安 宏 趙丹丹 于 娜 穆倩倩 張 毅 方 心 左加成 高 雅 趙保勝 高思華（北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京，100029）

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降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍對(duì)2型糖尿病小鼠糖脂代謝的影響

安 宏 趙丹丹 于 娜 穆倩倩 張 毅 方 心 左加成 高 雅 趙保勝 高思華
（北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京，100029）

摘要目的：探討降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍對(duì)2型糖尿病小鼠糖脂代謝的影響。方法：ICR小鼠高脂飼料喂養(yǎng)4周，腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）100 mg／kg，建立2型糖尿病小鼠模型。設(shè)正常對(duì)照組、模型組、西藥組（二甲雙胍）、中西藥聯(lián)合3組（降糖消渴顆粒低、中、高劑量分別與二甲雙胍同用）。給藥4周后，檢測(cè)小鼠的體重、空腹血糖（Fasting Blood-glucose，F(xiàn)BG）、血清胰島素（Insulin，Ins）、胰高血糖素、糖耐量（Oral Glucose Tolerance Test，OGTT）、血脂，并計(jì)算胰島素敏感指數(shù)（Insulin Sensitivity Index，ISI）。結(jié)果：降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍可降低糖尿病小鼠的體重（P＜0. 05）、空腹血糖（P＜0. 01）、血清胰島素水平（P＜0. 05）、胰高血糖素水平（P＜0. 05），提高胰島素敏感性（P＜0. 05），改善糖耐量（P＜0. 05），并有一定調(diào)節(jié)血脂的作用，且降低空腹血糖較西藥組更明顯（P＜0. 05）。結(jié)論：降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍可改善2型糖尿病小鼠的糖脂代謝，較單用二甲雙胍能更有效地降低體重和血糖。

關(guān)鍵詞降糖消渴顆粒；二甲雙胍；聯(lián)合用藥；2型糖尿病

Effect of Jiangtang Xiaoke Granule Combined with Metformin on Glucose and Lipid Metabolism in Type 2 Diabetic Mice

An Hong，Zhao Dandan，Yu Na，Mu Qianqian，Zhang Yi，F(xiàn)ang Xin，Zuo Jiacheng，Gao Ya，Zhao Baosheng，Gao Sihua
（Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100029，China）

Abstract Objective：To investigate the effect of Jiangtang Xiaoke granule（JTXKG）combined with metformin on the blood glucose and blood lipids in type 2 diabetic mice. Methods：ICR mice were fed by high-fat-diet for 4 weeks，combined with intraperitoneal injection of streptozocin in 100mg·kg-1. The mice were randomly divided into normal group，model group，western medicine group （metformin）and combination groups（JTXKG，combined with metformin，in low，medium，and high dose）. After 4-week treatment，the body weight，fasting blood glucose（FBG），fasting serum insulin（INS），glucagon，and blood lipid（BL）were tested，and the glucose tolerance was measured. Results：Compared with model group，combination groups lost body weight（P＜0. 05），decreased FBG（P＜0. 01），INS（P＜0. 05）and glucagon（P＜0. 05），improved glucose tolerance（P＜0. 05），and showed certain BL changes. Compared with western medicine group，combination groups FBG were lower（P＜0. 05）. Conclusion：JTXKG combined with metformin showed glucose and lipid metabolism improvement，and was more effective in weight loss and blood glucose reduction than metformin alone.

Key Words Jiangtang Xiaoke granule；Metformin；Combined medication；Type 2 diabetes

2型糖尿病是以機(jī)體胰島素敏感性下降為主，伴有胰島素分泌缺陷的代謝紊亂綜合征。近年來(lái)，2型糖尿病發(fā)病率逐年升高。截至2010年，我國(guó)18歲以上人群糖尿病患病率已達(dá)11. 6%，而符合糖尿病前期標(biāo)準(zhǔn)者已達(dá)50. 1%［1］。這為我國(guó)糖尿病的防治帶來(lái)巨大挑戰(zhàn)。

