沙　嬌 ， 李　濤 ， 任保增*

(1.河南省食品工業(yè)科學(xué)研究所有限公司 ， 河南 鄭州　450053 ； 2.鄭州大學(xué) 化工與能源學(xué)院 ， 河南 鄭州　450001)

?

高效液相色譜法在食品分析中的應(yīng)用進(jìn)展

沙嬌1， 李濤2， 任保增2*

(1.河南省食品工業(yè)科學(xué)研究所有限公司 ， 河南 鄭州450053 ； 2.鄭州大學(xué) 化工與能源學(xué)院 ， 河南 鄭州450001)

高效液相色譜法(HPLC)具有分離效率高、分離速度快、流動相范圍寬泛、精確度和靈敏度高、能同時分離多種物質(zhì)、操作簡單等優(yōu)勢，在食品分析中已得到了廣泛應(yīng)用。對HPLC在食品中的糖類、食品添加劑、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留檢測中的應(yīng)用進(jìn)展進(jìn)行了綜述。

高效液相色譜法 ； 食品 ； 分析 ； 應(yīng)用

高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography，簡稱HPLC)是20世紀(jì)60年代在經(jīng)典氣相、液相色譜的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新型分離技術(shù)[1]。HPLC具有分離效能高、分析速度快、檢測靈敏度高等優(yōu)勢，已被廣泛應(yīng)用于化學(xué)化工、食品分析、生物、藥物檢測等方面[2-6]。高效液相色譜因其自身諸多優(yōu)勢，在食品檢測中應(yīng)用越來越廣泛，如對食品中的糖類、食品添加劑、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留等的檢測分析。本文主要對高效液相色譜技術(shù)在食品中糖類、食品添加劑、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留等方面的應(yīng)用進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1　高效液相色譜法在食品分析中的應(yīng)用

1.1在糖類檢測中的應(yīng)用

HPLC可測定農(nóng)作物、水果、酒類、糖蜜類等食品中糖的含量。谷淑波等[7]采用HPLC的外標(biāo)法，以Walers公司生產(chǎn)的Sugar-Pak Ⅰ色譜柱為分析柱，配以示差折光檢測器，以水為流動相，同時測定出了墨西哥玉米和蘇丹草中糖類含量，檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)99.98%，加標(biāo)回收率98.7%～103.2%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為2.67%～3.10%，得到了準(zhǔn)確精密的分析結(jié)果；張秀梅等[8]采用HPLC法以Luna 5 μm NH2100A為色譜柱、70%乙腈水溶液為流動相，在35 ℃的柱溫下，采用示差折光檢測器測定了菠蘿果實(shí)中的三種糖分含量，檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)為99.92%，加標(biāo)回收率98.8%～100.3%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.52%～2.24%，檢測結(jié)果靈敏、可靠；魯玉俠等[9]采用HPLC法以Waters High Performance Carbohydrate Column 60A 4.6 mm×250 mm，4 μm為測試柱，以乙腈—水(90∶10)為流動相，蒸發(fā)光散射儀(ELSD)為檢測器，同時對橄欖果酒樣品中的果糖、葡萄糖、麥芽糖和蔗糖進(jìn)行檢測分析，檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)>99.7%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.02%～0.1%，研究結(jié)果為快速鑒定橄欖果酒中的糖類提供了新途徑；林長欽等[10]采用HPLC法，以美國Waters碳水化合物柱為分析柱，以乙腈+水(80∶20，體積比)為流動相，采用示差折光檢測器同時檢測了蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖的含量，檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)為99.95%，加標(biāo)回收率達(dá)到98.9%～102.9%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0～2.42%，這表明HPLC法是檢測蜂蜜中糖類的精確方法。

