董 冉,蔣 玫,李 磊,楊杰青,許高鵬,沈新強(qiáng)
(1.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所,上海 200090;2.上海海洋大學(xué)海洋科學(xué)學(xué)院,上海 201306)
0#柴油水溶性成分對(duì)黑鯛肝臟、鰓、
肌肉組織中抗氧化酶活性的影響
董 冉1,2,蔣 玫1,李 磊1,楊杰青1,2,許高鵬1,2,沈新強(qiáng)1
(1.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所,上海 200090;2.上海海洋大學(xué)海洋科學(xué)學(xué)院,上海 201306)
采用室內(nèi)實(shí)驗(yàn)方法,研究了不同濃度(0 mg·L-1、0.015 mg·L-1、0.03 mg·L-1、0.06 mg·L-1)0#柴油水溶性成分(WSF)對(duì)黑鯛(Sparus macrocephalus)肝臟、鰓和肌肉谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)和過(guò)氧化氫酶(CAT)的影響。結(jié)果顯示:(1)肝臟、鰓、肌肉和組織中GST活性與0#柴油具有明顯的時(shí)間-效應(yīng)和劑量-效應(yīng)關(guān)系,肝臟組織中GST活性較肌肉和鰓組織中的更為靈敏;(2)各組織中SOD活性隨時(shí)間和劑量的變化整體無(wú)明顯規(guī)律;(3)肝臟組織中CAT活性先誘導(dǎo)后抑制,肌肉中始終被誘導(dǎo),鰓中始終被抑制。CAT活性變化幅度不如GST明顯。實(shí)驗(yàn)表明,黑鯛肝臟組織中GST更適合作為0#柴油污染響應(yīng)的生物標(biāo)志物,用作早期海洋石油污染的預(yù)警和監(jiān)測(cè)的指標(biāo)之一。
0#柴油;黑鯛;肝臟;鰓;肌肉;抗氧化酶
石油是一種復(fù)雜的混合物,由烷烴、芳烴、雜環(huán)芳烴等多種復(fù)雜分子結(jié)構(gòu)組成,入海后發(fā)生一系列復(fù)雜變化,最終大多以水溶性成分(water soluble fraction,WSF)存在于海洋中,這正是產(chǎn)生毒性效應(yīng)的主要部分。0#柴油是典型的石油污染物之一,其WSF中芳香烴含量高達(dá)90%以上。海洋石油污染對(duì)海洋生態(tài)平衡造成了嚴(yán)重影響,呂福榮等[1]發(fā)現(xiàn)石油污染使馬糞海膽(Hemicentrotus pulcherrimus)胚胎發(fā)育延后,且延后程度與油品分散液濃度密切相關(guān),肖雅元等[2]指出WSF會(huì)使翡翠貽貝(Perna viridis)的內(nèi)臟團(tuán)和外套膜組織受到不同程度的損傷,王振等[3]的研究表明原油水溶性成分會(huì)導(dǎo)致斜帶髭鯛(Hapalogenysnitens)仔魚(yú)畸形或死亡。
石油烴在生物體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化的同時(shí)會(huì)伴隨著大量活性氧自由基(reactive oxygen radical,ROR)的產(chǎn)生,從而引起機(jī)體的酶蛋白失活、免疫細(xì)胞的脂質(zhì)過(guò)氧化、DNA損傷等氧化應(yīng)激反應(yīng)[4-5],進(jìn)而影響生物體的免疫功能[6]。水生生物機(jī)體的抗氧化防御系統(tǒng)則可以通過(guò)一系列反應(yīng),減少活性氧在體內(nèi)的蓄積,最大程度減少對(duì)細(xì)胞組織等造成的損傷。肝臟谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)均是抗氧化防御系統(tǒng)的重要組分,其活性的高低在一定程度上可以反映水生環(huán)境的早期污染[7-9]。
黑鯛(Sparus macrocephalus)是一種重要的淺海溫水性底層魚(yú)類,具有較高的養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)價(jià)值,廣泛分布于我國(guó)東南沿海及日本、東南亞等地區(qū)。由于其具有適溫適鹽等特性,且食譜雜、抗病能力強(qiáng)、生長(zhǎng)迅速,因此可作為理想的實(shí)驗(yàn)魚(yú)類[10]。
目前,海洋環(huán)境污染監(jiān)測(cè)中主要有關(guān)抗氧化酶活性的研究主要集中于蝦類[11]、貝類[12]、魚(yú)類[10,13-17]等水生生物,0#柴油水溶性成分對(duì)黑鯛體內(nèi)酶活性變化方面也有研究[18],但關(guān)于0#柴油污染下黑鯛不同組織中多種抗氧化酶的分析比較研究較為罕見(jiàn)。本實(shí)驗(yàn)以0#柴油水溶性成分作為污染源,對(duì)黑鯛肝臟、鰓和肌肉3種組織中不同種類抗氧化酶活性表達(dá)進(jìn)行對(duì)比研究,分析水體暴露處理后對(duì)黑鯛肝臟組織中GST、SOD和CAT活性的影響,并初步探討0#柴油對(duì)黑鯛可能的致毒機(jī)制,旨在為石油污染的生物標(biāo)志物選取方面提供新的參考資料和基礎(chǔ)參數(shù),并為溢油損害評(píng)估提供技術(shù)支持。
