王竹良，劉 新，李寶忠，閆振華

對腐植酸提高蘋果超氧化物歧化酶活性的研究

王竹良1，劉 新2，李寶忠3，閆振華3

（1.煙臺易施藍特生物技術(shù)有限公司，山東棲霞265300；2.青島農(nóng)業(yè)大學生命科學學院，山東青島266000；3.山東省棲霞市果業(yè)發(fā)展局，山東棲霞265300）

目前市場流行營養(yǎng)保健的SOD蘋果，為了研究在不使用外源性超氧化物歧化酶制劑的情況下，通過使用腐植酸液體肥，增強蘋果樹自身調(diào)節(jié)機制，提高自身生產(chǎn)超氧化物歧化酶活性（SOD）能力，從而提高蘋果超氧化物歧化酶的含量，打造出真正意義上的純天然的SOD保健蘋果，設(shè)置了腐植酸液體肥地下灌注＋葉面噴施、常規(guī)施肥（對照）2個處理。結(jié)果表明，腐植酸液體肥地下灌注＋葉面噴施處理顯著地提高了蘋果的SOD含量，其SOD值在43.52～51.43U／g，增幅為229.954%～289.92%，平均增幅為260.20%，超過了國際SOD蘋果含量標準（20.00U／g）。

腐植酸；超氧化物歧化酶；蘋果

超氧化物歧化酶（SOD）是一種廣泛存在于人體、動物、植物、微生物中的一種金屬酶，是一種源于生命體的活性物質(zhì)，是多余自由基的清除劑，能消除生物體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)。人體不斷地補充SOD具有抗衰老的特殊效果。近年來，SOD廣泛地應用于人類疾病的治療、化妝品和保健飲料的生產(chǎn)以及農(nóng)作物抗逆能力增強上。

國內(nèi)首個報道生產(chǎn)SOD蘋果的是在中國農(nóng)業(yè)大學指導下，河南三門峽科技局農(nóng)業(yè)科技咨詢服務(wù)中心利用“益微”SOD（2002年5月29日正式授權(quán)，專利號為ZL93108849.6），采用葉面噴施的方法［1］，促使蘋果體內(nèi)SOD酶量增加，生產(chǎn)出了高SOD含量并具有保健功能的SOD蘋果。

本文通過使用純天然、無污染、綠色環(huán)保的腐植酸液體肥料，補充植物必需的營養(yǎng)元素，降低化肥使用量，修復土壤，在不增加果農(nóng)成本，不加SOD酶制劑的情況下，提高蘋果樹自身營養(yǎng)調(diào)節(jié)功能，提高綜合營養(yǎng)轉(zhuǎn)換能力，靠蘋果樹自身生產(chǎn)出純天然的功能性SOD保健蘋果，為揭示提高蘋果SOD含量效果的機制提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

試驗于2015年3－11月在山東省威海市文登區(qū)葛家鎮(zhèn)龍澤果蔬專業(yè)合作社蘋果園進行。供試品種為7年生的紅富士?；A(chǔ)用肥為煙臺盛地生物科技有限公司生產(chǎn)的“盛地王子”牌有機肥（有機質(zhì)含量45%，N、P2O5、KO2≤5%）7 500kg／hm2、史丹利化肥股份有限公司生產(chǎn)的“三安”牌復合肥（N、P2O5、KO2≥54%）1 500kg／hm2和韓國生產(chǎn)、煙臺易施藍特生物技術(shù)有限公司提供的“易施藍特”牌中微量元素液體肥30kg／hm2（有效成分可溶性鈣含量≥48.9%，可溶性硅含量≥10.6%，可溶性鐵含量≥1.31%，可溶性鎂含量≥0.66%，可溶性鉀含量≥0.94%，可溶性磷含量≥0.15%）。

試驗所用腐植酸液體肥料是由“青島首林有機肥科技有限公司棲霞分公司”提供的“谷瑪特”牌腐植酸液體肥（腐植酸含量≥30g／L，有機質(zhì)含量≥60g／L，N、P2O5、K2O含量≥200g／L）。

1.2 試驗方法

試驗設(shè)計：試驗采用隨機區(qū)組排列，重復3次。每小區(qū)面積為600m2，總面積3 600m2。試驗設(shè)2個處理，分別為：處理1，2015年3月15日地下灌注“谷瑪特”牌腐植酸液體肥60kg／hm2，兌水30 000kg／hm2，葉面噴施1︰500倍腐植酸液體肥8次，具體噴施時間分別是，5月5日、6月10日、6月30日、7月15日、8月3日、8月26日、9月20日、10月10日；處理2，地下只施用基礎(chǔ)肥料，葉面噴施清水8次，噴施時間與處理1相同。

