王曉娜,王曉梅,楊素珍(山東福瑞達(dá)生物工程有限公司,山東濟(jì)南250101)
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蓮主要部位功能活性成分概述
王曉娜,王曉梅,楊素珍
(山東福瑞達(dá)生物工程有限公司,山東濟(jì)南250101)
摘要:綜述了蓮各部位所含活性成分及其它們各自所具有的作用,著重介紹了荷葉中所含的荷葉堿及荷葉黃酮這兩種活性成分,同時(shí)簡單對其活性成分提取分離純化方法進(jìn)行了簡單總結(jié)。
關(guān)鍵詞:蓮子;蓮葉;荷葉堿;荷葉黃酮
蓮,睡蓮科,多年生水生草本植物,又名荷花、芙蓉、水芙蓉、玉環(huán)、碧環(huán)、溪客等。蓮全株植物都有食用和藥用價(jià)值,《本草綱目》中記載“醫(yī)家取為服食,百病可卻”,是一種天然的保健食品。由于蓮自身的多功能作用,吸引研究者們研究其在化妝品中的用途。本文主要對蓮的全株不同部位所含營養(yǎng)成分,分離方法及其所具有的作用進(jìn)行了概述。
蓮子主要含有蓮心堿、異蓮心堿、甲基蓮心堿、蓮心季銨堿、前荷葉堿、荷葉堿、去甲基烏藥堿、dl-杏黃罌粟堿、S-N-甲基烏藥堿、甲基紫堇把靈[1]。同時(shí)還含有蘆丁、木犀草素、金絲桃甙等黃酮類物質(zhì)以及β-谷甾醇、棕櫚酸等,還含有水溶性多糖類及銅、鐵、鋅、鈣、鎂、錳等微量元素[2-3]。徐俊英等[4]研究證明異蓮心堿具有抗脂質(zhì)過氧化,氧自由基生成和增強(qiáng)氧自由基的清除有關(guān)。同時(shí)吳遠(yuǎn)明等[5]證明甲基蓮心堿也是一種有效的植物來源抗氧化劑,其通過清除氧自由基達(dá)到抗氧化作用。王輝等[6]利用大鼠作為模型證明蓮心堿具有抗氧化能力,可提高SOD水平。
Wu SH等[7]采用酸提堿沉淀方法提取蓮子中的生物堿,將蓮子用95 %乙醇浸提后將提取液在40℃蒸發(fā)濃縮,濃縮后用1.5 %的鹽酸溶解過濾,取濾液,用10 %氨水調(diào)節(jié)pH至8.5,得到的沉淀即為粗生物堿。李文龍等[8]將加速溶劑萃取法應(yīng)用于蓮子心有效成分的提取。溶劑采用乙醇∶水=8∶2(體積比),進(jìn)行加速萃取,萃取條件為100℃,9646kPa,萃取10min,將得到的萃取液濃縮甲醇溶解。加速溶劑萃取法比傳統(tǒng)溶劑萃取法操作更簡單,提取時(shí)間更短,重現(xiàn)性好等有優(yōu)點(diǎn)。
對于蓮心總堿的分離純化,郭毛娣等[9]采用強(qiáng)酸型陽離子交換樹脂進(jìn)行分離,得到得率為1.1 %的理想效果。王艷強(qiáng)等[10]聯(lián)合了膜分離和吸附技術(shù)對蓮心堿進(jìn)行分離提純,使提取率從75 %增長到85 %,利用此方法提高了提取率,也簡化了工藝。張吉祥等在劉韶等[11]傳統(tǒng)的LSA-5B型大孔吸附樹脂基礎(chǔ)上采用了AKS2W、AB28、H214大孔吸附樹脂,達(dá)到有選擇性地吸附分離蓮心堿,將提取工藝簡化,提高了提取率[12]。Chen等[13]采用制備液相成功得到蓮子中的主要生物堿。
花粉是植物的繁殖細(xì)胞,具有“天然完全營養(yǎng)素”、“微型營養(yǎng)庫”、“濃縮的維生素”等美譽(yù)。蓮花花粉是蜜蜂采集蓮花之精華,具有美容、調(diào)養(yǎng)等功效,是無污染的純天然產(chǎn)品。蔣楓等[14]研究發(fā)現(xiàn)蓮花花粉中含有VC、VE、VB1、氨基酸、脂肪酸、還原糖等有效成分,可以用于心腦血管疾病、腫瘤、輻射損傷等疾病的防治[15-16]?;ǚ壑械亩嗵强拱┘霸鰪?qiáng)機(jī)體免疫能力功能已被證實(shí)[17],因此對于蓮花花粉中的多糖也是主要的功能成分,發(fā)揮重要的作用。