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
實(shí)驗(yàn)用油為市售0#柴油。實(shí)驗(yàn)海水取自自然海區(qū),鹽度20~21,pH 8.20,經(jīng)沉淀和砂濾后,充分曝氣24 h以上備用。供試生物為江蘇省海洋水產(chǎn)研究所提供的黑鯛,平均體質(zhì)量(6.85± 1.54)g。實(shí)驗(yàn)前先將黑鯛馴養(yǎng),期間每天定時(shí)投放餌料,自然死亡率低于1%,馴養(yǎng)15 d后,挑選健康、活潑、無(wú)損傷的個(gè)體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
將0#柴油與過(guò)濾海水按體積比1∶10(V∶V)配比[19],置于磁力攪拌機(jī)上連續(xù)攪拌24 h后靜置3 h,吸取表層下水相,注入棕色玻璃瓶,4℃冰箱保存,作為0#柴油水溶性成分實(shí)驗(yàn)?zāi)敢簜溆?。按照海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范,使用紫外分光光度計(jì)法測(cè)定石油烴的含量[20]。
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)包括富集和釋放兩個(gè)階段,分別進(jìn)行19 d(0~19 d)和3 d(20~22 d)。經(jīng)過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定半致死濃度后,將1.1中母液用過(guò)濾海水稀釋成不同濃度[21],其梯度分別設(shè)為0 mg·L-1(天然海水)、0.015 mg·L-1、0.03mg·L-1、0.06mg· L-1,每組設(shè)3個(gè)平行,其中0 mg·L-1組為對(duì)照。每組投放50 ind黑鯛。
1.2.1 富集階段
實(shí)驗(yàn)采用半靜態(tài)法,整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中加入海水量為140 L,每24 h換水一次,換水量為100%,每天換水時(shí)需及時(shí)撈出死亡或行為異常的個(gè)體。每天定時(shí)定量喂食配合飼料(8∶00和18∶00投喂一次,投喂量為黑鯛個(gè)體質(zhì)量的2%),并按設(shè)定的濃度梯度重新配置實(shí)驗(yàn)溶液。分別于實(shí)驗(yàn)的第3天、第7天、第15天、第19天各選取5 ind黑鯛,在冰水浴條件下用生理鹽水清洗,取其肝臟、鰓和肌肉樣品,勻漿,然后迅速轉(zhuǎn)至液氮中冷凍保存,以備分析。
1.2.2 釋放階段
富集階段結(jié)束后,排出每個(gè)容器中的實(shí)驗(yàn)溶液,在天然海水流水條件下(3.6 L·h-1)進(jìn)行黑鯛體內(nèi)富集石油烴的釋放實(shí)驗(yàn)。喂食步驟與富集階段相同。于第22天采集5 ind黑鯛,處理方法同富集階段。
1.3 毒理學(xué)指標(biāo)的測(cè)定
黑鯛的肝臟、肌肉和鰓組織中蛋白含量的測(cè)定采用考馬斯亮藍(lán)法,CAT、SOD和GST活性的測(cè)定均嚴(yán)格按照由南京建成生物公司提供的檢測(cè)試劑盒所附帶的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。GST活性定義為在37℃扣除非酶促反應(yīng),1 mg組織蛋白1 min內(nèi)使反應(yīng)體系中谷胱甘肽(GSH)濃度降低1 μmol·L-1為1個(gè)酶活力單位(U1),單位為U1· mg-1;SOD活性定義為1 mg組織蛋白在1 mL反應(yīng)液中SOD抑制率達(dá)到50%時(shí)所對(duì)應(yīng)的量為1個(gè)酶活性單位(U2),單位為U2·mg-1;CAT活性定義為1 mg組織蛋白在1 min內(nèi)分解1μmol H2O2的量為1個(gè)酶活性單位(U3),單位為U3· mg-1。
1.4 統(tǒng)計(jì)分析
酶活性數(shù)據(jù)顯示為3個(gè)平行組數(shù)據(jù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Means±SD)。采用Excel2010軟件進(jìn)行繪圖。用t檢驗(yàn)法對(duì)試驗(yàn)組與對(duì)照組進(jìn)行差異性分析,P<0.05被認(rèn)為差異顯著。
