劉長倩　高巍　楊柳　胡江苗

摘要[目的]研究辣木Moringa oleifera Lam.的化學(xué)成分。[方法]采用硅膠柱色譜、Sephadex LH20凝膠柱色譜、反相硅膠色譜等柱層析方法進(jìn)行分離純化，根據(jù)理化性質(zhì)和譜學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。[結(jié)果]從辣木莖葉95%乙醇提取物中分離得到11個(gè)單體化合物，分別鑒定為多萜醇（1）、植醇（2）、鄰苯二甲酸-雙（2-乙基庚基）酯（3）、鄰苯二甲酸-雙（2-乙基辛基）酯（4）、杜葉醇（5）、N-苯乙基乙酰酸（6）、順-3，4-二羥基-β-紫羅蘭酮（7）、4[（4′OacetylαLrhamnosyloxy）benzyl]isothiocyanate（8）、甘油亞麻酸酯（9）、β-谷甾醇（10）、胡蘿卜苷（11）。[結(jié)論]化合物2、5、7為首次從辣木中分離得到。

關(guān)鍵詞 辣木；分離純化；結(jié)構(gòu)鑒定；化學(xué)成分

中圖分類號 S792 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 0517-6611（2016）05-142-03

Abstract[Objective]To study the chemical constituents of Moringa oleifera Lam..[Method]The chemical constituents were isolated and purified by silica gel column chromatography， SephadexLH20 gel column chromatography， reversed phase silica gelchromatography. The structure was identified according to physical and chemical properties and spectral data.[Result]Chemical investigation of the stems and leaves of M. oleiferaled to the isolation of eleven compounds， including polyprenol（1）， Phytol（2）， Bis（2ethylheptyl）phthalate（3）， Bis （2ethyloctyl） phthalate（4）， vomifoliol（5）， N（2phenylethyl）acetamide（6），3，4cis3，4dihydroxyβionone（7），4[4′OacetylαLrhamnosyloxy]benzyl]isothiocyanate（8），1Linolenoylglycerol（9），βsitosterol（10），daucosterol（11）.[Conclusion]The compounds 2， 5， 7are firstly isolated from M. oleifera.

Key words Moringa oleifera Lam.； Isolation and purification； Structure identification； Chemical constituents

辣木（Moringa oleifera Lam.）又名洋椿樹、鼓槌樹，為辣木科（Moringaceae）辣木屬（Moringa Adans.）植物，起源于印度西北部的喜馬拉雅山南麓，該科僅有1個(gè)屬，共14個(gè)種，其中已經(jīng)栽培了M.oleifera、M.ovalifolia、M.peregrina和M.stenopetala等4個(gè)品種[1]。我國于20世紀(jì)60年代初開始在臺灣、海南、廣東、云南南部等廣大熱帶、亞熱帶地區(qū)引種辣木[2]。辣木為藥食兩用的植物，其樹葉、果莢不僅含有鈣、鉀和氨基酸等營養(yǎng)物質(zhì)，且在印度和非洲國家常用于退熱、消炎、降壓、強(qiáng)心和抗菌等[3]。目前，國內(nèi)外學(xué)者主要集中于辣木營養(yǎng)學(xué)方面的研究[4-6]，近年來關(guān)于辣木的藥用保健功能日益受到人們的重視[7]，而辣木的活性物質(zhì)構(gòu)成卻有待進(jìn)一步研究，為了進(jìn)一步探知該植物的生物活性成分，筆者利用溶劑萃取、柱色譜、LH20凝膠、重結(jié)晶等方法對辣木乙酸乙酯部分進(jìn)行化學(xué)成分分離，并通過波譜和理化性質(zhì)等方法對化合物結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定，以期為辣木的開發(fā)利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)材料。辣木于2014年購自云南，經(jīng)中國科學(xué)院昆明植物研究所胡江苗副研究員鑒定為辣木（Moringa oleifera Lam.）的干燥莖葉。柱色譜硅膠（200～300目）、薄層色譜硅膠、硅膠GF254；反相填充材料Rp8；Sephadex LH20凝膠。

1.1.2 主要儀器。Brucker Avance Ⅲ 600型核磁共振儀，Waters AutoSpec Premier P776三扇型雙聚焦磁質(zhì)譜儀，Agllient 1100高效液相色譜儀，ZF20D暗箱式紫外分析儀。

