陳天翔，曲木，呂春雙，李嫦娥，白東清，孫金輝，喬秀亭，程鎮(zhèn)燕，通信作者

（1.天津農學院 水產學院，天津市水產生態(tài)及養(yǎng)殖重點實驗室，天津 300384；2.武清區(qū)畜牧水產業(yè)發(fā)展服務中心，天津 300380）

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飼料不同糖脂比對鯉魚生長、免疫及抗氧化相關酶活性的影響

陳天翔1，曲木1，呂春雙2，李嫦娥2，白東清1，孫金輝1，喬秀亭1，程鎮(zhèn)燕1，通信作者

（1.天津農學院 水產學院，天津市水產生態(tài)及養(yǎng)殖重點實驗室，天津 300384；2.武清區(qū)畜牧水產業(yè)發(fā)展服務中心，天津 300380）

摘 要：為研究不同糖脂比對鯉魚生長及免疫力的影響，選取平均體重為（44.45±1.6）g的鯉魚1 050尾，隨機分成5組（每組3個重復，每個重復70尾），分別飼喂糖脂比為5.2、6.9、9.7、14.8、27.8的飼料，進行為期63 d的攝食生長試驗。結果表明：攝食飼料糖脂比為6.9的鯉魚增重率和特定生長率最好，且飼料系數(shù)最低，顯著優(yōu)于其他處理組（P＜0.05）。隨著糖脂比的升高，血清超氧化物歧化酶活性呈先上升后下降的趨勢，且糖脂比為6.9時，達到最高，顯著高于糖脂比為14.8 和27.8的處理組（P＜0.05）；血清過氧化氫酶活性呈下降趨勢；糖脂比為9.7時，血清及肝胰臟丙二醛含量最低；在肝胰臟中糖脂比為27.8時，谷草轉氨酶、谷丙轉氨酶活性最低；堿性磷酸酶活性則呈先上升后下降的趨勢。由此可見，在本試驗條件下，飼料糖脂比為6.9時鯉魚的生長最好，且免疫力和抗氧化能力處于較佳狀態(tài)。

關鍵詞：鯉魚；糖脂比；生長；免疫力；抗氧化

隨著我國水產養(yǎng)殖業(yè)集約化水平的逐步提高，對配合飼料的需求量越來越大，魚粉價格也一路飆升。研究發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加的蛋白質類物質是水中N、P的主要來源。據(jù)統(tǒng)計，水產養(yǎng)殖過程中有80%以上的N進人水中未被利用[1]，N、 P的累積使藻類大量繁殖，極易暴發(fā)赤潮，最終造成重大經濟損失。因此，尋找新的蛋白源或降低飼料蛋白含量進而降低飼料成本成為亟待解決的問題。

魚體生長所需要的能量大部分來源于其所食用飼料中的脂肪、蛋白質和糖類，理論上可以通過利用糖類及脂類對蛋白質的節(jié)約作用來降低飼料中的蛋白質含量。然而，魚類是先天的“糖尿病”體質，對糖類的利用能力有限[2]，而且有研究表明，魚類日糧糖水平過高會導致體內血糖水平持續(xù)偏高，對機體造成傷害[3]。那么，糖類和脂類到底能不能真正起到節(jié)約蛋白質的作用呢？研究表明，魚類可以利用一定量的糖，但是糖水平過高可能抑制魚體的生長[4-5]，還有可能對機體的免疫功能產生影響[6]。吳凡等[7]認為，奧尼羅非魚（Oreochromis niloticus ♀×O.aureus ♂）幼魚飼料中碳水化合物對蛋白質有節(jié)約作用，碳水化合物水平以34%～41%為宜，添加水平過高會顯著增加其血清中膽固醇和三酰甘油含量，并損害魚體的肝臟功能。同樣，飼料中脂肪水平過高也會引起肝臟脂肪過量沉積，生長緩慢，抗病和抗應激能力及肌肉品質下降等。研究發(fā)現(xiàn)，黑線鱈（Melanogrammus aeglefinus）[8]、許氏平鲉（Sebastes schlegeli）[9]等多種魚類攝食過多脂肪反而導致生長減緩，蛋白質節(jié)約作用不明顯，甚至浪費飼料蛋白質。因此，適宜的飼料糖脂比對魚類生長、體成分、健康狀況來說至關重要。

