滕曉梅

(徐州市第一人民醫(yī)院檢驗科，江蘇徐州 221002)

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結(jié)核感染T細(xì)胞、結(jié)核抗體、抗酸染色3種方法的臨床評價

滕曉梅

(徐州市第一人民醫(yī)院檢驗科，江蘇徐州 221002)

摘要:目的評價結(jié)核感染T細(xì)胞檢測、結(jié)核抗體、抗酸染色3種方法檢測對結(jié)核病診斷的價值。方法對懷疑結(jié)核的患者標(biāo)本進(jìn)行抗酸染色的檢測、結(jié)核感染T細(xì)胞檢測、結(jié)核抗體的檢測，最后對3種方法的結(jié)果對結(jié)核病的診斷效果進(jìn)行判斷。結(jié)果本研究共納入80例患者，抗酸染色陽性的24例，結(jié)核感染T細(xì)胞檢測四項結(jié)果均陽性的58例，結(jié)核抗體陽性的65例，最終確診結(jié)核患者為62例。結(jié)論3種方法中抗酸染色作為一個傳統(tǒng)的方法不可丟棄，抗酸染色的方法最可靠，但是陽性率偏低；結(jié)核感染T細(xì)胞檢測容易出現(xiàn)假陰性，此方法檢測時間漫長，但是是一種具有較高敏感性和特異性的檢測結(jié)核感染的技術(shù)；結(jié)核抗體檢測容易出現(xiàn)假陽性(打過卡介苗的患者也可以出現(xiàn)陽性)，也是一種不可缺少的輔助診斷方法。在對結(jié)核病的診斷過程中，三者進(jìn)行聯(lián)合檢測可以增加了對結(jié)核病診斷的正確率，減少假陽性率與假陰性率。

關(guān)鍵詞:結(jié)核感染T細(xì)胞檢測；結(jié)核抗體；抗酸染色；結(jié)核病

結(jié)核病是一種古老的疾病，卡介苗應(yīng)用有效地遏制了結(jié)核病的發(fā)展。但是，近幾年結(jié)核病的發(fā)病率又有增加的趨勢，這和人口的流動有很大關(guān)系。盡早地確診和治療能夠有效地預(yù)防結(jié)核病的傳播，及時地發(fā)現(xiàn)結(jié)核病尤為重要。這就對檢測手段提出了一定的要求，既要準(zhǔn)確又要快速，而且損傷小、成本小。筆者所在的實驗室能對結(jié)核病做出輔助診斷并能對所開展的項目進(jìn)行研究。

1資料與方法

1.1一般資料2013年至2014年本院住院并確診為結(jié)核病的患者。

1.2方法結(jié)核感染T細(xì)胞、結(jié)核抗體檢測及抗酸染色3種檢測嚴(yán)格按照SOP文件進(jìn)行操作。(1)結(jié)核感染T細(xì)胞檢測：采集不少于4 mL靜脈血于肝素抗凝管中，2 h內(nèi)將全血顛倒混勻每分鐘3～5次倒入標(biāo)記為“T”、“N”、“P”三種培養(yǎng)管中，再混勻5次后37 ℃培養(yǎng)(22±2)h，培養(yǎng)后3 000～5 000 r/min離心10 min，取上清液加入待測樣品孔中，混勻封板37 ℃ 60 min后加酶標(biāo)試劑50 μL?；靹蚍獍?7 ℃放置60 min，洗板5遍，加顯色劑A、B液各50 μL，37 ℃避光顯色15 min，加終止液震蕩混勻，10 min后450 nm檢測。(2)結(jié)核抗體：將待測血清2滴加入檢測孔中，水平放置，15 min內(nèi)觀察結(jié)果，超過15 min判斷結(jié)果無效。(3)抗酸染色：采用熱染法，將合格標(biāo)本涂于玻片上，自然干燥后經(jīng)火焰固定，滴加石碳酸復(fù)紅，用微火加熱保持染液冒蒸汽約5 min。冷卻后水洗，滴加酸性酒精脫色至無色，水洗。滴加亞甲藍(lán)染色約1 min，水洗鏡檢，查找抗酸桿菌。

2結(jié)果

3種檢測方法各有優(yōu)缺點，陽性率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。3種檢測方法對兩組臨床標(biāo)本檢測結(jié)果見表1。

表1　　3種檢測方法及聯(lián)合檢測對80例臨床標(biāo)本檢測

3討論

結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌感染引起的一種傳染性疾病，結(jié)核分枝桿菌屬于放線菌目分枝桿菌科分枝桿菌屬，它可侵犯全身各器官。結(jié)核感染T細(xì)胞檢測的原理為全血標(biāo)本經(jīng)結(jié)核分枝桿菌特異性抗原體外刺激后產(chǎn)生的γ干擾素(IFN-γ)，根據(jù)IFN-γ的濃度判斷是否具有針對結(jié)核分枝桿菌特異性的T細(xì)胞免疫反應(yīng)。結(jié)核抗體檢測是用基因工程重組的結(jié)核桿菌抗原去檢測樣本中的抗體?？顾崛旧珓t用染色法去檢測患者標(biāo)本(痰、胸腹水、尿等)是否存在結(jié)核桿菌。3種方法各有缺陷和優(yōu)點，結(jié)核感染T細(xì)胞的檢測局限性易出現(xiàn)假陰性，例如培養(yǎng)過程中培養(yǎng)細(xì)胞易受損或者受試者本身如果免疫缺陷都可以出現(xiàn)假陰性；如果以往感染過結(jié)核或者注射過卡介苗結(jié)核抗體可能陽性或者強陽性；患者在排菌期抗酸染色陽性率很高，如果不在排菌期也能查到結(jié)核桿菌但是易被忽略。3種方法損傷性最小的為抗酸染色，準(zhǔn)確率最高的為抗酸染色，費用最少的也為抗酸染色，操作最復(fù)雜的為結(jié)核感染T細(xì)胞的檢測。但是三者結(jié)合可以提高結(jié)核臨床診斷的準(zhǔn)確率。

參考文獻(xiàn)

[1]袁麗娜，黨霞，史慧敏，等．不同檢測方法對結(jié)核病的診斷價值[J]．鄭州大學(xué)學(xué)報:醫(yī)學(xué)版，2011，46(6)：945-947．

[2]費兵，殷勇，吳真，等．3種檢測方法診斷喉結(jié)核42例效果評價[J]．交通醫(yī)學(xué)，2014，28(1)：79-80．

[3]吳海露，張振玉，袁捷，等．結(jié)核感染T細(xì)胞斑點試驗在結(jié)核性腹膜炎診斷中的臨床應(yīng)用[J]．臨床薈萃，2012，27(23)：2046-2049．

[4]Lalvani A.Diagnosing tuberculosis infection in the 21st century:new tools to tackle an old enemy[J].Chest,2007,131(6):1898-1906.

[5]左向華，陳水平，宋世平，等．γ-干擾素釋放分析A.TB試驗在臨床診斷結(jié)核病中的價值[J]．臨床誤診誤治，2014，27(6)：44-47．

(收稿日期：2016-01-19)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.08.061

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

文章編號：1673-4130(2016)08-1149-02