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黃花倒水蓮栽培及利用研究綜述

2016-02-02 16:07王子威何中聲劉金福
中國野生植物資源 2016年4期
關(guān)鍵詞:黃花皂苷學報

王子威,何中聲*,劉金福

(1. 福建農(nóng)林大學 林學院,福建 福州350002; 2. 海峽自然保護區(qū)研究中心,福建 福州350002)

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黃花倒水蓮栽培及利用研究綜述

王子威1,2,何中聲1,2*,劉金福1,2

(1. 福建農(nóng)林大學 林學院,福建 福州350002; 2. 海峽自然保護區(qū)研究中心,福建 福州350002)

黃花倒水蓮(PolygalafallaxHemsl.)為遠志科遠志屬灌木或小喬木,以根入藥,有健脾利濕、活血調(diào)經(jīng)的功能。為更好開發(fā)利用黃花倒水蓮資源,綜述了其生物學特性、栽培與育種、組培快繁、化學成分和藥理作用以及提取工藝等方面研究,并對黃花倒水蓮豐產(chǎn)開發(fā)技術(shù)的研究方向作出展望。

黃花倒水蓮;生物學特性;育種與栽培;化學成分;藥理作用;提取工藝

黃花倒水蓮(Polygalafallax)根可供藥用,治風濕關(guān)節(jié)痛,腎虛腰痛,月經(jīng)不調(diào),經(jīng)痛,子宮脫垂,病后和產(chǎn)后虛弱等癥,并有一定的園林觀賞價值[1]。目前黃花倒水蓮資源來源主要依靠野生,由于現(xiàn)今民間黃花倒水蓮的需求及藥材市場迅速發(fā)展,野生資源采收過度,人工栽培黃花倒水蓮已成為該植物資源合理保護、持續(xù)開發(fā)利用的重要途徑。如何栽培以及提高產(chǎn)量與質(zhì)量現(xiàn)已成為開發(fā)利用該資源至關(guān)重要的問題,也是目前亟待解決的問題。通過對黃花倒水蓮國內(nèi)外研究現(xiàn)狀進行綜述,旨在為未來該種豐產(chǎn)開發(fā)技術(shù)提供基礎(chǔ)。

1 黃花倒水蓮地理分布與生物學特性

遠志科遠志屬植物黃花倒水蓮(Polygalafallax)又稱假黃花遠志(中國高等植物圖鑒)、黃金印(江西)、倒吊黃(福建)、黃花遠志(中國經(jīng)濟植物志)、雞仔樹、黃花參、吊吊黃(廣東)、白馬胎、一身保暖(廣西)、鴨仔兜(廣西恭城瑤語)。植株呈小喬木或灌木狀,高可達3 m。小枝密被毛。葉披針形或橢圓狀披針形,長8~17(20) cm,寬4~6.5 cm,先端漸尖,基部楔形或稍圓,兩面被毛,側(cè)脈8~9 對;葉柄長0.9~0.4 cm,被毛??偁罨ㄐ蝽斏蛞干L10~15(30) cm,花長1.5~1.7 cm;外萼片中間1枚盔形花瓣黃色,龍骨瓣雞冠狀附屬物流蘇狀,具柄。蒴果倒心形或球形,徑1~1.4 cm,無翅,具緣毛。種子圓,徑約4 mm,黑色或棕黑色,密被白色短柔毛?;ㄆ?—8月,果期8—11月[2]。

黃花倒水蓮為我國特有種,目前分布于江西、福建、湖南、廣東、廣西、貴州和云南;野生資源可見于山谷林下溪旁潮濕肥沃處,葉形較大,花序較密,龍骨瓣顯著短于花瓣狀萼片。在福建三江源保護區(qū)多見于竹林邊緣及路旁,分布廣且散,尚未發(fā)現(xiàn)成片分布[3]。在福建三明地區(qū)多生于溪邊疏林及光照較好的山谷,其葉片紙質(zhì)極易失水而萎蔫,主要分布于山的北坡[4]。在廣西全區(qū)有分布,主要分布于生境保護較好的海拔超過400 m的大山中[5]。

