施兆鴻，廖雅麗，王孝杉，高權(quán)新，彭士明，張晨捷

（1.上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，上海 201306；2.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所，上海 200090）

鹽度驟降對(duì)云紋石斑魚(yú)肝臟代謝酶活力的影響

施兆鴻1，2，廖雅麗1，2，王孝杉2，高權(quán)新2，彭士明2，張晨捷2

（1.上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，上海 201306；2.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所，上海 200090）

為探討云紋石斑魚(yú)（Epinephelus moara）肝臟代謝酶活力對(duì)鹽度驟降的響應(yīng)，設(shè)置27（對(duì)照組）、21、15、9共4個(gè)鹽度梯度對(duì)云紋石斑魚(yú)進(jìn)行鹽度驟降脅迫實(shí)驗(yàn)。分別在0、1、2、3、7 d時(shí)取樣，測(cè)定其肝臟中酸性磷酸酶（ACP）、堿性磷酸酶（AKP）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）以及乳酸脫氫酶（LDH）活力。結(jié)果顯示，ACP活力鹽度21組先波動(dòng)變化后恢復(fù)正常水平，鹽度15組先下降后升高，隨后第7天下降恢復(fù)正常水平；AKP活力鹽度21組和鹽度15組先呈下降趨勢(shì)，第3天大幅度升高；GPT與LDH活力鹽度21組和鹽度15組基本呈現(xiàn)先下降再上升并波動(dòng)的變化趨勢(shì)；GOT活力變化趨勢(shì)鹽度21組先升后降，鹽度15組先降后波動(dòng)。研究表明：在鹽度27驟降至21或15，均會(huì)使云紋石斑魚(yú)產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，磷酸酶、轉(zhuǎn)氨酶與乳酸脫氫酶活力初期均會(huì)受到抑制，隨時(shí)間延長(zhǎng)可以得到恢復(fù)；而當(dāng)鹽度從27驟降至9，3 d時(shí)實(shí)驗(yàn)魚(yú)全部死亡。

云紋石斑魚(yú)；驟降低鹽脅迫；肝臟代謝酶

云紋石斑魚(yú)（Epinephelus moara）俗稱真油斑，屬鱸形目（Perciformes），鮨科（Serranidae），石斑魚(yú)屬。具有肉味鮮美、生長(zhǎng)快、環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)、經(jīng)濟(jì)價(jià)值高等特點(diǎn)[1－2]，是我國(guó)東南沿海地區(qū)重要養(yǎng)殖對(duì)象[3]。鹽度作為水產(chǎn)養(yǎng)殖中重要的環(huán)境因子，直接影響水生生物的生長(zhǎng)與存活。目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于云紋石斑魚(yú)的研究主要有淋巴囊腫病、育苗技術(shù)、攝食生長(zhǎng)、形態(tài)發(fā)育等[4－7]，而鹽度脅迫方面的研究報(bào)道主要集中在形態(tài)學(xué)方面，如鹽度對(duì)其胚胎發(fā)育、仔魚(yú)活力、早期幼魚(yú)生長(zhǎng)和存活的影響等[8－9]。

酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）和堿性磷酸酶（akaline phosphatase，AKP）是衡量機(jī)體免疫機(jī)能和健康狀況的重要指標(biāo)[10]。水生生物機(jī)體部分新陳代謝由物質(zhì)的磷酸化和去磷酸化進(jìn)行調(diào)節(jié)，這些過(guò)程主要依靠不同磷酸酶催化完成[11]。轉(zhuǎn)氨酶存在于血漿及多種身體組織中，但最常見(jiàn)與肝臟有關(guān)。轉(zhuǎn)氨酶的種類很多，以谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，GPT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate transaminase，GOT）最為重要，是氨基酸代謝過(guò)程中兩個(gè)重要的氨基轉(zhuǎn)移酶，可以作為評(píng)價(jià)攝食水平、生長(zhǎng)發(fā)育和肝功能測(cè)試的指標(biāo)[12]。乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）是糖酵解途徑與檸檬酸循環(huán)之間的關(guān)鍵酶，能催化丙酮酸與乳酸之間的相互轉(zhuǎn)化，并提供能量[13]，其活力大小在一定程度上反映了無(wú)氧代謝能力的高低。VIJAYAVEL等[14]對(duì)鋸緣青蟹（Scylla serrata）的研究認(rèn)為，抑制乳酸脫氫酶活力能夠?qū)е潞粑陆?，并影響機(jī)體氧化磷酸化作用，進(jìn)而影響生物體能量供給和生理活動(dòng)的進(jìn)行。因此，ACP、AKP、GPT、GOT及LDH 5種酶在研究魚(yú)類受鹽度脅迫下組織功能及生理變化具有重要的意義，酶活性變化趨勢(shì)可以間接的反映體內(nèi)生理動(dòng)態(tài)變化及組織損傷情況[15]。本實(shí)驗(yàn)首次研究了從鹽度27驟降至9、15和21（7 d）對(duì)云紋石斑魚(yú)肝臟中代謝酶（ACP、AKP、GPT、GOT、LDH）的影響，旨在明確其對(duì)鹽度變化脅迫的響應(yīng)，以期為養(yǎng)殖環(huán)境因子調(diào)控提供參考。

1 材料與方法

1 實(shí)驗(yàn)用魚(yú)和條件

實(shí)驗(yàn)于2014年9月在上海水產(chǎn)研究所啟東養(yǎng)殖基地進(jìn)行。云紋石斑魚(yú)幼魚(yú)由黃海水產(chǎn)研究所提供，平均體長(zhǎng)（10.43±1.08）cm，平均體質(zhì)量（16.73±4.47）g。魚(yú)運(yùn)抵養(yǎng)殖基地后先在水溫（27±1.0）℃、鹽度27的環(huán)境中暫養(yǎng)14 d。暫養(yǎng)密度20 ind·m－3，每天8∶00和17∶00各飽食投喂由日本林兼株式會(huì)社生產(chǎn)的“魚(yú)寶”牌6＃（粒徑大小：1.1～1.3 mm）配合飼料，不間斷充氣，每天換同鹽同溫水25%，同時(shí)吸去底部污物及殘餌。實(shí)驗(yàn)用水為沉淀過(guò)濾處理后的天然海水。

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)在直徑1.0 m、深度0.8 m的圓形玻璃鋼桶中進(jìn)行。鹽度梯度設(shè)為27、21、15、9，以暫養(yǎng)海水鹽度27為對(duì)照組，低鹽度海水（鹽度21、15、9）用曝氣后自來(lái)水兌天然海水配置，實(shí)驗(yàn)用水配制穩(wěn)定48 h后使用。每個(gè)鹽度梯度設(shè)3個(gè)平行，共12個(gè)桶。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，用手操網(wǎng)隨機(jī)從暫養(yǎng)群體中撈取個(gè)體直接放入各鹽度組（含對(duì)照組）水體中，每個(gè)平行20 ind。實(shí)驗(yàn)期間的投喂和管理與暫養(yǎng)期間相同，每天觀察魚(yú)的活動(dòng)狀況，及時(shí)撈出死魚(yú)，統(tǒng)計(jì)死亡情況。從實(shí)驗(yàn)魚(yú)放入各鹽度組水體作為起始0 h并開(kāi)始計(jì)時(shí)，在1、2、3、7 d各鹽度梯度組中分別取樣，每平行每次取3 ind。

