惲?xí)r鋒， 董 敏， 趙志剛， 陳 莉， 劉 彪， 田小蕓（南京軍區(qū)南京總醫(yī)院比較醫(yī)學(xué)科，全軍實(shí)驗(yàn)動物科普與倫理教育基地，全國科普教育基地，南京 210002）

不同日齡新西蘭白兔血液學(xué)特性研究

惲?xí)r鋒， 董 敏， 趙志剛， 陳 莉， 劉 彪， 田小蕓
（南京軍區(qū)南京總醫(yī)院比較醫(yī)學(xué)科，全軍實(shí)驗(yàn)動物科普與倫理教育基地，
全國科普教育基地，南京 210002）

目的 探討不同日齡封閉群新西蘭白兔的血液學(xué)特性。方法 采集不同年齡、不同性別新西蘭白兔的血液樣品，應(yīng)用全自動血細(xì)胞儀測定160只新西蘭白兔的血液學(xué)指標(biāo)。結(jié)果 各年齡段新西蘭白兔血液學(xué)指標(biāo)性別間無顯著差異（P＞0.05），不同年齡段之間除單核細(xì)胞總數(shù)差異不顯著（P＞0.05），其它指標(biāo)有顯著差異（P＜0.05）。結(jié)論 本院培育自繁的實(shí)驗(yàn)型封閉群新西蘭白兔生物學(xué)特性較穩(wěn)定，個體間差異較小，初步建立了不同日齡新西蘭白兔血液生理指標(biāo)正常值，為新西蘭白兔的廣泛使用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

新西蘭白兔； 各年齡段； 血液學(xué)特性

新西蘭白兔作為實(shí)驗(yàn)動物廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)、免疫學(xué)及微生物學(xué)研究，然而在常見的動脈粥樣硬化性心血管疾病研究中，家兔使用量卻相對少，主要原因是血液生理生化指標(biāo)參數(shù)匱乏，無從參考，使實(shí)驗(yàn)難度增大［1］。實(shí)驗(yàn)動物血液生理常規(guī)值是生物醫(yī)學(xué)研究的基礎(chǔ)指標(biāo)，是臨床醫(yī)療和科學(xué)研究的重要依據(jù)［2］。本實(shí)驗(yàn)對新西蘭白兔進(jìn)行基礎(chǔ)數(shù)據(jù)的測定，探討不同日齡、不同性別新西蘭白兔的血液學(xué)特性，為建立新西蘭白兔的日常檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)奠定基礎(chǔ)，為廣泛使用新西蘭白兔作為實(shí)驗(yàn)動物進(jìn)行科學(xué)研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

普通級封閉群新西蘭白兔160只，由南京軍區(qū)南京總醫(yī)院比較醫(yī)學(xué)科培育自繁 ［SCXK（軍）2012-0014］，其中幼年、育成、成年及老年兔各40只，雌雄各半，幼年兔體質(zhì)量0.4～1.0 kg（1～2月齡），育成青年兔體質(zhì)量1.1～2.0 kg（2～4月齡），成年兔體質(zhì)量2.0～3.0 kg（4～6月齡），老年兔體質(zhì)量3.0～4.4 kg（24月齡及以上）。

1.2 飼養(yǎng)管理及環(huán)境

實(shí)驗(yàn)兔飼養(yǎng)于自動沖洗式不銹鋼籠中，飼喂南京愛立默科技有限公司生產(chǎn)的家兔顆粒料，定時給食，飲水。飼養(yǎng)室內(nèi)溫度維持在16～28 ℃，相對濕度72%～85%，光照明暗各12 h［SYXK（軍）2012-0046］。

1.3 血樣采集

實(shí)驗(yàn)兔在清晨空腹自然清醒狀態(tài)下，妥善保定， 自耳中央動脈常規(guī)剪毛消毒后，采血2 mL，置于肝素鈉抗凝管中，分別測定白細(xì)胞總數(shù)（WBC）、淋巴細(xì)胞（LYM）百分率、單核細(xì)胞（MO）百分率、中性粒細(xì)胞（GR）百分率、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞比積（HCT）、平均紅細(xì)胞體積（MCV）、平均血紅蛋白含量（MCH）、平均血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細(xì)胞寬度（RDW）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）、血小板比積（PCT）、平均血小板體積（MPV）、血小板寬度（PDW）等血液學(xué)常規(guī)項(xiàng)目。