2 黃花倒水蓮生長規(guī)律與栽培育種研究

2.1黃花倒水蓮的生長規(guī)律

2.1.1生態(tài)環(huán)境

福建三明地區(qū)黃花倒水蓮主要與毛竹和雜木形成兩種群落類型,其群落層次多樣性和豐富度變化趨勢基本一致。黃花倒水蓮生境為溫暖透光以及空氣濕度較高的肥沃地帶,喬木層郁閉度和高度相對不高,郁閉度過高的林下分布較少[4]。

2.1.2生物量與產(chǎn)量

采用隨機取樣對福建山區(qū)的黃花倒水蓮群落研究表明,黃花倒水蓮的生殖構(gòu)件生物量與總生物量成線性關(guān)系;而豆莢生物量和種子生物量分配與其他組分成冪函數(shù)負相關(guān);通過提高總生物量以促進花序發(fā)育可提高其觀賞價值;可通過抑制生殖器官發(fā)育來促進根莖生長,提高產(chǎn)量與藥用價值[6]。

2.2栽培技術(shù)

黃花倒水蓮常用播種、扦插和組織培養(yǎng)進行繁殖。播種繁殖系數(shù)較低[7],為提高黃花倒水蓮種子的發(fā)芽率有必要對其種子特點和萌發(fā)特性進行深入研究。史艷財?shù)纫渣S花倒水蓮種子為試驗材料,研究了光照、溫度、種子成熟度、晾曬時間、GA3浸種濃度、發(fā)芽基質(zhì)對其發(fā)芽率的影響,結(jié)果表明以黃泥為基質(zhì)100 mg/L GA3浸種6 h后在25 ℃光照下發(fā)芽為最佳發(fā)芽條件[8]。

對黃花倒水蓮大田扦插育苗技術(shù)進行試驗,采用插穗生根處理、覆蓋保濕增溫、除草、遮陰、施肥灌溉等技術(shù)措施可生產(chǎn)出高質(zhì)量苗木,平均出苗率在90%以上,平均地徑可達1.16 cm,平均苗高度最高55.3 cm[9]。在黃花倒水蓮生長季節(jié)對裸根苗用4種處理措施進行移栽試驗,比較新芽萌發(fā)時間、成活率,其中以生根劑蘸根+遮蔭保濕+留全枝葉的新芽萌發(fā)最快,成活率最高[10]。根據(jù)黃花倒水蓮與毛竹最適生境較為相似特點,建立了毛竹林下套種黃花倒水蓮的栽培技術(shù)體系,為竹農(nóng)增收,為農(nóng)村產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整和山地農(nóng)業(yè)綜合開發(fā)開辟新的途徑[11]。在杉闊混交林郁閉度0.1~ 0.3的林冠下套種的黃花倒水蓮地徑、株高、根、莖、葉生長量較大,成活率較高[12]。

2.3組織培養(yǎng)技術(shù)

勃列日涅夫為重新斯大林主義化,主要通過一些行政措施對站在反斯大林主義立場上的人施加壓力,但又不采取或很少采取極端的手段,如逮捕判刑等?!耙话愕淖龇ㄊ歉锫?,給予嚴厲的黨紀處分,直至開除黨籍,以及用越來越巧妙的手段搞臭和迫害持不同政見者,包括公開詆毀中傷他們,送入精神病醫(yī)院,乃至驅(qū)逐出境,剝奪蘇聯(lián)國籍等等?!盵33]191

為實現(xiàn)野生資源可持續(xù)發(fā)展,構(gòu)建組織培養(yǎng)體系,產(chǎn)生大量種苗,建立規(guī)范的規(guī)模化生產(chǎn)基地快速繁殖與栽培。黃花倒水蓮組織培養(yǎng)體系以當年生帶芽莖段為外植體,誘導叢生芽培養(yǎng)基配方為MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.5 mg/L,增殖率高且少量產(chǎn)生愈傷組織,叢生芽較粗壯,其中促生根培養(yǎng)基配方1/2MS+IBA 0.5 mg /L+NAA 0.2 mg /L,根的分化率高且植株長勢良好[13]。