1.3 取樣和指標(biāo)測(cè)定

取樣前停喂飼料1次，用MS222（200 mg· L－1）將魚(yú)麻醉后，將魚(yú)置于冰盤(pán)上解剖，取出肝臟，用預(yù)冷生理鹽水沖洗，并用吸水紙吸干，置于1.5 mL離心管中－20℃保存，在30 d內(nèi)檢測(cè)ACP、AKP、GPT、GOT及LDH活力。測(cè)定前，先將肝臟在勻漿介質(zhì)（pH 7.4，0.01 mol·L－1Tris-HCl，0.000 1 mol·L－1EDTA－2Na，0.01 mol· L－1蔗糖，0.8%NaCl）中剪碎，用勻漿機(jī)15 000 r·min－1研磨制成勻漿。用低溫離心機(jī)4℃下1 500 r·min－1離心5 min。根據(jù)需要，取上清液稀釋后進(jìn)行酶活力及總蛋白測(cè)定。

總蛋白采用考馬斯亮蘭法（南京建成試劑盒）進(jìn)行測(cè)定。酶活力均采用南京建成試劑盒檢測(cè)，按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。其中，ACP活力和AKP活力測(cè)定采用磷酸苯二鈉法，活力單位定義為每克組織蛋白在37℃與基質(zhì)作用30 min和15 min，產(chǎn)生1 mg酚者為1個(gè)活力單位。GOT和GPT兩種酶活力測(cè)定采用King氏法，活力單位定義為生成產(chǎn)物1 min內(nèi)使NADH氧化成NAD＋而引起吸光度每下降0.001為1個(gè)活力單位。LDH活力測(cè)定采用比色法測(cè)定，活力單位定義25℃條件下，每分鐘催化1μmol的丙酮酸轉(zhuǎn)化為乳酸的酶量為1個(gè)活力單位。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析。運(yùn)用單因素方差分析，先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，不滿足方差齊性時(shí)，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行自然對(duì)數(shù)或平方根轉(zhuǎn)換，然后采用Duncan’s檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較，P＜0.05為有顯著性差異，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示。用Excel 2007繪制圖表。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同鹽度下云紋石斑魚(yú)肝臟酸性磷酸酶（ACP）活性變化

隨著鹽度驟降的幅度增大和脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，云紋石斑魚(yú)肝臟ACP活力的變化見(jiàn)圖1。鹽度21組的ACP活力呈波動(dòng)的變化趨勢(shì)，在第1天和第3天出現(xiàn)兩個(gè)峰值，且峰值顯著高于其它時(shí)間的值（P＜0.05）；鹽度15組ACP活力呈先下降后升高的趨勢(shì)，第2天出現(xiàn)峰值且為各時(shí)間點(diǎn)中最高（P＜0.05）；鹽度21和15組在第7天時(shí)都恢復(fù)到實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)水平，且均與鹽度27組之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。鹽度9組ACP活力呈不斷上升的趨勢(shì)（P＜0.05）。此外，鹽度9組在實(shí)驗(yàn)第2天出現(xiàn)個(gè)別死亡，至實(shí)驗(yàn)第3天時(shí)全部死亡（死亡情況以下各部分不再重復(fù)描述）。同一時(shí)間的不同處理組，隨著鹽度的降低，第1、2、7天均呈波動(dòng)變化趨勢(shì)，第3天呈不斷上升的變化趨勢(shì)。

2.2 不同鹽度下云紋石斑魚(yú)肝臟堿性磷酸酶（AKP）活性變化

不同鹽度下肝臟AKP活力的變化見(jiàn)圖2。鹽度21組與鹽度15組AKP活力呈先下降后上升最后恢復(fù)的趨勢(shì)，且均在第3天出現(xiàn)峰值；鹽度21組第3天AKP活力值為不同時(shí)間點(diǎn)各組中最高（P＜0.05）；鹽度9組AKP活力呈不斷下降趨勢(shì)（P＜0.05）。對(duì)于同一時(shí)間的不同處理組：第1、3天AKP活力隨鹽度降低均呈波動(dòng)變化趨勢(shì)，第2、7天隨鹽度降低AKP酶活力下降且均未低于對(duì)照組。

圖1 不同鹽度下云紋石斑魚(yú)肝臟酸性磷酸酶（ACP）活性Fig.1 Activity of ACP in the liver of Epinephelus moara reared at different salinities