1.1.3 主要試劑。所用試劑為色譜純和分析純，市售。

1.2 方法

1.2.1 樣品的提取。將辣木干燥莖葉9.5 kg粉碎后分別用70%丙酮、85%丙酮浸提各一次，再用95%乙醇回流提取3次，每次3 h，合并提取液2 L，過濾后加入等體積水飽和乙酸乙酯進(jìn)行萃取，減壓濃縮回收乙酸乙酯，得乙酸乙酯相1 kg；剩余液體再加入等體積水飽和正丁醇進(jìn)行萃取，減壓濃縮回收正丁醇，得到正丁醇相130 g。

1.2.2 樣品的分離與鑒定。取乙酸乙酯相1 kg采用正相硅膠柱色譜分離。丙酮充分溶解后均勻吸附于1.3 kg（200～300目）規(guī)格正相硅膠中，經(jīng)硅膠柱色譜（8 kg），以石油醚-丙酮（50∶1→0∶1）梯度洗脫，每2 L為一份收集，配合TLC檢識，合并相同部位，濃縮回收溶劑得到13個(gè)部分（Fr.1～Fr.13）。Fr.5經(jīng)正相硅膠柱色譜，用不同濃度的石油醚-丙酮（40∶1、25∶1、15∶1、5∶1）洗脫，每100 mL為一份收集，配合TLC檢識，合并相同部位，得到4個(gè)部分（Fr.5.1～Fr.5.4），F(xiàn)r.5.4進(jìn)行正相硅膠柱色譜分離，以石油醚-丙酮（30∶1）洗脫，每100 mL為一份收集，得到化合物1、2。Fr.6經(jīng)正相硅膠柱色譜，用不同濃度的石油醚-丙酮（30∶1、20∶1、1∶1）洗脫，每500 mL為一份收集，經(jīng)TLC檢識，合并斑點(diǎn)相似的部分，濃縮回收溶劑得到5個(gè)部分（Fr.6.1～Fr.6.5），F(xiàn)r.6.1經(jīng)重結(jié)晶所得物質(zhì)通過TLC檢識與β谷甾醇標(biāo)準(zhǔn)品對比，得化合物10；Fr.6.4經(jīng)正相硅膠柱色譜，三氯甲烷-甲醇（15∶1→0∶1）梯度洗脫，再用Sephadex LH20（1.8 cm×150 cm）凝膠柱色譜，采用三氯甲烷-甲醇（1∶1）系統(tǒng)洗脫，得到化合物3。Fr.8經(jīng)過中低壓-MCI柱分離，以不同濃度的甲醇-水（30∶70、50∶50、70∶30、90∶10、100∶0）洗脫，得到7個(gè)部分（Fr.8.1～Fr.8.7），F(xiàn)r.8.1經(jīng)過Sephadex LH20（1.8 cm×150 cm）凝膠柱色譜和正相硅膠柱色譜分離，得到化合物4、11；Fr.8.2以Rp8反相柱色譜，甲醇-水（30∶100→100∶0）梯度洗脫，分離得到5、6、7、8、9。

2 結(jié)果與分析

2.1 化合物1

白色粉末，分離得到4.2 mg；1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為5.44（1H，t，J= 6.8 Hz，H2）、5.13（11H，d，J=6.4 Hz，CH）、4.09（2H，d，J= 7.1 Hz，H1）、2.09（40H，m，CH2）、1.75（3H，s，H20）、1.68（21H，m，CH3）、1.61（12H，CH3）；13CNMR（150 MHz，CDCl3）δ分別為139.7（C3）、136.0、135.3、135.2、135.2、135.1、135.0、134.8、131.2、125.0、125.0、124.9、124.9、124.5、124.5、124.4、124.2、124.2、124.1、58.9（CH2OH）、39.7、32.2、32.2、32.1、31.9、29.7、26.7、26.6、26.6、26.4、26.3、26.3、25.7、23.4、23.4、23.3、17.6、16.0、16.0。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]基本一致，故鑒定化合物1為多萜醇（Polyprenol）。

