張　恒

(銅川市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，陜西銅川 727000)

?

·論著·

93例貧血患者外周血涂片紅細胞形態(tài)學(xué)分析

張恒

(銅川市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，陜西銅川 727000)

摘要:目的探討貧血患者外周血紅細胞的形態(tài)學(xué)特征。方法選擇93例貧血患者的外周血涂片在全自動閱片儀上進行紅細胞形態(tài)學(xué)檢查，對于異形性紅細胞采取人工鏡檢。結(jié)果93例貧血患者經(jīng)DM-96全自動血細胞形態(tài)分析系統(tǒng)分析，紅細胞大小不均占77.4%，其中48.4%以小紅細胞為主，異形性紅細胞占55.9%，嗜多色性紅細胞人工鏡檢與儀器自動閱片檢出率差異較大，低色素性紅細胞占11.8%。異形性紅細胞形態(tài)中檢出率居前三位的是橢圓形紅細胞、紅細胞碎片及紅細胞緡錢狀排列。結(jié)論外周血紅細胞形態(tài)學(xué)分析在紅細胞疾病，尤其是貧血的診斷、預(yù)后、治療中具有重要的意義，為實驗室報告的可靠性提供了形態(tài)學(xué)上的重要依據(jù)。

關(guān)鍵詞:貧血；血涂片；紅細胞形態(tài)

目前全自動血細胞分析儀已廣泛應(yīng)用，極大地提高了實驗室的檢測速度，同時也具備了較高的細胞計數(shù)和白細胞分類的準(zhǔn)確性，但是儀器始終無法替代細胞形態(tài)學(xué)檢查這個金標(biāo)準(zhǔn)。異常白細胞形態(tài)學(xué)檢查一直備受關(guān)注，而臨床對異常紅細胞形態(tài)學(xué)檢查相對不夠重視，本研究對93例貧血患者外周血涂片的紅細胞形態(tài)學(xué)檢查結(jié)果進行了分析總結(jié)，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料本院2015年4～6月臨床診斷為貧血的患者93例。

1.2儀器與試劑XE-2100全自動血細胞分析儀、SP-1000i全自動血涂片制備儀購自日本Sysmex公司，DM-96全自動血細胞形態(tài)分析系統(tǒng)購自瑞典CellavisionAB公司，瑞氏-姬姆薩染液由珠海貝索公司提供。

1.3檢測方法自動閱片方法：乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝全血在檢測完畢確認貧血后，在SP-1000i全自動血涂片制備儀上進行自動涂片染色，干燥后放置DM-96中進行自動讀片。人工鏡檢方法：分析步驟嚴格參照《血細胞形態(tài)學(xué)分析中國專家共識》中所述內(nèi)容執(zhí)行[1]。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理采用Excel2003 軟件進行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計學(xué)分析。

2結(jié)果

2.1自動閱片檢測結(jié)果93份血涂片經(jīng)DM-96全自動血細胞形態(tài)分析系統(tǒng)分析結(jié)果顯示，77.4%為紅細胞大小不均，以小紅細胞為主的占48.4%，大紅細胞為主的相對較少，占16.1%。55.9%的貧血患者外周血涂片檢出有紅細胞的異形性。有低色素性紅細胞表現(xiàn)的占11.8%，出現(xiàn)嗜多色性紅細胞的占9.7%。

2.2人工鏡檢分析結(jié)果93份外周血涂片異形紅細胞經(jīng)人工鏡檢分析結(jié)果顯示，異形紅細胞形態(tài)出現(xiàn)頻率居前三位的有橢圓形紅細胞、紅細胞碎片、紅細胞緡錢狀排列，分別占32.3%、12.9%、8.6%。

2.3自動閱片與人工鏡檢差異人工鏡檢和DM-96儀器自動閱片差異較大的是嗜多色性紅細胞，人工鏡檢檢出率為21.5%，自動閱片檢出率為9.7%，人工鏡檢檢出率是自動閱片檢出率的2倍多。而對于紅細胞低色素的檢出率接近(人工鏡檢有中央淡染區(qū)擴大表現(xiàn)的占12.9%)。

3討論

貧血是由于多種原因引起外周血單位容積內(nèi)血紅蛋白濃度、紅細胞計數(shù)及血細胞比容低于本地區(qū)、相同年齡和性別人群的參考值下限的一種血液疾病[2-4]。貧血的診斷主要依靠外周血的血紅蛋白、紅細胞數(shù)和紅細胞比積等檢測[5-7]。全自動血細胞分析儀提供了準(zhǔn)確性和精密度均非常良好的紅細胞計數(shù)及其相關(guān)參數(shù)，通過采樣后不到1 min的時間給出了紅細胞的分布、大小、血紅蛋白水平等信息，一旦這些參數(shù)中的一個或多個發(fā)生異常，應(yīng)該涂片進行光學(xué)顯微鏡檢查[8]。由于全自動數(shù)字圖像分析系統(tǒng)的發(fā)展，其精密度及對細胞形態(tài)識別的準(zhǔn)確度越來越高[9-10]，且提高了實驗室的閱片速度，因此本研究利用DM-96全自動閱片分析儀進行閱片檢查，尤其對紅細胞的相關(guān)信息做出了定量分析，加之人工審核和判斷能夠快速準(zhǔn)確地對異常情況作出描述和報告。

