韓志紅

（寶雞職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)分院，陜西寶雞721013）

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檢驗技能大賽中革蘭氏染色出現(xiàn)的問題分析及對策探討

韓志紅

（寶雞職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)分院，陜西寶雞721013）

摘要：革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法，也是微生物檢驗中一個傳統(tǒng)而經(jīng)典的實驗項目。該方法雖然并不復(fù)雜，但由于技能大賽的特殊性，比賽過程中參賽選手容易出現(xiàn)各種各樣的問題或失誤。筆者將革蘭氏染色法（傳統(tǒng)法）這一賽項及選手在競賽過程中出現(xiàn)的問題進(jìn)行分析整理，并提出解決對策及賽后反思。

關(guān)鍵詞：檢驗技能大賽；革蘭氏染色法；選手

2014年、2015年，全國衛(wèi)生職業(yè)院校檢驗技能大賽分別在西安及信陽舉辦。檢驗技能大賽的宗旨是面向臨床崗位需求，體現(xiàn)檢驗基本技能，注重工學(xué)結(jié)合；深化職業(yè)教育教學(xué)改革，落實職業(yè)教育技能競賽制度化、常態(tài)化，進(jìn)一步推動產(chǎn)教結(jié)合、深化校企合作；提高我國檢驗職業(yè)教育水平，促進(jìn)院校交流，加強(qiáng)檢驗專業(yè)基本技能訓(xùn)練；展示全國檢驗專業(yè)學(xué)生積極進(jìn)取的精神風(fēng)貌、熟練的專業(yè)技能、良好的職業(yè)素質(zhì)和檢驗教學(xué)新成果。隨著大賽的逐步成熟，第二屆比賽項目成果均比第一屆好，但個別項目也出現(xiàn)了一些問題。

革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法，由丹麥醫(yī)師、細(xì)菌學(xué)家漢斯·克里斯蒂安·約阿希姆·革蘭于1884年創(chuàng)立。革蘭氏染色的醫(yī)學(xué)意義：（1）可以協(xié)助鑒定細(xì)菌。革蘭氏染色將細(xì)菌分成革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌兩大類，初步鑒別細(xì)菌，縮小檢驗范圍，有助于進(jìn)一步選擇鑒定方法。（2）為臨床使用抗生素提供依據(jù)。革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌在細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)上有很大差異，對抗生素與化學(xué)藥劑的敏感性也不同。革蘭氏陽性菌大多對青霉素、頭孢菌素、紅霉素等藥物敏感；而革蘭氏陰性菌大多對青霉素不敏感，但對鏈霉素、慶大霉素、氯霉素等藥物敏感。臨床上可根據(jù)革蘭氏染色性質(zhì)，合理選擇有效藥物進(jìn)行治療。（3）有助于分析細(xì)菌致病性。大多數(shù)革蘭氏陽性菌的致病物質(zhì)是外毒素，而革蘭氏陰性菌的致病物質(zhì)主要是內(nèi)毒素，兩者的性質(zhì)、致病作用和治療方法均不相同。革蘭氏染色法（傳統(tǒng)法）是微生物檢驗中一個傳統(tǒng)而經(jīng)典的實驗項目，雖然操作并不復(fù)雜，但由于技能大賽的特殊性，比賽過程中參賽選手容易出現(xiàn)各種各樣的問題或失誤。筆者將革蘭氏染色法（傳統(tǒng)法）這一賽項及選手在競賽過程中出現(xiàn)的問題進(jìn)行分析整理，提出解決對策以及賽后反思。

1　參賽選手現(xiàn)狀與比賽考核說明

選手為各職業(yè)院校高職檢驗和中職檢驗專業(yè)在校生，經(jīng)學(xué)校選拔確定。比賽前，學(xué)校對參賽選手進(jìn)行了較長時間的強(qiáng)化培訓(xùn)或一對一針對性訓(xùn)練，所以其實際技能水平要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他在校學(xué)生。選手競賽成績?yōu)椴僮魅淘u分、操作結(jié)果評分和考核時間評分之和。評分標(biāo)準(zhǔn)由賽事專家組集體討論制定，滿分為100分，完成時間為15分鐘。

2　比賽過程中選手易出錯部分及解決對策

2.1賽前準(zhǔn)備工作階段

大部分選手雖然賽前經(jīng)過了嚴(yán)格的訓(xùn)練，但在比賽過程中還是會緊張，表現(xiàn)為：（1）報告參賽項目時緊張、語無倫次、結(jié)巴、發(fā)抖。（2）漏報參賽項目，將參賽項目準(zhǔn)備工作結(jié)束誤報成操作結(jié)束，擺放實驗器材及物品時反復(fù)調(diào)整次序，漏擺吸水濾紙和計時器，導(dǎo)致物品準(zhǔn)備不全。（3）所用器材沒有按照涂片制作區(qū)→染色區(qū)→鏡檢區(qū)→結(jié)果填寫區(qū)的順序擺放，導(dǎo)致操作過程中手忙腳亂。（4）染液沒有按照順序擺放，染色過程中耽擱了時間，影響操作速度。

