仇廣翠，孫明忠，金　浩

(鹽城市第三人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，江蘇 鹽城224001)

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220株金黃色葡萄球菌的臨床分布特點(diǎn)及耐藥性分析

仇廣翠，孫明忠，金浩

(鹽城市第三人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，江蘇 鹽城224001)

摘要：目的探討金黃色葡萄球菌感染的臨床分布特點(diǎn)及耐藥性狀況，為臨床感染是治療和預(yù)防提供有益的參考。方法將2011年1月至2014年10月期間我院臨床檢驗(yàn)分離出的220株金黃色葡萄球菌納入本研究。采用常規(guī)方式分離菌株，菌株鑒定主要采用金葡菌單克隆抗體、血漿凝固酶和Vitek-32型儀等。抗菌藥物對細(xì)菌敏感性測定選擇紙片擴(kuò)散法，耐甲氧西林金葡菌(MRSA)耐藥性測定選擇頭孢西丁法。所得數(shù)據(jù)分析使用WHONET5.5軟件。結(jié)果本研究分離培養(yǎng)的220株菌株包括痰液培養(yǎng)菌株91株(41.36%)，膿液培養(yǎng)菌株55株(25.00%)，血液培養(yǎng)菌株40株(18.18%)；主要分布在腦外科、ICU，分別占20.00%和29.09%；在藥敏結(jié)果中，青霉素耐藥率高達(dá)89.55%，紅霉素耐藥率高達(dá)64%，苯唑西林、四環(huán)素耐藥率分別為34.56%和26.82%，萬古霉素、利奈唑胺耐藥率為0，利福平、呋喃妥因耐藥率均低于3%。結(jié)論金黃色葡萄球菌主要檢測部位是在患者皮膚組織和下呼吸道等部位，對臨床常用抗菌藥物的耐藥率較嚴(yán)重。

關(guān)鍵詞：金黃色葡萄球菌；抗菌藥；耐藥性；特點(diǎn)；分析

(ChinJLabDiagn,2016,20:0269)

金黃色葡萄菌球菌(SA)是臨床感染中最常見的一種致病菌，也是院內(nèi)感染的主要病菌，臨床表現(xiàn)主要是導(dǎo)致患者軟組織、皮膚等器官出現(xiàn)化膿性感染，患者生活質(zhì)量下降，健康恢復(fù)和抗菌藥物選擇均存在一定困難[1]。菌株的耐藥性惡化，藥物存在不同的耐藥性，給金黃色葡萄球菌感染的治療和預(yù)防等工作帶來嚴(yán)重考驗(yàn)。目前，在臨床上尤其需要注意的是耐甲氧西林金葡菌(MRSA)[2]，其特點(diǎn)在于耐藥性較強(qiáng)，且對多種藥物均有耐藥性，呈多重耐藥的特點(diǎn)。MRSA對幾乎所有類型的β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物具有耐藥性，對克林霉素、紅霉素、四環(huán)素等常規(guī)抗菌藥耐藥率也相對較高。目前臨床上金黃色葡萄球菌檢出率相對較高，國際相關(guān)研究結(jié)果表明[3]，在3 251株金葡菌中檢測出1 900株MRSA，檢出率達(dá)58.4%。我國一項(xiàng)重癥監(jiān)護(hù)室(ICU)金黃色葡萄球菌感染狀況調(diào)查研究結(jié)果表明[4]，MRSA檢出率高達(dá)72.0%以上。因此，本研究主要探討金黃色葡糖球菌感染臨床分布以及耐藥性狀況，為對金葡菌感染進(jìn)行有效治療、控制和預(yù)防，對院內(nèi)感染進(jìn)行控制和預(yù)防指導(dǎo)提供參考。

1材料與方法

1.1菌株來源

將2011年1月至2014年10月期間我院臨床檢驗(yàn)分離出的220株金黃色葡萄球菌納入本研究。但需要注意的是，本研究中并不包含相同患者以及同樣病例的相同部位進(jìn)行多次菌株分離而出現(xiàn)的重復(fù)菌株。菌株標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定為金黃色葡萄球菌菌株ATCC25923。

1.2試劑與儀器

二氧化碳細(xì)菌培養(yǎng)箱、BacT∕ALERT 3D血培養(yǎng)儀、GPI細(xì)菌鑒定卡及VITEK-32全自動微生物分析儀等。上述所有儀器操作均嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，醫(yī)保證細(xì)菌培養(yǎng)分離的效果。