黃花倒水蓮無菌苗誘導率達90%培養(yǎng)基配方為MS+BA 0.3 mg/L+NAA 0.05 mg/L,長勢好,無玻璃化苗出現(xiàn);經(jīng)試驗最佳誘導叢生芽培養(yǎng)基配方為MS+NAA 0.05 mg/L +6-BA 0.5 mg/L,經(jīng)1個增殖周期數(shù)量可達12倍,且叢生芽生長密集粗壯;30天后取增殖后的無菌苗進行生根培養(yǎng),經(jīng)試驗生根培養(yǎng)基配方1/2MS+NAA 0.5 mg/L+6-IBA 0.8 mg/L+0.3%活性炭,單株無菌苗生根數(shù)量可達5條。黃花倒水蓮主要以根部入藥,這為資源豐產(chǎn)開發(fā)奠定了基礎(chǔ)[14]。

以木本植物用培養(yǎng)基( WPM)為基本培養(yǎng)基,得到最佳外植體誘導培養(yǎng)基為1/2MS + NAA 0.1 mg /L+BA 2.0 mg/L,誘導率可達95.1%; 最佳增殖培養(yǎng)基為WPM+NAA 0.1 mg/L+ BA1.5 mg/L,增殖系數(shù)為6.12,周期為25 d,不定芽生長狀況好; 最佳生根培養(yǎng)基為1/2 WPM +ABT 0.4 mg/L+IBA 0.1 mg/L,生根率為95.67%;待瓶苗4/5 長出根原基時進行煉苗,7天后進行移栽。最佳移栽基質(zhì)為泥炭土∶珍珠巖∶黃泥土 (2∶1∶1),成活率可達92.6%,且莖稈呈半木質(zhì)化,葉色濃綠[15]。

對于組培苗的移栽在不同季節(jié)采用不同遮蔭措施、不同基質(zhì)進行黃花倒水蓮組培苗移植成活率對比試驗,移植成活率較高的基質(zhì)為黃心土+5%鈣鎂磷以及輕基質(zhì),分別達80.3%和85. 6%,其中采用塑料小拱棚在林下移栽,則春、夏、秋三季的成活率均較高,分別達86.3%、81.4%、85.1%[16]。

3 黃花倒水蓮藥材質(zhì)量評價研究

3.1化學成分

3.1.1礦質(zhì)元素

隨著中藥藥用價值研究的逐步深入,中藥中的礦質(zhì)元素在一定程度上可以鑒定藥材以及解釋藥用機理。采用火焰原子吸收光譜法測定黃花倒水蓮中的6種礦質(zhì)元素的含量,結(jié)果表明Pb

皂苷是黃花倒水蓮中最主要的活性物質(zhì),在黃花倒水蓮中發(fā)現(xiàn)豐富皂苷如黃花倒水蓮皂苷A、遠志皂苷、細葉遠志皂苷元[18]。三萜皂苷是黃花倒水蓮中主要水溶性物質(zhì)之一[19]。對廣西境內(nèi)黃花倒水蓮不同部位的皂苷含量進行測定,總皂苷含量差異明顯,由根、葉、莖依次遞減;而不同地域植株內(nèi)皂苷含量無明顯差異,根、莖、葉中皂苷含量范圍依次為15.574~17.789 mg/g、7.923~10.971 mg/g、11.787~12.637 mg/g[5]。采用毛細管電泳法測定不同產(chǎn)地黃花倒水蓮中,結(jié)果表明廣西各地黃花倒水蓮Tenuifilin皂苷含量為1.02~3.41 μg/g[20]。此外,通過建立黃花倒水蓮皂苷C的測定方法得到準確測定結(jié)果,可用于監(jiān)測黃花倒水蓮質(zhì)量[21]。

3.1.3酮類

采用UV-VIS 法測定黃花倒水蓮中提取的總黃酮含量,該測定方法簡單準確[22]。李麗等建立反向高效液相色譜法使用Dikma DiamonsilC18柱,以流速0.9 mL/min的65甲醇∶35水為流動相在檢測波長為245 nm的檢測器中測定了黃花倒水蓮中的兩種口山酮(xanthone)[23]。采用75%乙醇從黃花倒水蓮根提取到3種化合物, 分別鑒定出3種口山酮[24]。此外利用多種色譜技術(shù)從黃花倒水蓮根的醋酸乙酯部分中分離純化得到了7 個口山酮類的化合物[25]。

3.1.4多糖及有機酸類

黃花倒水蓮中多糖類物質(zhì)含量豐富,可進一步開發(fā)利用[26]。黃花倒水蓮種子油的脂肪酸成分,首次發(fā)現(xiàn)在遠志科種子中含有大量11-廿碳烯酸[27],此外還含有芥子酸、阿魏酸等[28]。