二甲雙胍是治療2型糖尿病的首選藥物，單獨(dú)應(yīng)用可有效降低空腹血糖，改善血脂，并具有一定的降低體重作用。對(duì)于單用二甲雙胍療效不佳者，聯(lián)用其他降糖藥可繼續(xù)改善血糖［2］。目前國(guó)內(nèi)外主要糖尿病指南均建議：除非有腎損害的證據(jù)或風(fēng)險(xiǎn)，患者應(yīng)從一開(kāi)始就使用二甲雙胍治療，且聯(lián)合治療的方案中都應(yīng)包括二甲雙胍［3］。而中藥具有不良反應(yīng)較少、作用溫和持久、擅長(zhǎng)綜合調(diào)理、延緩并發(fā)癥等優(yōu)點(diǎn)，是糖尿病聯(lián)合治療方案的重要選擇。

降糖消渴顆粒是以中醫(yī)肝、脾、腎三臟同調(diào)理論為指導(dǎo)，結(jié)合現(xiàn)代中藥藥理研究組成的治療糖尿病的方劑，經(jīng)基礎(chǔ)和臨床研究證實(shí)具有改善血糖、血脂等作用［4-5］。本實(shí)驗(yàn)采用高脂飲食聯(lián)合小劑量STZ注射，建立2型糖尿病小鼠模型探討降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍對(duì)糖尿病小鼠體重、血糖、血脂、血胰島素等方面的影響。

1　材料與方法

1. 1 動(dòng)物 ICR小鼠，雄性，8周，購(gòu)于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，許可證號(hào)SCXK（京）2012-0001。飼養(yǎng)于北京中醫(yī)藥大學(xué)SPF動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，合格證號(hào)SCXK（京）2011-0024，室溫20℃，相對(duì)濕度45%左右，光暗周期12 h／12 h。普通飼料及高脂飼料購(gòu)自北京華阜康生物科技股份有限公司。

1. 2 主要試劑與儀器 鏈脲佐菌素（批號(hào)SLBB7526V，Sigma），以pH4. 5檸檬酸緩沖液配制，現(xiàn)用現(xiàn)配。血糖試劑盒（批號(hào)312032K，北京利德曼生化股份有限公司）；三酰甘油（Triglyceride，TG）測(cè)定試劑盒（批號(hào)404161C，北京利德曼生化股份有限公司）；胰島素試劑盒（批號(hào)20141220，北京北方生物技術(shù)研究所有限公司）；胰高血糖素試劑盒（批號(hào)20141220，北京北方生物技術(shù)研究所有限公司）；拜安康血糖儀及血糖試紙；貝克曼全自動(dòng)生化儀（BKMCX4，貝克曼）；XH6080放免儀（西安核儀廠）。

1. 3 受試藥物 鹽酸二甲雙胍（天津亞寶藥業(yè)科技有限公司）；降糖消渴顆粒（丹參、生地黃、黃連、茯苓、山茱萸、生曬參等10味藥依6∶6∶3∶3∶2∶2…比例組成）飲片購(gòu)于河北安國(guó)藥材批發(fā)市場(chǎng)，經(jīng)北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院中藥科技發(fā)展部鑒定為正品，并制成顆粒，每克含5. 01 g生藥。用時(shí)以蒸餾水配制相應(yīng)濃度的混懸液。

1. 4 方法

1. 4. 1 造模及給藥 8周齡雄性ICR小鼠80只，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)抽取20只為正常組，給予普通飼料，其余給予高脂飼料。4周后，各組禁食12 h（過(guò)夜），高脂組予STZ 100 mg／kg腹腔注射，正常組予同體積檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。7 d后查血糖，以空腹血糖＞11. 1 mmol／L為造模成功。將符合糖尿病模型標(biāo)準(zhǔn)的小鼠依血糖、體重隨機(jī)分組，正常組10只，模型組9只，二甲雙胍組（西藥組）9只，降糖消渴顆粒低、中、高劑量聯(lián)合二甲雙胍組（分別為中低＋西、中中＋西、中高＋西）各8只。西藥組給予二甲雙胍0. 19 g／kg，中西藥聯(lián)用組二甲雙胍用量同前，同時(shí)給予降糖消渴顆粒低、中、高劑量按生藥量分別計(jì)為1. 75 g／kg、3. 5 g／kg、7 g／kg。

1. 4. 2 指標(biāo)檢測(cè) 于給藥前、給藥2周、給藥4周測(cè)定體重、空腹血糖；給藥4周后進(jìn)行糖耐量實(shí)驗(yàn)，并檢測(cè)空腹血糖、血清胰島素、胰高血糖素、三酰甘油、總膽固醇（Total Cholesterol，TC）和高密度脂蛋白（High-density Lipoprotein，HDL），計(jì)算胰島素敏感指數(shù)。ISI計(jì)算公式：ISI＝。