2.1 0#柴油水溶性成分對(duì)黑鯛肝臟、肌肉和鰓組織中GST活性的影響
由圖1可知,在富集階段,3種組織中各染毒濃度組GST活性在第3天均被誘導(dǎo)。肝臟組織中各染毒濃度組GST活性均在第7天達(dá)到峰值,顯著高于對(duì)照組(P<0.05),隨后肝臟中各染毒濃度組GST活性開(kāi)始下降,第19天時(shí)高濃度組(0.06 mg·L-1)GST活性仍顯著高于對(duì)照組水平(P<0.05)。鰓組織中各染毒濃度組GST活性在第3天時(shí)達(dá)到峰值,其中高濃度組GST活性為對(duì)照組的2.55倍,顯著高于對(duì)照組(P<0.05),隨后各染毒濃度組GST活性開(kāi)始下降,第15天時(shí)基本達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。肌肉組織中各染毒濃度組GST活性在第15天達(dá)到峰值,中濃度0.03 mg ·L-1組、高濃度組GST活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05),分別為對(duì)照組的2.15、3.23倍,第19天時(shí)只有高濃度組GST活性較對(duì)照組有顯著性差異(P<0.05)。
進(jìn)入釋放階段后,三種組織中各染毒濃度組GST活性逐漸下降。在第22天時(shí),除肌肉組織高濃度組GST活性顯著高于對(duì)照組(為其2.97倍,P<0.05)外,其余各試驗(yàn)組GST活性基本恢復(fù)至對(duì)照組水平(P>0.05)。
圖1 0#柴油水溶性成分對(duì)黑鯛肝臟(a)、鰓(b)、肌肉(c)組織中GST活性的影響Fig.1 Effects of No.0 diesel oil exposure on GST activities in liver(a),muscle(b)and gill(c)of Sparus macrocephalus
2.2 0#柴油水溶性成分對(duì)黑鯛肝臟、肌肉和鰓組織中SOD活性的影響
如圖2所示,在富集階段,肝臟組織中各試驗(yàn)組SOD活性在第3天降至最低,高濃度組SOD活性為對(duì)照組的66%,差異顯著(P<0.05),隨后各試驗(yàn)組SOD活性升高,第15天達(dá)到峰值后又開(kāi)始下降,至第19天時(shí)與對(duì)照組水平無(wú)顯著差異(P>0.05)。鰓組織中的高濃度組SOD活性逐漸下降,在第15天降至最低,為對(duì)照組水平的62%,差異顯著(P<0.05),第19天時(shí)升至對(duì)照組水平(P>0.05)。肌肉組織中的高濃度組SOD活性在第3天被顯著誘導(dǎo)(P<0.05),在第7天升至峰值,顯著高于對(duì)照組(P<0.05),為其1.86倍,隨后下降,第19天時(shí)與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)。
圖2 0#柴油水溶性成分對(duì)黑鯛肝臟(a)、鰓(b)、肌肉(c)組織中SOD活性的影響Fig.2 Effects of No.0 diesel oil exposure on SOD activities in liver(a),muscle(b)and gill(c)of Sparus macrocephalus
在釋放階段,肝臟組織中各試驗(yàn)組SOD活性繼續(xù)下降,第22天時(shí),肝臟組織中的中、高濃度組SOD活性顯著低于對(duì)照組(P<0.05),分別為對(duì)照組水平的56%、51%。鰓和肌肉組織中各試驗(yàn)組SOD活性在第22天與對(duì)照組水平無(wú)顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
2.3 0#柴油水溶性成分對(duì)黑鯛肝臟、肌肉和鰓組織中CAT活性的影響
在富集階段,如圖3所示,黑鯛肝臟和肌肉組織中各濃度組CAT活性整體先升高后降低。肝臟組織中各試驗(yàn)組CAT活性在第7天達(dá)到峰值,中、高濃度組CAT活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05),分別為對(duì)照組的2.94、5.38倍,至第19天肝臟組織中各試驗(yàn)組CAT活性恢復(fù)至對(duì)照組水平(P>0.05)。鰓組織中各試驗(yàn)組CAT活性持續(xù)下降,第19天時(shí)與對(duì)照組水平仍有顯著差異(P<0.05)。肌肉組織中各試驗(yàn)組在第3天達(dá)到峰值,且中(0.03 mg·L-1)、高濃度組CAT活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05),分別為對(duì)照組的2.19、2.87倍,隨后肌肉組織中各試驗(yàn)組CAT活性開(kāi)始下降,其中高濃度組CAT活性在第19天仍顯著高于對(duì)照組水平(P<0.05)。