圖2 不同鹽度下云紋石斑魚(yú)肝臟堿性磷酸酶（AKP）活性Fig.2 Activity of AKP in the liver of Epinephelus moara reared at different salinities

2.3 不同鹽度下云紋石斑魚(yú)肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）活性

不同鹽度下肝臟GPT活力的變化見(jiàn)圖3。鹽度21組GPT活力呈波動(dòng)的變化趨勢(shì)（P＜0.05），且均未超過(guò)初始值；鹽度15組與鹽度9組GPT活力呈先下降后上升的趨勢(shì)，鹽度15組第3天出現(xiàn)峰值，且為不同時(shí)間點(diǎn)各組中最高（P＜0.05）；鹽度9組第2天AKP活力值顯著升高（P＜0.05）。對(duì)于同一時(shí)間的不同處理組：隨鹽度降低各組GPT活力均呈波動(dòng)變化趨勢(shì)。

圖3 不同鹽度下云紋石斑魚(yú)肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）活性Fig.3 Activity of GPT in the liver of Epinephelus moara reared at different salinities

2.4 不同鹽度下云紋石斑魚(yú)肝臟谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）活性

不同鹽度下肝臟GOT活力的變化見(jiàn)圖4。鹽度21組GOT活力呈先升高后降低的趨勢(shì)，第1天出現(xiàn)峰值（P＜0.05）；鹽度15組GOT活力呈先下降后上升再下降的趨勢(shì)，第2天出現(xiàn)峰值，且為不同時(shí)間點(diǎn)各組中最高（P＜0.05）；鹽度9組GOT活力呈不斷上升的變化趨勢(shì)（P＜0.05）。對(duì)于同一時(shí)間的不同處理組，GOT活力隨鹽度降低均呈波動(dòng)變化趨勢(shì)。

圖4 不同鹽度下云紋石斑魚(yú)肝臟谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）活性Fig.4 Activity of GOT in the liver of Epinephelus moara reared at different salinities

2.5 不同鹽度下云紋石斑魚(yú)肝臟乳酸脫氫酶（LDH）活性

不同鹽度下肝臟LDH活力的變化見(jiàn)圖5。鹽度21組與15組LDH活力均呈先降低后升高再恢復(fù)的變化趨勢(shì)，且均在第3天出現(xiàn)峰值，鹽度21組第3天為不同時(shí)間點(diǎn)各組中最高（P＜0.05）；鹽度9組LDH活力呈先下降后上升的變化趨勢(shì)（P＜0.05），但均未超過(guò)對(duì)照組。同一時(shí)間各處理組LDH活力隨鹽度降低均呈波動(dòng)變化趨勢(shì)。

圖5 不同鹽度下云紋石斑魚(yú)肝臟乳酸脫氫酶（LDH）活性Fig.5 Activity of LDH in the liver of Epinephelus moara reared at different salinities

