張　旭，趙芬琴

(河南大學(xué) 藥學(xué)院，河南 開封 475004)

生姜提取液抗炎鎮(zhèn)痛作用研究

張旭，趙芬琴

(河南大學(xué) 藥學(xué)院，河南 開封 475004)

摘要：目的研究生姜水提液和生姜醇提液的鎮(zhèn)痛抗炎作用。方法通過二甲苯致小鼠耳腫脹模型及小鼠腹膜炎模型，研究其抗炎作用；采用醋酸誘發(fā)小鼠扭體反應(yīng)及小鼠熱板法，觀察其鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果生姜提取液在一定濃度下能明顯抑制炎癥發(fā)生和醋酸致小鼠扭體反應(yīng)，并對(duì)熱板法致小鼠痛閾值有顯著提高。結(jié)論生姜提取液有明顯的抗炎鎮(zhèn)痛作用。

關(guān)鍵詞：生姜；抗炎；鎮(zhèn)痛

中圖分類號(hào)：R285.5

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：識(shí)碼： A

文章編號(hào)：編號(hào)： 1672-7606(2015)01-0026-03

收稿日期：2014-10-15

基金項(xiàng)目：河南省教育廳自然科學(xué)研究指導(dǎo)計(jì)劃項(xiàng)目(2010B310003)；河南大學(xué)校內(nèi)基金(2008YB2R32)；開封市科技局項(xiàng)目(100317)。

作者簡(jiǎn)介：張旭(1979—)，女，河南鹿邑人，碩士，講師，從事中藥藥理和腫瘤藥理研究工作。

Abstract:ObjectiveTo study anti-inflammatory and analgesic of the Fresh Ginger Extract. MethodsThe anti-inflammatory effect of the Fresh Ginger Extract was studied by the mice ear edema model and peritonitis induced by xylene. The analgesic effect was observed by using writhe reaction induced by acetic acid in mice, the pain threshold caused by hot plate in mice. ResultsThe Fresh Ginger Extract could distinctively inhibit the inflammatory edema caused by xylene and reduce the time of writhe induced by acetic acid in mice, could obviously improve the mice’ pain threshold by hot plate. Conclusion The Fresh Ginger Extract has significant anti-inflammatory and analgesic effect.

Experimental studies on Anti-inflammatory and Analgesic effects of Fresh Ginger Extract

ZHANG Xu, ZHAO Fenqin

(PharmacyCollegeofHenanUniversity,Kaifeng,Henan475004,China)

Key words: Fresh Ginger Extract; Anti-inflammatory; Analgesic

生姜為姜科多年生草本植物姜(Zingiber officinale Rosc)的根莖[1]，生姜味辛，性溫,具有解表散寒、溫中止嘔、行水解毒、化痰止咳之功效。近年來(lái)的研究[2-4]表明,生姜具有廣泛的藥理作用，如強(qiáng)心、抗氧化、抗腫瘤、增強(qiáng)免疫等作用。我們就生姜水提液和生姜醇提液的鎮(zhèn)痛抗炎作用進(jìn)行研究，目的是觀察二者的鎮(zhèn)痛抗炎效果及二者的作用是否有異。

1材料與方法

1.1　藥物及試劑

生姜，為開封本地產(chǎn)，經(jīng)河南大學(xué)藥學(xué)院生藥鑒定為姜科植物姜(Zingiber officinale Rosc)根莖，洗凈，切絲，置于50 ℃烘箱中干燥。

生姜水提液：將從市場(chǎng)購(gòu)買的干凈生姜500 g切成細(xì)絲，在2 500 mL自來(lái)水中浸泡2 h后超聲1 h，在文火下煮沸30 min，過濾，提取3次，合并濾液，濃縮，得到生姜水提液100 mL，保存于-20 ℃冰箱中，該提取液1周內(nèi)用完，臨用時(shí)配成所需濃度并搖勻；生姜醇提液：干凈生姜500 g切成細(xì)絲于2 500 mL白酒(乙醇體積分?jǐn)?shù)為52%)中浸泡5 d后，超聲1 h，提取3次，合并濾液，放入50 ℃下水浴鍋中濃縮，得到生姜醇提液100 mL，保存于-20 ℃冰箱中，該提取液1周內(nèi)用完，臨用時(shí)配成所需濃度并搖勻。白酒(乙醇體積分?jǐn)?shù)為52%)，開封釀制；丙酮，天津市福晨化學(xué)試劑廠；冰醋酸，天津市福晨化學(xué)試劑廠；二甲苯，天津市福晨化學(xué)試劑廠；伊文思藍(lán)，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；阿司匹林原料藥，湖北省新銀河有限公司。

1.2　動(dòng)物

健康昆明小鼠，清潔級(jí)，體重18~22 g，由河南省動(dòng)物養(yǎng)殖中心提供(合格證號(hào)：豫動(dòng)合字101號(hào))。

1.3　儀器

電子天平，型號(hào)：JY10001,上海精密科學(xué)儀器有限公司；0516型-臺(tái)式低速離心機(jī)，上海醫(yī)療器械有限公司手術(shù)器械廠； UV-1600型分光光度計(jì)，上海精密科學(xué)儀器有限公司；智能熱板儀，RB-200，成都泰盟軟件有限公司。

1.4　實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1生姜水提液/醇提液對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響[5-6]小鼠60只，雌雄兼有，隨機(jī)分為6組，每組10只，生姜水提液/醇提液高劑量組、生姜水提液/醇提液低劑量組、模型組及陽(yáng)性藥物阿司匹林組。生姜水提液/醇提液高劑量組、低劑量組分別按5 g/kg、1 g/kg，阿司匹林組按0.2 g/kg，模型組給予相應(yīng)量生理鹽水，均灌胃給藥，1次/d，連續(xù)14 d。于末次給藥30 min后，立即在右耳前后兩面均勻涂抹二甲苯0.02 mL/只致炎，左耳不涂作對(duì)照。致炎后40 min處死小鼠，用8 mm打孔器分別取雙耳耳廓相同部位耳片，精密稱重。按下式計(jì)算腫脹率。