1.2在食品添加劑檢測中的應(yīng)用

食品添加劑在合理使用時，一般不會對人體產(chǎn)生危害，但是當(dāng)過量或者不加以限制使用時，會對人體健康產(chǎn)生一定的危害。因此，對食品中添加劑的檢測意義重大。HPLC可實(shí)現(xiàn)對飲料、肉制品、糕點(diǎn)、蜜餞等各種食品中添加劑的檢測。汪輝等[11]采用HPLC技術(shù)以C18色譜柱為分析柱、甲醇+醋酸銨為流動相、Agilent VWD紫外檢測器測定了果蔬汁飲料中防腐劑、色素和甜味劑共計(jì)14種，檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)>99.92%，加標(biāo)回收率達(dá)93%～102%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)<5%，該方法檢測速度快，可以準(zhǔn)確、靈敏地測定果蔬汁中常見的食品添加劑的含量。李秀琴等[12]采用HPLC技術(shù)以C18色譜柱為分析柱，以甲醇+醋酸銨溶液(物質(zhì)的量濃度20 mmol/L)為流動相，紫外檢測器在235 nm的條件下測定肉制品中苯甲酸、山梨酸、糖精鈉等6種食品添加劑的含量，檢測結(jié)果相關(guān)系數(shù)>99.91%，加標(biāo)回收率達(dá)80.7%～94.4%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為2.0%～7.1%，該方法實(shí)現(xiàn)了6種食品添加劑的同時測定。楊春林等[13]采用HPLC法以Inertsil ODS-sp C18(4.6mm×250mm，5 μm)為色譜柱、甲醇+硫酸鈉+溴化四丁基銨為流動相，運(yùn)用紫外檢測器在220 nm的條件下測定了糕點(diǎn)中3種防腐劑和2種甜味劑的含量，檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)>99.95%上，加標(biāo)回收率89.5%～101.6%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.98%～3.07%。劉英等[14]采用HPLC法，以Athena C18-wp色譜柱( 4.6 mm×250 mm，5 μm)為分析柱，以乙酸銨—甲醇(物質(zhì)的量濃度0.02 mol/L)為流動相、以二極管陣列檢測器檢測了蜜餞中16種糖食品添加劑的含量，檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)>99.99%，加標(biāo)回收率達(dá)76%～106%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.14%～1.5%，以上表明，該方法對蜜餞中添加劑含量的分析具有較高的準(zhǔn)確度和精密度。

1.3在農(nóng)藥殘留檢測中的應(yīng)用

農(nóng)藥在食品中的殘留可能對人類健康產(chǎn)生潛在的危害，對食品中農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測十分重要。HPLC法可實(shí)現(xiàn)對氨基甲酸酯類、有機(jī)氯類農(nóng)藥、有機(jī)磷類及菊酯類等農(nóng)藥的檢測[15]。張舉成等[16]采用HPLC法，以安捷倫SDB C18 (4.6 mm×150 mm，5 μm)色譜柱為分析柱、以水—乙腈(體積比62.5∶37.5)為流動相、以紫外檢測器檢測了三七、重樓中6種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量，檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)>99.27%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)1.9%～9.3%，實(shí)現(xiàn)了對三七、重樓中6種氨基甲酸酯類農(nóng)藥的完全分離；張翔等[17]采用萃取—HPLC法，以O(shè)DS色譜柱(填料粒徑5 μm)、甲醇—磷酸水溶液(溶液pH值2.27)為流動相、以紫外檢測器在230 nm處檢測了9種有機(jī)氯農(nóng)藥在棉織品中的殘留量，檢測結(jié)果相關(guān)系數(shù)>99.88%，加標(biāo)回收率達(dá)85.5%～99.6%，檢測限為0.5～10 mg/L，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為2.4%～4.1%，表明HPLC法能夠作為生態(tài)紡織品中有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留的檢測方法；陳若虹等[18]采用HPLC法，以Diamonsil-C18柱(填料粒徑5 μm)為色譜柱、甲醇—醋酸水溶液(0.002 5%)為流動相、以紫外檢測器在225 nm處檢測了10種有機(jī)磷農(nóng)藥在飲料中的殘留量，檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)>99.83%，加標(biāo)回收率達(dá)到76.2%～114%，檢測限為0.05～0.42 μg/mL，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.8%～16%，結(jié)果表明HPLC法檢測飲料中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量靈敏度高、重現(xiàn)性好、結(jié)果可靠；周卿等[19]采用分散液液微萃取—HPLC法，以Agilent ZORBAX XDB-C18色譜柱( 4.6 mm×250 mm，5 μm)為分析柱，乙腈—水為流動相，以紫外檢測器在230 nm處檢測了5種菊酯類農(nóng)藥在金銀花中的殘留量，檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)>99.90%，加標(biāo)回收率達(dá)72.1%～110.4%，檢測限為0.05～5.0 μg/mL，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.63%～8.93%，較好地實(shí)現(xiàn)了菊酯類農(nóng)藥在金銀花中殘留量的檢測。