鯉魚（Cyprinus carpio）原產亞洲，后引進歐洲、北美以及其他地區(qū)，雜食性，由于其生長快、肉質鮮美而受到廣泛關注。本研究以鯉魚為研究對象，探討不同糖脂比對鯉魚的生長、免疫及抗氧化相關酶活性的影響，為篩選適宜鯉魚生長的飼料糖脂比提供理論依據(jù)。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗魚及飼養(yǎng)管理

試驗鯉魚為天津市換新水產良種場繁殖的同一批魚種，運往天津市寧河縣天祥水產養(yǎng)殖公司，進行消毒處理后，以泡沫浮板搭在大面積混養(yǎng)池塘上構建暫養(yǎng)池，通過拉網(wǎng)形式將暫養(yǎng)池分為15個小沉性網(wǎng)箱（1 m×1 m×2 m）。試驗魚以基礎飼料（蛋白水平為32%）預飼，馴化14 d，待其適應環(huán)境后，選取平均體長（12.31±0.2）cm、平均體重（44.45±1.6）g、體質健壯的1 050尾鯉魚進行試驗，隨機分為5組，設3個重復，每個重復70尾魚。養(yǎng)殖期間，水溫（28±3.1）℃，pH值為7.8±0.2，溶解氧大于5.0 mg/L，日投喂率為體重的6%，每日投喂2次（09：00和15：00），試驗期63 d。

1.2 飼料配制

試驗飼料以魚粉、豆粕、花生粕和棉粕作為蛋白源，糊精作為糖源，豆油作為脂肪源，配制5種糖脂比為5.2、6.9、9.7、14.8和27.8的飼料（分別記作Diet 1、Diet 2、Diet 3、Diet 4、Diet 5）。各飼料原料均通過粉碎機粉碎，過40目分析篩，混合均勻后，使用MUZLM V4型飼料制粒機制成直徑為2.00 mm的沉性顆粒飼料，常溫下晾干，用塑料袋密封包裝，置于-20 ℃冰箱中，備用。飼料組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗飼料配方及營養(yǎng)組成（干重）%

1.3 樣品采集與處理

養(yǎng)殖試驗結束后，禁食48 h，測量所有試驗魚的體長、體重和全長，每箱取20尾魚，靜脈取血后解剖，取其肝胰臟、脾臟、腎臟，之后放于-80 ℃冰箱內保存待測。在指標測定前，將組織（g）與生理鹽水（mL）按1∶9的比例進行勻漿，之后，4 000 r/min離心，取上清液待測。血清待融化后直接測定。本試驗中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、過氧化氫酶（CAT）、谷草轉氨酶（GOT）、谷丙轉氨酶（GPT）、堿性磷酸酶（AKP）的測定均采用試劑盒測定。試劑盒由南京建成生物工程研究所生產。

1.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

增重率（WG，%）＝（Wt－W0）/ W0×100；

特定生長率（SGR，%/d）＝（LNWt－LNW0）× 100 / t；

飼料系數(shù)（FCR）＝Id/（Wt－W0）；

肥滿度（CF，%）＝100×Wt/ Lt3。

式中：Wt和W0—魚的終末體重和初始體重（g）；Lt—魚終末體長；t —試驗天數(shù)；Id—攝食量的干重（g）。

所有數(shù)據(jù)均以平均值±標準差（Means±SD）表示。并用SPSS 13.0進行單因素方差分析，若差異達到顯著水平（P＜0.05），則進行Duncan’s多重比較。