解決對策：賽前選拔選手時，盡量選擇心理素質(zhì)較好的學(xué)生，準(zhǔn)備多套訓(xùn)練方案，最好針對選手的薄弱環(huán)節(jié)進(jìn)行有的放矢的訓(xùn)練，只要認(rèn)真、反復(fù)練習(xí)，上述問題就不會出現(xiàn)。

2.2制片階段

（1）在玻片上寫錯組號及工位號、漏寫標(biāo)本號；拿取玻片時，用手捏住玻片中央部分（涂片區(qū)域），之后又未擦凈，或因手套上的粉末、污物沾染玻片，導(dǎo)致鏡下見到少許雜質(zhì)。（2）點(diǎn)燃酒精燈時只是提了一下燈芯，未達(dá)到排氣的目的。（3）制片前沒有對菌落進(jìn)行詳細(xì)觀察；令平皿開口正對操作者面部，缺乏自我防護(hù)和無菌意識。（4）接種環(huán)滅菌操作不規(guī)范，燒灼方向和次數(shù)錯誤。（5）沒有選擇單一菌落取菌，菌量挑取過多，涂片太厚。（6）涂片不均勻，未加生理鹽水，涂片面積過大導(dǎo)致切片干燥、染色受影響。（7）反復(fù)多次干燥涂片，使涂片過分受熱；用手試溫；干燥涂片時離火焰太遠(yuǎn)，沒有達(dá)到干燥目的或干燥時間過長。（8）沒有統(tǒng)一的涂片固定方式，可能由教師理解不同所致。

解決對策：制片過程是所有參賽選手出現(xiàn)問題最多和扣分較多的環(huán)節(jié)，反映出我們在培訓(xùn)時，沒有將靈活性與規(guī)范性有機(jī)結(jié)合起來。如菌落的挑選、接種環(huán)的滅菌、涂片的制備、涂片的干燥和固定等。此外，比賽過程中各校的規(guī)范也有所不同，這些操作程序是否應(yīng)該統(tǒng)一、如何統(tǒng)一，也是擺在我們面前急需解決的問題。

2.3染色階段

染色過程中最容易扣分的是沖洗環(huán)節(jié)。如先倒染液后沖水，直接沖淋菌膜導(dǎo)致部分菌膜脫落，沖水過大過快污染手指。

解決對策：出現(xiàn)上述問題，主要是因為學(xué)生在訓(xùn)練時不夠細(xì)致和規(guī)范，操作過程沒有做到精益求精，只要解決這些問題，就不會輕易丟分。

2.4顯微鏡使用階段

這個環(huán)節(jié)出現(xiàn)的問題是參賽選手普遍存在的共性問題。由于大賽中使用的顯微鏡是組委會指定型號，很多院校并沒有同種型號的顯微鏡，所以暴露出來的問題較多。（1）大部分選手不能正確調(diào)整光圈、聚光器及載物臺，調(diào)試顯微鏡時耗時太多，這是操作超時最主要的原因。（2）有的選手對油鏡的使用還不太熟練，因未能看到菌體反復(fù)在低倍鏡和油鏡間轉(zhuǎn)換，導(dǎo)致顯微鏡下觀察耗時較多，從而超時。（3）未用低倍鏡，直接使用油鏡尋找視野而丟分。（4）拿取顯微鏡動作粗暴而扣分。（5）不擦拭或沒有正確擦拭油鏡頭，沒有對留待復(fù)查的涂片進(jìn)行正確的脫油處理。

解決對策：以上問題普遍存在，說明顯微鏡的使用是大多數(shù)學(xué)生的薄弱環(huán)節(jié)，對顯微鏡基本操作技能掌握不夠理想，在大賽壓力下，選手操作能力普遍下降。日常教學(xué)中要求學(xué)生系統(tǒng)了解和熟悉顯微鏡的結(jié)構(gòu)、使用原理，掌握正確的操作方法。顯微鏡的使用是一門實打?qū)嵉牟僮骷寄?，除了反?fù)練習(xí)外沒有捷徑。

2.5結(jié)果分析及報告階段

該階段也是參賽選手出現(xiàn)失誤最多的環(huán)節(jié)之一，甚至有選手因為沒有正確報告結(jié)果而對一等獎失之交臂。選手存在的問題主要有：（1）菌體顏色描述不正確，如將革蘭氏陽性菌的紫色描述為藍(lán)黑、藍(lán)色。（2）鏡下視野效果不好，菌體不清晰、顏色不正、數(shù)量過多或過少、分布不均勻。（3）鏡下未找到細(xì)菌，僅對菌落性狀作出報告。（4）因緊張將革蘭氏陽性桿菌寫成革蘭氏陰性桿菌。

