王　睿，孫　鵬，易清云,周　露

(重慶第二師范學(xué)院 生物與化學(xué)工程系，重慶 400067)

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開縣龍珠茶粗提物對(duì)利血平誘導(dǎo)昆明小鼠胃潰瘍的預(yù)防效果

王睿，孫鵬，易清云,周露

(重慶第二師范學(xué)院 生物與化學(xué)工程系，重慶 400067)

摘要：利用利血平誘導(dǎo)昆明小鼠出現(xiàn)胃潰瘍來測(cè)定市售重慶開縣龍珠茶提取物的胃潰瘍預(yù)防效果。龍珠茶2000mg/kg處理組小鼠的IL-6,IL-12,TNF-α和IFN-γ細(xì)胞因子低于1000mg/kg處理組和對(duì)照組小鼠。龍珠茶組小鼠胃潰瘍面積也低于對(duì)照組小鼠，并且2000mg/kg處理組表現(xiàn)得更為明顯。龍珠茶組小鼠的胃液量低于對(duì)照組小鼠，胃液pH值高于對(duì)照組小鼠，可見龍珠茶對(duì)利血平誘導(dǎo)胃潰瘍有很好的預(yù)防效果。

關(guān)鍵詞：龍珠茶；胃潰瘍；細(xì)胞因子；血清；昆明小鼠

起源于重慶市開縣的龍珠茶是一種高品質(zhì)的綠茶，它的名字來源于龍王的女兒和凡人之間的愛情傳說[1]。胃損傷是一種胃黏膜損傷，化學(xué)物質(zhì)和藥物都可能造成這種損害，損傷發(fā)生后也往往引發(fā)炎癥反應(yīng)[2]。龍珠茶中含有一定的營(yíng)養(yǎng)成分，適用于胃潰瘍患者，可以在胃潰瘍患者不宜進(jìn)食的情況下進(jìn)行補(bǔ)充，同時(shí)其中的保健功效成分有可能對(duì)胃潰瘍本身產(chǎn)生抑制作用。本研究對(duì)龍珠茶預(yù)防胃潰瘍的功效進(jìn)行研究，為充分利用這種傳統(tǒng)食品積累科學(xué)依據(jù)。

一、材料方法

(一)材料與試劑

龍珠茶：選用重慶市開縣售優(yōu)質(zhì)龍珠茶。

無水乙醇(分析純)(重慶市品譽(yù)化工有限公司)，利血平(美國(guó)Sigma公司)，細(xì)胞因子IL-6、IL-12、TNF-α和IFN-γ試劑盒(美國(guó)Biolegend公司)。

R-114型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士Buchi公司)，VS-15CFN型離心機(jī)(韓國(guó)Vision科學(xué)株式會(huì)社)UV-1750型紫外分光光度計(jì)(日本島津公司)，D550數(shù)碼相機(jī)(日本佳能公司)。

(二)實(shí)驗(yàn)方法

1.龍珠茶提取物準(zhǔn)備

將龍珠茶粉碎后與80%的乙醇按1∶20混合提取，每次12h，重復(fù)3次，過濾得到提取液，合并提取液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干后得到提取物待用。

2.昆明小鼠誘導(dǎo)胃潰瘍實(shí)驗(yàn)

SPF級(jí)昆明小鼠40只，雄性，體重20~25g，按體重將小鼠隨機(jī)分為正常組、胃潰瘍對(duì)照組、1000mg/kg龍珠茶處理組和2000mg/kg龍珠茶處理組，每組10只，在相對(duì)濕度50±10%，室溫保持24±2℃，12h明暗輪換條件下飼養(yǎng)。正常組和胃潰瘍對(duì)照組小鼠每日口腔灌胃0.2mL生理鹽水，龍珠茶處理組每日按龍珠茶提取物濃度1000mg/kg和2000mg/kg對(duì)小鼠實(shí)施口腔灌胃0.2mL龍珠茶提取物稀釋液，實(shí)驗(yàn)期14d。14d后用生理鹽水配制利血平懸濁液后按10mg/kg濃度對(duì)除了正常組小鼠外所有小鼠實(shí)施腹腔皮下注射0.2mL利血平懸濁液。注射后對(duì)小鼠禁食24h后對(duì)所有小鼠進(jìn)行解剖，取小鼠全胃，浸泡在福爾馬林下10min后用數(shù)碼相機(jī)拍照，并使用ImageJ軟件分析胃潰瘍面積，計(jì)算胃潰瘍抑制率=(各組胃潰瘍面積-對(duì)照組胃潰瘍面積)/對(duì)照組胃潰瘍面積×100；并對(duì)胃液量和胃液總酸度進(jìn)行測(cè)定[3],同時(shí)對(duì)小鼠的胃液量和胃液pH值進(jìn)行測(cè)定。

