劉書敏,馮小娟

(江蘇省連云港市東方醫(yī)院檢驗科，江蘇連云港 222042)

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·臨床研究·

246株尿培養(yǎng)病原菌的分布與耐藥性分析

劉書敏,馮小娟

(江蘇省連云港市東方醫(yī)院檢驗科，江蘇連云港 222042)

摘要:目的分析該院2013年1月至2014年12月門診和住院泌尿系統(tǒng)感染患者尿培養(yǎng)中病原菌的分布及耐藥情況，為臨床合理選用抗菌藥物提供依據(jù)。方法采用Microscan auto SCAN-4 細菌鑒定和藥敏分析系統(tǒng)進行菌株鑒定和藥敏試驗，應用WHONET 5．5軟件統(tǒng)計分析病原菌的分布及耐藥情況。結(jié)果594份中段尿培養(yǎng)標本共分離病原菌246株，陽性率為41.41%。其中革蘭陰性菌157株(63.82%)，革蘭陽性菌67株(27.24%)，真菌22株(8.94%)。分離的革蘭陰性菌中,以大腸埃希菌最為常見；而在革蘭陽性菌中以腸球菌屬為主，屎腸球菌最常見；真菌感染的數(shù)量亦明顯增加。結(jié)論革蘭陰性菌仍是泌尿系感染的主要病原菌，臨床醫(yī)生應根據(jù)尿培養(yǎng)藥敏結(jié)果合理使用抗菌藥物，減少耐藥菌株產(chǎn)生。

關(guān)鍵詞:泌尿系統(tǒng)；尿培養(yǎng)；病原菌；藥敏試驗；耐藥分析

泌尿系統(tǒng)感染是臨床最常見的感染性疾病之一。而尿培養(yǎng)是診斷泌尿系感染的最直接手段，隨著現(xiàn)代醫(yī)學的快速發(fā)展，抗菌藥物的廣泛應用，耐藥菌株的不斷增多，使許多病原菌的耐藥性越來越高，給臨床治療帶來困難[1]。為掌握本院泌尿系統(tǒng)感染病原菌的分布及耐藥情況，為臨床醫(yī)生合理選用抗菌藥物提供依據(jù)，研究者對本院2013年1月1日至2014年12月31日送檢的594份尿標本進行培養(yǎng)、鑒定和耐藥分析?，F(xiàn)報道如下。

1材料與方法

1.1標本來源收集本院2013年1月1日至2014年12月31日門診和住院泌尿系統(tǒng)感染患者送檢的尿培養(yǎng)標本，包括中段尿和導尿等共594份，分離到病原菌246株。

1.2儀器與試劑應用Microscan auto SCAN-4 細菌鑒定分析儀進行菌株鑒定及藥敏試驗(PC33、NC50細菌鑒定藥敏板及配套試劑均購自美國德靈公司)。血平板、麥康凱平板以及念珠菌顯色平板均購自鄭州安圖生物工程有限公司。常用質(zhì)控菌株大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、金黃色葡萄球菌ATCCATCC25923、糞腸球菌ATCC29212,均購自衛(wèi)生部藥品鑒定所。藥敏紙片和藥敏培養(yǎng)基MH瓊脂均購自杭州天和生物試劑有限公司。

1.3方法按全國臨床檢驗操作規(guī)程留取清潔中段尿標本,采用10μL定量接種的方法，接種于血瓊脂平板、麥康凱平板以及念珠菌顯色平板上。置5%～10% CO235 ℃培養(yǎng)18～24 h，觀察菌落生長情況，尿培養(yǎng)陽性的標準是革蘭陰性菌大于105cfu/mL，革蘭陽性菌大于104cfu/mL，同時去除相同患者重復分離的菌株，細菌培養(yǎng)及鑒定均按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進行[2]。

1.4細菌鑒定及藥敏試驗應用Microscan auto SCAN-4細菌鑒定分析儀進行菌株鑒定及藥敏試驗，嚴格按Microscan auto SCAN-4 細菌鑒定分析儀操作手冊進行操作。陽性菌株進行革蘭染色、觸酶及氧化酶試驗。觸酶陽性的革蘭陽性菌接種PC33鑒定藥敏板，革蘭陰性菌接種NC50鑒定藥敏板。35 ℃非CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16～24 h。滴加相應試劑后，放入AS-4細菌鑒定藥敏分析儀判讀結(jié)果。

1.5超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的測定依據(jù)2013年CLSI M100 S23推薦的方法及標準進行判讀,用頭孢噻肟(30 μg)和頭孢噻肟/克拉維酸(30/10 μg)、頭孢他啶(30 μg)和頭孢他啶/克拉維酸(30/10 μg)雙紙片確證法。結(jié)果以2個藥物中有任何一個，在加克拉維酸后，抑菌環(huán)直徑與不加克拉維酸的抑菌環(huán)相比，增大值大于或等于5 mm時，判定為產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)。

1.6統(tǒng)計學處理用世界衛(wèi)生組織細菌耐藥性監(jiān)測中心推薦的WHONET5.6軟件進行菌株及耐藥性統(tǒng)計。

2結(jié)果

2.1菌株構(gòu)成594份中段尿培養(yǎng)標本共分離病原菌246株，陽性率為41.41%，與邵敏偉等[3]報道的42.8%相接近。其中檢出革蘭陰性菌157株(63.82%)，革蘭陽性菌67株(27.24%)，真菌22株(8.94%)。革蘭陰性菌中,以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌最為多見；而在革蘭陽性菌中以屎腸球菌和糞腸球菌為主，真菌以白色念珠菌和光滑念珠菌多見。泌尿道病原菌檢出前三位的細菌分別為大腸埃希菌，肺炎克雷伯菌，屎腸球菌，具體比率見表1。