3.2藥理作用

3.2.1增強免疫功能

黃花倒水蓮中部分多糖能激活并增強吞噬細胞的吞噬能力,促進產(chǎn)生抗體以及提高淋巴細胞應答功能[29-30]。其總皂苷也能增強小鼠的細胞免疫功能[31]。黃花倒水蓮水提液具有明顯免疫抗炎作用[32]。其提取物可促進胸腺和脾臟以及外周血象的恢復[33],進一步研究發(fā)現(xiàn)黃花倒水蓮提取物還對損傷的小鼠DNA有一定修復作用[34]。另外黃花倒水蓮提取物對小鼠肝損傷[35-36]以及胃黏膜損傷[37]具有一定修復與保護作用。通過臨床觀察實驗結(jié)果,完全緩解2 例(10%), 部分緩解9 例(45%),腫瘤病灶兩徑乘積縮小<50%或增大<25%7 例(35%), 腫瘤病灶兩徑乘積增大≥25% 2例(10%), 有效率(完全緩解+部分緩解)為55%,表明黃花倒水蓮煎劑可提高機體免疫能力殺死癌細胞[38-39]。

3.2.2降血脂作用

通過臨床觀察發(fā)現(xiàn)中藥制劑黃花倒水蓮口服液對高血脂癥療效顯著[40-42]。觀察對比黃花倒水蓮煎劑治療缺血性腦血管病患者27例發(fā)現(xiàn)有效11例,無效2例[43]。黃花倒水蓮中總皂苷具有調(diào)脂作用的主要活性物質(zhì),可提取出4種具有明顯降脂作用的皂苷類化合物[44]。采用高脂飼料喂養(yǎng)大鼠21 d 得到高脂模型,黃花倒水蓮總皂苷能降低大鼠血清TG、TC及MDA含量并有一定劑量相關(guān)性[45]。通過構(gòu)建家兔高脂血癥模型、鵪鶉高脂血癥模型和大鼠急性血瘀模型觀察到黃花倒水蓮總苷能顯著降低全血黏度和纖維蛋白原含量,加速血液循環(huán)[46-47]。黃花倒水蓮總皂苷通過對凝血系統(tǒng)的作用達到抗凝血和抗血栓效果[48]。黃花倒水蓮皂苷C可明顯抑制ox-LDL 誘導的LOX -1 mRNA及LOX -1蛋白表達,從而降血脂抑制動脈粥樣硬化[49]。黃花倒水蓮提取物有顯著降低小鼠血脂作用[50]。

3.2.3抗衰老作用

黃花倒水蓮中的口山酮類成分具有一定抗氧化作用,從黃花倒水蓮中提取了7種口山酮類物質(zhì),對H2O2的清除率在30.3%~74.8%之間[26]。從黃花倒水蓮根中提取7個不同組分并用比色法研究其對脂性自由基DPPH的清除能力和還原鐵離子能力,通過化學發(fā)光法比較各組分清除超氧陰離子和羥自由基的能力,結(jié)果表明黃花倒水蓮具有一定抗衰老作用[51]。

3.2.4抗應激作用

通過小鼠高低溫缺氧以及負重游泳實驗證明黃花倒水蓮多糖能延長小鼠在逆境下的生存時間, 增強小鼠耐低溫、耐高溫、耐缺氧能力,可以提高小鼠抗應激能力,這與秦華珍的研究結(jié)果相一致[52-53]。進一步研究發(fā)現(xiàn)黃花倒水蓮水提物可明顯降低心肌耗氧量從而延長小鼠存活時間約4 min[54]。

3.2.5抗病毒作用

采用細胞病變抑制法可檢測出黃花倒水蓮醇提物1,3-二羥基-2-甲基口山酮、1,3-二羥基口山酮、1,3-二羥基-2-甲氧基口山酮具有一定的抗CoxB3和HSV-1病毒活性[55]。黃花倒水蓮煎劑對乙肝病毒表面抗原( HBsAg )具有體外抑制作用,抑制效果與藥物濃度和接觸時間有關(guān),隨接觸時間1h、2h、4h增加,其吸光度值逐漸降低,說明接觸時間越長抑制作用越強[56-57]。

4 提取工藝與開發(fā)