1.3藥敏紙片和培養(yǎng)基

對金黃色葡萄球菌耐藥種類進(jìn)行設(shè)定，藥敏紙片主要包含青霉素、紅霉素、萬古霉素、克林霉素、左氧氟沙星、復(fù)方磺胺甲噁唑、頭孢西丁、利福平、呋喃妥因、利奈唑胺及四環(huán)素等，此外，還需要MH瓊脂，Etest條。

1.4菌株分離鑒定和藥敏試驗(yàn)

嚴(yán)格參照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[5]采集標(biāo)本、細(xì)菌接種及進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，在獲得細(xì)菌后進(jìn)行純培養(yǎng)，隨后進(jìn)行革蘭染色和觸酶試驗(yàn)，對細(xì)菌進(jìn)行初篩。菌株檢測需要采用金黃色葡萄球菌單克隆抗體、血漿凝固酶試驗(yàn)和VITEK-32型儀。相關(guān)儀器和試驗(yàn)操作參照相關(guān)操作程序和步驟進(jìn)行。藥敏試驗(yàn)采用K-B法，嚴(yán)格參照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(CLSI)規(guī)則判斷抗菌藥物相關(guān)藥敏結(jié)果。金黃色葡萄球菌對萬古霉素耐藥性檢測方式自2009年3月1日起采用Etest條法進(jìn)行，并對其MIC值進(jìn)行檢測，結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)參照M100-S19標(biāo)準(zhǔn)。

1.5頭孢西丁紙片法檢測MRSA

MRSA細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果需要嚴(yán)格參考2007年制定的CLSI標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判讀。選取待檢菌落后將菌液濃度調(diào)至1.5×108CFU/ml，并將MH平皿表面用菌液均勻涂布，把頭孢西丁(30 μg)紙片貼在平皿上，將平皿置于33-35度中進(jìn)行孵育，16-18 h后對菌落培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行觀察，甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(MSSA)觀察結(jié)果為頭孢西丁抑菌圈直徑超過22 mm；耐甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(MRSA)觀察結(jié)果為頭孢西丁抑菌圈直徑小于21 mm。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用Whonet 5.5軟件進(jìn)行相關(guān)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2結(jié)果

2.1臨床菌株分離情況

本研究共收集分離培養(yǎng)金黃色葡萄球菌220株，其中2011年58株，2012年62株，2013年60株，2014年40株，各年份內(nèi)的細(xì)菌培養(yǎng)分離數(shù)目基本保持穩(wěn)定。

2.2標(biāo)本來源

本研究培養(yǎng)的220株細(xì)菌，其中來自痰液培養(yǎng)的菌株91株，來自膿液培養(yǎng)的菌株55株，來自血液的菌株為40株，具體數(shù)據(jù)見表1。

表1　標(biāo)本來源分布情況

2.3科室分布情況

本研究220株菌株主要來自于臨床各個(gè)科室，其中金黃色葡萄球菌(SA)分布最多的科室分別為腦外科、ICU、兒科和門診等，分別占20.00%、29.09%、10.00%以和8.64%，科室分布構(gòu)成比見表2。

表2　金黃色葡萄球菌感染科室分布及構(gòu)成比(%)

2.4藥敏結(jié)果

金黃色葡萄球菌對青霉素類藥物耐藥性較強(qiáng)，耐藥率在90%左右，對紅霉素耐藥率超過60%，對苯唑西林耐藥性超過30%，而金黃色葡萄球菌對萬古霉素、利奈唑胺兩類藥物無耐藥性，利福平、呋喃妥因兩類藥物耐藥性也維持在3%以下，耐藥性較好，見表3。

表3　220株菌的藥敏結(jié)果

3結(jié)論

革蘭陽性菌中最為重要的一種致病菌是金黃色葡萄球菌，作為一種條件致病菌，金黃色葡萄球菌在自然界中廣泛分布。目前，隨著抗生素在臨床治療中應(yīng)用越發(fā)廣泛，金黃色葡萄球菌不僅可以導(dǎo)致社區(qū)感染，也是院內(nèi)感染的重要原因[6]，其臨床癥狀常常表現(xiàn)為患者皮膚、泌尿道、血液及呼吸道等組織器官感染，其耐藥性越來越強(qiáng)，耐藥種類越來越多，尤其是院內(nèi)感染中MRSA問題已成為嚴(yán)峻問題，對患者感染的治療產(chǎn)生嚴(yán)重影響，因此，對金黃色葡萄球菌感染，尤其是對MRSA耐藥耐藥檢測有助于臨床用藥合理性[7]。