1. 4. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS 20. 0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理，結(jié)果以（±s）表示。組間差異采用單因素方差分析（One-way ANOVA），進(jìn)而采用LSD-t法兩兩比較，P＜0. 05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2. 1 對(duì)糖尿病小鼠體重的影響 給藥前，各組小鼠體重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0. 05）。給藥期間，西藥組體重有所降低，但較模型組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而中西藥聯(lián)用組小鼠體重均較模型組有所降低（P＜0. 05）。其中，降糖消渴顆粒中劑量聯(lián)合二甲雙胍可顯著降低2型糖尿病小鼠體重（P＜0. 01）。見(jiàn)表1。

表1　降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍對(duì)2型糖尿病小鼠體重的影響（±s）

表1　降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍對(duì)2型糖尿病小鼠體重的影響（±s）

注：與模型組比較，*P＜0. 05，**P＜0. 01。

組別體重給藥前　　給藥1周　　給藥2周　　給藥3周　　給藥4周正?！?2. 13±2. 66　41. 85±2. 69　42. 03±2. 77　42. 46±3. 1042. 08±3. 31模型　41. 93±3. 08　42. 37±2. 14　41. 72±2. 57　42. 60±3. 40　41. 60±3. 01西藥　41. 87±2. 70　40. 88±2. 72　39. 81±3. 16　40. 33±3. 21　39. 64±3. 69中低＋西　40. 13±1. 71　38. 74±3. 37*　38. 53±2. 74*　38. 91±2. 27*　38. 41±2. 34*中中＋西　40. 78±2. 70　39. 73±3. 26　37. 84±2. 62**　37. 50±2. 65**　37. 05±2. 49**中高＋西　41. 43±2. 71　39. 16±3. 51*　38. 63±2. 94*　39. 11±3. 54*　38. 33±4. 12*

2. 2 對(duì)糖尿病小鼠空腹血糖的影響 給藥前、給藥2周及4周，模型組血糖較正常組顯著升高（P＜0. 01），表明模型組高血糖狀態(tài)穩(wěn)定。給藥前，各給藥組血糖與模型組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0. 05）；給藥2周，各給藥組血糖呈下降趨勢(shì)（P＜0. 05）；給藥4周后，各給藥組血糖較模型組顯著降低（P＜0. 01）。其中，中中＋西組較西藥組血糖降低（P＜0. 05）。見(jiàn)表2。

2. 3 對(duì)糖尿病小鼠胰島素、胰島素敏感性和胰高血糖素的影響 給藥4周后，模型組Ins較正常組顯著升高（P＜0. 05），ISI明顯下降（P＜0. 05），而胰高血糖素水平亦有所上升，表現(xiàn)出以高胰島素血癥為主的胰島素敏感性下降和胰島功能失調(diào)；各給藥組Ins、ISI和胰高血糖素水平較模型組有所降低。其中，中低＋西組、中中＋西組Ins和ISI較模型組明顯下降（P＜0. 05），中高＋西組胰高血糖素水平較模型組明顯下降（P＜0. 05），說(shuō)明中西藥聯(lián)合應(yīng)用表現(xiàn)出一定的改善胰島素敏感性和調(diào)節(jié)胰島功能的作用。見(jiàn)表3。

表2　降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍對(duì)2型糖尿病小鼠FBG的影響±s）

表2　降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍對(duì)2型糖尿病小鼠FBG的影響±s）

注：經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后，進(jìn)行方差分析。與正常組比較，**P＜0. 01；與模型組比較，△P＜0. 05，△△P＜0. 01；與西藥組比較，▲P＜0. 05。

組別　FBG給藥前　　給藥2周　　給藥4周正常6. 09±1. 14　 6. 56±0. 89　6. 07±0. 76模型　24. 70±4. 14**23. 56±5. 46**　23. 27±5. 29**西藥　24. 60±6. 58　 18. 48±6. 30△　15. 77±5. 13△△中低＋西　23. 35±4. 57　 18. 69±3. 61　 15. 36±2. 48△△中中＋西　25. 81±6. 73　 16. 99±4. 20△　11. 39±4. 44△△▲中高＋西　25. 54±4. 62　 18. 53±5. 08△　15. 83±5. 75△△

