李 姮
(江蘇省連云港市藥品檢驗(yàn)所 江蘇 連云港 222000)
曲匹布通片是臨床上常用的利膽藥。該藥具有療效確切、副作用小等特點(diǎn),是目前臨床上治療膽道疾病的首選藥。曲匹布通片對(duì)患者的膽囊平滑肌具有鎮(zhèn)靜的作用,能促進(jìn)其膽汁的生成。該藥是七十年代未由日本研發(fā)的,并于1981年應(yīng)用于膽道疾病的臨床治療中。我國于1984年由株州湘江制藥廠(現(xiàn)湖南省千金湘江藥業(yè)有限公司)將該藥研制成功,并于同年上市。溶出度是指片劑等固體制劑在規(guī)定溶劑中溶出的速度和程度,它是反映片劑等固體制劑質(zhì)量的一個(gè)重要指標(biāo)。過去,我國主要采用紫外分光光度法測(cè)定曲匹布通片的溶出度,但效果欠佳。近年來,大量的臨床實(shí)踐證實(shí),用HPLC法測(cè)定曲匹布通片溶出度的效果較好,具有準(zhǔn)確、快速、靈敏度高等優(yōu)勢(shì)。為了進(jìn)一步探討用HPLC法測(cè)定曲匹布通片溶出度的效果,我們進(jìn)行了以下試驗(yàn):
1.1 儀器 Waters-2695型高效液相色譜儀,Waters-2996型紫外檢測(cè)器,Empower色譜工作站,ZRS—8G智能溶出試驗(yàn)儀(由天津大學(xué)儀器廠生產(chǎn)),塞多利斯BP211D電子分析天平。
1.2 試劑 曲匹布通對(duì)照品(由中國藥品生物制品檢定所生產(chǎn)),曲匹布通片(為三個(gè)不同廠家的三批藥品),色譜甲醇,純化水,分析純冰醋酸。
2.1 色 譜 條 件 采用 XDB-C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇 :0.1mol-1醋酸溶液(70:30)為流動(dòng)相,將流速設(shè)為1.0 ml/min,將檢測(cè)的波長設(shè)為270nm,將柱溫設(shè)為30℃,理論塔板數(shù)(色譜的柱效參數(shù)之一)>3000,色譜圖中相鄰兩峰的分離度>1.5。
2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取曲匹布通對(duì)照品100.2mg,置于200ml的量瓶中,向其中加入適量的甲醇,然后進(jìn)行超聲溶解,使之稀釋至刻度,即制得對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密量取5ml的對(duì)照品儲(chǔ)備液,將其置于50ml的量瓶中,用甲醇將其稀釋至刻度,即制得對(duì)照品溶液。
2.3 供試品溶液的制備 取6片曲匹布通片,將其研碎,精密稱取15mg的曲匹布通藥粉,置入1000ml的量瓶中,在瓶中加入500ml的磷酸鹽緩沖溶液(pH值為7.4)。對(duì)此溶液進(jìn)行超聲溶解,將其稀釋至刻度后搖勻,用0.45μm的濾膜對(duì)此溶液進(jìn)行過濾。然后精密量取此濾液5ml,將其置于10ml的量瓶中,用甲醇將這5ml的濾液稀釋至刻度,即制得供試品溶液。
2.4 線性關(guān)系考察 精密稱取對(duì)照品溶液10μL、20μL、30μL、40μL、50μL,分別將其置于50ml的量瓶中,加入甲醇-水(80∶20)溶液稀釋至刻度,并按上述色譜條件進(jìn)樣。以曲匹布通片的質(zhì)量(X)為橫坐標(biāo),以峰面積(Y)為縱坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸分析,即得出回歸方程和線性范圍。結(jié)果為:Y=6.13×106X+4130,r=0.9997,曲匹布通片的濃度在0.501μg~2.505μg的范圍內(nèi)與吸收度的線性關(guān)系良好。
2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密量取20μL的對(duì)照品溶液,將其注入色譜儀內(nèi),分別在0h、2h、4h、6h、8h測(cè)定其峰面積。結(jié)果表明,在12h內(nèi),曲匹布通對(duì)照品溶液峰面積值無明顯變化,其峰面積的標(biāo)準(zhǔn)差(RSD)為0.9%,表示其穩(wěn)定性良好。2.6 精密度試驗(yàn) 在上述色譜條件下,取曲匹布通對(duì)照品溶液20μL重復(fù)進(jìn)樣六次,記錄其峰面積。結(jié)果表明,曲匹布通峰面積的RSD為0.6%。
2.7 加樣回收率試驗(yàn) 分別量取曲匹布通供試品溶液10ml,將其加入到2ml、4ml、6ml的對(duì)照品溶液中,然后用甲醇將此混合液定容到20ml的量瓶中,即制得加樣回收的供試品溶液。精密量取20μL加樣回收的供試品溶液注入色譜儀中進(jìn)行分析,以曲匹布通的峰面積計(jì)算其回收率。結(jié)果見表1。
表1 曲匹布通的加樣回收率
2.8 對(duì)曲匹布通片溶出度的測(cè)定 精密量取供試品溶液10μL注入液相色譜儀中,共測(cè)定3個(gè)廠家的3批樣品。結(jié)果顯示3批樣品的溶出量均在80%以上。
曲匹布通片是目前臨床上治療膽道疾病的首選藥。該藥的主要成份為曲匹布通。溶出度是反映片劑等固體制劑質(zhì)量的一個(gè)重要指標(biāo)。目前,大多數(shù)藥品生產(chǎn)企業(yè)已將進(jìn)行溶出度檢測(cè)作為控制藥品質(zhì)量的一個(gè)重要手段[5]。過去,我國主要采用紫外分光光度法測(cè)定曲匹布通片的溶出度,但此方法具有一定的局限性。近年來,任啟惠[6]等學(xué)者研究認(rèn)為,用HPLC法測(cè)定曲匹布通片溶出度的效果較好。
本次研究的結(jié)果證實(shí),用HPLC法測(cè)定曲匹布通片溶出度的效果顯著,具有靈敏度高、重現(xiàn)性好、分離度好、準(zhǔn)確、快速等優(yōu)勢(shì)。
[1] 竺心影.藥理學(xué)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,1990:303.
[2] 國家藥品標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)第四冊(cè) 2002;93
[3] Royal Hanson, Vivian Gray.溶出度實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2007:129.
[4] 吳靜.HPLC法測(cè)定羅紅霉素片溶出度[J].中國藥事,2008,22(1):70.
[5] 國家藥典委員會(huì).中國藥典[S]. 2010二部.北京:人民衛(wèi)生出版
[6] 任啟惠,何建梅.利福平片的溶出度測(cè)定[J].藥物分析雜志,1995,15(29):262-263.