表1　246株病原菌種類分布

2.2病原菌對抗菌藥物的耐藥率分離率前5位的革蘭陰性菌和革蘭陽性菌細菌藥敏試驗結(jié)果見表2。

表2　分離率在前5位的革蘭陰性菌和革蘭陽性菌對常用抗菌藥物的耐藥率(%)

續(xù)表2　分離率在前5位的革蘭陰性菌和革蘭陽性菌對常用抗菌藥物的耐藥率(%)

-：無數(shù)據(jù)。

2.3產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)細菌的檢出率共檢出ESBLs細菌61株，大腸埃希菌、肺炎克雷伯和變形桿菌中分別檢出ESBLs細菌57株、4株和0株，檢出率分別為60.0%、23.5%和0.0%。

3討論

泌尿系感染是常見的感染性疾病之一，近年來，隨著抗菌藥物的發(fā)展，以及抗菌藥物的廣泛應用，泌尿系感染檢出的耐藥菌株也越來越多，發(fā)病率也明顯增高，其發(fā)病率僅次于呼吸道感染，占醫(yī)院感染的第2位[4]。

泌尿系感染的主要病原菌是革蘭陰性菌，尤以大腸埃希菌為最多。本次研究表明， 594份中段尿培養(yǎng)標本共分離病原菌246株，陽性率為41.41%。其中革蘭陰性菌157株(63.82%)，革蘭陽性菌67株(27.24%)，真菌22株(8.94%)，與文獻報道相接近[5]。而檢出的革蘭陰性菌中,以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌最為多見；而在革蘭陽性菌中以屎腸球菌和糞腸球菌為主，真菌以白色念珠菌和光滑念珠菌多見。表1、2顯示，本次分析的尿培養(yǎng)標本中共分離出95株大腸埃希菌，居各類病原菌的首位，其中產(chǎn)ESBL菌株者占60%。而產(chǎn)ESBL菌株對大多數(shù)抗菌藥物的耐藥性均高于非產(chǎn)ESBLs菌株。由表2可見，無論是產(chǎn)ESBLs還是非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌及變形桿菌，它們對碳青霉烯類都高度敏感，敏感率均為100.0%，表明碳青酶烯類仍是治療腸桿菌科細菌最有效的抗菌藥物[6]。含酶抑制劑的抗菌藥物對大腸埃希菌也較敏感，耐藥率在15.0%左右。其次為阿米卡星和頭孢西丁，耐藥率分別在16.3%和18.6%。本次監(jiān)測結(jié)果顯示，大腸埃希菌對環(huán)丙沙星和左氧氟沙星的耐藥率分別達68.7%和63.8%，高于同類文獻報道的53.6%和52.4%[7]，可能與喹諾酮類藥物是廣譜抗菌藥物，因其不良反應低，使用方便，臨床醫(yī)生在治療時使用頻率很高，不少患者也將其視作抗菌藥物中的“非處方藥”來使用有關(guān)，致使其耐藥性呈上升趨勢。因此，臨床醫(yī)生在治療大腸埃希菌引起的尿路感染時應慎重且不宜將喹諾酮類藥物用作經(jīng)驗用藥，應根據(jù)尿培養(yǎng)的藥敏結(jié)果合理使用抗菌藥物。銅綠假單胞菌對多數(shù)抗菌藥物的耐藥率相對較低，多在20.0%～30.0%。本次監(jiān)測顯示在尿路感染病原菌中占第2位的是屎腸球菌，占12.26%，表明屎腸球菌是引起本地區(qū)尿路感染革蘭陽性菌的主要細菌。屎腸球菌對青霉素類、喹諾酮類、紅霉素類的耐藥率均大于88.0%，喹奴普汀/達福普汀的耐藥率為10.3%，呋喃妥因的耐藥率為24.0%，未檢出耐萬古霉素、達托霉素和利奈唑胺的腸球菌株，提示這3種藥物是治療泌尿系腸球菌感染的有效藥物。但因呋喃妥因的價格低廉且敏感性高的特點，經(jīng)驗用藥可作為首選藥物[8]。此外，本次檢出真菌22株，占8.94%，這與長期大量使用抗菌藥物，導致機體正常菌群失調(diào)有關(guān)。因此對免疫力低下的患者，和使用廣譜、高效抗菌藥物的患者應注意是否出現(xiàn)真菌引起的二重感染。

綜上所述，本地區(qū)泌尿系感染病原菌以大腸埃希菌和屎腸球菌為主，且耐藥性已相當嚴重，臨床醫(yī)生在對泌尿系感染患者使用抗菌藥物治療前，應及時做尿細菌培養(yǎng)鑒定和藥物敏感試驗，根據(jù)藥敏結(jié)果合理選用抗菌藥物，以達到良好的治療效果和減少耐藥菌株的產(chǎn)生。

參考文獻

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[3]邵敏偉,梁艷,周庭銀.2 991份中段尿培養(yǎng)病原菌種類分布與耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志,2009,19(15):2044-2047.

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[8]孟祥博,劉光標,陳麗娜,等.腦卒中住院康復患者尿路感染病原菌的分布及耐藥性[J].中國康復理論與實踐,2011,17(10):993-996.

(收稿日期：2015-12-18)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.09.060

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)09-1282-04