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小白菊內(nèi)酯干預(yù)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的臨床觀察

2016-05-17 14:17:12宋培燕劉倩平章志福魏濤
中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥 2016年9期
關(guān)鍵詞:干預(yù)觀察

宋培燕 劉倩平 章志?!∥簼?/p>

【摘要】 目的 觀察小白菊內(nèi)酯干預(yù)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的臨床效果。方法 30例急性髓系白血病患者, 隨機(jī)分為對(duì)照組和觀察組, 各15例。對(duì)照組僅加白血病干細(xì)胞, 觀察組加用小白菊內(nèi)酯和白血病干細(xì)胞。分析小白菊內(nèi)酯對(duì)患者骨髓基質(zhì)細(xì)胞的干預(yù)效果。結(jié)果 觀察組白血病干細(xì)胞對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的黏附率(52.14±11.32)%明顯低于對(duì)照組的(77.52±19.14)%;觀察組患者使用小白菊內(nèi)酯對(duì)白血病干細(xì)胞黏附骨髓基質(zhì)細(xì)胞阻斷作用(66.7%)明顯高于對(duì)照組患者(20.0%);差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 小白菊內(nèi)酯對(duì)白血病干細(xì)胞黏附骨髓基質(zhì)細(xì)胞有阻斷作用, 從而在患者發(fā)病早期起到阻擋白血病干細(xì)胞的更新和分化的作用, 對(duì)白血病新的治療藥物研究起到重要的作用。

【關(guān)鍵詞】 小白菊內(nèi)酯;骨髓基質(zhì)細(xì)胞;干預(yù);觀察

DOI:10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.09.024

骨髓基質(zhì)細(xì)胞(marrow stromal cell, MSC)是存在骨髓中的多能干細(xì)胞, 是機(jī)體造血環(huán)境中的主要成分, 由纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等細(xì)胞組成, 能夠分泌出細(xì)胞因子、黏附分子、細(xì)胞外基質(zhì)等物質(zhì), 進(jìn)而形成了復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng), 在機(jī)體細(xì)胞之間的信號(hào)傳遞中起到重要的作用[1]。在白血病患者的骨髓環(huán)境中, 當(dāng)白血病干細(xì)胞(leukemic stem cell, LSC)表達(dá)黏附分子異常時(shí), 影響到骨髓基質(zhì)細(xì)胞對(duì)白血病干細(xì)胞的黏附和遷移, 進(jìn)而對(duì)白血病細(xì)胞起到保護(hù)作用[2]。因此, 白血病的治療可以從骨髓微環(huán)境與白血病細(xì)胞之間的相互作用入手。小白菊內(nèi)酯(parthenolide, PTL)是植物藥野生菊的有效活性成分, 有研究顯示其具有體外抗腫瘤的作用, 本研究本院經(jīng)病史、臨床生化檢查、骨髓穿刺等檢查確診的急性髓系白血病患者30例作為研究對(duì)象, 根據(jù)是否使用小白菊內(nèi)酯分為兩組, 觀察其干預(yù)效果?,F(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取在本院2014年6月~2015年6月收治的經(jīng)病史、臨床生化檢查、骨髓穿刺等檢查確診的30例急性髓系白血病患者作為研究對(duì)象, 所有患者均知情同意參與研究并簽署知情研究同意書(shū)。將患者隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組, 各15例。觀察組中男8例, 女7例, 年齡17~36歲, 平均年齡(26.8±4.5)歲。對(duì)照組中男9例, 女6例, 年齡18~38歲, 平均年齡(30.4±3.8)歲。兩組患者性別、年齡等一般資料比較, 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05), 具有可比性。

1. 2 方法 兩組患者均進(jìn)行骨髓基質(zhì)細(xì)胞分離:抽取患者5 ml骨髓液放入肝素抗凝無(wú)菌管中, 用吸管將骨髓液吹打混勻, 過(guò)程中要輕, 然后吸取0.5 ml放入經(jīng)15 Gy的C060照射的MSC支持層培養(yǎng)體系中培養(yǎng)6 d, 培養(yǎng)的環(huán)境模擬骨髓微環(huán)境。此后, 根據(jù)細(xì)胞的生長(zhǎng)情況換液。在分離結(jié)束后, 對(duì)照組患者的分離骨髓基質(zhì)細(xì)胞中不添加小白菊內(nèi)酯, 直接添加白血病干細(xì)胞, 觀察組患者的骨髓基質(zhì)細(xì)胞中添加小白菊內(nèi)酯和白血病干細(xì)胞。用顯微鏡觀察細(xì)胞在體外的生長(zhǎng)、存活、形態(tài)的改變, 在培養(yǎng)2 h、1 d、3 d、6 d時(shí)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)兩組白血病干細(xì)胞的凋亡率和細(xì)胞周期, 用HE染色方法觀察白血病干細(xì)胞與骨髓基質(zhì)細(xì)胞黏附的細(xì)胞數(shù), 用MTT比色法(MTT方法)檢測(cè)白血病干細(xì)胞的增殖能力, 用遷移實(shí)驗(yàn)了解骨髓基質(zhì)細(xì)胞對(duì)白血病干細(xì)胞的遷移作用, 白血病干細(xì)胞上各種黏附分子的表達(dá)、反應(yīng)氧和線粒體膜電位的水平。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示, 采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