進(jìn)入釋放階段后,三種組織中各染毒濃度組CAT活性下降。第22天時(shí),肌肉和肝臟各試驗(yàn)組CAT活性與對(duì)照組水平均無(wú)顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),鰓組織中各試驗(yàn)組CAT活性顯著低于對(duì)照組水平(P<0.05)。
抗氧化系統(tǒng)由多個(gè)抗氧化酶系組成,是生物體內(nèi)清除活性氧自由基、抵抗外源環(huán)境壓力的重要防御系統(tǒng)。外源性污染物進(jìn)入生物體內(nèi)后,先經(jīng)Ⅰ相反應(yīng)在有關(guān)酶催化下生成一些活性基團(tuán)或使活性基團(tuán)暴露,活性基團(tuán)經(jīng)Ⅱ相反應(yīng)在其它酶作用下與內(nèi)源性化合物或基團(tuán)(內(nèi)源性輔因子)結(jié)合,生成親水性更強(qiáng)、利于排出體外的二級(jí)代謝物[16]。
圖3 0#柴油水溶性成分對(duì)黑鯛肝臟(a)、鰓(b)、肌肉(c)組織中CAT活性的影響Fig.3 Effects of No.0 diesel oil exposure on CAT activities in liver(a),muscle(b)and gill(c)of Sparus macrocephalus
有研究表明,在輕度污染下SOD活性往往升高,而在重度污染下SOD活性常常會(huì)降低,致使生物體內(nèi)活性氧過(guò)量積累,進(jìn)而對(duì)生物體造成傷害[22]。但本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,黑鯛肝臟組織中各濃度組SOD活性呈下降-上升-下降趨勢(shì),在染毒初期被明顯被抑制,且抑制程度與試驗(yàn)組濃度呈正相關(guān),這說(shuō)明細(xì)胞受到了一定程度的傷害[23],傷害程度隨0#柴油水溶性成分濃度的增加而加深。隨后SOD活性開(kāi)始上升,表明黑鯛機(jī)體誘導(dǎo)產(chǎn)生大量的SOD,以清除過(guò)量的自由基,減少對(duì)機(jī)體造成的傷害。魯雙慶等[23]在黃鱔肝臟中也發(fā)現(xiàn)了同樣的現(xiàn)象。在鰓組織中,中低濃度組SOD活性與對(duì)照組無(wú)明顯差異,高濃度組(0.06 mg·L-1)SOD活性則被抑制,可見(jiàn)0.06 mg· L-1為其閾值濃度,當(dāng)0#柴油污染的作用超過(guò)黑鯛機(jī)體的適應(yīng)能力時(shí)就會(huì)出現(xiàn)中毒反應(yīng)[24]。肌肉組織中高濃度組SOD活性誘導(dǎo)早于中低濃度組,這在夏斌等[24]的研究中也得到了驗(yàn)證。
黑鯛的肝臟和肌肉組織中CAT活性先升后降,說(shuō)明受到污染后CAT能有效被誘導(dǎo),將H2O2等被進(jìn)一步代謝為水和分子氧,從而防止毒性更大的羥自由基等的產(chǎn)生,阻斷其放大氧自由基的損傷,保護(hù)細(xì)胞免受其傷害,減少脂質(zhì)過(guò)氧化損傷[25-27],但隨著曝油時(shí)間的延長(zhǎng),黑鯛體內(nèi)的活性氧蓄積,氧自由基使CAT和SOD酶蛋白結(jié)構(gòu)和輔基的微環(huán)境與價(jià)態(tài)發(fā)生變化,使其受到損傷,放大了氧自由基的損傷效應(yīng),導(dǎo)致活性降低[28]。
從時(shí)間-效應(yīng)來(lái)看,黑鯛各組織中GST活性先升后降。染毒初期表現(xiàn)出敏感性和誘導(dǎo)性,表明GST特定的亞基催化異生物質(zhì)與GSH結(jié)合生成了易于排泄低毒的化合物[27],從而在石油烴的解毒過(guò)程起到了重要作用[29]。后期可能是解毒代謝過(guò)程中產(chǎn)生的中間代謝物使GST亞基組成發(fā)生變化,加上GSH被大量消耗,導(dǎo)致GST活性降低[12]。從劑量-效應(yīng)來(lái)看,在本實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi),黑鯛的肝臟和肌肉組織中CAT活性和黑鯛各組織中GST活性與0#柴油濃度呈正相關(guān),該現(xiàn)象在其它污染物的毒性效應(yīng)中也普遍存在[14-15]。釋放結(jié)束后,除肌肉組織中高濃度組(0.06 mg· L-1)外,其余各濃度組均恢復(fù)至對(duì)照水平,說(shuō)明在0.015~0.03 mg·L-1濃度范圍內(nèi),受試黑鯛能夠調(diào)節(jié)自身的適應(yīng)機(jī)制,各組織并未受到不可逆損傷。此外,鰓的GST活性出現(xiàn)峰值的時(shí)間早于肝臟和肌肉,這印證了鰓是黑鯛吸收污染物的重要位點(diǎn)[30],對(duì)外界污染的應(yīng)激反應(yīng)最為優(yōu)先,而肝臟是解毒代謝器官,受到污染的影響更為嚴(yán)重,需要更長(zhǎng)的時(shí)間來(lái)緩和[31]。同時(shí),各組織中三種酶活性大小依次為為:肌肉<鰓<肝臟,這可能是由各組織的功能進(jìn)化差異造成的。