1.4在獸藥殘留檢測中的應(yīng)用

獸藥農(nóng)殘的檢測方法很多，但大多方法只能檢測單一或較少數(shù)量獸藥的檢測，無法快速檢測多種獸藥的殘留，HPLC法很好地解決了這一問題。趙亞華等[20]采用HPLC法，以Discovery C18色譜柱為分析柱，以甲醇—乙酸(1.2%水溶液)為流動相，以紫外檢測器在270 nm下檢測了動物源食品中磺胺等22種獸藥的殘留量，檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)>99%，加標(biāo)回收率達(dá)61.2%～103.4%，檢測限為0.004～0.018 mg/kg，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)1.0%～8.0%。李盛安等[21]采用HPLC法，以Acquity Uplctmbeh C18柱(2.1 mm×50 mm，1.7 μm)色譜柱為分析柱，以0.05 mol/L磷酸溶液/三乙胺+乙腈(92+8，體積分?jǐn)?shù))為流動相，以熒光檢測器檢測了羅非魚3 種氟喹諾酮類獸藥的殘留量，檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)>99%，加標(biāo)回收率84%～93%，檢測限為0.7～1.6 μg/mL，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為3.9%～6.7%。這表明HPLC法能快速準(zhǔn)確地測定水產(chǎn)品中的喹諾酮類獸藥的殘留量。沙美蘭等[22]采用HPLC+質(zhì)譜法，以Waters Acquily UPLC BEH C18色譜柱為分析柱，以乙腈+0.1%甲酸水溶液為流動相，檢測了動物組織樣品中甲氧芐胺嘧啶、克林霉素、泰妙菌素和吡喹酮4種獸藥的殘留量，檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)為>99.6%，加標(biāo)回收率達(dá)65.8%～95.9%，檢測限為0.5 μg/kg，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為3.2%～13.1%，這表明HPLC+質(zhì)譜法能快速準(zhǔn)確地測定動物源性食品中獸藥的殘留量。

2　結(jié)語

綜上所述，高效液相色譜技術(shù)因其具有分離效率高、分離速度快、流動相范圍寬泛、精確度和靈敏度高、能同時分離多種物質(zhì)、操作簡單等優(yōu)勢，在食品分析中已得到了廣泛應(yīng)用。隨著樣品前處理技術(shù)的不斷發(fā)展，以及與質(zhì)譜、電滲析等技術(shù)的結(jié)合，HPLC技術(shù)將在食品分析中起到更為重要的作用。

[1]黃國宏.高效液相色譜技術(shù)在食品分析中的應(yīng)用[J].食品工程,2006(4):47-51.

[2]朱萍萍,岳振峰,鄭宗坤,等.分散固相萃取結(jié)合高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法測定羊肝中19 種全氟烷基酸[J].色譜,2015,33(5):494-500.

[3]徐夢漪,周亮,龔盛昭,等.高效液相色譜法測定護(hù)理洗液產(chǎn)品中 2, 4, 4′-三氯-2′-羥基二苯醚含量[J].廣東化工,2015,42(14):224-225.

[4]張明,唐訪良,徐建芬,等.固相萃—高效液相色譜法同時測定地表水中9種微囊藻毒素[J].環(huán)境化學(xué),2013,32(6):1096-1097.

[5]洪蕾潔,石璐,張亞雷,等.固相萃取—高效液相色譜法同時測定水體中的10種磺胺類抗生素[J].環(huán)境科學(xué),2012,33(2):652-657.

[6]陳妙蘭. 淺談高效液相色譜在食品檢測中的應(yīng)用[J].科學(xué)之友(中),2012(4): 67-68.