解決對策：上述問題反映出選手對大賽的嚴(yán)肅性認(rèn)識不足，比較隨意。特別是有的選手鏡下并未找到細(xì)菌而想當(dāng)然地出具了報告。菌體顏色和形態(tài)描述失誤可以通過反復(fù)練習(xí)與強(qiáng)化訓(xùn)練來糾正，但是由于過度緊張而導(dǎo)致報告結(jié)果相反現(xiàn)象則反映出選手心理素質(zhì)不佳以及操作不細(xì)心的問題。

2.6超時

大賽所有賽項都有超時現(xiàn)象，而革蘭氏染色賽項的超時現(xiàn)象最普遍。主要原因：（1）選手壓力較大、高度緊張，導(dǎo)致動作變形影響了操作。（2）顯微鏡使用不熟練，不能在有限的時間內(nèi)迅速找到細(xì)菌。

解決對策：賽前專項訓(xùn)練中，適當(dāng)增加抗壓訓(xùn)練項目，培養(yǎng)學(xué)生自信心、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)淖黠L(fēng)，以及遇到困難冷靜應(yīng)對和分析能力；加強(qiáng)顯微鏡操作能力培養(yǎng)。

2.7賽后整理

由于比賽出現(xiàn)了超時現(xiàn)象，導(dǎo)致賽后物品整理、桌面清潔等程序流于形式，很多選手為了節(jié)約時間，對整理工作一筆帶過，如桌面只是象征性地用抹布隨便擦一下，而未用消毒液仔細(xì)擦拭。由于該環(huán)節(jié)扣分標(biāo)準(zhǔn)并沒有細(xì)化，導(dǎo)致此處扣分不嚴(yán)謹(jǐn)。

解決對策：在日常學(xué)習(xí)和培訓(xùn)過程中，指導(dǎo)學(xué)生合理安排操作時間，避免前松后緊，養(yǎng)成良好的實驗操作習(xí)慣。

3　賽后反思及小結(jié)

2015年全國檢驗技能大賽已經(jīng)落下帷幕，我們應(yīng)反思比賽中選手出現(xiàn)的問題和失誤，從而達(dá)到以賽促學(xué)、以賽促教的目的。縱觀比賽，在以下方面還有待加強(qiáng)：（1）選手心理素質(zhì)普遍不強(qiáng)，在大賽壓力下，很多選手因緊張導(dǎo)致比賽結(jié)果不理想。如我校選手參賽期間嚴(yán)重失眠，甚至一日三餐都難以下咽。（2）學(xué)生基本技能較為薄弱，特別是在制片過程中出現(xiàn)了一些不應(yīng)該出現(xiàn)的問題。（3）選手動手能力普遍薄弱，對陌生型號的顯微鏡不能在短時間內(nèi)掌握使用方法，提示我們在活學(xué)活用這一塊還需下工夫。（4）選手綜合分析、處理結(jié)果能力還需進(jìn)一步提高。如有的選手寫錯了結(jié)果，這不僅是因為不仔細(xì)，還反映出選手對比賽過程中所用標(biāo)本（如菌落）的綜合評價分析能力有待提高。

革蘭氏染色操作的考核項繁多且評分標(biāo)準(zhǔn)非常細(xì)，這就對操作的規(guī)范性和靈活性提出了更高要求，同時也對主辦方提出了更高要求?？偨Y(jié)兩年革蘭氏染色法賽項的評分標(biāo)準(zhǔn)，我們發(fā)現(xiàn)以下問題有待與同行商榷。（1）個別扣分點(diǎn)設(shè)置不合理。比如，著白大褂、帽、口罩、手套并按要求佩戴參賽簽與儀表端莊、頭發(fā)符合要求重復(fù)。（2）由于比賽過程中選手所用的器材及試劑已由主辦方工作人員準(zhǔn)備充分且大部分?jǐn)[放合理，所以實驗準(zhǔn)備階段的正確擺放試劑一項扣分點(diǎn)形同虛設(shè)。（3）部分扣分點(diǎn)設(shè)置模棱兩可，評委在評分的尺度上不好掌握。如有選手賽后清理臺面，但未清理干凈，標(biāo)準(zhǔn)上卻無該扣分項。（4）部分環(huán)節(jié)的操作規(guī)范各院校不一致，需要檢驗專業(yè)同行統(tǒng)一認(rèn)識，使得革蘭氏染色法更加合理化、規(guī)范化，有利于教學(xué)工作的開展。（5）成績公布不及時，比賽的公開、公平、公正性有待加強(qiáng)。（6）建議評分標(biāo)準(zhǔn)更加細(xì)化和合理，最好是與臨床工作結(jié)合起來，使學(xué)生更適應(yīng)臨床一線崗位要求。

隨著全國檢驗技能大賽的逐步發(fā)展以及檢驗界同行的共同努力，相信在不久的將來我們的大賽會更上一層樓。

中圖分類號：G424.31

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

文章編號：1671－1246（2016）05－0111－02