3.酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清中細(xì)胞因子水平

取小鼠動(dòng)脈血漿0.2mL，在4℃，3000r/min下離心分離10min，取上層血清。采用定量酶聯(lián)檢測(cè)試劑盒，按試劑盒說明書的酶聯(lián)免疫法用紫外分光光度計(jì)在450nm處檢測(cè)血清中細(xì)胞因子IL-6,IL-12,TNF-α和IFN-γ水平。

(三)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

使用SAS統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)所得到數(shù)據(jù)采用one-wayANOVA法分析數(shù)據(jù)結(jié)果是否存在差異性(p<0.05)。

二、結(jié)果

(一)龍珠茶對(duì)小鼠胃潰瘍抑制率的影響

龍珠茶提取物灌胃小鼠后，由表1可以看出對(duì)照組的胃潰瘍最為嚴(yán)重，龍珠茶提取物灌胃后小鼠胃潰瘍面積明顯下降，并且2000mg/kg高濃度龍珠茶提取物灌胃組小鼠胃潰瘍面積下降得更為明顯。

(二)龍珠茶對(duì)小鼠細(xì)胞因子的影響

由表2可知，相對(duì)于正常組小鼠，對(duì)照組小鼠的IL-6，IL-12，TNF-α和IFN-γ細(xì)胞因子水平增加(p<0.05)；龍珠茶提取物能降低小鼠的IL-6，IL-12，TNF-α和IFN-γ細(xì)胞因子水平，且2000mg/kg龍珠茶提取物的效果最為明顯。

表1　龍珠茶提取物對(duì)利血平誘導(dǎo)胃潰瘍小鼠的胃組織觀察

a-d不同字母表示差各組數(shù)據(jù)平均值差異顯著(p<0.05)，同表2，3。

(三)龍珠茶對(duì)小鼠胃液的影響

通過觀察小鼠胃液，由表3可知正常組和龍珠茶提取物處理組小鼠的胃液量低于對(duì)照組，pH值高于對(duì)照組，并且2000mg/kg龍珠茶提取物可以使小鼠的胃液更接近正常組小鼠。

表2　龍珠茶提取物對(duì)利血平誘導(dǎo)胃潰瘍小鼠的細(xì)胞因子的效果

表3　龍珠茶提取物對(duì)利血平誘導(dǎo)胃潰瘍的

三、結(jié)論

胃潰瘍?cè)谂R床上可以通過測(cè)定血液中炎癥細(xì)胞因子來進(jìn)行判斷。食用功能性食品可以起到加強(qiáng)胃功能，調(diào)節(jié)體內(nèi)相關(guān)因子水平，預(yù)防胃潰瘍的作用[4]。胃潰瘍發(fā)生后引起胃黏膜出現(xiàn)炎癥，血液中的炎癥相關(guān)細(xì)胞因子水平發(fā)生改變，IL-6，IL-12，TNF-α和IFN-γ等炎癥相關(guān)因子在血液中的含量會(huì)明顯升高[5]，龍珠茶提取物可以降低血液中以上因子的水平，由此判斷龍珠茶提取物對(duì)胃潰瘍的預(yù)防有明顯效果。出現(xiàn)胃損傷后胃部會(huì)分泌胃酸，大量胃酸使胃內(nèi)部呈酸性，加劇胃潰瘍程度[6]。龍珠茶提取物灌胃后小鼠的胃酸分泌被更好地抑制，起到了胃潰瘍抑制效果。胃黏膜損傷會(huì)引起胃液分泌量增多，此時(shí)胃液的pH值與正常值相比較會(huì)有所下降[2]，本文中龍珠茶提取物也顯著降低了胃潰瘍小鼠的胃液pH值。本研究從胃潰瘍抑制率、血清中炎癥因子水平、胃液分泌量和pH值等方面對(duì)龍珠茶提取物灌胃處理的胃潰瘍小鼠進(jìn)行了觀察，觀察到龍珠茶提取物可以起到抑制胃潰瘍的作用，并且隨濃度的增加效果更好。龍珠茶發(fā)揮具體功效的有效成分有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

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[6]張守仁,邵金鶯,於毓文.呋喃唑酮和一些常用抗?jié)兯帉?duì)四種大鼠胃潰瘍模型的影響[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，1984,19(1):5-11.

[責(zé)任編輯劉江南]

中圖分類號(hào)：Q946.88

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1008-6390(2015)01-0168-02

作者簡(jiǎn)介：王睿(1982-)，男，重慶第二師范學(xué)院講師，研究方向?yàn)槭称坊瘜W(xué)與營(yíng)養(yǎng)學(xué)、功能性食品開發(fā)；

通訊作者：孫鵬(1983-)，男，重慶第二師范學(xué)院講師，研究方向?yàn)樗幚韺W(xué)、藥劑學(xué)。