4.1皂苷類提取工藝

采用回流法進行黃花倒水蓮總皂苷提取試驗,最佳提取方案為用水浸泡藥材粗粉12 h , 第一次提取時間1 h,第二次提取時間0.5 h, 加水量依次為藥材的8倍和6倍,將兩次提取液合并濃縮用大孔樹脂純化洗脫干燥即可[58]。對5種大孔吸附樹脂性能進行考察發(fā)現(xiàn):非板性HPD-100與LSA-30樹脂在吸附和脫吸附性能突出[59]。測定通過大孔樹脂的黃花倒水連總皂苷比吸附量從6種不同無機鹽濃度中優(yōu)選出最佳吸附無機鹽濃度[60]。通過設計正交實驗對比得到黃花倒水蓮中遠志皂苷浸取最佳條件:以400 r/min的攪拌速度用60%乙醇在80℃水浴條件下浸提1 h,結(jié)果浸取率可達85.06%[61]。

4.2酮類提取工藝

超聲波法廣泛用于黃花倒水蓮酮類提取,經(jīng)試驗優(yōu)選出黃花倒水蓮中總黃酮提取工藝:料液比1∶20 g/mL,在80℃溫度下以70%乙醇為溶劑,使用50 W超聲波提取20 min。提取量最高3.71 mg/g[62]。對超聲波提取黃花倒水蓮總黃酮工藝進行優(yōu)化,最佳條件為:料液比1∶15 g/mL,在55 ℃溫度下以90%乙醇為提取溶劑提取40 min,超聲波頻率和功率分別為61 kHz和420 W[63]。

4.3多糖類

采用均勻設計法試驗得到黃花倒水蓮粗多糖最佳提取工藝:料液比1∶20 (g/mL),1∶6.1 (mL/mL)的乙醇與乙醚作為提取劑,回流3 h將多糖脫脂后提取率為2.65%[64];提取多糖,料液比1∶100 (g/mL),溫度 99 ℃[65]。

5 研究前景與展望

黃花倒水蓮藥用價值正逐步得到重視,目前已取得一定進展。其種子繁殖率低,扦插、組織培養(yǎng)等無性繁殖技術(shù)相對成熟,現(xiàn)今桂林、永安、德化、永春等地已建立黃花倒水蓮繁殖基地,組織培養(yǎng)技術(shù)將是其擴大繁殖的主要手段。黃花倒水蓮藥用價值早為民間所知,但在臨床治療中多使用煎劑以及口服液等傳統(tǒng)形式,提取的有效活性物質(zhì)僅停留在動物實驗層次。對其各個有效活性物質(zhì)的提取純化也尚無成熟工藝,有待進一步分離純化各化學物質(zhì)并研究其在臨床上的藥理活性。其中皂苷類和酮類進展相對迅速,而其他活性物質(zhì)亟需深入研究。

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Research Summary of Cultivation and Utilization ofPolygalafallax

Wang Ziwei1,2,He Zhongsheng1,2*,Liu Jinfu1,2

(1.College of Forestry, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China; 2. Cross-Strait Nature Reserve Research Center, Fuzhou 350002, China)

Polygalafallaxis a shrub or small tree, belonging to the genus ofPolygala, the family of Polygalaceae, whose root is used as medicine that can invigorate spleen to damp elimination, activate blood and regulate menstruation. In order to make good use of thePolygalafallaxresources, we summarized the studies of biological traits, cultivation and tissue culture, chemical compenss, main pharmacological actions, and its extraction process forPolygalafallax. Moreover, we suggested the prospect of high yield technology application forPolygalafallaxin the future.

Polygalafallax;biological traits;growth and breeding;chemical components;pharmacological action; extraction process

10.3969/j.issn.1006-9690.2016.04.013

2015-12-25

福建省自然科學基金項目(2105J05051);福建省教育廳中青年教師教育科研項目(JA14123);國家級大學生創(chuàng)新性實驗計劃(201410389008);福建農(nóng)林大學重點項目建設專項(6112C039H);福建農(nóng)林大學A類畢業(yè)生啟動項目(KXML2008A)。

王子威(1995—),男,在讀本科生。研究方向:植被生態(tài)學。E-mail:fafuwzw@qq.com

何中聲(1985—),男,博士,碩士生導師。研究方向:野生動植物保護與利用研究。E-mail:jxhzs85@126.com

R284;R285

A

1006-9690(2016)04-0048-05

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