陶建芳

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規(guī)范規(guī)?；B(yǎng)豬場抗體監(jiān)測的措施

陶建芳*

（甘肅省甘南州夏河縣動物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 夏河747100）

摘要：近年來隨著規(guī)模化養(yǎng)豬場數(shù)量的增多，單純依靠經(jīng)驗進行豬群的日常管理存在極大風(fēng)險，在實踐經(jīng)驗的基礎(chǔ)上引入更為科學(xué)的豬群健康狀況評價機制，抗體監(jiān)測正是一種可以提供除生產(chǎn)數(shù)據(jù)信息之外，可直觀反映豬群健康狀態(tài)的有效技術(shù)。但是受經(jīng)濟條件和技術(shù)水平等多方面因素的制約，由散養(yǎng)戶轉(zhuǎn)型而來的規(guī)?；B(yǎng)豬場在生產(chǎn)管理上還存在著諸多問題。本文在結(jié)合養(yǎng)豬場實際情況，全面總結(jié)分析影響規(guī)?；B(yǎng)豬場抗體監(jiān)測因素的基礎(chǔ)上，提出了規(guī)范規(guī)?；B(yǎng)豬場抗體監(jiān)測的措施，為全面提高養(yǎng)豬場的科學(xué)化管理水平、切實消除疫病防控盲區(qū)提供一定的技術(shù)指導(dǎo)。

關(guān)鍵詞：規(guī)范；規(guī)模化養(yǎng)豬場；抗體監(jiān)測；措施

抗體監(jiān)測是指根據(jù)抗原抗體特異結(jié)合原理，利用某些方法對樣品中的抗體類型和含量進行定性或定量測定的一種技術(shù)，其根本過程是利用抗原誘導(dǎo)刺激畜禽機體，在體內(nèi)產(chǎn)生免疫應(yīng)答，從而達到抵御外界病原微生物和其他外來物質(zhì)的侵襲，保護畜禽的健康生長。近年來隨著規(guī)?；B(yǎng)豬場數(shù)量的增多，單純依靠經(jīng)驗進行豬群的日常管理存在極大風(fēng)險，在實踐經(jīng)驗的基礎(chǔ)上引入更為科學(xué)的豬群健康狀況評價機制，抗體監(jiān)測正是一種可以提供除生產(chǎn)數(shù)據(jù)信息之外，可以直觀反映豬群健康狀態(tài)的有效技術(shù)［1］。但是受經(jīng)濟條件和技術(shù)水平等多方面因素的制約，由散養(yǎng)戶轉(zhuǎn)型而來的規(guī)?；B(yǎng)豬場在生產(chǎn)管理上還存在著諸多問題，尤其是在養(yǎng)豬場的安全控制和疫病的綜合防控上缺乏相應(yīng)的指導(dǎo)依據(jù)，存在著盲目性和隨意性，引起養(yǎng)豬場安全的隱患，造成養(yǎng)殖過程中不必要的損失。本文在結(jié)合養(yǎng)豬場實際情況，全面總結(jié)分析影響規(guī)?；B(yǎng)豬場抗體監(jiān)測因素的基礎(chǔ)上，提出了規(guī)范規(guī)模化養(yǎng)豬場抗體監(jiān)測的措施，為全面提高養(yǎng)豬場的科學(xué)化管理水平、切實消除疫病防控盲區(qū)提供一定的技術(shù)指導(dǎo)［2］。

1　影響規(guī)?；B(yǎng)豬場抗體監(jiān)測規(guī)范化程度的因素

1.1在養(yǎng)豬場內(nèi)部因素上

受規(guī)?；B(yǎng)豬場負責(zé)人的文化素質(zhì)、專業(yè)技術(shù)水平的限制，養(yǎng)殖場負責(zé)人對于抗體監(jiān)測不了解、重視程度不夠，缺乏實際可操作性，導(dǎo)致養(yǎng)豬場負責(zé)人對于抗體監(jiān)測的重要性認識不夠，具體操作方面不明［3］，影響著在養(yǎng)豬實踐過程中抗體監(jiān)測結(jié)果的實際應(yīng)用。