血細胞形態(tài)學(xué)人工鏡檢通過血涂片觀察紅細胞大小、顏色、形狀與內(nèi)含物四大特征，不但能驗證儀器結(jié)果，并能及時發(fā)現(xiàn)一些假性結(jié)果，避免漏檢。外周血異常紅細胞形態(tài)主要包括嗜多色性紅細胞、低色素性紅細胞、紅細胞大小不均、小紅細胞、大紅細胞、異形性紅細胞，其中異形性紅細胞中又包括紅細胞碎片、卵圓形紅細胞、紅細胞緡錢狀排列、球形、靶型、棘型紅細胞、嗜堿性點彩紅細胞，當(dāng)出現(xiàn)毛刺紅細胞、不規(guī)則收縮紅細胞、口型、淚滴型紅細胞大于一定比例，或發(fā)現(xiàn)紅細胞凝集、雙相紅細胞、豪-焦小體、橢圓形大紅細胞、帕彭海爾體、紅細胞內(nèi)寄生蟲、鐮狀紅細胞時也要報告臨床。除了報告這些異常情況，還應(yīng)給予半定量的描述。一些異常形態(tài)只在達到一定比例時才有報告的價值，這樣有助于實驗室內(nèi)部和實驗室間在形態(tài)學(xué)上報告的統(tǒng)一性和可比性[11-13]。

本研究中93例患者的血涂片經(jīng)DM-96全自動血細胞形態(tài)分析系統(tǒng)分析，結(jié)果顯示77.4%為紅細胞大小不均，以小紅細胞為主的占48.4%，大紅細胞為主的占16.1%。這表明小細胞低色素的貧血是臨床出現(xiàn)較多的表現(xiàn)類型，與相關(guān)報道一致[14]。

本研究結(jié)果顯示，經(jīng)DM-96全自動血細胞形態(tài)分析系統(tǒng)自動閱片的結(jié)果僅能檢出紅細胞大小不均、小紅細胞、大紅細胞、異形性紅細胞、嗜多色性紅細胞及低色素紅細胞。而對于檢出率接近一半的異形紅細胞形態(tài)卻無法進一步分類。通過人工鏡檢發(fā)現(xiàn)異形紅細胞形態(tài)檢出率居前三位的包括橢圓形紅細胞、紅細胞碎片、紅細胞緡錢狀排列。

紅細胞碎片或裂紅細胞輕度增加可見于脾功能亢進、巨幼貧、缺鐵貧、化療、感染等，中度增加見于地中海貧血、嚴重?zé)齻?、機械性溶血性貧血，明顯增加見于微血管性溶血性貧血、彌散性血管內(nèi)凝血、血管炎綜合征。橢圓形紅細胞輕度增加見于后脾切除術(shù)、肝臟疾病、輸注紅細胞，中度增加見于微血管溶血性貧血、遺傳性紅細胞增多癥，明顯增加見于橢圓形遺傳性紅細胞增多癥、自身免疫性溶血性貧血。紅細胞緡錢狀排列多見于高纖維蛋白原血癥、高球蛋白血癥、多發(fā)性骨髓瘤。

本研究中人工鏡檢和DM-96儀器自動閱片差異較大的是嗜多色性紅細胞的檢出率，試驗結(jié)果顯示自動閱片的檢出率為9.7%,而人工鏡檢檢出率為21.5%。嗜多色表現(xiàn)是紅細胞剛脫核未完全成熟的紅細胞，因胞質(zhì)中含有少量RNA物質(zhì)而被染成灰紅色或淡灰藍色，增多提示骨髓造紅細胞功能活躍。與人工鏡檢比較，自動閱片對于輕度增加的嗜多色性紅細胞檢出不敏感，而對于中重度的增加，自動閱片與人工鏡檢結(jié)果較為一致，因此差異主要來自于輕度增加這部分病例，再次提示人工鏡檢的重要性[15-16]。

綜上所述，外周血紅細胞形態(tài)學(xué)分析在紅細胞異常，尤其是貧血的診斷、預(yù)后、治療中具有重要的意義。雖然全自動血細胞形態(tài)分析系統(tǒng)及全自動血液分析儀能夠快速提供許多參數(shù)和報警信息[17]，但對于紅細胞異常形態(tài)的輕度增加，儀器尚不夠敏感。而對于紅細胞內(nèi)部的異常結(jié)構(gòu)，如嗜堿性點彩紅細胞、豪焦小體、卡波環(huán)、寄生蟲等更是無法檢出，因此儀器的快速發(fā)展目前仍無法完全替代人工鏡檢。

參考文獻

[1]中華醫(yī)學(xué)會血液學(xué)分會實驗診斷血液學(xué)學(xué)組.血細胞形態(tài)學(xué)分析中國專家共識(2013年版)[J]．中華血液學(xué)雜志，2013,34(6)：558-559.

