張航 符改梅 張婷

大腸癌EGFR、HER-2、VEGF表達及對靶向治療的指導作用

張航 符改梅 張婷

目的 通過實驗探討大腸癌中表皮生長因子受體（EGFR）、人表皮生長因子受體-2（HER-2）以及血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）表達，旨在為靶向治療提供理論指導。方法 選取大腸癌患者36例，取腫瘤組織，經(jīng)處理行PV-9000二步法免疫組化法檢測，觀察大腸癌腫瘤組織中EGFR、HER-2、VEGF的表達，同時分析與其余病理組織的關系。結果 EGFR陽性率為58.33%，HER-2陽性率為66.67%，VEGF陽性率為58.33%；EGFR、HER-2、VEGF與腫瘤大小、侵襲深度以及淋巴結轉(zhuǎn)移表現(xiàn)為密切相關。結論 EGFR、HER-2、VEGF的表達與大腸癌的侵襲、生長、轉(zhuǎn)移都有較大關聯(lián)，故通過三者的聯(lián)合篩查更利于高?；颊叩脑缙谂袛?，同時還可為靶向治療提供用藥指導。

大腸癌；EGFR；HER-2；VEGF；表達

大腸癌是當前臨床中最常見的一種消化系統(tǒng)惡性腫瘤，盡管關于大腸癌的治療方法非常多，但仍然無法對其死亡率和發(fā)病率進行有效的控制，且仍然表現(xiàn)為逐年攀升[1]。就當前所掌握的情況來看，腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移是導致大腸癌患者死亡的主要因素。截至目前為止，臨床中并無關于大腸癌轉(zhuǎn)移的預防方法。有研究報道表示[2]，表皮生長因子受體（EGFR）、人表皮生長因子受體-2（HER-2）以及血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）的表達與大腸癌的轉(zhuǎn)移和腫瘤的侵襲有著非常密切的關聯(lián)。此外，關于3種分子的靶向治療藥物已成功研制，并被用于臨床試驗中[3]。但關于三者的綜合研究資料卻非常少，鑒于此，本文通過實驗對大腸癌中EGFR、HER-2、VEGF表達進行分析，旨在為靶向治療提供理論指導。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取陜西省寶雞市金臺醫(yī)院2013年1月～2014年12月大腸癌根治術患者中選取36例，切取腫瘤組織，行石蠟包埋和甲醛固定，同時性HE染色組織學確診。所有患者均未接受放化療治療。其中女17例，男19例，年齡35～75歲，平均年齡（67.34±13.31）歲，腫瘤大小2.2～15.0cm，平均（5.02±2.84）cm；經(jīng)Dukes分期，結果顯示為6例D期，7例C期，17例B期，6例A期。

1.2 方法 取病理組織5μm厚切片，運用兔抗人VEGF單克隆抗體、兔抗人EGFR單克隆抗體、兔抗人GER-2單克隆抗體。通過PV-9000二步法免疫組化法進行測試，試劑盒購自北京中杉公司，且操作均嚴格按照試劑盒要求來實施。每組實驗均同時設置2組，分別為陰性對照組和陽性對著組，同時選用PBS替代一抗來作為陰性對照組，而針對已知的陽性切片則將其作為陽性對照組。

1.3 判斷標準[4]HER-2定位在細胞漿、EGFR定位在細胞膜和細胞漿、VEGF定位在細胞膜。EGFR與VEGF均根據(jù)陽性細胞數(shù)以及染色強度來進行計算，再根據(jù)得分作為其判斷依據(jù)。陽性細胞數(shù)評分標準：4分（≧75%）；3分（51%～74%）；2分（26%～50%）；1分（≦25%）；染色強度評分標準：3分（棕褐色）；2分（棕黃色）；1分（淡棕色）；綜合評分標準：6～7分（+++）；4～5分（++）；2～3分（+）；0～1分（-）。

2 結果

2.1 EGFR、HER-2、VEGF在大腸癌腫瘤組織中的表達 HER-2主要在胞膜上表達，并主要呈現(xiàn)為棕褐色顆粒狀；EGFR主要在細胞漿和胞膜上表達，且呈現(xiàn)為棕黃色細顆粒；VEGF同樣在胞膜上表達，且呈現(xiàn)為棕褐色顆粒狀。腫瘤的間質(zhì)均未著色。另根據(jù)陽性結果顯示，EGFR陽性患者21例，陽性率為58.33%；HER-2陽性患者24例，陽性率為66.67%；VEGF陽性患者21例，陽性率為58.33%。