2 結果與分析

2.1 飼料不同糖脂比對鯉魚生長指標的影響

如表2所示，魚體的增重率和特定生長率隨飼料糖脂比的升高呈先上升后下降的趨勢，在糖脂比為6.9時達到最高，且顯著高于其他各組（P＜0.05）；飼料糖脂比為5.2～14.8時，餌料系數(shù)沒有顯著差異（P＞0.05），但均顯著低于投喂糖脂比為27.8的飼料（P＜0.05）。肥滿度則隨糖脂比的升高呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢，投喂糖脂比為6.9的飼料時，魚體的肥滿度顯著低于投喂糖脂比為27.8的飼料（P＜0.05），其余各組之間差異不顯著（P＞0.05）。

表2 飼料不同糖脂比對鯉魚生長的影響

2.2 飼料不同糖脂比對鯉魚抗氧化指標的影響

由表3可知，飼料不同糖脂比顯著影響魚體各組織中CAT、SOD、MDA的活性（P＜0.05）。當糖脂比為6.9時，血清SOD活性達到最高值，顯著高于糖脂比為14.8和27.8的飼料（P＜0.05），與糖脂比為5.2、9.7的飼料沒有顯著差異（P＞0.05）；而肝胰臟和腎臟中SOD活性的最高值卻發(fā)生在糖脂比為14.8的處理組。隨著飼料糖脂比的升高，CAT活性基本呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢，在飼料糖脂比為5.2時，血清CAT活性最高，顯著高于其他各組（P＜0.05），當飼料糖脂比為9.7時，肝胰臟和腎臟的CAT活性則達到最高。飼料糖脂比為9.7時，血清和肝胰臟MDA含量最低，最高值分別為20.32和20.22，發(fā)生在糖脂比為27.8的處理組。

表3 飼料不同糖脂比對鯉魚SOD、MDA、CAT的影響

2.3 飼料不同糖脂比對鯉魚免疫指標的影響

由表4可知，飼料不同糖脂比顯著影響魚體各組織中GOT、GPT、AKP的活性（P＜0.05）。其中血清GOT活性在糖脂比為14.8時達到最低，并顯著低于其他各組（P＜0.05），最高值則出現(xiàn)在糖脂比為27.8的處理組，肝胰臟GOT及GPT活性最低值出現(xiàn)在糖脂比為27.8的處理組，并顯著低于其他各組（P＜0.05），血清GPT活性的最高值出現(xiàn)在糖脂比為14.8的處理組。血清及腎臟AKP活性均在糖脂比為5.2時最低，肝胰臟AKP活性在飼料糖脂比6.9時最低（P＜0.05）。

表4 飼料不同糖脂比對鯉魚GOT、GPT、AKP活性的影響

肝胰臟/U·gprot-1　49.68±0.75b　49.28±0.63b　38.64±0.28c　69.44±0.64a　27.65±1.21d血清/U·L-1　9.02±0.55b　6.60±0.63c　9.01±0.85b　11.42±0.94a　5.86±0.56dGPT 　肝胰臟/U·gprot-1　11.17±0.41a　1.52±0.34c　4.23±0.56c　9.41±0.28b　1.78±0.35d血清/U·（100mL）-1　3.23±0.01d　4.79±0.22c　11.78±0.89a　10.70±0.12b　3.84±0.23cd肝胰臟/U·gprot-1　6.16±0.06c　4.72±0.06d　5.25±0.24d　19.04±0.37a　8.52±0.17bAKP腎臟/U·gprot-1　55.62±1.00d　78.82±4.18c　113.00±1.58a　115.56±2.19a　93.70±2.79b

