何繼東

摘 要：針對目前蔬菜水果中多殘留農(nóng)藥分析的前處理存在操作繁瑣、自動(dòng)化程度低、提取凈化效率低、溶劑使用量大、溶劑揮發(fā)物毒害檢測人員等缺點(diǎn)，該文建立了全自動(dòng)固相萃取-濃縮-定容蔬菜水果多殘留農(nóng)藥檢測前處理方法，不僅簡化了繁瑣的樣品前處理流程、降低了工作量，而且可以保護(hù)檢驗(yàn)員免受有有機(jī)溶劑毒害，能夠滿足蔬菜水果中多殘留農(nóng)藥的檢測需求。

關(guān)鍵詞：固相萃取；自動(dòng)濃縮定容；蔬菜水果；農(nóng)藥殘留；檢測

中圖分類號 O657.71 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731（2016）01-75-02

農(nóng)業(yè)生產(chǎn)者為獲得更多的產(chǎn)品，加大了各種農(nóng)藥的使用量，促使農(nóng)藥殘留問題日趨嚴(yán)峻，因此，農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全的監(jiān)管和檢測工作顯得尤為重要。為促進(jìn)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全的檢驗(yàn)檢測工作，我國相繼推出了一系列國家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)分析方法，使蔬菜水果多殘留農(nóng)藥檢測技術(shù)得到了快速推廣。由于蔬菜水果樣品基質(zhì)復(fù)雜，含有大量的色素等干擾物質(zhì)，嚴(yán)重干擾了提取液中農(nóng)藥殘留的檢測，因而農(nóng)藥殘留的前處理技術(shù)尤為重要，但是目前蔬菜水果中多殘留農(nóng)藥分析的前處理存在操作繁瑣、自動(dòng)化程度低、提取凈化效率低、溶劑使用量大、溶劑揮發(fā)物毒害檢測人員等缺點(diǎn)。為此，本研究根據(jù)相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)分析方法，采用全自動(dòng)固相萃取-定量濃縮儀，用乙腈+甲苯提取，石墨碳黑/氨基（GCB/NH2）固相萃取柱富集凈化，建立了全自動(dòng)固相萃取-濃縮-定容蔬菜水果多殘留農(nóng)藥檢測前處理方法。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與設(shè)備 LabTech PrepElite-SV全自動(dòng)固相萃取-定量濃縮前處理平臺（美國萊伯泰科有限公司），GC2010-PLUS氣相色譜儀（日本島津公司），配備FPD檢測器，色譜柱：Rtx-1701（30m×0.25mm×0.25μm毛細(xì)柱），高速離心機(jī)HC-3018（安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司）。

1.2 試劑與材料 丙酮、乙腈和甲苯均為色譜純，無水硫酸鈉為分析純650℃灼燒4h，氯化鈉為優(yōu)級純140℃烘烤4h，水為去離子水。提取溶劑為乙腈+甲苯（3+1）。CNWBOND GCB/NH2石墨化炭黑/氨基復(fù)合SPE柱（500mg/500mg/6mL）。13種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品：敵敵畏（Dichlorvos）、甲胺磷（Methamidophos）、乙酰甲胺磷（Acephate）、甲拌磷（Phorate）、氧樂果（Omethoate）、久效磷（Monocrotophos）、磷銨（Phoshamidon）、對硫磷（Parathion）、毒死蜱（Chlorpyrifos）、殺螟硫磷（Fenitrothion）、甲基對硫磷（Parathion-methyl）、水胺硫磷（Isocarbophos）、三唑磷（Triazophos），購于上海農(nóng)藥研究所有限公司，濃度均為100μg/mL。

1.3 工作液的配制 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制：各取0.200mL上述農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)液于10mL容量瓶中，用丙酮稀釋定容，配制成各農(nóng)藥組分質(zhì)量濃度均為2μg/mL的混合工作液。由此工作液通過稀釋得到0.05、0.10、0.20、0.40、0.80μg/mL共5個(gè)濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，貯存在4℃冰箱中備用。

1.4 樣品前處理

1.4.1 樣品的提取 準(zhǔn)確稱取10g（精確至0.01g）均勻試樣，置于50mL離心管中，加入20mL提取溶劑乙腈+甲苯（3+1），用均質(zhì)器在15 000r/min勻漿提取1min，加入3g氯化鈉，在勻漿提取1min，將離心管放入離心機(jī)，在3 000r/min離心5min，取上清液10mL裝入LabTech PrepElite-SV全自動(dòng)固相萃取—定量濃縮前處理平臺的進(jìn)樣瓶中待凈化。