2.2 EGFR、HER-2、VEGF表達與病理特點的關系EGFR、HER-2、VEGF與腫瘤大小、侵襲深度以及淋巴結轉(zhuǎn)移表現(xiàn)為較大關聯(lián)。見表1。

表1 EGFR、HER-2、VEGF表達與病理特點的關系（n=36）

3 討論

EGFR是一種原癌基因HER-1的產(chǎn)物，屬于HER/crbB非常重要的成員，在各種重要細胞信號通路的激活中起到了決定性作用[5]。HER-2與EGFR相同，均屬于HER/crbB的成員之一，并且兩者的同源性達到了50%以上，這使得它們的功能和結構都非常相似，其主要對細胞生長分化進行調(diào)節(jié)[6]。VEGF屬于血管內(nèi)皮細胞刺激因子，具有較高的特異性，有研究表示，VEGF在多種腫瘤中均有不同的表達，并且與預后有著較大的關聯(lián)性[7]。根據(jù)本研究結果來看，EGFR陽性率為58.33%，HER-2陽性率為66.67%，VEGF陽性率為58.33%。這表明EGFR、HER-2、VEGF的測定可謂分子靶向治療提供用藥方向。

本研究認為通過對EGFR、HER-2、VEGF進行聯(lián)合檢測，可有效提高高危患者的篩查，同時還可作為大腸癌患者預后效果的判斷標準。而關于大腸癌的靶向治療，本研究認為還需要解決以下幾點問題：（1）分子的生物學篩查問題。迄今為止，在文獻報道和臨床研究中，多運用的是免疫組化法來實現(xiàn)對EGFR、HER-2、VEGF的測定；這種方式極易因抗體實際的操作水平和質(zhì)量等因素受到影響，同時無法進行有效的定量檢測，為此，我們需要進一步研究。（2）對靶向治療的用藥劑量和用藥時機進行確定[8]。（3）進一步了解EGFR、HER-2、VEGF與靶向治療藥物之間的關系。

綜上所述，伴隨著對大腸癌的深入了解，EGFR、HER-2、VEGF的測定有助于提高篩選率，同時也是靶向藥物治療的重要發(fā)展方向。

[1] 李文,趙峰.EGFR、VEGF和HER-2在大腸癌中的表達及其臨床意義[J].新疆醫(yī)科大學學報，2012,35(6):793-797.

[2] 徐建國,張成武.大腸癌肝轉(zhuǎn)移的分子靶向治療進展[J].腫瘤基礎與臨床,2012,25(5):458-460.

[3] 唐武平.針對Survivin靶向治療大腸癌的研究[J].中外醫(yī)療, 2012,31(35):103-104.

[4] 李輝,張靜，湯堅強,等.熱療聯(lián)合組織因子靶向治療對人大腸癌細胞增殖及凋亡的影響[J].中華臨床醫(yī)師雜志(電子版), 2012,6(8):2103-2106.

[5] 盛莉莉,吉兆寧.大腸癌的分子靶向治療[J].中國臨床藥理學與治療學,2013,18(6):715-720.

[6] 夏學明,毛志遠,張婷婷,等.K-ras基因突變型晚期大腸癌患者一線化療及靶向治療療效分析[J].解放軍醫(yī)學院學報, 2014,35(11):1101-1104.

[7] 房玉海,張春林,洪志飛.PEG-5-FU-MAMS靶向治療裸鼠大腸癌的實驗研究[J].實用腫瘤雜志,2014,29(4):325-329.

[8] 錢維,陳國昌,張永鎮(zhèn),等.抗EGFR單抗與抗VEGF單抗聯(lián)合治療轉(zhuǎn)移性大腸癌的Meta分析[J].中國腫瘤生物治療雜志, 2014,21(1):79-85.

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.9.012

陜西 721000 陜西省寶雞市金臺醫(yī)院 （張航 符改梅 張婷）