3 討論

3.1 不同鹽度對(duì)云紋石斑魚(yú)肝臟磷酸酶活力的影響

有研究顯示，海洋生物在應(yīng)對(duì)鹽度變化的過(guò)程中，ACP與AKP活力會(huì)隨著鹽度的降低顯著升高或者先降低再升高。文昌魚(yú)（Branchiostoma lanceolatum）的培育鹽度低于28.0～32.0范圍時(shí)，磷酸酶活性顯著升高[16]；仿刺參（Apostichopus japonicus）在鹽度脅迫下ACP和AKP活力先升高后降低[17]；三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）在低鹽14脅迫下，ACP和AKP活力先降后升再降[18]；鋸緣青蟹（Scylla serrata）在急性低鹽脅迫時(shí)AKP活力顯著被抑制，而高鹽度的和小幅度低鹽度的變化，會(huì)刺激機(jī)體使AKP活力增強(qiáng)[19]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與上述研究基本一致，ACP活力鹽度15組云紋石斑魚(yú)第1天降低，第2天顯著升高，鹽度21組呈波動(dòng)趨勢(shì)，鹽度9組呈升高趨勢(shì)；AKP活力鹽度21組與15組實(shí)驗(yàn)魚(yú)均先降低后升高再恢復(fù)，鹽度9組呈降低趨勢(shì)。即在本實(shí)驗(yàn)初期鹽度脅迫基本上在短時(shí)間內(nèi)會(huì)先顯著抑制磷酸酶活力，至實(shí)驗(yàn)第2天或第3天磷酸酶活力恢復(fù)并大幅升高，也有部分鹽度脅迫會(huì)刺激魚(yú)體，磷酸酶活力直接升高。整體升高的趨勢(shì)說(shuō)明鹽度驟降引起云紋石斑魚(yú)的應(yīng)激反應(yīng)，磷酸酶活力升高以增強(qiáng)魚(yú)體免疫防御能力。對(duì)于不同鹽度脅迫下，云紋石斑魚(yú)機(jī)體內(nèi)磷酸酶活力并不隨鹽度降低而成比例的變化，說(shuō)明云紋石斑魚(yú)在急性低鹽脅迫下，不同的鹽度范圍有不同的免疫調(diào)節(jié)反應(yīng)。

3.2 不同鹽度對(duì)云紋石斑魚(yú)肝臟轉(zhuǎn)氨酶活力的影響

有研究表明，在鹽度脅迫下生物需要足夠的能量用于滲透調(diào)節(jié)，機(jī)體內(nèi)大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被調(diào)動(dòng)，多種氨基酸參與并被用于為滲透壓調(diào)節(jié)提供能量[20]，體內(nèi)游離氨基酸如谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、脯氨酸和?；撬醄21]含量會(huì)隨鹽度脅迫而升高。凡納濱對(duì)蝦（Litopenaeus vannamei）在低鹽度脅迫下，其肝胰腺中蛋白質(zhì)含量顯著升高，以保障機(jī)體分解蛋白質(zhì)時(shí)有足夠的游離氨基酸來(lái)調(diào)節(jié)機(jī)體的滲透[22]。目前對(duì)于這種現(xiàn)象的解析主要有兩種觀點(diǎn)：GEOFFRIOR等[23]從能量學(xué)的角度認(rèn)為機(jī)體在滲透脅迫下，體內(nèi)游離氨基酸的動(dòng)態(tài)變化與機(jī)體的能量消耗相關(guān)，高滲脅迫下，游離氨基酸的形成主要來(lái)自體內(nèi)蛋白質(zhì)的降解；而HOCHACHKA等[24]則認(rèn)為機(jī)體為了獲得足夠的游離氨基酸用于滲透壓調(diào)節(jié)，在一定程度上降低了從頭合成途徑的效率，從而使機(jī)體組織中的某些游離氨基酸積累量升高。轉(zhuǎn)氨酶是組織中將一種氨基酸的氨基轉(zhuǎn)運(yùn)到另一種氨基酸上的一類氨基轉(zhuǎn)移酶，參與氨基酸的分解和合成，其活性高低在一定程度可以反映氨基的轉(zhuǎn)移能力[25]。本研究測(cè)定了不同鹽度云紋石斑魚(yú)肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活力，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，鹽度驟降脅迫下云紋石斑魚(yú)肝臟中轉(zhuǎn)氨酶活力呈先降低后升高的趨勢(shì)。由此可見(jiàn)，初期鹽度驟降對(duì)云紋石斑魚(yú)肝臟中轉(zhuǎn)氨酶活力產(chǎn)生一定的抑制作用，魚(yú)體適應(yīng)后，轉(zhuǎn)氨酶活力恢復(fù)并顯著升高，使氨基轉(zhuǎn)運(yùn)活力上升以抵抗環(huán)境脅迫。所以，根據(jù)轉(zhuǎn)氨酶的功能，筆者推測(cè)云紋石斑魚(yú)為了在低鹽度下進(jìn)行滲透調(diào)節(jié)，動(dòng)用機(jī)體儲(chǔ)存的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化成游離氨基酸為滲透調(diào)節(jié)供能，這種解釋與DEATON[26]的觀點(diǎn)相符，且因轉(zhuǎn)氨酶活力的升高推測(cè)魚(yú)體內(nèi)游離氨基酸的升高主要來(lái)自于蛋白質(zhì)的降解，這與凡納濱對(duì)蝦在低鹽度慢性脅迫下，其體內(nèi)轉(zhuǎn)氨酶活力會(huì)升高以加快機(jī)體氨基轉(zhuǎn)運(yùn)速度研究結(jié)果相似。