1.4 檢測儀器

coulter stks全自動血細(xì)胞分析儀，由Beckman coulter公司（美國）生產(chǎn)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件對不同性別、不同日齡段數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 性別間比較

所測的15項(xiàng)血液學(xué)性狀中，所有指標(biāo)在同一年齡段內(nèi)雌、雄兔間無顯著差異（P＞0.05）（表1）。

2.2 年齡段間比較

除單核細(xì)胞（MO）百分率在不同年齡段無顯著差異外（P＞0.05），其余各項(xiàng)目不同年齡階段間均存在顯著差異（P＜0.05）（表1）。

3 討論

新西蘭白兔具有毛色純白、皮膚光澤、體格健壯、繁殖力強(qiáng)、生長迅速、性情溫和及容易管理等特點(diǎn)，已被培育成質(zhì)量穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)型封閉群動物［2，3］。除廣泛應(yīng)用于皮膚反應(yīng)實(shí)驗(yàn)、藥劑的熱源實(shí)驗(yàn)、致畸實(shí)驗(yàn)、毒性實(shí)驗(yàn)和胰島素檢定外，亦常用于妊娠診斷、人工受胎實(shí)驗(yàn)、計(jì)劃生育研究和制造診斷血清等［4］。因此，新西蘭白兔的血液學(xué)指標(biāo)對生物醫(yī)學(xué)研究非常有價值，同時也是動物正常生理狀態(tài)的判定及人類疾病研究中探討發(fā)病機(jī)理，選擇動物的重要指標(biāo)和依據(jù)，但目前在相關(guān)報道中未見有對其正常值進(jìn)行過詳盡具體的描述，因此建立健康新西蘭白兔血液學(xué)指標(biāo)正常參考值對于生物醫(yī)學(xué)研究具有重要的應(yīng)用價值［5-7］。

動物血液學(xué)指標(biāo)是反映動物健康與否的重要指標(biāo)， 是臨床醫(yī)療和科學(xué)研究的重要依據(jù)， 是評價封閉群動物遺傳標(biāo)準(zhǔn)的一項(xiàng)重要指標(biāo)。其參數(shù)受較多因素影響，如飼養(yǎng)環(huán)境、年齡、性別、動物級別、品系、采血時間、測試方法、檢測儀器甚至測定技術(shù)熟練程度等，其數(shù)值也隨之變化［8，9］。本研究選用了健康封閉群新西蘭白兔160只，其中幼齡、育成、成年及老齡兔各40只，實(shí)驗(yàn)兔在空腹非麻醉狀態(tài)下經(jīng)耳中央動脈采血，用全自動血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血液學(xué)指標(biāo)檢測。結(jié)果表明，在各年齡段實(shí)驗(yàn)型封閉群新西蘭白兔血液學(xué)指標(biāo)性別間無顯著差異（P＞0.05），說明性別對實(shí)驗(yàn)型封閉群新西蘭白兔的血液學(xué)指標(biāo)沒有顯著的影響，這與張曉玉、楊鋒等［10，11］的結(jié)果基本一致； 不同年齡段新西蘭白兔間的比較結(jié)果顯示，除MO百分率無顯著差異外（P＞0.05），其余各項(xiàng)血液學(xué)指標(biāo)均存在顯著差異（P＜0.05）， 說明年齡因素對實(shí)驗(yàn)動物血液學(xué)指標(biāo)的影響十分顯著。血液學(xué)指標(biāo)是機(jī)體各組織、器官功能和狀態(tài)的反映［12］， 血液學(xué)指標(biāo)的顯著差異說明隨著年齡增長， 不同年齡新西蘭白兔的生理、代謝及機(jī)體防御等方面都有顯著變化，因此在不同實(shí)驗(yàn)研究中因根據(jù)實(shí)際需要選擇不同年齡段新西蘭白兔。

張曉玉等［10］測定了70～80日齡SPF新西蘭兔血液學(xué)指標(biāo)，李增強(qiáng)等［12］進(jìn)行了SPF級與普通級成年新西蘭兔血液學(xué)指標(biāo)比較分析， 閆峰等［1］測定了成年新西蘭兔部分血液學(xué)參數(shù)， 上述研究均未涉及不同年齡段新西蘭白兔的血液學(xué)參數(shù)比較分析。本實(shí)驗(yàn)研究表明本院培育自繁的實(shí)驗(yàn)型封閉群新西蘭白兔生物學(xué)特性較穩(wěn)定，個體間差異較小，初步建立了不同年齡段新西蘭白兔血液生理指標(biāo)正常值，為新西蘭白兔的廣泛使用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，也為科技人員進(jìn)行實(shí)驗(yàn)型新西蘭白兔動物模型的選擇提供參考。

［1］ 閆峰， 吉訓(xùn)明， 田欣， 等. 新西蘭兔血?dú)夂筒糠盅荷砩瘏?shù)的測定［J］. 實(shí)驗(yàn)動物科學(xué)， 2010， 27（2）:55-57.