表3　降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍對(duì)2型糖尿病小鼠Ins、ISI和胰高血糖素的影響（-±s）

表3　降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍對(duì)2型糖尿病小鼠Ins、ISI和胰高血糖素的影響（-±s）

注：與正常組比較，*P＜0. 05；與模型組比較，△P＜0. 05。

組別　Ins／IU（／mL）　ISI　　胰高血糖素／pg／mL正常4. 62±3. 02　 -3. 13±0. 64　 215. 18±24. 61模型　8. 58±2. 95*　-5. 22±0. 49*　250. 35±56. 84西藥　4. 91±3. 63△　-4. 01±0. 94△　216. 38±43. 06中低＋西　5. 00±2. 67△　-4. 16±0. 68△　231. 17±72. 54中中＋西　4. 87±2. 79△　-3. 78±0. 59△　235. 67±32. 74中高＋西　7. 27±3. 03　 -4. 60±0. 60　 204. 82±34. 41△

2. 4 對(duì)糖尿病小鼠糖耐量實(shí)驗(yàn)（OGTT）的影響給藥4周后，各給藥組均能改善糖負(fù)荷后血糖（P＜0. 05），中中＋西和中高＋西組的血糖于60 min時(shí)即明顯低于模型組（P＜0. 05），說(shuō)明其對(duì)糖耐量有較好的改善作用。見(jiàn)表4。

表4　降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍對(duì)2型糖尿病小鼠OGTT的影響（-±s）

表4　降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍對(duì)2型糖尿病小鼠OGTT的影響（-±s）

注：與正常組比較，*P＜0. 05；與模型組比較，△P＜0. 05。

組別　　血糖0 min　30 min　60 min　 120 min正常5. 76±1. 45　 12. 74±1. 34　 9. 76±2. 72　 6. 64±1. 65模型　24. 88±3. 38*　33. 30±0. 00*32. 06±1. 42*28. 24±3. 06*西藥　16. 82±5. 86△　30. 02±4. 62　 26. 04±4. 03　 19. 42±5. 67△中低＋西　16. 12±6. 17△　29. 26±5. 33　 27. 74±5. 63　 18. 50±5. 52△中中＋西　12. 68±7. 19△　28. 54±5. 25　 22. 98±6. 80△　14. 72±6. 93△中高＋西　17. 02±7. 72△　27. 42±7. 87　 24. 32±8. 25△　19. 14±8. 71△

2. 5 對(duì)糖尿病小鼠血脂的影響 給藥4周后，模型組TG、TC顯著高于正常組（P＜0. 01），HDL顯著低于正常組（P＜0. 01），表現(xiàn)出脂質(zhì)代謝紊亂。中低＋西和中中＋西組TG較模型組顯著降低（P＜0. 01），各給藥組HDL較模型組顯著升高（P＜0. 01），但未表現(xiàn)出降低TC的作用。見(jiàn)表5。

表5　降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍對(duì)2型糖尿病小鼠TG、TC和HDL的影響（±s）

表5　降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍對(duì)2型糖尿病小鼠TG、TC和HDL的影響（±s）

注：TG：三酰甘油；TC：總膽固醇；HDL：高密度脂蛋白；與正常組比較，**P＜0. 01；與模型組比較，△P＜0. 05，△△P＜0. 01。

組別TG　TC　HDL正常0. 71±0. 33　 2. 75±0. 49　4. 54±0. 87模型　1. 56±0. 70**　5. 27±1. 23**　2. 74±0. 49**西藥　0. 99±0. 66△　5. 61±1. 57　4. 85±1. 78△△中低＋西　0. 84±0. 31△△　5. 91±1. 51　5. 32±1. 37△△中中＋西　0. 82±0. 35△△　5. 39±0. 86　4. 49±0. 38△△中高＋西　1. 08±0. 38　 4. 82±1. 56　4. 25±1. 44△△