由于花粉具有一層厚厚外壁,結(jié)構(gòu)中的孢粉素對酸、堿、溫度、壓力、酶都很穩(wěn)定,限制其營養(yǎng)成分的吸收利用及活性成分的釋放,使花粉活性成分的分離提取研究進(jìn)展緩慢,國內(nèi)外對蓮花花粉多糖的提取、分離等方面的研究報(bào)道甚少?;ǚ燮票诩夹g(shù)普遍采用溫差破壁法、機(jī)械破壁法、酶解破壁法等。劉進(jìn)杰等[18]采用超聲波機(jī)械破壁方法提取蓮花花粉中的多糖,采用苯酚-硫酸法[19]測定多糖含量。選取最佳提取工藝超聲功率518.11 W、超聲時(shí)間5.60min、處理量1.37g/25mL,在這個(gè)條件下蓮花花粉多糖的提取量21.79 mg/g。張國鋒等[20]采用溫浸法確定最佳提取工藝條件為1∶8的料液比,在50℃水浴條件下,浸提3 h,提取2次,在節(jié)約成本,節(jié)省時(shí)間的前提下得到較高的花粉多糖得率。楊文超等[21]優(yōu)化了蓮花粉的酶解破壁工藝,酶解條件為pH 4.0、復(fù)合酶添加量1.2 %、酶解溫度45℃、料液比1∶14(g/mL),可以得到89.21 %的破壁率,酶作用比較溫和,有利于提高提取得率。
劉潔等研究得出對于蓮花多糖的分離純化工藝,將粗多糖經(jīng)95 %乙醇沉淀,丙酮、乙醚洗滌之后,采用Sephadex G-75純化多糖。利用花粉多糖具有抗氧化、降血脂作用可以加強(qiáng)在保健食品、藥品、美容護(hù)膚品等高附加值產(chǎn)品方面的深度開發(fā)。
蓮葉系睡蓮科植物蓮(Nelumbo nucifera Gaertn)的葉片,蓮主要分布于我國熱帶、亞熱帶和溫帶水資源豐富的湖泊和沼澤等地區(qū)。蓮葉葉自古以來就是一種藥食兩用的植物,據(jù)《本草綱目》中記載“荷葉服之令人瘦劣。單服可以消陽水浮之氣。能生發(fā)元?dú)?,裨助脾胃,澀精濁,散癖血,消腫痛,發(fā)痘瘡”。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為,荷葉苦平,歸肝、脾、胃,具有清解暑熱、升發(fā)清陽、涼血止血的作用,可以用于暑熱煩渴、暑濕泄瀉、便血便漏[22]。在1991年11月中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布的第45號文件中,荷葉被列入第二批“既是食品又是藥品”的名單中?,F(xiàn)代分析研究發(fā)現(xiàn)荷葉中除了含有普通植物所共有的碳水化合物、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、單寧等常規(guī)化學(xué)成分外,還含有豐富的活性成分,例如蓮甙、槲皮素、異槲皮素、蘆丁等黃酮類化合物及荷葉堿、原荷葉堿、亞類罌粟堿、N-去甲基荷葉堿等生物堿類物質(zhì)[23]。荷葉中的堿類物質(zhì)和黃酮類物質(zhì)具有抑菌、抗有絲分裂、止痙攣、抗氧化等作用。紀(jì)麗蓮[24]對荷葉乙醇提取物進(jìn)行了抑菌效果的研究,結(jié)果顯示荷葉乙醇提取物對細(xì)菌和酵母,尤其是大腸桿菌、金黃色葡萄球菌抑制效果明顯。陳海光等[25]研究荷葉水提物對羥自由基(·OH)和超氧陰離子自由基(O2-·)有較好的清除效果。杜力軍等[26]研究表明荷葉水提物具有調(diào)脂明顯調(diào)脂作用。同時(shí)喻澤蘭等[27]證明了荷葉水提物L(fēng)D50及可信限MTD>5 000 mg/kg,也通過了中藥毒性分析,證明了荷葉提取物幾乎無毒。在荷葉提取物種主要起活性作用的物質(zhì)是荷葉堿和荷葉黃酮類化合物,下面主要對荷葉中兩種活性物質(zhì)進(jìn)行介紹。
3.1荷葉黃酮
黃酮類化合物主要指以2-苯基色原酮為基核的化合物,以C6-C3-C6為骨架,而且大多環(huán)都有酚羥基取代,屬植物次級代謝產(chǎn)物。黃酮類化合物是藥用植物中主要活性成分之一[28],具有抗氧化、抗過敏、抗炎、抗茵、抗突變、保肝、保護(hù)心腦血管系統(tǒng)和抗病毒以及殺蟲等廣譜的生理活性。荷葉黃酮屬于黃酮類化合物的一類,其同樣具有上述作用。胡榴燕等[29]研究表明,荷葉黃酮對高脂血癥大鼠有顯著的抗氧化活性,可以顯著提升谷胱甘肽過氧化物酶和血清超氧化物歧化酶的活力,降低丙二醛的含量。鄧勝國等[30]通過實(shí)驗(yàn)測定體外荷葉抗氧化活性,研究表明荷葉黃酮能明顯抑制亞油酸的氧化過程且具有較好地清除DPPH自由基的作用。