研究結(jié)果顯示, 觀察組患者白血病干細(xì)胞對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的黏附率明顯低于對(duì)照組;觀察組患者使用小白菊內(nèi)酯對(duì)白血病干細(xì)胞黏附骨髓基質(zhì)細(xì)胞阻斷作用(66.7%)明顯高于對(duì)照組患者(20.0%), 兩組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

3 討論

小白菊內(nèi)酯是從艾葉菊屬的野生菊中的一種提取物, 主要成分是半萜烯內(nèi)酯, 在我國(guó)的藥用植物的樹(shù)皮、樹(shù)枝、木部等部位均能提取出小白菊內(nèi)酯[3, 4]。由于小白菊內(nèi)酯具有高生物學(xué)活性, 與細(xì)胞的增殖、凋亡、信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞呼吸等有一定的關(guān)系, 因此, 在民間用藥中, 常被用在偏頭痛、眩暈、關(guān)節(jié)炎、月經(jīng)不調(diào)、產(chǎn)程阻滯等治療中。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步, 近年來(lái)發(fā)現(xiàn)小白菊內(nèi)酯具有抗腫瘤的特性, 能夠誘導(dǎo)多種腫瘤細(xì)胞的凋亡, 并且對(duì)抗腫瘤藥物有增敏的效果, 特別是能夠誘導(dǎo)急性骨髓性白血病細(xì)胞凋亡, 選擇性的殺傷白血病干細(xì)胞, 對(duì)正常的造血干細(xì)胞不會(huì)產(chǎn)生較大的影響。

白血病干細(xì)胞是白血病發(fā)生、發(fā)展的根源, 只有清除白血病干細(xì)胞才有可能根治白血病, 達(dá)到緩解、康復(fù)的目的。但是白血病干細(xì)胞擁有自我更新、多向分化和無(wú)限增殖能力的生物學(xué)特性, 容易在臨床治療過(guò)程中產(chǎn)生的耐藥性和復(fù)發(fā)率, 為臨床治療帶來(lái)了一定的困難性。骨髓微環(huán)境對(duì)白血病干細(xì)胞的生存和發(fā)展起到調(diào)節(jié)的作用, 骨髓微環(huán)境是機(jī)體造血細(xì)胞的“土壤”, 在正常情況下, 由于其內(nèi)部的復(fù)雜系統(tǒng)使造血干細(xì)胞處于靜止的狀態(tài), 維持白血病干細(xì)胞自我更新的微小環(huán)境。但當(dāng)白血病細(xì)胞遺傳的穩(wěn)定性和微環(huán)境發(fā)生變化時(shí), 白血病干細(xì)胞的生態(tài)地位發(fā)生了改變, 導(dǎo)致白血病的發(fā)生。當(dāng)造血微環(huán)境處于病態(tài)的狀態(tài)時(shí), 白血病干細(xì)胞與骨髓基質(zhì)細(xì)胞發(fā)生相互作用, 使白血病干細(xì)胞突破了抗腫瘤藥物產(chǎn)生的微環(huán)境屏障, 產(chǎn)生了抗藥性。有研究認(rèn)為[5], 基體的造血干細(xì)胞和白血病干細(xì)胞的自我更新過(guò)程就有一定的相似性, 如表達(dá)黏附分子、細(xì)胞間黏附分子參與機(jī)體內(nèi)多種細(xì)胞信號(hào)傳輸, 并介導(dǎo)細(xì)胞之間、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間的黏附。本研究采用體外實(shí)驗(yàn)的方式, 對(duì)培養(yǎng)的骨髓基質(zhì)細(xì)胞中觀察組添加白血病干細(xì)胞和小白菊內(nèi)酯, 對(duì)照組僅添加白血病干細(xì)胞, 結(jié)果顯示, 小白菊內(nèi)酯對(duì)白血病干細(xì)胞黏附骨髓基質(zhì)細(xì)胞起到阻斷的作用。

綜上所述, 小白菊內(nèi)酯能夠干預(yù)骨髓基質(zhì)細(xì)胞, 對(duì)白血病干細(xì)胞的更新和分化起到阻斷作用, 對(duì)白血病新型治療藥物的研究具有重要的作用, 值得在臨床中進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

[1] 何玉嬋, 周思瑤, 唐榮芳, 等.小白菊內(nèi)酯干預(yù)骨髓基質(zhì)細(xì)胞對(duì)Jurkat細(xì)胞黏附作用的影響及其機(jī)制研究.中國(guó)全科醫(yī)學(xué), 2015, 18(5):535-539.

[2] 白宇, 雷永虹, 李瑞乾, 等.小白菊內(nèi)酯在人膀胱癌T24細(xì)胞中抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用.昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2014, 35(7):5-8.

[3] 張輝, 陶建峰, 王愛(ài)軍, 等.小白菊內(nèi)酯對(duì)帕金森病MPTP模型小鼠抗炎作用的研究.中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志, 2015, 32(2):158-160.

[4] 王茜, 張輝, 劉名, 等.小白菊內(nèi)酯對(duì)帕金森病小鼠模型黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的保護(hù)作用.神經(jīng)解剖學(xué)雜志, 2014, 30(3): 357-362.

[5] 章志福, 湯禮賓, 劉倩平, 等.小白菊內(nèi)酯對(duì)白血病干細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)作用及分子機(jī)制探究.海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2015, 21(7):888-890.

[收稿日期:2015-11-09]

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