1.2在實驗室設(shè)施建設(shè)上

突出表現(xiàn)在實驗室監(jiān)測能力建設(shè)上，雖然大部分縣區(qū)都配備了監(jiān)測儀器和監(jiān)測試劑，但是實驗室實際操作人員缺乏，專業(yè)技術(shù)水平偏低，在實際實驗操作過程中駕馭工作全局能力缺乏，對于抗體監(jiān)測的評判標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)要求掌握不準(zhǔn)，影響著抗體監(jiān)測的準(zhǔn)確性。

1.3在監(jiān)測方法上

主要存在著監(jiān)測方法不科學(xué)、監(jiān)測個體選擇不具有代表性、確定的監(jiān)測時間不合理等諸多問題，嚴(yán)重影響著抗體監(jiān)測的質(zhì)量和對生產(chǎn)管理的指導(dǎo)性，導(dǎo)致抗體監(jiān)測對于生產(chǎn)實踐的指導(dǎo)促進作用降低，甚至產(chǎn)生誤導(dǎo)，制約著規(guī)?；B(yǎng)豬場的健康發(fā)展，嚴(yán)重影響著規(guī)?；B(yǎng)豬經(jīng)濟的提升。

2　規(guī)范規(guī)?；B(yǎng)豬場抗體監(jiān)測的措施

結(jié)合規(guī)?；B(yǎng)豬場抗體監(jiān)測的影響因素，規(guī)范規(guī)?；B(yǎng)豬場抗體監(jiān)測必須從流行病學(xué)調(diào)查、抗體監(jiān)測方法選擇、監(jiān)測對象選擇、血液的采集保存等方面規(guī)范養(yǎng)豬場的抗體監(jiān)測，切實發(fā)揮抗體監(jiān)測在養(yǎng)豬場疫病防控、安全運行、健康發(fā)展方面的重要作用。

2.1依據(jù)養(yǎng)豬場周邊流行病學(xué)調(diào)查情況確定監(jiān)測重點病種

加強國內(nèi)外疫情形勢和本地區(qū)季節(jié)性、區(qū)域性、重點發(fā)生頻率較高的疫病的關(guān)注程度，進行流行病學(xué)調(diào)查，重點從本地區(qū)和周邊養(yǎng)豬場調(diào)運動物的頻率、常發(fā)疫病、臨近縣區(qū)多發(fā)疫病進行大范圍判斷開展監(jiān)測的重點疫病。重點針對本場內(nèi)種畜禽引進情況、往年發(fā)生過的疫病、蚊蠅蜱等飛行昆蟲的分布情況、疫苗接種情況，對照臨床表現(xiàn)癥狀將豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂犬病、豬圓環(huán)病毒病等免疫抑制性疫病作為重點監(jiān)測病種，進行重點抗體監(jiān)測［4］。在種公豬和母豬群中，將豬細小病毒病、豬乙型腦炎等繁殖障礙性疾病和布魯氏桿菌病、口蹄疫等人畜共患病，依照發(fā)病規(guī)律作為針對性監(jiān)測對象，進行有針對性監(jiān)測。

2.2依據(jù)豬群的不同結(jié)構(gòu)確定監(jiān)測對象

通常規(guī)?；B(yǎng)豬場的豬群分為種公豬、妊娠母豬、哺乳母豬、哺乳仔豬、保育豬、生長育肥豬六類豬群，豬群結(jié)構(gòu)的不同對于監(jiān)測疫病的對象也不同，繁殖豬群（種公豬、母豬）是養(yǎng)豬場的基礎(chǔ)，由于要經(jīng)歷配種、懷孕、妊娠、分娩、哺乳等生理過程，加之飼養(yǎng)時間長，感染疫病的可能性較大，在養(yǎng)豬場中的重要性也顯得尤為重要。而仔豬、育肥豬是養(yǎng)豬場的生產(chǎn)工具，是養(yǎng)豬場經(jīng)濟效益的重要來源，飼養(yǎng)周期短（通常需要6個月，最長超不過1年），其生長過程中環(huán)境條件改變較大、個體抵抗力較低，疫病影響因素也不容忽視。通盤考慮在繁殖豬群中應(yīng)做好繁殖障礙性疫病、病毒感染性疫病的抗體監(jiān)測，在生產(chǎn)豬群中應(yīng)做好細菌性疫病、多發(fā)性疫病、階段性疫病的抗體監(jiān)測［5］。對于國家規(guī)定的一類動物疫病要做好全群監(jiān)測，不斷擴大抗體監(jiān)測在豬群中的覆蓋面，切實提高抗體監(jiān)測指導(dǎo)生產(chǎn)、規(guī)范管理、促進養(yǎng)殖科學(xué)化水平提高方面的作用，不斷增強規(guī)?；B(yǎng)殖場的綜合疫病防控能力［6］。