[7]谷淑波, 樊廣華,張曉艷.HPLC 法快速測定墨西哥玉米和蘇丹草中的糖類[J].現(xiàn)代儀器,2005,11(6):25-26.

[8]張秀梅,杜麗清,謝江輝,等.高效液相色譜法測定菠蘿果實(shí)中的糖分[J].食品科學(xué),2007,28(11):450-452.

[9]魯玉俠.高效液相色譜法檢測橄欖果酒中的 Vc 和糖類物質(zhì)[J].現(xiàn)代食品科技,2011,27(7):861-862.

[10]林長欽,李穎怡,劉垚.高效液相色譜示差法測定蜂蜜中的果糖、 葡萄糖、蔗糖[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,37(4):254-256.

[11]汪輝,曹小彥,李林,等.反相高效液相色譜法對果蔬汁飲料中 14 種常見食品添加劑的快速測定[J].分析測試學(xué)報(bào),2009,28(10):1194-1197.

[12]李秀琴,張慶合,楊總.高效液相色譜法同時測定肉制品中的 6 種食品添加劑[J].色譜,2010,28(12):1204-1208.

[13]楊春林,李佳峻,吳蔚,等.高效液相色譜法測定糕點(diǎn)中 5 種食品添加劑[J].食品研究與開發(fā),2012,33(2):146-149.

[14]劉英,尹州,鄒曉筱,等.高效液相色譜法同時測定蜜餞中的 16 種食品添加劑[J].分析測試學(xué)報(bào), 2011, 30(6): 651-655.

[15]朱正斌.高效液相色譜法在農(nóng)藥殘留分析中的應(yīng)用[J].化學(xué)工業(yè)與工程技術(shù),2004,25(6):51-53.

[16]張舉成,劉衛(wèi),閔勇,等.高效液相色譜測定三七、重樓中6種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留[J].農(nóng)藥,2012,51(3):206-208.

[17]張翔,廖青,張焱.高效液相色譜法同時檢測棉織品中的9種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留[J].色譜,2007,25(3):380-383.

[18]陳若虹,凌東輝,段夏菲.高效液相色譜法同時測定果汁飲料中的10 種有機(jī)磷農(nóng)藥[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2011,21(4):854-855.

[19]周卿,周旭美.分散液液微萃取—高效液相色譜法測定金銀花中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2014, 20(20): 70-73.

[20]趙亞華,李勇,何學(xué)芳.高效液相色譜法同時測定動物源食品中22種獸藥殘留技術(shù)研究[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2009,19(8):1707-1709.

[21]李盛安,馮敏鈴,李擁軍.超高效液相色譜法對羅非魚中3種氟喹諾酮類獸藥殘留的測定[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2013(8):279-280.

[22]沙美蘭,曹鵬,李金強(qiáng),等.超高效液相色譜質(zhì)譜法快速檢測動物源性食品中的四種獸藥殘留[J].食品工業(yè)科技,2012,33(16):82-85.

Application Progress of HPLC in Food Analysis

SHA Jiao1, LI Tao2, REN Baozeng2*

(1.Henan Food Industry Science Research Institute Co.Ltd , Zhengzhou450053 , China ; 2.School of Chemical Engineering and Energy , Zhengzhou University , Zhengzhou450001 , China)

High performance liquid chromatography(HPLC) has many advantages,such as high separation efficiency,high separation speed,wide range of mobile phase,high accuracy and sensitivity,simultaneous separation of multiple substances,simple operation and so on,which has been widely used in food analysis.Application progress of HPLC in food inspection for sugar,food additives,pesticide residues,drug residues in food are reviewed.

high performance liquid chromatography ； food ； analysis ； application

2016-05-27

沙嬌(1987-)，女，碩士，從事食品分析檢測方面的研究工作，電話：13015504136；聯(lián)系人：任保增(1962-)，男，教授，博導(dǎo)，從事綠色化工研究工作，電話：13803846110，E-mail: renbz@zzu.edu.cn。

TS207.3

A

1003-3467(2016)08-0015-03