許冠華金柏軍雷俊華

丹參及丹參提取物增敏放療的研究進(jìn)展

許冠華1金柏軍1雷俊華2

丹參酮類化合物；放療；增敏；惡性腫瘤

腫瘤放射治療是利用放射線治療腫瘤的一種局部治療方法，與腫瘤外科學(xué)、腫瘤化學(xué)治療學(xué)構(gòu)成了現(xiàn)代腫瘤治療學(xué)的三大支柱。放射治療在腫瘤治療中的作用和地位日益突出，大約70%的癌癥患者在治療癌癥的過程中需要放射治療，約有40%的患者可以用放療根治，僅次于手術(shù)治愈率[1]。但放療的毒副作用也給患者帶來諸多傷害，如頭暈、頭痛、全身乏力、上腹悶脹、食欲缺乏、骨髓抑制、照射部位的皮膚反應(yīng)及照射治療后肝腎等重要臟器的損傷[2]。研究發(fā)現(xiàn)丹參及丹參提取物具有增敏放療的效果，現(xiàn)將研究成果概述如下。

1 丹參概述

丹參味苦、性微寒，歸心、心包、肝經(jīng)。功效：祛瘀止痛，涼血消癰。臨床主要用于瘡癰腫毒、熱病煩躁神昏等[3]。藥理學(xué)[4]研究表明，丹參具有抗腫瘤、改善微循環(huán)、抗血栓、促進(jìn)組織恢復(fù)、抗脂質(zhì)過氧化和清除自由基等廣泛的藥理作用。目前從丹參中提取了眾多抗腫瘤活性物質(zhì)，主要包括脂溶性的二萜醌類化合物和水溶性的酚酸類兩大類成分，脂溶性成分主要包括丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA、丹參酮ⅡB、二氫丹參酮I、隱丹參酮、丹參新酮等，水溶性成分包括丹參素鈉、原兒茶醛、丹酚酸B等。

2 丹參及丹參提取物抗腫瘤增敏的研究內(nèi)容

2.1 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究 藥物與射線疊加在一起的生物效應(yīng)，大致有三種情況，即：相加、加強(qiáng)和增敏，通常用增敏比（ser=不用增敏劑時(shí)達(dá)到某一效應(yīng)的放射劑量/使用增敏劑時(shí)達(dá)到同樣效應(yīng)的放射劑量）進(jìn)行衡量[5]。李如冰等[6]用1μmol/L的二氫丹參酮Ⅰ作用于有氧細(xì)胞1h后照射，SPC-A-1細(xì)胞的增敏比為1.62，1μmol/L的二氫丹參酮Ⅰ在乏氧狀態(tài)下對SPC-A-1細(xì)胞的增敏比為1.96。結(jié)果顯示二氫丹參酮Ⅰ對有氧及乏氧的肺癌SPC-A-1細(xì)胞放射均具有增敏性。

宮頸癌為女性生殖系統(tǒng)常見的腫瘤，嚴(yán)重危害女性的健康[7]。葉因濤等[8]用流式細(xì)胞儀檢測宮頸癌Hela細(xì)胞株凋亡率，隱丹參酮聯(lián)合放療凋亡率較單獨(dú)作用宮頸癌HeLa細(xì)胞的凋亡率增加了（22.5±0.7）%。結(jié)果顯示隱丹參酮聯(lián)合放療具有明顯抑制腫瘤細(xì)胞生長的特性，這為治療宮頸癌提供了一種新的方向。

鼻咽癌是我國高發(fā)惡性腫瘤之一，發(fā)病率為耳鼻咽喉惡性腫瘤之首。放射治療是鼻咽癌的首選治療方法，耳毒性是其常見的毒副作用之一。Du等[9]研究發(fā)現(xiàn)，與單獨(dú)放療組相比，丹參酮IIA聯(lián)合放療組HEI-OC1細(xì)胞存活率明顯增多（P＜0.05），說明丹參酮IIA具有明顯減少HEI-OC1聽細(xì)胞放療損傷的作用。