2.3選擇具有代表性的對象作為監(jiān)測個體

抗體監(jiān)測在抽樣上要保證所抽樣的個體具有代表性，能全面反映豬群的抗體水平，防止誤導(dǎo)養(yǎng)豬場，造成疫病防控上的決策錯誤。在個體抽取上要按照1∶10的比例進行抽取。個體的選擇上按照上、中、下三級區(qū)分法分別選取抽樣監(jiān)測對象，不能隨便抽取，造成所選取樣本無代表性，抗體監(jiān)測無實際意義。需要注意的是種公豬飼養(yǎng)數(shù)量較少、且與養(yǎng)豬場的每一頭母豬均有不同程度的接觸，所以種公豬應(yīng)全部抽樣進行抗體監(jiān)測，做到全覆蓋。繁殖母豬群按照空懷、妊娠和哺乳的階段性分別抽取，尤其應(yīng)加大妊娠母豬的抽樣數(shù)量，為掌握妊娠期的母豬體內(nèi)抗體含量，提供合理的依據(jù)。生產(chǎn)豬群依照哺乳、斷奶保育、育肥階段的分布，按照1∶10的比例確定抽樣對象，要保證抗體抽樣監(jiān)測樣本的代表性。

2.4確定合理的監(jiān)測時間

在抗體監(jiān)測時間的確定上要依照豬群結(jié)構(gòu)的不同和疫苗的注射時間的差異進行確定，重點以疫苗注射時間為準(zhǔn)，在疫苗注射15 d后進行抗體監(jiān)測，這是因為疫苗注射在動物體內(nèi)7 d產(chǎn)生抗體，15 d趨于平衡。在應(yīng)用程序化免疫的規(guī)?；B(yǎng)豬場，監(jiān)測時間的確定上還要依據(jù)重點監(jiān)測疫病種類，在注射疫苗后15 d進行［7］，這是因為兩種以上疫苗注射的間隔時間必須是7 d，而15 d內(nèi)如果存在著注射兩種以上疫苗的情況下，一次可以采集樣品進行兩種疫病的抗體監(jiān)測，減少了抗體監(jiān)測抽樣過程中對豬群的頻繁保定，減輕抽樣過程中的應(yīng)激；或是在一個免疫程序結(jié)束后同時進行，但是對于在前期注射的疫苗抗體隨著注射時間的延長，疫苗抗體含量降低，往往得不到準(zhǔn)確的評價，應(yīng)結(jié)合實際情況進行。在繁殖豬群的抗體監(jiān)測上，妊娠母豬選擇在妊娠后期臨產(chǎn)前3個月進行，對于繁殖障礙性疫病和免疫抑制性疫病要做到注射兩種疫苗抗體監(jiān)測一次，對于口蹄疫、豬瘟等需要在全群普免的疫病，在普免完成后進行一次全面監(jiān)測。