轉(zhuǎn)氨酶主要存在于肝臟中，正常情況下，肝細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)氨酶只有少量被釋放到血液中，血清中的轉(zhuǎn)氨酶活性較低。有研究通過(guò)測(cè)定血清中轉(zhuǎn)氨酶含量，來(lái)判斷環(huán)境變化對(duì)肝細(xì)胞的損傷程度。如大黃魚(yú)（Pseudosciaena crocea）在鹽度突降后血清中GPT和GOT顯著上升[27]；紅耳龜（Trachemys scripta）在不同鹽度脅迫下血液中GPT和GOT活性均顯著升高[28]。肝臟中轉(zhuǎn)氨酶活性也會(huì)因滲透脅迫而發(fā)生變化，如虎斑烏賊（Sepia plaraonis）幼體在鹽度漸變情況下肝臟GOT活性和GPT呈先上升后下降的變化趨勢(shì)[29]；大馬哈魚(yú)（Oncorhynchus keta）在低鹽度脅迫下，肝臟中GPT和GOT活性均降低[30]。

3.3 不同鹽度對(duì)云紋石斑魚(yú)肝臟乳酸脫氫酶活力的影響

脫氫酶類是生物體內(nèi)氧化還原反應(yīng)中重要的催化劑之一，在生物體內(nèi)的氧化產(chǎn)能、解毒以及某些生理活動(dòng)[31]（如Cori循環(huán)）中起著很重要的作用。LDH是糖酵解途徑與TCA循環(huán)之間的關(guān)鍵酶[32－34]，其活力可作為衡量無(wú)氧代謝水平的指標(biāo)之一[35]。本實(shí)驗(yàn)中，云紋石斑魚(yú)肝臟中LDH先降低后升高，說(shuō)明鹽度驟降初期其機(jī)體內(nèi)無(wú)氧代謝并不旺盛，甚至抑制了LDH的活力，直至第3天由LDH催化產(chǎn)生的NAD＋保障了無(wú)氧條件下糖酵解作用的持續(xù)進(jìn)行[34]，從而為其抵御環(huán)境脅迫提供了能量。然而，鹽度驟降為9時(shí)，云紋石斑魚(yú)LDH活力逐漸下降并未恢復(fù)正常水平，說(shuō)明鹽度驟降至9時(shí)云紋石斑魚(yú)無(wú)氧代謝會(huì)受到一定程度的阻礙，影響魚(yú)類生長(zhǎng)存活。此外，SOMERO等[36]認(rèn)為L(zhǎng)DH活力水平與生物高速游動(dòng)的能力密切相關(guān)，并且隨著規(guī)格的增大而增大。這可能是大規(guī)格生物游動(dòng)對(duì)能量需求更大，使得LDH活力增大。由于魚(yú)的種類繁多，實(shí)驗(yàn)所取的個(gè)體大小也各不相同，無(wú)法獲得一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的范圍值（如人類的LDH正常標(biāo)準(zhǔn)值為109～ 245、GPT和GOT標(biāo)準(zhǔn)值均為5～50），因此本實(shí)驗(yàn)只能說(shuō)明受脅迫后各測(cè)試指標(biāo)的變化趨勢(shì)。

4 小結(jié)