在本研究所有培養(yǎng)的220株菌株中，包括痰液培養(yǎng)菌株91株(41.36%)，來自膿液培養(yǎng)的菌株55株(25.00%)，來自血液的菌株為40株(18.18%)，此結(jié)果顯示金黃色葡萄球菌感染部位主要在呼吸道、血流等，與國內(nèi)[8]相似的研究結(jié)果一致；220株菌株中金黃色葡萄球菌感染主要分布在腦外科、ICU、兒科和門診等科室，分別占20.00%、29.09%、10.00%和8.64%；在藥敏結(jié)果中，分離出的金黃色葡萄球菌株對青霉素耐藥性較強(qiáng)，耐藥率高達(dá)89.55%，在對金黃色葡萄球菌感染治療中，選擇青霉素則其抗菌活性幾乎沒有，其治療作用有限[9]。金黃色葡萄球菌對紅霉素耐藥率高達(dá)64%，對苯唑西林、四環(huán)素耐藥率分別為34.56%、26.82%，表明在金黃色葡萄球菌抗感染治療中需要進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，從而能夠?qū)χ委熯M(jìn)行有效指導(dǎo)。220株菌株對萬古霉素、利奈唑胺全部耐藥，利福平、呋喃妥因耐藥率低于3%，因此，在金黃色葡萄球菌感染治療中，應(yīng)選用萬古霉素、利奈唑胺、利福平及呋喃妥因等作為其首選藥[10]。此外，左氧氟沙星、莫西沙星對金葡菌感染耐藥率為12.73%、9.55%，可在其感染過程中作為輔助用藥。

綜上所述，在預(yù)防金黃色葡萄球菌院內(nèi)感染和社區(qū)感染中，通過將金黃色葡萄球菌臨床分布特征進(jìn)行研究，確定其分布特點(diǎn)，明確組織器官感染狀況，對其耐藥菌分類進(jìn)行確認(rèn)，可在臨床治療中做到有針對性和有效性。在預(yù)防措施中，首先需要保證消毒隔離措施安全有效，對傳染源應(yīng)該做到盡量切斷，其次還應(yīng)該對院內(nèi)感染進(jìn)行有效監(jiān)測，做到及時(shí)有效地進(jìn)行處理，這些方法可對金黃色葡萄球菌尤其是MRSA感染有積極意義，在臨床治療、抗感染中應(yīng)該受到臨床重視。

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Clinical distribution characteristic and drug resistance of 220 strains of staphylococcus aureusCHOUGuang-cui,SUNMing-zhong,JINHao.(DepartmentofClinicallaboratory,YanchengThirdPeople'sHospital,Yancheng,Jiangsu224001,China)

Abstract:Objectiveto study the clinical distribution characteristic and drug resistance of 220 strains of staphylococcus aureus,to give a reference of clinical treatment and prevention of infection.Methods220 strains of staphylococcus aureus in my hospital between January 2011 and October 2014 isolated from the clinical examination into the study,strains was separated by conventional way,strain was identified mainly by aureus bacteria monoclonal antibody,plasma coagulase and Vitek - 32 type instrument,Determination of antimicrobial susceptibility to bacterial choose disc diffusion method,determination of resistance of Bacteria methicillin-resistant s.aureus (MRSA) was choose cefoxitin method,Data was used WHONET5.5 software to analyze result.Resultsin this study,the separation of culture from 220 strains included sputum strains for 91 strains (41.36%),pus culture strains for 55 strains (25.00%),blood culture strains for 40 cases (18.18%).Mainly distributed in brain surgery department,ICU,accounted for 20.00% and 29.09%,respectively;in drug susceptibility results,penicillin resistant rate was as high as 89.55%,erythromycin resistance was as high as 64%,Westwood,tetracycline,benzene azole resistance were 34.56%,26.82%,vancomycin,rina of often resistant rate was 0,rifampicin,nitrofurantoin for resistance was less than 3%.ConclusionStaphylococcus aureus detection area is mainly in patients with skin tissue and lower respiratory tract,its resistance to clinical common antimicrobial drug is serious.

Key words:Staphylococcus aureus;Antimicrobials;Drug resistance;Characteristic;Analysis

(收稿日期：2015-01-23)

作者簡介：仇廣翠(1976-)，女，本科，副主任醫(yī)師，從事微生物、基因診斷、免疫方面的研究。

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

中圖分類號：R446.5

文章編號：1007-4287(2016)02-0269-03