3 討論

飼料糖脂比為6.9時，鯉魚增重率及特定生長率均顯著高于其他處理組，這表明，若糖和脂肪維持一定的比例，能充分發(fā)揮糖類和脂肪的協(xié)同效應[10]，從而提高魚的生長和飼料利用效率[11]，若糖脂比過高，則會對魚的生長和飼料利用率產生不利影響[12]。王麗娜等[13]研究發(fā)現(xiàn)，當飼料糖脂比適中時，黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）幼魚生長性能最好；何吉祥等[14]研究發(fā)現(xiàn)，對于異育銀鯽（Carassius auratus gibelio）幼魚來說，當飼料蛋白質含量降低時，適宜的糖脂比能夠發(fā)揮其對蛋白質的替代作用，糖或脂肪含量過高會對其生長產生抑制作用。另外，在眼斑擬石首魚（Sciaenops Ocellatus）[15]、革胡子鯰（Clarias gariepinus）[16]以及許氏平鲉[17]、長吻鮠（Leiocassis longirostris Gunther）[18]、瓦氏黃顙魚（Pelteobagrus vachelli）[19]和草魚（Ctenopharyngodon idella）[20]研究中也有類似的發(fā)現(xiàn)。然而，有研究發(fā)現(xiàn)，隨著飼料糖脂比的變化，各處理組生長性能并沒有顯著差異，這可能與養(yǎng)殖對象、養(yǎng)殖環(huán)境、飼料配方及投喂方式等有關[21]。本試驗中，餌料系數(shù)普遍偏高，可能與投喂方式及加工工藝有關，但相比之下，高糖脂比組餌料系數(shù)最高，增重率與特定生長率最低，表明攝入高糖飼料后生長可能會受阻，這與戈賢平[22]在翹嘴紅鲌上（Erythroculter ilishaeformis Bleeker)的研究結果一致。另外，魚體在攝入高糖脂比的飼料后肥滿度增加，表明高糖低脂飼料比低糖高脂飼料更容易促進體內營養(yǎng)物質的積累，攝入的糖類很大一部分可能轉化為脂肪在肝胰臟與腸系膜中沉積。

雖然魚類為低等脊椎動物，但已具備比較完善的免疫系統(tǒng)。AKP是動物代謝過程中重要的調控酶，而GOT和GPT也是最重要的兩種反映肝臟功能的轉氨酶。當機體免疫水平降低或提高時，它們會產生相應的變化并且在營養(yǎng)物質的消化吸收和轉運過程中起重要作用。本試驗中血清GOT活性在糖脂比為14.8時達到最低，并顯著低于其他各組（P＜0.05），肝胰臟GOT活性最低值出現(xiàn)在糖脂比為27.8時。各組織GPT活性在糖脂比為14.8時達到最低，并顯著低于其他各組（P＜0.05）。這與AKP活性檢測的結果基本吻合，血清及腎臟AKP活性均在糖脂比為5.2時最低，肝胰臟AKP活性在糖脂比為6.9、9.7時最低（P＜0.05），而在糖脂比為14.8時達到最高值。表明高糖脂比的飼料會導致肝糖蓄積，引發(fā)魚類肝功能下降。吳凡等[7]研究發(fā)現(xiàn)，當飼料糖水平上升到48%時，奧尼羅非魚幼魚的肝功能會受到損害，血清GOT和GPT活性顯著上升，本試驗結果與之一致；蔡春芳[23]在青魚（Mylopharyngodon pieces)和鯽（Carassius auratus）上的研究也得出了相同結論。

SOD、CAT、MDA是魚體中最重要的抗氧化指標，SOD和CAT能清除體內的超氧化物自由基和過氧化氫。MDA作為脂質過氧化反應的主要代謝產物，可以反映機體內脂質的過氧化程度，其含量的升高實際上是脂質過氧化反應增強，脂質過氧化物增多的表現(xiàn)[24]。本試驗中，SOD活性在飼料糖脂比6.9最高，CAT活性在飼料糖脂比9.7時達到最高，而MDA含量在糖脂比9.7時最低，并且與其他各組差異顯著（P＜0.05），說明適宜的糖脂比添加量可以增強魚體抗氧化酶的活力，減少脂質過氧化物的產生而提高魚體的抗氧化能力。飼料糖脂比過高或過低均會影響魚體的抗氧化能力。本試驗中血清及肝胰臟中MDA含量隨著飼料糖脂比的升高而升高，表明外源的糖和脂肪對細胞脂質過氧化有一定的誘導作用。王朝明等[25]研究發(fā)現(xiàn)，胭脂魚（Myxocyprinus asiaticus）幼魚的適宜脂肪水平為6.62%～7.02%，飼料脂肪含量過高將會影響其抗氧化能力。蔡春芳等[26]研究發(fā)現(xiàn)，青魚可耐受的日糧中糖含量可達30%，一定量的日糧糖可以提高魚體的抗氧化能力。