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)云紋石斑魚(yú)在鹽度驟降條件下肝臟中ACP、AKP、GPT、GOT及LDH活力隨時(shí)間變化的情況，探討了云紋石斑魚(yú)肝臟代謝酶對(duì)鹽度驟降的響應(yīng)。研究結(jié)果表明云紋石斑魚(yú)在鹽度驟降脅迫下，部分鹽度下磷酸酶、轉(zhuǎn)氨酶與LDH酶活力初期會(huì)受到抑制，隨后恢復(fù)，部分直接升高以抵御脅迫傷害。本研究使用的魚(yú)規(guī)格較小，鹽度驟降對(duì)魚(yú)體生長(zhǎng)影響大，因此在云紋石斑魚(yú)幼魚(yú)的養(yǎng)殖生產(chǎn)中應(yīng)避免養(yǎng)殖水體鹽度大幅度急劇降低。

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Impact of abrupt salinity decrease on metabolic enzymes in the liver of Epinehelus moara

SHI Zhao-hong1，2，LIAO Ya-li1，2，WANG Xiao-shan2，GAO Quan-xin2，PENG Shi-ming2，ZHANG Chen-jie2
（1.College of Fisheries and Life，Shanghai Ocean University，Shanghai201306，China；2.East China Sea Fisheries Research Institute，Chinese Academy of Fishery Sciences，Shanghai200090，China）

This experiment was conducted to investigate the response of metabolic enzymes in the liver ofEpinehelus moarato abrupt salinity decrease.Four salinity groups（27，21，15，9）were designed.The average body length ofEpinehelus moarawas（10.43±1.08）cm and the average body weight was（16.73± 4.47）g.The fish were reared temporarily in the water of（27±1.0）℃temperature and 27 salinity when reaching Shanghai Fisheries Research Institute of Qidong breeding base.The study was conducted in a circular glass cylinder barrelwith 1 m in diameter and 0.8 m in depth.The temporary rearing seawater at salinity 27 was the control group，and the seawater with lower salinities（salinity 21，salinity 15，salinity 9）used tap water after aerationmixed with natural seawater after purification treatment，and the experimentalwater could be used after stabling for 48 hours.Every salinity gradient had 3 parallels and 12 buckets.Fish livers in each group were sampled on day 0，1，2，3，and 7 tomeasure the activities of acid phosphatase（ACP），alkaline phosphatase（AKP），glutamic-pyruvic transaminase（GPT），glutamic-oxalacetic transaminase（GOT）and lactate dehydrogenase（LDH）.Results showed that the activity of ACP in salinity 21 group first changed wavely，then recovered to the nomal level.ACP activity in salinity 15 group decreased first and then increased，finally decreased to the normal level on day 7；AKP activity in salinity 21 and 15 groups decreased on day 1 and 2，and then increased significantly on day 3；GPT and LDH activities in salinity 21 and 15 groups first decreased and then increased wavely；GOP activities in 21 salinity group increased first and then decreased，activities in salinity 15 group decreased first and then changed wavely.The results indicated that abrupt salinity decrease from 27 to 21 or 15 could cause stress response ofEpinehelus moara；the phosphatase，aminopherase and LDH activities were all inhibited first and recovered afterward；the abrupt salinity decrease from 27 to 9 caused the death of all fish on day 3.Research highlights：Epinehelus moaracan adapt themselves to a comparatively broad range of salinities and temperature.The impact of abrupt salinity decrease on the metabolic enzymes in the liver ofEpinehelus moarawas studied for the first time in this paper.Abrupt salinity decrease had a significant effect on metabolic enzymes in the liver ofEpinehelus moara，remaining steady salinity had an important ecophysiological significance on maintaining（or recovering）the normal metabolism and keeping the osmotic balance of organism during the culture period.

Epinehelus moara；abrupt salinity decrease；metabolic enzymes in liver

S 917

A

1004－2490（2016）02－0174－08

2015－07－15

中央級(jí)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)項(xiàng)目（東2015M04）

施兆鴻，研究員，主要研究方向?yàn)楹Ｋ~(yú)類繁育與養(yǎng)殖。E-mail：shizh＠eastfishery.ac.cn