目前,國內(nèi)外提取黃酮技術(shù)主要有溶劑提取法、索氏提取法、超聲提取法、微波法及超微粉碎、超臨界流體提取法等[31]。對于荷葉黃酮的提取,張赟彬[32]采用浸提法采用70 %乙醇做提取液,料液比1∶30、浸提溫度80℃、浸提時(shí)間2 h、浸提3次,得到提取率為3.62 %。薛曉麗[33]應(yīng)用超聲波輔助萃取法對荷葉總黃酮進(jìn)行提取,按1∶35的料液加入60 %乙醇浸提液,浸泡24 h,然后在35℃條件下超聲提取35 min,荷葉總黃酮得率為13.68 %。張蕾[34]采用超微粉碎技術(shù),提取液為70 %乙醇,料液比為1∶20,提取9 min,超聲波功率為200 W,與對照相比,此條件下荷葉黃酮提取率最高位5.35 %。對于荷葉黃酮的分離純化方法國內(nèi)外大多采用樹脂吸附法,研究發(fā)現(xiàn)分離純化的效果較好的樹脂為AB-8,D101和HP-20,黃酮含量可達(dá)到60 %以上[35-38]。
荷葉黃酮類物質(zhì)可以作為抗氧化劑、抑菌物質(zhì)外,還可以用于天然食用色素添加劑及天然甜味劑。荷葉黃酮具有極高的使用、食用及藥用價(jià)值,因此隨著科技創(chuàng)新的步伐不斷加快,分離純化荷葉總黃酮的技術(shù)在不斷創(chuàng)新與提高,在不久的將來,肯定可以得到純度極高的荷葉黃酮,用于食品、藥品、保健品及化妝品中,為人類造福。
3.2荷葉堿
目前,從荷葉中分析鑒定出15種生物堿,主要生物堿為為荷葉堿、亞美罌粟堿、原荷葉堿、N-去甲基荷葉堿、番荔枝堿等。分為單芐基異喹啉型、阿樸啡型、去氫阿樸啡型和氧化阿樸啡型4種類型,荷葉堿是阿樸啡型生物堿。現(xiàn)代藥理試驗(yàn)證明荷葉堿具有降脂、抑菌抗氧化等活性作用[39]。研究表明荷葉中主要生物堿具有抗HIV活性,衡州烏藥堿、O-去甲基衡州烏藥堿、荷葉堿這三種荷葉堿可以發(fā)展成為抗HIV病毒的新前導(dǎo)物[40]。Boustie J等[41]研究荷葉堿的抗菌抗病毒活力,結(jié)果表明荷葉堿在體外對脊髓灰質(zhì)炎病毒具有顯著的抗病毒活性。肖娟等[42]證明當(dāng)7 mg/mL的荷葉生物堿水提物對水楊酸體系中羥自由基清除率為55.2 %。分子試驗(yàn)研究證明,荷葉生物堿的降脂作用主要是通過間接改變底物乳化來阻斷底物與酶結(jié)合從而達(dá)到抑制作用[43]。荷葉堿除具有上述作用外,還具有其他功效,如Bhattacharya等[44]研究了其精神藥理學(xué),發(fā)現(xiàn)其能誘導(dǎo)僵住癥,抑制自發(fā)性運(yùn)動(dòng)、條件躲避反應(yīng)等。Chulia等[45]研究發(fā)現(xiàn)其能通過電壓運(yùn)行信道阻斷Ca2+的跨膜運(yùn)動(dòng),從而阻斷α-腎上腺素受體與受體調(diào)控性通道連接。林木仙等[46]發(fā)現(xiàn)其可預(yù)防致死性遺傳疾病囊性纖維化病的發(fā)生。費(fèi)景蘭[47]研究證明其具有很好的護(hù)理作用,能改善血液循環(huán),增強(qiáng)機(jī)體抗病能力,提高治愈率。因此可以利用荷葉堿的諸多特性開發(fā)食品、保健品、藥品及化妝品等功能性附加值高的產(chǎn)品。
荷葉生物堿類化合物大部分呈弱堿性,較難溶于水,但是易溶于氯仿、乙醚、乙醇、甲醇等有機(jī)溶劑,也可溶于偏酸性的水溶液中生成可溶性鹽[48]。在荷葉堿的提取中一般采用溶劑萃取法,輔助以超聲波、超臨界CO2、微波等技術(shù)。李宇亮等[49]使用90 %乙醇提取劑,得到最優(yōu)提取工藝為提取溫度90℃,料液比1∶15,得率為23.83 mg/20 g。王穎瀅[50]采用超臨界CO2流體萃取和超聲波技術(shù)提取荷葉總堿:萃取溫度55℃,萃取壓力20 MPa,夾帶劑流速0.2 mL/min,萃取2 h,荷葉總堿的得率為318.45 μg/mg,采用超聲波技術(shù),在超聲功率410W,乙醇濃度70 %,料液比1∶43的最優(yōu)條件下其得率為326.08 μg/mg。在這些工藝的基礎(chǔ)上鐘世安等[51]采用了纖維素酶-超聲波輔助提取技術(shù),最終得到的優(yōu)化工藝為:酶用量2.667×10-6mol/(s·g),酶作用溫度50℃,酶解時(shí)間2 h,pH為5.0,料液比為1∶30,浸提16 h,荷葉堿的提取率可達(dá)1.105 %。