4 結論

試驗中糖脂比在6.9時，鯉魚生長狀態(tài)最佳。飼料中適宜的糖脂比水平可提高魚體的抗氧化能力，飼料糖脂比為6.9～9.7時，魚體抗氧化能力最高，過高的飼料糖脂比會導致抗氧化能力下降。

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Effects of Different Dietary Carbohydrate-to-lipid Ratio on Growth,Immune Ability and Antioxidant Enzymes Activity of Carp

CHEN Tian-xiang1,QU Mu1,Lü Chun-shuang2,LI Chang-e2,BAI Dong-qing1,SUN Jin-hui1,QIAO Xiu-ting1,CHENG Zhen-yan1,Corresponding Author
（1.Tianjin Key Lab of Aqua-Ecology and Aquaculture,College of Fisheries,Tianjin Agricultural University,Tianjin 300384,China; 2.Animal Husbandry and Fishery Service Center,Wuqing District,Tianjin 300380,China）

Abstract:A feeding trial was conducted to explore the effect of different dietary carbohydrate-to-lipid ratio on growth and immune ability of carp.1 050 carp were randomly divided into 5 groups.Each group has three replicate and each replicate has 70 fish.Five diets were formulated with carbohydrate-to-lipid ratio of 5.2,6.9,9.7,14.8,27.8.The feeding trial lasted for 63 day.Results showed that dietary carbohydrate-to-lipid (CHO/LIP) ratio level remarkably affected the growth performance of carp (P＜0.05).At dietary CHO/LIP ratio of 6.9,the weight gain,special growth ratio got the maximum,while the feed conversion ratio got the minimum.With the increasing of dietary CHO/LIP ratio level,antioxidant capacity of carp first raised and then decreased.At dietary CHO/LIP ratio of 6.9,the activity of superoxide dismutase (SOD) in serum reached the highest level,which was significantly higher than that in fish fed diet with CHO/LIP ratio of 14.8 and 27.8.While the malondialdehyde (MDA) content in serum and hepatopancreas got the minimum when the dietary CHO/LIP ratio was 9.7.Catalase (CAT) activity in serum significantly decreased with the increasing dietary CHO/LIP ratio.At the same time,the glutamic-oxaloacetic transaminase (GOT) and glutamic-pyruvic transaminase (GPT) activity got the minimum at 27.8,and the alkaline phosphatase (AKP) first raised and then went down.Considered the growth and antioxidant enzymes activity,the optimal dietary CHO/LIP ratio of carp was 6.9.

Key words：carp; carbohydrate-to-lipid ratio; growth; immunity; antioxidant

通信作者：程鎮(zhèn)燕（1981-），女，山東泰安人，副教授，博士，主要從事水產動物營養(yǎng)與飼料的研究。E-mail：chengzhenyan2005@126.com。

作者簡介：陳天翔（1990-），男，浙江寧波人，碩士在讀，主要從事水產動物營養(yǎng)與飼料的研究。E-mail：61832344@qq.com。曲木（1990-），女，山東煙臺人，碩士在讀，主要從事水產動物營養(yǎng)與飼料的研究。E-mail：310901543@qq.com。

基金項目：天津市大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目“飼料不同糖脂比對鯉魚生長、免疫及抗氧化相關酶活性的影響”（201410061168）；天津市科技支撐計劃項目“漁用低氮環(huán)保飼料的研究與應用”（13ZCZDNC00900）；天津市應用基礎與前沿技術研究計劃項目“鯉魚糖代謝關鍵酶的基因表達及調控機理”（14JCQNJC15100）；天津市高等學校創(chuàng)新團隊資助項目“現(xiàn)代水產生態(tài)健康養(yǎng)殖”（TD12-5018）；天津市高等學校“中青年骨干創(chuàng)新人才培養(yǎng)計劃”資助項目（無編號）

收稿日期：2015-07-30

文章編號：1008-5394（2016）01-0005-05

中圖分類號：S963.71

文獻標識碼：A