［2］ 詹純列， 肖育華， 李新春， 等. 普通級、SPF級SD、Wistar大鼠血液生化參考值的建立的測定與比較［J］. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志， 2004， 14（2）:94-96.

［3］ 惲?xí)r鋒， 張立波， 董敏， 等. 不同品種實(shí)驗(yàn)兔血液流變學(xué)特性［J］. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志， 2010， 20（10）:41-43.

［4］ 惲?xí)r鋒， 張立波， 董敏， 等. 新西蘭白兔血液流變學(xué)特性動態(tài)變化［J］. 實(shí)驗(yàn)動物與比較醫(yī)學(xué)， 2010， 30（5）:379-380.

［5］ 秦川. 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物學(xué)［M］. 北京: 人民衛(wèi)生出版社， 2008: 92-95.

［6］ 王冬平， 李慕， 尚世臣， 等. 不同日齡SPF級KM小鼠血液生理生化正常指標(biāo)的探討［J］. 實(shí)驗(yàn)動物科學(xué)， 2008， 25（4）: 5-8.

［7］ Mizoguchi Y， Matsuoka T， Mizuguchi H， et al. Changes in blood parameters in New Zealand White rabbits during pregnancy［J］. Lab Anim， 2010， 44（1）:33-39.

［8］ 惲?xí)r鋒， 方天， 董敏， 等. 新西蘭兔腦電的生物學(xué)特性［J］. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志， 2014， 24（6）:40-45.

［9］ 鄭敏， 翁迪成， 劉芳， 等. 高溫高濕環(huán)境對家兔血液流變特性與生化指標(biāo)的影響［J］. 中南大學(xué)學(xué)報: 自然科學(xué)版， 2012，43（7）:2883-2888.

［10］ 張曉玉， 張修彥， 詹純列. SPF級新西蘭兔臟器參數(shù)、血液指標(biāo)、心率、勁動脈血壓、心室壓的測定與比較［J］.中國比較醫(yī)學(xué)雜志， 2015， 25（8）:37-43.

［11］ 楊鋒， 艾應(yīng)先， 謝曉娟， 等. 屏障系統(tǒng)大耳白、新西蘭兔血液學(xué)指標(biāo)測定分析［J］. 實(shí)驗(yàn)動物科學(xué)， 2012， 29（6）:26-29.

［12］ 李增強(qiáng)， 孫淑華， 孟金萍， 等. SPF級與普通級新西蘭兔血液學(xué)參數(shù)的比較［J］. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志， 2008， 18（4）:51-55.

Experimental Study on Hematological Parameters of New Zealand White Rabbits at Different Ages

YUN Shi-feng， DONG Min， ZHAO Zhi-gang， CHEN Li， LIU Biao， TIAN Xiao-yun
（Department of Comparative Medicine， Nanjing General Hospital of Nanjing Military Command，Army Education Base of Science and Ethics of Experimental Animal，National Science Education Base， Nanjing 210002， China）

Objective To investigate the hematological parameters of outbred colony New Zealand white rabbits at different ages. Methods Blood samples from 160 New Zealand white rabbits （Female， 80 and male， 80） in different age groups were analyzed with automatic blood cell analyzer. Result There was no statically significant difference between the blood samples of different age experimental closed colony New Zealand white rabbits in different sex sets （P＞0.05）. Significant differences （P＜0.05）of hematological indexes except monocyte （P＞0.05） were observed among New Zealand white rabbits in different age groups. Conclusion The outbred colony New Zealand white rabbits had stable biological characteristics and less difference among individuals. In this study， the biological hematologic parameters database for New Zealand white rabbits at different ages was established， which will be used as basic reference for New Zealand white rabbits experiment.

New Zealand white rabbits； Different ages； Hematological parameters

Q95-33

A

1674-5817（2016）01-0037-04

10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.007

2015-06-30

惲?xí)r鋒（1965- ）， 男， 教授， 從事實(shí)驗(yàn)動物管理工作。E-mail: yunshifeng1@163.com