2.2 移殖瘤動物模型研究 低氧誘導(dǎo)子-1α（HIF-1α）為檢測腫瘤微環(huán)境缺氧的重要指標(biāo)，而腫瘤微環(huán)境的缺氧又會促進(jìn)VEGF的濃度增高，對腫瘤細(xì)胞的生長、凋亡、轉(zhuǎn)移、侵襲等皆非常重要。馮儉等[10]、劉晨昕等[11]研究丹參聯(lián)合放療對小鼠Lewis肺癌作用，結(jié)果顯示聯(lián)合組的抑瘤率明顯高于丹參組和放療組，馮儉等[10]應(yīng)用免疫組化法檢測腫瘤組織中的微血管密度（MVD）顯示聯(lián)合用藥組較丹參組和放療組能明顯抑制腫瘤組織微血管密度、且有效抑制HIF-1αmRNA水平及血中VEGF濃度。

原發(fā)性肝癌的惡性程度高、預(yù)后極差，致死率極高[12]。葉因濤等[13]研究二氫丹參酮Ⅰ對H22肝癌小鼠腫瘤的放療增敏作用，研究發(fā)現(xiàn)二氫丹參酮Ⅰ高、中、低濃度均能抑制腫瘤生長，增敏作用隨劑量的增加而增強(qiáng)，高劑量的增敏效果最為明顯。在本次實(shí)驗(yàn)中，未見小鼠生活習(xí)性的異常改變，說明毒副作用較小或無。二氫丹參酮Ⅰ增敏放化療效果，在移植瘤動物模型上得到驗(yàn)證，為臨床提高放療效果帶來希望。

2.3 臨床研究 張建宇等[14]采用隨機(jī)開放式方法將156例食管癌病人平行分為（丹參+放療）和單放組（單純放療），研究結(jié)果顯示，大劑量丹參注射液靜滴加放療組較單獨(dú)放療組療效提高12.7%，聯(lián)合用藥組白細(xì)胞、外周血淋巴細(xì)胞rDNA轉(zhuǎn)錄活性較單獨(dú)用藥組影響較少，說明大劑量丹參注射液靜滴加放療組不僅可以提高放療對食管癌的抗癌活性，而且毒副作用較小，可提高近期療效，增強(qiáng)機(jī)體免疫機(jī)能，刺激骨髓造血，輔助升白細(xì)胞的效果。但丹參注射液中丹參酮Ⅰ、隱丹參酮和丹參酮ⅡA等未能檢測到，其原因主要為目前市場上丹參注射液往往采用水提取方式制備，此種方法提取到的主要以丹參水溶性成分為主[15]。

李輝等[16]為觀察鼻咽癌放療后鼻-鼻竇及咽部損傷的最佳治療方案，將255例放療后出現(xiàn)鼻-鼻竇及咽部損傷的鼻咽癌患者，按發(fā)生時(shí)間順序隨機(jī)分為克拉霉素組、丹參酮組以及克拉霉素+丹參酮聯(lián)合用藥組，結(jié)果顯示三組均有治療效果，與治療前比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但克拉霉素組、丹參酮組療效差異不明顯（P＞0.05），而聯(lián)合用藥組療效明顯好于克拉霉素組、丹參酮組（P＜0.05）。認(rèn)為多元化治療是鼻咽癌放療后鼻竇及咽部損傷治療的趨勢，克拉霉素+丹參酮聯(lián)合用藥是治療鼻咽癌放療后鼻竇及咽部損傷非常有效的手段和方法。