[2]譚齊賢,張樹平.臨床血液學(xué)和血液學(xué)檢驗[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：120-121.

[3]Prihirunkit K，Salakij C ，Apibal S，et al.Hematology, cytochemistry and ultrastructure of blood cells in fishing cat (Felis viverrina)[J].J Veter Sci, 2007, 8(2):163-168.

[4]Kok-Hooi Y，Jennifer C，Jeff H,et al.Correction: epimorphin-induced MET sensitizes ovarian cancer cells to platinum[J].Plos One, 2013, 8(10): 72637.

[5]左大鵬.貧血的實驗室檢查程序和診斷[J]．中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2004,27(2)：127-128.

[6]James W，Valenti MR，De-Haven-Brandon AK,et al. The Bcl-2/Bcl-XL family inhibitor ABT-737 sensitizes ovarian cancer cells to carboplatin[J].Clin Cancer Res, 2007, 13(23):7191-7198.

[7]Lynch TJ， Adjei AA，Bunn PA,et al. Summary statement: novel agents in the treatment of lung cancer: advances in epidermal growth factor receptor-targeted agents[J].Clin Cancer Res, 2006,12(14 Pt 2):4365s-4371s.

[8]Palmer L,Briggs S,Mcfadden S,et al.ICSH recommendations for the standardization of nomenclature and grading of peripheral blood cell morphological features[J]．Int J Lab Hematol，2015，37(6)：287-303.

[9]王建中.外周血細胞形態(tài)學(xué)檢驗診斷的發(fā)展趨勢[J]．中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2013，36(5)：392-393.

[10]任穎佳,王悅,劉汝峰,等.CellaVision DM96血細胞形態(tài)分析儀外周血細胞分類結(jié)果評價[J]．臨床檢驗雜志，2014,(8):568-571.

[11]Constantino BT.Reporting and grading of abnormal red blood cell morphology[J]．Int J Lab Hematol，2015，37(6)：1-7.

[12]Li Y.Up-regulation of miR-200 and let-7 by natural agents leads to the reversal of epithelial-to-mesenchymal transition in gemcitabine-resistant pancreatic cancers[J].Cancer Res, 2009, 69(16):6704-6712.

[13]Jane EP，Premkumar D，Didomenico J,et al.Abstract 4100: YM-155 sensitizes malignant human glioma cells to ABT-737 via survivin and Mcl-1 downregulation in an EGFR-dependent context[J].Cancer Res, 2013, 73(4):4100.

[14]胡昊.98例成人貧血患者的血細胞形態(tài)學(xué)診斷分析[J]．國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2014，35(12)：1640-1641.

[15]李順義.血細胞形態(tài)學(xué)漏診分析與對策[J]．中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2005，28(2)：140-141.

[16]朱建鋒.血片紅細胞形態(tài)學(xué)檢查在疾病診斷中的應(yīng)用[J]．檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10(23)：3211-3212.

[17]李麗,夏永.SYSMEX-XE5000測定小紅細胞率在成人缺鐵性貧血中的臨床價值[J]．國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2011，32(4)：481-483.

Analysis on peripheral blood smear red blood cell morphology in 93 patients of anemia

ZhangHeng

(DepartmentofClinicalLaboratory,TongchuanMunicipalHospitalofTraditional

ChineseMedicine,Tongchuan,Shaanxi727000,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the morphological characteristics of peripheral blood red blood cell(RBC) in the patients with anemia.MethodsThe peripheral blood smears were selected from 93 cases of anemia and performed the morphological examination by the automatic reading instrument,the heteromorphic red blood cells were examined by the manual microscopy.ResultsAmong 93 patients of anemia analyzed by the DM-96 automatic blood cell morphological analytical system,anisocytosis accounted for 77.4%,in which 48.4% were mainly microcytic,heteromorphic RBC accounted for 55.9%,the detection rate of polychromatophil RBC had large difference between the manual microscopy and the instrument automatic reading,the hypochromic RBC accounted for 11.8%.The top three places of detection rates in heteromorphic RBC were elliptocyte,RBC fragment and RBC rouleaux arrangement.ConclusionPeripheral blood erythrocyte morphology analysis has an important significance in the RBC diseases,especially in the diagnosis,prognosis and treatment of anemia,which provides the important basis of morphology for the reliability of laboratory report.

Key words:anemia;blood smear;red blood cell morphology

(收稿日期：2015-09-24)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.03.027

文獻標(biāo)識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)03-0353-02

作者簡介：張恒，女，主管檢驗師，主要從事臨床檢驗的研究。