3　討論

中醫(yī)很早便認(rèn)識(shí)到糖尿病，并按消渴、消癉等論治，如《素問(wèn)·奇病論》：“肥者令人內(nèi)熱，甘者令人中滿，故其氣上溢，轉(zhuǎn)為消渴［6］”。而2型糖尿病的發(fā)病主要在于肝、脾、腎三臟的功能失調(diào)。該病的發(fā)病和發(fā)展，無(wú)論先傷于肝、脾、腎任何一臟，都最終漸次波及三臟。其病多呈氣陰兩虛，而以陰虛為主，邪熱內(nèi)盛的病理表現(xiàn)［7］。中醫(yī)對(duì)糖尿病的這種認(rèn)識(shí)方法，在改善癥狀的同時(shí)，更加注重從整體上把握病證，因而成就了與西醫(yī)迥然的糖尿病辨治理論及方法。降糖消渴顆粒組方基于這一理論，以滋養(yǎng)肝腎、健脾益氣為主，清熱和血為輔，扶正與祛邪并舉，下元與中土同調(diào)。本方經(jīng)實(shí)踐證實(shí)具有降低血糖、體重，調(diào)節(jié)血脂等作用，在防治2型糖尿病方面有良好的應(yīng)用前景。

2型糖尿病是一種慢性進(jìn)展性疾病，具有高血糖和繼發(fā)的血管神經(jīng)并發(fā)癥等特征［8］。隨著病程的進(jìn)展，患者的血糖有逐漸升高的趨勢(shì)［9］，血糖控制難度也逐漸增大，因而常需多種藥物聯(lián)合治療。作為目前治療2型糖尿病的首選藥物，二甲雙胍可有效地控制2型糖尿病患者的空腹和餐后血糖，改善肥胖和心血管疾?。?0-11］，并具有良好的安全性［12-13］。當(dāng)單用二甲雙胍血糖控制不滿意時(shí)，可加用其他降糖藥物以進(jìn)一步改善血糖。

本實(shí)驗(yàn)采用高脂飲食聯(lián)合小劑量STZ誘導(dǎo)建立2型糖尿病小鼠模型［14］。實(shí)驗(yàn)期間，小鼠表現(xiàn)出高血糖和高胰島素血癥，并有糖耐量及血脂異常，具有與人類(lèi)2型糖尿病類(lèi)似的表現(xiàn)。肥胖是2型糖尿病發(fā)生和發(fā)展的重要因素之一［15］，降低體重有助于2型糖尿病患者控制糖脂水平，延緩病程進(jìn)展。降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍可顯著降低2型糖尿病小鼠體重及空腹血糖，并改善其糖耐量，對(duì)于肥胖型2型糖尿病患者，可能是一種有效的聯(lián)合用藥方案。本實(shí)驗(yàn)以降糖消渴顆粒中劑量聯(lián)合二甲雙胍降糖效果最優(yōu)，并未表現(xiàn)出明顯量效關(guān)系。這可能與中西藥聯(lián)用的藥效機(jī)制復(fù)雜有關(guān)，亦可能與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的個(gè)體差異有關(guān)。

高胰島素血癥是2型糖尿病的重要表現(xiàn)之一，與胰島功能失調(diào)和胰島素敏感性下降密切相關(guān)。降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍可降低2型糖尿病小鼠的血清胰島素和胰高血糖素水平，改善胰島素敏感性，提示該聯(lián)合用藥對(duì)2型糖尿病引起的胰島素敏感性下降和胰島功能紊亂具有一定調(diào)節(jié)作用。另外，本實(shí)驗(yàn)亦顯示中西藥聯(lián)用對(duì)2型糖尿病小鼠的脂質(zhì)代謝紊亂有一定調(diào)節(jié)作用，但并未明顯優(yōu)于二甲雙胍。

綜上所述，降糖消渴顆粒聯(lián)合二甲雙胍表現(xiàn)出良好的協(xié)同降糖效果，在延緩糖尿病病程方面具有潛在的應(yīng)用前景。

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（2015 -05 -16收稿 責(zé)任編輯：張文婷）

中圖分類(lèi)號(hào)：R285. 5

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

doi：10. 3969／j. issn. 1673 -7202. 2016. 03. 031

通信作者：高思華（1957. 07—），男，博士，教授，研究方向：中醫(yī)藥防治糖尿病研究，E-mail：gaosihua1216＠163. com；趙保勝（1973. 08—），男，博士，副研究員，研究方向：中藥藥效與物質(zhì)基礎(chǔ)研究，E-mail：zhaobs1973＠163. com

作者簡(jiǎn)介：安宏（1989. 12—），男，碩士研究生，研究方向：中醫(yī)藥防治糖尿病研究，E-mail：llfcanhong＠163. com

基金項(xiàng)目：國(guó)家科技重大專(zhuān)項(xiàng)子課題（編號(hào)：2012ZX09103201-005）