(1)黑鯛各組織中GST活性整體先升后降,始終被誘導(dǎo)。肝臟中SOD活性呈抑制-誘導(dǎo)-抑制趨勢(shì),鰓中SOD活性先抑制后誘導(dǎo),肌肉中SOD活性始終被誘導(dǎo),各組織中SOD的活性表達(dá)整體隨時(shí)間和劑量的變化曲線是多階段的,無(wú)明顯變化規(guī)律。肝臟和肌肉組織中CAT活性也呈現(xiàn)上升-下降趨勢(shì),但變化幅度不如GST明顯;肝臟中CAT活性先誘導(dǎo)后抑制,肌肉中始終被誘導(dǎo),而鰓組織中CAT活性始終被抑制。
(2)0#柴油污染對(duì)黑鯛肝臟組織中GST活性影響比肌肉和鰓組織中的更為靈敏,在0.015 mg ·L-1濃度下即可誘導(dǎo)GST的顯著表達(dá),各組織中GST活性大小依次為:肌肉<鰓<肝臟。SOD和CAT活性分別在0.06 mg·L-1、0.03mg·L-1濃度下才能被顯著誘導(dǎo),各組織中SOD和CAT活性大小呈現(xiàn)與GST活性相同的規(guī)律。
(3)從抗氧化酶角度來(lái)分析,所有檢測(cè)的各組織的抗氧化生化指標(biāo)中,只有GST對(duì)污染的反應(yīng)同時(shí)具有明顯的劑量-效應(yīng)和時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系;從受試的黑鯛組織來(lái)看,肝臟組織中幾種抗氧化酶的變化規(guī)律較為明顯。因此,較其它指標(biāo)而言,在本研究的受試濃度下,肝臟組織中的GST更適合作為監(jiān)測(cè)石油污染的有效生物標(biāo)志物。
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Effects of water-soluble fraction in No.0 diesel oil exposure on the antioxidase activities in liver,gill and muscle of Sparus microcephalus
DONG Ran1,2,JIANG Mei1,LI Lei1,YANG Jie-qing1,2,XU Gao-peng1,2,SHEN Xin-qiang1
(1.East China Sea Fisheries Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Shanghai200090,China;2.Colloge of Marine Sciences,Shanghai Ocean University,Shanghai 201206,China)
No.0 diesel is a typical pollutant in marine environment,it will trigger a chain reaction if exposed in the sea.Most of these compositions exist as water-soluble fraction(WSF),which is toxic to sea-life and thus breaks the balance of marine ecosystem.Under indoor simulation conditions,the activities of glutathione s-transferase(GST),superoxide dismutase(SOD)and catalase(CAT)in the liver,gill and muscle ofSparus microcephaluswere studied,with a 19-day No.0 diesel oil water-soluble fraction(WSF)exposure period and 3-day elimination period.The experimental larvae were provided by fish farms from Jiangsu Fisheries Research Institute.Experimental water was natural seawater,with the pH at8.20 and salinity at20-21.Four groups at concentrations of 0,0.015,0.03,0.06 mg·L-1of No.0 diesel WSF solution were set in all three organs.Results indicated