2.5選擇適宜的監(jiān)測方法

目前有關(guān)豬疫病的抗體監(jiān)測方法有很多種，病毒性疫病最常用的是免疫熒光抗體監(jiān)測實驗、RTPCR方法和ELISA法。熒光抗體監(jiān)測法主要用于監(jiān)測病料組織切片中的病毒，具有監(jiān)測時間較短（約2 h）、直觀的優(yōu)點，是實驗室常用的監(jiān)測方法之一，但該方法也有一些限制，如對實驗室硬件條件要求較高、需要熒光顯微鏡等［8］。RT-PCR方法和ELISA法具有快速、敏感的優(yōu)點，在豬瘟的診斷上扁桃體是豬瘟病毒的最先定植器官，也是含毒量最多和帶毒時間最長的器官，采集扁桃體樣品進行病毒的RT-PCR方法監(jiān)測，對于病毒感染的早期診斷及凈化具有重要意義［9］。ELISA法采用間接酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）原理，可用于大量樣品的監(jiān)測、國內(nèi)外均有商品化的試劑盒出售，其操作簡單、經(jīng)濟方便，常用于免疫效果的監(jiān)測。細菌性疫病通常需要在實驗室中進行細菌的分離培養(yǎng)，對于技術(shù)要求和實驗室條件的要求較高，在養(yǎng)豬場自己無法完成時需要進行送檢。由于規(guī)?；B(yǎng)豬場負責(zé)人和技術(shù)人員專業(yè)技術(shù)水平不高、在實踐中采用ELISA試劑盒進行疫苗免疫效果的監(jiān)測，具有重要的實際意義。而RT-PCR方法主要用于病毒感染的監(jiān)測，其監(jiān)測方法復(fù)雜，要求高，在基層規(guī)?；B(yǎng)殖場不實用。要全面摸清養(yǎng)豬場疫病感染情況，徹查感染種類，要在ELISA試劑盒監(jiān)測的基礎(chǔ)上，進行免疫熒光抗體監(jiān)測實驗、RT-PCR方法確診。在試劑盒的選擇上要根據(jù)監(jiān)測疫病的種類不同進行購買，在購買過程中要嚴(yán)格生產(chǎn)企業(yè)的資質(zhì)審核，重點查驗生產(chǎn)企業(yè)的獸藥生產(chǎn)許可證、GMP證書；國外代理的品牌要查驗準(zhǔn)許在國內(nèi)生產(chǎn)的授權(quán)委托書，確保購買的ELISA試劑盒質(zhì)量合格。

2.6規(guī)范樣品的采集保存

規(guī)?；B(yǎng)豬場的抗體監(jiān)測樣品主要是血液，在抗體監(jiān)測血液的采集上要重點做好無菌操作、加強被采集豬的保定和血清的分離。在豬的保定上要重點加強妊娠母豬的保定，采用誘導(dǎo)母豬進入到限位欄或是保定欄中的方式，避免發(fā)生劇烈運動或追趕以防止流產(chǎn)，保定要牢固扎實。采血用具的選擇上應(yīng)選用真空采血器，在實踐操作中采血后要及時用離心機進行血液的分離，分離后的血清用冰袋冷藏保存，在運輸過程中要防止傾斜、震蕩。有條件的可在全血中加入抗凝劑，完成采血后進行血清的分離。

2.7加強抗體監(jiān)測過程中數(shù)據(jù)的分析應(yīng)用

規(guī)?；B(yǎng)豬場抗體監(jiān)測在指導(dǎo)生產(chǎn)、規(guī)范管理、促進效益的提高上，最終的評價方式體現(xiàn)在抗體監(jiān)測的數(shù)據(jù)上。要加強對抗體監(jiān)測過程中數(shù)據(jù)的整理匯總，重點在妊娠母豬和哺乳母豬、哺乳仔豬上要全面掌握母豬和仔豬體內(nèi)的抗體效價變動情況，密切關(guān)注仔豬體內(nèi)母源抗體的效價維持程度，為合理確定仔豬的首免時間提供科學(xué)的依據(jù)。掌握重點疫病在豬群內(nèi)的抗體效價，發(fā)現(xiàn)免疫盲區(qū)，全面評價疫苗的免疫質(zhì)量。

參考文獻：（9篇，略）

中圖分類號：S851.35

文獻標(biāo)識碼：B

文章編號：1001-0769（2016）06-0075-03

收稿日期：2016-04-28.

*作者簡介：陶建芳（1968.1- ）女，寧夏中衛(wèi)人，畜牧師，大學(xué)學(xué)歷，主要從事畜牧技術(shù)推廣、動物疫病防控工作。