,model group,vitamin E,pumpkin polysaccharide large,medium and small dose group.Blank group each rat cervical back subcutaneous injection of saline every day 0.5ml,groups each rat carotid every day back subcutaneous injection of 5% D-galactose saline solution 0.5 mL brain aging model.Straight to the D-galactose 45 days.Starting from the 10 th day,filling and respectively take large,medium and small dose of pumpkin polysaccharide aqueous solution mixed suspension,vitamin E and with normal saline,volume 1 times a day,35 days in a row,in the last one to D-galactose and 2 h after feeding,eyeball blood in mice,the determination of SOD,CAT and GSH-PX and MDA.ResultsCompared with model group,the pumpkin polysaccharide large dose group can significantly increase the SOD activity in mice (P<0.01),the pumpkin polysaccharide,small dose group can obviously increase the SOD activity in mice (P<0.05);Pumpkin polysaccharide large dose group can obviously improve the CAT activity in mice (P<0.05);Large,medium and small dose group of the pumpkin polysaccharide can significantly increase gsh-px activity in mice (P<0.01);Compared with model group,large,medium and small dose group of the pumpkin polysaccharide can significantly decrease the MDA level in plasma,liver homogenate in mice (P<0.01);Pumpkin polysaccharide in medium and small dose group can significantly reduce the little mouse brain homogenate MDA level (P<0.01),pumpkin polysaccharide large dose group can obviously reduce the level of MDA in mice (P<0.05).ConclusionPumpkin polysaccharide could improve vitality of SOD,CAT,GSH-PX,and reduce the level of MDA,it had a certain antioxidant.

Keywords:Pumpkin polysaccharide;D-galactose;laneuria;rat

南瓜是葫蘆科南瓜屬植物南瓜的果實(shí)，營養(yǎng)全面，臨床具有多種藥用價值[1]。南瓜多糖是南瓜有效成分中重要的活性物質(zhì)，近年來研究證實(shí)[2]，南瓜多糖在降糖、降血脂、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等方面具有明顯的藥理作用,本研究主要從南瓜多糖對D-半乳糖致腦老化模型小鼠超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)的影響方面進(jìn)行研究，旨在探討南瓜多糖對衰老小鼠自由基代謝的影響。

1材料與方法

1.1藥品及試劑南瓜多糖，西安天園生物制劑廠生產(chǎn)，批號20100624;維生素E，鄭州龍生化工產(chǎn)品有限公司生產(chǎn)，批號20111042；D-半乳糖，上海安妍生物有限公司生產(chǎn)，批號20120708；三氯乙酸(分析純)，鄭州中天實(shí)驗(yàn)儀器有限公司，批號20120207;肝素鈉，山東省泰安新泰市朝陽生化研究所，批號20131106；生理鹽水，四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號12030601；SOD檢測試劑盒，艾美捷科技有限公司生產(chǎn)，批號20130721；MDA檢測試劑盒，艾美捷科技有限公司生產(chǎn)，批號20130812；CAT檢測試劑盒，艾美捷科技有限公司生產(chǎn)，批號20130713；GSH-Px檢測試劑盒，艾美捷科技有限公司生產(chǎn)，批號20131102。

1.2儀器UV-2000紫外可見分光光度計，尤尼柯(上海)儀器有限公司生產(chǎn)。

1.3動物小鼠，KM種，雌雄各半，體質(zhì)量19～22 g，山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司實(shí)驗(yàn)動物室，生產(chǎn)許可證號：SCXK(魯)20130001。

1.4方法取KW種小鼠60只,隨機(jī)分為6組(雌雄分籠飼養(yǎng))，分別為空白組、模型組、維生素E組、南瓜多糖高、中、低劑量組?？瞻捉M每鼠每天頸背部皮下注射生理鹽水0.5 mL，其余各組每鼠每天頸背部皮下注射5% D-半乳糖生理鹽水液0.5 mL造腦老化模型[3]。小鼠每周稱重1次，調(diào)整給藥量，連續(xù)給D-半乳糖45 d。從第10天開始，分別灌服高、中、低劑量南瓜多糖水溶液(0.6、0.4、0.2 g/kg，取南瓜多糖用生理鹽水配制，0.2 mL/10 g)、維生素E混懸液(0.09 g/kg，用0.5%CMC配制，0.2 mL/10 g)和同體積生理鹽水，1次/d，連續(xù)35 d，于最后1次給D-半乳糖和灌藥后2 h，小鼠眼球取血置于備好的肝素抗凝管中抗凝，分取部分全血液測GSH-Px、CAT，剩余血液離心取血漿測SOD、MDA，將小鼠處死，取腦、肝，生理鹽水制成10%腦、肝勻漿，測MDA。上述測定方法均嚴(yán)格按照各自的試劑盒說明書進(jìn)行。

2實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1南瓜多糖對腦老化模型小鼠血中SOD、CAT、GSH-PX活力的影響見表1。