1.4.2生姜水提液/醇提液對(duì)二甲苯致小鼠腹膜炎的影響[5-6]小鼠60只，雌雄兼有，隨機(jī)分為6組，每組10只，生姜水提液/醇提液高劑量組、生姜水提液/醇提液低劑量組、模型組及陽(yáng)性藥物阿司匹林組。給藥劑量按1.4.1項(xiàng)，模型組給予相應(yīng)量生理鹽水，均灌胃給藥，1次/d，連續(xù)14 d。于末次給藥40 min后，小鼠尾部靜脈注射10 g/L伊文氏藍(lán)0.1 mL/10 g，注射后立即于小鼠腹部去毛處涂二甲苯0.1 mL，30 min后處死小鼠，剝離腹部正中腹部皮膚，剪取染色皮膚直徑2.5 cm，剪碎，放入試管，加5 mL丙酮-生理鹽水(7∶3)液，浸泡48 h(中間振搖10次)，1 500 r/min離心15 min，取上清液于610 nm處測(cè)吸光度(以丙酮-生理鹽水7∶3調(diào)零)。

1.4.3生姜水提液/醇提液對(duì)冰醋酸致小鼠扭體實(shí)驗(yàn)的影響[7-8]小鼠60只，雌雄兼有，隨機(jī)分為6組，每組10只，生姜水提液/醇提液高劑量組、生姜水提液/醇提液低劑量組、模型組及陽(yáng)性藥物阿司匹林組。給藥劑量按1.4.1項(xiàng)，模型組給予相應(yīng)量生理鹽水，均灌胃給藥，1次/d，連續(xù)14 d。于末次給藥40 min后，小鼠腹腔注射8 g/L冰醋酸0.1 mL/10 g，記錄小鼠扭體潛伏期及20 min內(nèi)各組小鼠出現(xiàn)扭體反應(yīng)(腹部?jī)?nèi)凹，伸展后肢，臀部抬高)的次數(shù)。按照下式計(jì)算扭體抑制率：抑制率%=[(對(duì)照組扭體次數(shù)-給藥組扭體次數(shù))/對(duì)照扭體次數(shù)]。

1.4.4生姜水提液/生姜醇提液對(duì)小鼠熱板致痛實(shí)驗(yàn)的影響[7-8]取18~22 g雌性小鼠，放入(55±0.5) ℃熱板上，以出現(xiàn)舔后足所需時(shí)間(s)作為小鼠的痛閾值。痛閾值在30 s之內(nèi)的小鼠為合格小鼠。挑選60只合格小鼠隨即分為6組，分別與分組與給藥量同1.4.1項(xiàng)，每天灌胃1次，連續(xù)灌胃14 d，于末次給藥后分別測(cè)給藥后0.5、1、1.5 h的痛閾值。

1.5　統(tǒng)計(jì)分析

2實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1　對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響

無(wú)論是高劑量組(5 g/kg)生姜水提液還是醇提液都能明顯地抑制炎癥的發(fā)生(P<0.05)，但低劑量組抗炎作用不明顯(P>0.05)，見表1。

注：與模型組比較，*P<0.05。

2.2　對(duì)二甲苯致小鼠腹膜炎的影響

生姜水提液及生姜醇提液連續(xù)灌胃14 d后，無(wú)論高劑量組還是低劑量組均能降低小鼠血管通透性，但高劑量組與對(duì)照生理鹽水組相比，其滲出的染料吸光度明顯低于生理鹽水對(duì)照組(P<0.05)，見表2。

注：與生理鹽水組比較，*P<0.05。

2.3　對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響

從表3可見，生姜水提液/生姜醇提液高劑量及陽(yáng)性對(duì)照均有鎮(zhèn)痛作用，可延長(zhǎng)小鼠發(fā)生扭體反應(yīng)的潛伏期和減少小鼠扭體反應(yīng)的次數(shù)(P<0.01，P<0.05)。

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01。

2.4　對(duì)小鼠熱板致痛實(shí)驗(yàn)的影響

從表4可以看出，生姜水提液/醇提液高劑量1 h后鎮(zhèn)痛作用明顯，特別是生姜醇提物1 h后痛閾值延長(zhǎng)極其顯著(P<0.01)，而低劑量提取液對(duì)痛閾值沒有明顯影響。

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

3討論

炎癥是十分常見而又重要的基本病理過程，體表的外傷感染和各器官的大部分常見病和多發(fā)病(如癤、癰、肺炎、肝炎、腎炎等)都屬于炎癥性疾病。急性炎癥以發(fā)紅、腫脹、疼痛等為主要征候?？寡祖?zhèn)痛的相關(guān)研究很多[9-11]，方法成熟，結(jié)果可靠，我們的試驗(yàn)結(jié)果顯示高劑量對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹及醋酸致腹腔毛細(xì)血管通透性的增高有明顯的抑制作用，說明高劑量生姜水提液/醇提液對(duì)急性炎癥有一定的對(duì)抗作用。生姜水提液/醇提液高劑量可使小鼠醋酸所致扭體反應(yīng)潛伏期延長(zhǎng)，扭體次數(shù)明顯降低；高劑量對(duì)熱板法引起的疼痛均有不同程度的鎮(zhèn)痛作用，高劑量在1 h后鎮(zhèn)痛效果極其顯著(P<0.01)。

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[責(zé)任編輯李武營(yíng)]