that:(1)within the experimental dose range,the time-response trend of inductions of liver,gill and muscle GST ofSparus macrocephaluswas bell-shaped.The activities of GST in the liver,gill and muscle versus time increased first and then decreased under the prolonged exposure of No.0 diesel oil water-soluble fraction(WSF).Overall,GST activities in the liver,gill and muscle were induced during the exposure period.There was an obvious dose-time response relationship between No.0 diesel oil water-soluble fraction(WSF)and GST activities in the liver,gill and muscle ofSparus microcephalus.GST activities in liver were the most sensitive to No.0 diesel oil water-soluble fraction(WSF),as which could be induced significantly under No.0 diesel oil water-soluble fraction(WSF)exposure at the concentration of0.015 mg· L-1.(2)On the whole,SOD activities in the liver,gill and muscle of Sparus microcephalus didn’t show a direct correlation with the concentration of No.0 diesel oil water-soluble fraction(WSF),neither with time.(3)CAT activities in three organs were distinct.The time-response trend of inductions of liver and muscle CAT was bell-shaped,which was similar to that of GST,but varied less than that of GST.CAT activities in liver were induced at first and then inhibited,while that in muscle was induced all the time,in contrast,the CAT activities in gill kept inhibited all through the experiment.When the elimination period came to an end,except for the three groups in gill,the CAT activities in all other groups showed no difference from control groups.In summary,the simulation results showed that GST activities in liver of Sparus macrocephalus were recommended for environmental No.0 diesel oil pollution monitoring.
No.0 diesel oil;Sparus macrocephalus;liver;gill;muscle;antioxidase
S 973.2
A
1004-2490(2016)02-0190-08
2015-06-30
農(nóng)業(yè)部應(yīng)對(duì)溢油關(guān)鍵技術(shù)專項(xiàng)(2012-2014);中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)(2014A02XK01);
中央級(jí)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)(2014T06)
董 冉(1990-),女,碩士研究生,主要研究方向?yàn)樗h(huán)境毒理學(xué)。E-mail:197668825@qq.com
沈新強(qiáng),研究員。E-mail:xinqiang_shen@hotmail.com