取樣方法：隨機從每個小區(qū)取樣15個蘋果，標記后分別裝入保溫箱，共計取樣90個，采樣時間為2015年10月26日，樣品采后立即裝入泡沫保溫箱，28日送青島農(nóng)業(yè)大學生命科學學院進行檢測化驗，11月7日收到檢測結(jié)果。

測定方法：利用氮藍四唑法檢測SOD活性［2］。45個樣品取中部果肉（離果皮2cm），每個處理混合樣品，經(jīng)液氮速凍后放入－80℃冰箱保存，每個處理重復3次。

2 結(jié)果與分析

使用腐植酸液體肥和常規(guī)施肥相比，使用腐植酸液體肥對蘋果SOD含量有顯著提高的效果，其SOD值在43.52～51.43U／g，增幅為229.954%～289.92%，平均增幅為260.20%，超過了國際SOD蘋果含量標準（20.00U／g）。

3 結(jié)論

表1 使用腐植酸液體肥后蘋果SOD含量

本次實試驗由于使用了腐植酸液體肥，蘋果SOD含量有大幅度的提高。進一步說明腐植酸能夠調(diào)節(jié)植物體內(nèi)營養(yǎng)平衡。眾所周知SOD是一種含有金屬元素（Cu、Zn、Mn、Ni和Fe）的活性蛋白酶，根據(jù)結(jié)合到活性位點的金屬的不同，分為Cu／ZnSOD、FeSOD、MnSOD和NiSOD，土壤中的腐植酸能與Zn、Cu、Fe等多價離子形成易溶的配位化合物［3］，更有利于SOD產(chǎn)生。

葉面噴施腐植酸能夠提高多種酶的活性，增強植物光合能力刺激植物營養(yǎng)物質(zhì)的積累［4］，2015年膠東地區(qū)出現(xiàn)100年來前所未有的旱情，從1－7月有效降雨不足30mm，有的地區(qū)滴雨未下，蘋果園旱死面積在幾十萬畝，有的果園為了保命，在7月下旬將蘋果全部摘掉。在這種情況下使用腐植酸液體肥的果園，在同樣旱情的情況下，7月底以前蘋果長勢很慢，均較常年偏小，到7月底8月初下雨以后蘋果長勢很快，除對照外，蘋果等級80mm以上均占80%以上。噴施腐植酸水溶肥能顯著提高其抗旱性，調(diào)節(jié)氣孔開啟度，減少水分蒸騰［5］，增加葉綠素含量［6－9］，于此同時顯著改善植物抗氧化系統(tǒng)和滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，有利于植物SOD的積累，增加產(chǎn)量，改善品質(zhì)。葉面噴施腐植酸液體肥次數(shù)越多，葉片就越大、厚，葉綠素含量高，抗病能力越強，積累的營養(yǎng)物質(zhì)就越多，有利于新陳代謝，SOD含量也就越高。

［1］仇宏昌，張煥珍，高艷華.SOD蘋果發(fā)展前景和生產(chǎn)技術(shù)［J］.果農(nóng)之友，2004（3）：15.

［2］劉 新，植物生理學實驗指導［M］，北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2015.1.

［3］李肯堂.黃腐酸高效土壤改良劑在立茬地小麥上的應用效果［C］／／2014土壤生態(tài)環(huán)境可持續(xù)發(fā)展論壇第十二屆全國綠色環(huán)保肥料（農(nóng)藥）新技術(shù)、新產(chǎn)品交流會［C］論文集：179.

［4］劉長江，于廣武，何長興，等.新興肥料及其配方［M］.黑龍江：哈爾濱地圖出版社2011：56，62，64.

［5］曾憲成.腐植酸本源活性肥料可持續(xù)發(fā)展［J］.腐植酸，2013（4）：1－6.

［6］許俊香，鄒國元，孫欽平，等.腐植酸尿素對土壤揮發(fā)和玉米生長的影響［J］.土壤通報，2013，44（4）：934－939.

［7］李志堅，林治安，趙秉強，等.增效磷肥對冬小麥產(chǎn)量和磷素利用率的影響［J］.植物營養(yǎng)與肥料學報，2013，19（6）：1329－1336.

［8］王振振，張 超，史春余，等.腐植酸緩釋鉀肥對土壤鉀素含量和甘薯吸收利用的影響［J］.植物營養(yǎng)與肥料學報，2013，18（1）：249－255.

［9］趙日明，蘇 益，藺萬煌，等.腐植酸對水稻生長及相關(guān)生理指標的影響［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學，2014，41（36）：14163－14165.

1005－345X（2016）05－0009－03

：S661.1

：A

2016－05－05

王竹良（1957－），男，高級肥料配方師，高級農(nóng)藝師，主要從事腐植酸肥料、中微量元素研究與推廣。E－mail：wzl639＠163.com