表1　南瓜多糖對腦老化模型小鼠血中SOD、CAT、GSH-PX活力的影響

注：與模型組相比，#P<0.05，##P<0.01

2.2南瓜多糖對腦老化模型小鼠血漿、腦勻漿、肝勻漿中MDA含量的影響見表2。

表2　南瓜多糖對腦老化模型小鼠血漿、腦勻漿、肝勻漿中MDA含量的影響 　nmol/mgprot

注：與模型組相比，#P<0.05,##P<0.01

3結(jié)論

早在二十世紀(jì)五六十年代，有學(xué)者提出了關(guān)于氧化自由基的學(xué)說[4]，該學(xué)說認(rèn)為機(jī)體在代謝過程中，能夠不斷產(chǎn)生自由基，同時機(jī)體又存在自由基清除系統(tǒng)[5]，比如SOD和GHS-PX等抗氧化酶，上述物質(zhì)的存在可以對抗和消除自由基的損傷，使機(jī)體自由基保持正常水平[6]。研究[7]表明,SOD是體內(nèi)重要的抗氧化酶，能清除超氧陰離子自由基，保護(hù)細(xì)胞免受損傷。組織中存在的CAT,可隨時使氧化變性的大分子還原恢復(fù)功能[8]，在細(xì)胞核中也存在著DNA修復(fù)酶，另一方面是對自由基強(qiáng)氧化物的消除機(jī)制[9]。GSH-Px是機(jī)體內(nèi)廣泛存在的一種重要的催化H2O2分解的酶，它也可以保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能免受H2O2的氧化損傷[10],而MDA是機(jī)體中細(xì)胞膜受到氧自由基的攻擊、細(xì)胞膜中的多不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過氧化作用的產(chǎn)物[11]，可反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度，間接地反映出細(xì)胞損傷的程度[12]。

南瓜為葫蘆科植物南瓜的果實(shí)，具有補(bǔ)中益氣、消炎止痛、解毒殺蟲之功效[13]。近年來有報道顯示南瓜具有抗衰老作用[14]，因此，在本實(shí)驗(yàn)中，我們觀察了南瓜多糖對腦老化模型小鼠自由基的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，南瓜多糖高劑量組可顯著提高小鼠SOD活力(P<0.01)，南瓜多糖中、低劑量組可明顯提高小鼠SOD活力(P<0.05)；南瓜多糖高劑量組可明顯提高小鼠CAT活力(P<0.05)；南瓜多糖高、中、低劑量組均可顯著提高小鼠GSH-PX活力(P<0.01)；南瓜多糖高、中、低劑量組均可顯著降低小鼠血漿、肝勻漿中MDA水平(P<0.01)；南瓜多糖中、低劑量組均可顯著降低小鼠腦勻漿中MDA水平(P<0.01),南瓜多糖高劑量組可明顯降低小鼠MDA水平(P<0.05)。上述實(shí)驗(yàn)提示，南瓜多糖對腦老化模型小鼠自由基確實(shí)有一定影響,具有抗氧化、延緩衰老作用，有利于中藥抗衰老領(lǐng)域的進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]王昱,李海燕,張世忠.南瓜功能成分的研究及其發(fā)展[J].天津農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,16(5):133-135.

[2]刁文超,吳昊,楊紹蘭,等.南瓜多糖的分離純化及抗氧化活性研究[J].中國食品學(xué)報,2012,12(11):24-31.

[3]唐瑛,雷呈祥,段凱,等.半夏總生物堿對D-半乳糖所致衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的改善作用[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2012,20(18):224-227.

[4]胥冰,席孝賢,賀新懷.千佛菌對D-半乳糖致衰老小鼠腦組織SOD,GSH-PX和MDA的影響[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥,2010,30(6):100-101.

[5]陳艷珍,宋新華.黃秋葵果實(shí)粉對衰老模型小鼠抗氧化能力的影響[J].食品研究與開發(fā),2014,35(15):19-22.

[6]任瑞琴,陳丹,程清.芙蓉李總多酚提取物對D-半乳糖所致亞急性衰老小鼠的抗氧化作用[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué),2014,31(1):5-9.

[7]陳頗,張澤生,楊華.迷迭香提取物對D-半乳糖致衰老小鼠氧化損傷的保護(hù)作用[J].食品工業(yè)科技,2012,14(33):357.

[8]吳巧攀,喬洪翔,何厚洪,等.銀杏葉渣中多糖的提取及其抗氧化活性研究[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué),2014,31(1):9-10.

[9]王書華,楊國棟,饒娜,等.金蓮花中藥草許和牡荊許對D-半乳糖致衰小鼠體內(nèi)抗氧化作用的影響[J].中國老年學(xué)雜志,2011,31(24):4818-4820.

[10]石娜,蘇潔,楊正標(biāo),等.白術(shù)多糖對D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗氧化作用[J].中國新藥雜志,2014,23(5):577.

[11]馬濤,徐世軍,張?jiān)蕩X,等.益腎化濁解毒法對D-半乳糖致癡呆小鼠學(xué)習(xí)記憶及氧化應(yīng)激的影響[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2014,20(7):895-897.

[12]徐紅艷,劉富國,于陽陽,等.東北山核桃仁油對D-半乳糖衰老小鼠抗氧化能力的影響[J].食品科學(xué),2012,33(7):266-269.

[13]畢新穎,王建南,姜玲玲,等.南瓜多糖的多重生理效應(yīng)研究進(jìn)展[J].生物學(xué)雜志,2014,31(1):78-80.

[14]劉穎,梁盈,林親錄,等.南瓜多糖的提取及其抗氧化活性研究進(jìn)展[J].食品與機(jī)械,2014,30(3):239-242.