2.2 化合物2

無色油狀物，分離得到3.3 mg；1HNMR（600 MHz，CD3COCD3）δ分別為5.34（1H，t，J= 6.5 Hz，H2）、4.05（2H，t，J=6.2 Hz，H1）、3.36（1H，t，J=5.4 Hz，OH1）、2.04（2H，m，H4）、1.61（3H，s，H17）、1.52（1H，m，H15）、1.42（5H，m，H5，6a，7，11）、1.28（8H，m，H6b，8a，9，10a，12a，13）、1.15（2H，m，H14）、1.08（3H，m，H8b，10b，12b）、0.86（6H，d，J=6.6 Hz，H16，20）、0.85（6H，d，J=6.6 Hz，H18，19）；13CNMR（150 MHz，CD3COCD3）δ分別為137.5（C3）、126.0（C2）、59.1（C1）、40.5（C4）、40.1（C14）、38.1（C8）、38.1（C12）、38.0（C10）、37.3（C6）、33.5（C11）、33.4（C7）、28.6（C15）、25.9（C5）、25.5（C13）、25.1（C9）、23.0（C20）、22.9（C16）、20.1（C19）、20.0（C18）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]基本一致，故鑒定化合物2為植醇（Phytol）。

2.3 化合物3

黃色油狀物，分離得到3.0 mg；1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為7.71（2H，dd，J=5.5，3.4 Hz，H3，6）、7.53（2H，dd，J=5.5，3.3 Hz，H4，5）、4.21（4H，m，H1′，1″）、1.70（2H，m，H2′，2″）、1.56（4H，m，H6′，6″）、1.42（8H，m，H3′，3″，8′，8″）、1.31（8H，m，H4′，4″，5′，5″）、0.93（6H，t，J=7.5 Hz，H9′，9″）、0.90（6H，t，J=7.5 Hz，H7′，7″）；13CNMR（150 MHz，CDCl3）δ分別為167.8（C=O）、132.4（C1，2）、130.9（C3，6）、128.8（C4，5）、68.2（C1′，1″）、38.7（C2′，2″）、30.4（C3′，3″）、29.7（C4′，4″）、28.9（C5′，5″）、23.7（C6′，6″）、23.0（C8，8″）、14.0（C7′，7″）、11.0（C9′，9″）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]基本一致，故鑒定化合物3為鄰苯二甲酸-雙（2-乙基庚基）酯（Bis（2ethylheptyl）phthalate）。

2.4 化合物4

黃色油狀物，分離得到2.0 mg；1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為7.71（2H，dd，J=5.5，3.4 Hz，H3，6）、7.53（2H，dd，J=5.5，3.3 Hz，H4，5）、4.21（4H，m，H1′，1″）、1.70（2H，m，H2′，2″）、1.56（4H，m，H6′，6″）、1.42（8H，m，H3′，3″，8′，8″）、1.31（8H，m，H4′，4″，5′，5″）、0.93（6H，t，J=7.5 Hz，H9′，9″）、0.90（6H，t，J=7.5 Hz，H7′，7″）；13CNMR（150 MHz，CDCl3）δ分別為167.8（C1′）、132.4（C1，6）、130.9（C2，5）、128.8（C4，5）、68.2（C3′，3″）、38.7（C4′，4″）、30.5（C5′，5″）、30.3（C6′，6″）、29.7（C7′，7″）、28.9（C8′，8″）、23.7（C9′，9″）、23.0（C11′，11″）、14.0（C10′，10″）、11.0（C12′，12″）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]基本一致，故鑒定化合物4為鄰苯二甲酸-雙（2乙基辛基）酯（Bis（2ethyloctyl）phthalate）。

2.5 化合物5

白色固體，分離得到3.0 mg；1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為5.90（1H，d，J=10.5 Hz，H1′）、5.83（1H，dd，J=5.3 Hz，H2′）、5.80（1H，s，H2）、4.41（1H，dq，H3′）、2.45（1H，d，J= 17 Hz，H6α）、2.43（1H，d，J=17 Hz，H6β）、1.89（3H，s，CH3）、1.30（3H，d，J=6.3 Hz，H4′）、1.09（1H，s，Meα）、1.01（3H，s，Meβ）；13CNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為197.8（C1）、162.5（C3）、135.6（C2′）、128.9（C1′）、79.0（C4）、68.0（C3′）、49.6（C6）、41.2（C5）、24.0（C4′）、23.7[MeβC（5）]、22.8[MeαC（5）]、18.8[MeC（3）]。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]基本一致，故鑒定化合物5為杜葉醇（vomifoliol）。