對于荷葉中生物堿的分離純化,大多采用大孔樹脂吸附法、膜分離法、色譜法等[52]。趙俊等[53]采用大孔樹脂吸附法得到純度在50 %~70 %之間的荷葉堿。梁峰[54]采用W/O乳狀液膜分離荷葉中3種生物堿,采用工藝為:遷移時(shí)間2.5 min,表面活性劑Span 80的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.0 %,載體D2EHPA的濃度為0.01 mol/L,乳水比1∶6,油水比10∶6,水相鹽酸0.2 mol/L,可分別得到O-去甲基荷葉堿、N-去甲基荷葉堿和荷葉堿的萃取率達(dá)100 %、95.6 %和97.9 %。劉婧靖等[55]采用制備型高效液相色譜分離純化荷葉堿,可得到質(zhì)量分?jǐn)?shù)> 98 %,制備收率>49 %的荷葉堿。而Xie等[56]采用高速逆流色譜法分離荷葉類生物堿,溶劑體系為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(1∶5∶1∶5,體積比),可得到純度為92.1 %的22.1 mg/150 mg荷葉堿提取液。
目前已經(jīng)開發(fā)出適應(yīng)于肥胖、高血壓、高膽固醇、動(dòng)脈硬化等病癥的荷葉堿類藥物,對于其抗氧化及抑菌功能藥物、食品、保健品及美容產(chǎn)品的開發(fā)正在研究防腐劑、抗氧化劑等添加劑中[57]。我國歷史悠久的紹興黃酒也是用荷葉為封口包裝材料的[58]。同時(shí)其含有多種氨基酸,將其作為飼料,可的得到很好的養(yǎng)殖效果[59]。
4小結(jié)
隨著生活水平的提高,人們越來越重視健康飲食,科學(xué)養(yǎng)生,蓮由于其本身含有多種生物活性成分,如荷葉黃酮、荷葉堿、多糖、有機(jī)酸、多種微量元素及氨基酸等,使其具有抗氧化、抑菌、降脂、減肥及美容等功效。我國蓮花生長分布廣泛,具有豐富的資源,對于開發(fā)蓮類具有抗氧化、降脂、減肥的食品、藥品、保健品、美容類產(chǎn)品以及借助其抑菌作用開發(fā)天然防腐劑產(chǎn)品等是極為有利的,必為促進(jìn)人類健康發(fā)展畫上重要一筆。
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The Introduction of Active Ingredients Function in Main Part of Lotus
WANG Xiao-na,WANG Xiao-mei,YANG Su-zhen
(Shandong Freda Bioeng Co. Ltd,Jinan 250101,Shandong,China)
Abstract:The article mainly summarized the each part of lotus contains the active ingredient and the function they has. And then introduced the alkaloid and flavonoids the two active ingredients in lotus le sf emphatically. At last,introduced the extraction separation methods.
Key words:lotus seed;lotus leaf;alkaloid;flavonoids
收稿日期:2014-10-21
DOI:10.3969/j.issn.1005-6521.2016.01.052
作者簡介:王曉娜(1988—),女(漢),助理工程師,碩士研究生,研究方向:生物制藥方向。