3 丹參及丹參提取物抗腫瘤增敏研究的作用機(jī)制

3.1 周期阻滯誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡 細(xì)胞周期（cell cycle）是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程，包含G1期、S期、G2期、M期四個(gè)階段。細(xì)胞周期阻滯是指細(xì)胞有絲分裂阻滯在四個(gè)階段之一，細(xì)胞有絲分裂循環(huán)停止從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。葉因濤等[8]研究隱丹參酮對Hela細(xì)胞的放射增敏作用，機(jī)制為Hela細(xì)胞生長停滯在G2/M期，進(jìn)而通過下調(diào)Bcl-2和Bcl-xl蛋白的表達(dá)來誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡。

3.2 改善腫瘤細(xì)胞的乏氧狀態(tài) HIF-1α（低氧誘導(dǎo)子-1α）是調(diào)節(jié)氧穩(wěn)態(tài)的核心轉(zhuǎn)錄因子，在機(jī)體的病理和生理過程中起關(guān)鍵作用，在腫瘤形成中也發(fā)揮非常重要的作用，腫瘤細(xì)胞的生長需要厭氧的微環(huán)境，低氧誘導(dǎo)因子HIF-1α是檢測腫瘤內(nèi)部缺氧的重要指標(biāo)。HIF-α與腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡、代謝、遷移、浸潤、血管生成以及炎癥和藥物耐受等多方面密切相關(guān)?，F(xiàn)在以HIF-α為靶點(diǎn)是治療腫瘤的重要手段和方法[17]。莫小宇[18]研究表明，丹參加放療組HIF-1αmRNA較丹參組和放療組的HIF-1αmRNA的轉(zhuǎn)錄水平低。說明丹參加放療組減少乏氧細(xì)胞數(shù)目，增加乏氧細(xì)胞的氧壓，提高小鼠Lewis肺癌的放療療效。

3.3 分子結(jié)構(gòu)的重構(gòu) 分子結(jié)構(gòu)修飾指保留藥物原有的基本結(jié)構(gòu)，僅在某些官能團(tuán)上作一定的改變，以達(dá)到提高療效，降低毒副作用，適應(yīng)制劑要求，便于臨床使用的目的。江城鋒[19]對丹參類化合物其A環(huán)和D環(huán)進(jìn)行修飾后，增強(qiáng)對腫瘤細(xì)胞的增殖抑制活性和放射敏感性。說明對其分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾后，可以改變其抗癌的活性。

4 討論

研究發(fā)現(xiàn)丹參酮類化合物聯(lián)合化療藥對肺癌、胃癌、宮頸癌、肝癌、血液病等皆具有抗腫瘤增敏化療的作用，且降低化療藥物的毒副作用，其增敏機(jī)制或與細(xì)胞周期阻滯、P53基因、MAPK信號通路的磷酸化等相關(guān)[20]。前期研究發(fā)現(xiàn)隱丹參酮可通過抑制STAT3磷酸化705位點(diǎn)增敏順鉑抗非小細(xì)胞肺癌PC9細(xì)胞的療效[21]，而信號傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3 （STAT3）是一條經(jīng)典的腫瘤發(fā)生、發(fā)展的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，與腫瘤細(xì)胞凋亡、轉(zhuǎn)移侵襲、腫瘤新生血管生成、放化療抗性密切相關(guān)[22]。目前我們的科研團(tuán)隊(duì)已經(jīng)就隱丹參酮是否具有增敏非小細(xì)胞肺癌PC9及NCIH1975細(xì)胞放療療效及與STAT3磷酸化關(guān)系進(jìn)行細(xì)胞學(xué)及移植瘤動物模型研究。

目前丹參及丹參提取物增敏放療的研究仍處于初級階段，其增敏的作用及機(jī)制仍需進(jìn)一步探討，目前的研究或?qū)榕R床放療提供新的配伍方案、為腫瘤患者帶來新的希望。

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（收稿：2015-12-20 修回：2016-03-21）

1杭州市蕭山區(qū)第一人民醫(yī)院全科醫(yī)學(xué)（杭州 311200）；2海南醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科（?？?570102）

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