1.4.2 樣品的凈化和定容 首先向CNWBOND GCB/NH2石墨化炭黑/氨基復(fù)合SPE柱（500mg/500mg/6mL）中填充高約2cm的無水硫酸鈉，放入LabTech PrepElite-SV全自動(dòng)固相萃取-定量濃縮前處理平臺的萃取柱架中。設(shè)置固相萃取-定容濃縮方法如下：氮?dú)鈮毫φ{(diào)至0.05MP，真空泵真空度為-0.03MP。SPE固相萃取設(shè)置內(nèi)容：方法類型為保留目標(biāo)物；潤洗設(shè)為收集次數(shù)為0次、溶劑類型為乙腈+甲苯（3+1）、體積為7.0mL、流速為1.0mL/min、干燥時(shí)間為0s；上樣設(shè)為收集次數(shù)為1次、溶劑類型為待凈化樣品、體積為4.0mL、流速為1.5mL/min、干燥時(shí)間為0s；洗脫設(shè)為收集次數(shù)為1次、溶劑類型為乙腈+甲苯（3+1）、體積為24.0mL、流速為1.5mL/min、干燥時(shí)間為30s。Concentration濃縮定量設(shè)置內(nèi)容：濃縮方式為定量濃縮、定容體積為2.0mL、加熱溫度為50℃；清洗溶劑（指實(shí)驗(yàn)結(jié)束清洗濃縮杯）為溶劑1（丙酮）、清洗次數(shù)為2次，體積為5mL、清洗時(shí)間為15s，吹干為1min。編輯批處理表或單針運(yùn)行，填入相應(yīng)參數(shù)（定容用S1丙酮），樣品經(jīng)上述步驟凈化濃縮定容后，最終收集到用丙酮定容為2.0mL的待測樣品。

1.5 色譜條件 色譜柱：Rtx-1701（30m×0.25mm×0.25um毛細(xì)柱）載氣：高純氮?dú)猓?9.999%），載氣流量：1.01mL/min，氫氣62.5mL/min，空氣90mL/min，吹掃3.0mL/min，F(xiàn)PD檢測器，檢測器溫度280℃，進(jìn)樣口溫度250℃，進(jìn)樣方式：不分流自動(dòng)進(jìn)樣，控制模式：線速度28cm/s，升溫程序：90℃保持1.0min、以18℃/min升到200℃保持0.0min、以1℃/min升到212℃保持0.0min、以15℃/min升到220℃保持2.0min、以30℃/min升到270℃保持5.0min，進(jìn)樣量1.0μL，定量方法：峰面積外標(biāo)法定量。

2 結(jié)果與分析

2.1 目標(biāo)物質(zhì)的分離效果 取0.2μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照上述色譜條件測定，13種有機(jī)磷農(nóng)藥可得到良好的分離效果，出峰順序依次為：敵敵畏（6.613min）、甲胺磷（7.364min）、乙酰甲胺磷（9.642min）、甲拌磷（10834min）、氧樂果（12.013min）、久效磷（14.156min）、磷銨1（14.815min）、毒死蜱（16.770min）、甲基對硫磷（17.219min）、磷銨2（17.367min）、殺螟硫磷（18.497min）、對硫磷（19.675min）、水胺硫磷（20.718min）、三唑磷（25.881min），得到色譜圖1。

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圖1 0.2μg/mL13種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜

注：1敵敵畏（6.613min），2甲胺磷（7.364min），3乙酰甲胺磷（9.642min），4甲拌磷（10834min），5氧樂果（12.013min），6久效磷（14.156min），7磷銨1（14.815min），8毒死蜱（16.770min），9甲基對硫磷（17.219min），10磷銨2（17.367min），11殺螟硫磷（18.497min），12對硫磷（19.675min），13水胺硫磷（20.718min），14三唑磷（25.881min）。

2.2 線性范圍及相關(guān)系數(shù) 線性范圍為：0.05～0.80μg/mL，各濃度分別為：0.05、0.10、0.20、0.40、0.80μg/mL，按上述色譜條件進(jìn)樣分析，通過計(jì)算得到相關(guān)系數(shù)、線性方程、檢出限，見表1。

2.3 方法的回收率與精密度 在已知不含農(nóng)藥殘留的西葫蘆樣品中，添加13種有機(jī)磷農(nóng)藥，計(jì)算得到各農(nóng)藥含量為0.3mg/kg3個(gè)重復(fù)樣品，使用上述“1.4樣品前處理”方法進(jìn)行樣品提取后分析，3個(gè)添加相同濃度的樣品回收率和精密度見表2。由表2可知，13種有機(jī)磷農(nóng)藥的平均回收率在76.72%～100.93%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD在1.41%～7.22%，檢測中未出現(xiàn)色譜峰干擾情況，回收率高，重復(fù)性良好。

3 結(jié)論

本文研究并建立一種全自動(dòng)固相萃取-濃縮-定容蔬菜水果多殘留農(nóng)藥檢測前處理方法，方法符合農(nóng)藥殘留的檢測要求，實(shí)現(xiàn)了前處理過程自動(dòng)化。該方法實(shí)用性強(qiáng)、自動(dòng)化程度高、凈化效果好、干擾少、重現(xiàn)性好、回收率高，可以有效保護(hù)檢驗(yàn)員免受有有機(jī)溶劑毒害，能夠滿足蔬菜水果中多殘留農(nóng)藥的檢測需求。

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