2.6 化合物6

白色粉末，分離得到2.0 mg；1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為7.35（2H，t，J= 7.5 Hz，H3″，H5″）、7.28（1H，t，J=11.6 Hz，H4″）、7.23（2H，d，J=7.3 Hz，H2″，H6″）、3.52（2H，t，J=6.7 Hz，H1′）、2.82（2H，dt，J=6.9 Hz，H2′）、1.94（3H，s，H2）；13CNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為170.1（C1）、138.3（C1″）、128.8（C3″，5″）、128.7（C2″，6″）、126.6（C4″）、40.6（C2）、35.6（C1′）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]基本一致，故鑒定化合物6為N-苯乙基乙酰酸（N（2phenylethyl）acetamide）。

2.7 化合物7

白色粉末，分離得到2.0 mg；1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為7.17（1H，d，J=16.0，H7）、6.15（1H，d，J=16.0，H8）、3.98（1H，brd，J=16.0，H4）、3.91（1H，ddd，J=16.0，H3）、2.33（3H，s，J=16.0，H10）、1.90（3H，d，J= 16.0，H13）、1.77（1H，d，J=16.0，Meα）、1.66（1H，ddd，J= 16.0，Meβ）、1.12（3H，s，J=16.0，H12）、1.09（3H，s，J=16.0，H11）；13CNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為198.2（C9）、141.9（C7）、140.3（C6）、133.6（C8）、131.0（C5）、71.2（C4）、66.4（C3）、41.0（C2）、29.8（C12）、27.5（C11）、19.8（C13）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]基本一致，故鑒定化合物7為順-3，4-二羥基-β-紫羅蘭酮（3，4cis3，4dihydroxyβionone）。

2.8 化合物8

無色油狀，分離得到4.0 mg；1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為7.23（2H，d，J=8.3 Hz，H3，5）、7.03（2H，dd，J=8.4 Hz，H2，6）、5.55（1H，s，H1′）、4.97（2H，s，H7）、4.85（1H，t，J=9.6 Hz，H4′）、4.15（1H，s，H2′）、4.10（1H，m，H3′）、3.88（1H，qd，J=6.8 Hz，H5′）、2.15（3H，s，CH3C=O）、1.19（3H，t，J=6.2 Hz，H6′）；13CNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為172.4（C=O）、155.4（C1）、132.5（C4）、131.1（N=C=S）、128.9（C3，C5）、116.3（C2，C6）、91.7（C1′）、75.6（C4′）、70.6（C2′）、70.2（C3′）、44.5（C7）、21.1（C=O）、17.5（C6′）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]基本一致，故鑒定化合物8為4[（4′OacetylαLrhamnosyloxy）benzyl]isothiocyanate。

2.9 化合物9

無色油狀，分離得到2.0 mg；1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為5.38（6H，m，J=16.4 Hz，H9′，10′，12′，13′，15′，16′）、4.21（2H，m，J=8.1、4.1 Hz，H1）、3.94（1H，m，H2）、3.61（2H，m，J=11.4，5.8 Hz，H3）、2.79（4H，m，J=21.7 Hz，H11′，14′）、2.36（2H，t，J=7.6 Hz，H2′）、2.07（4H，m，H8′，17′）、1.63（2H，m，J=6.8 Hz，H3′）、1.31（8H，m，J=2.5 Hz，H4′，5′，6′，7′）、0.98（3H，t，J=9.2、5.8 Hz，H18′）；13CNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為174.3（C1′）、129.5（C9′，10′，12′，13′，15′，16′）、70.2（C2）、65.1（C3）、63.3（C2）、29.5（C2′、C3′、C4′、C5′、C6′、C7′、C8′、C11′、C14′）、20.5（C17′）、14.3（C18′）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]基本一致，故鑒定化合物9為甘油亞麻酸酯（1Linolenoylglycerol）。

2.10 化合物10

白色針晶，分離得到15.0 mg。用1%硫酸-乙醇顯色顯紫色，與β-谷甾醇標(biāo)準(zhǔn)品顯色行為及比移值（Rf）值一致，對照氫譜數(shù)據(jù)一致，故鑒定化合物10為β-谷甾醇。

2.11 化合物11

白色粉末，分離得到12.0 mg。與胡蘿卜苷標(biāo)準(zhǔn)品共薄層層析，顯色行為及比移值（Rf）一致，對照氫譜數(shù)據(jù)一致，故鑒定化合物11為胡蘿卜苷。

3 結(jié)論

該試驗(yàn)利用溶劑萃取、柱色譜、LH20凝膠、重結(jié)晶等方法對辣木乙酸乙酯部分進(jìn)行化學(xué)成分分離，并通過波譜和理化性質(zhì)等方法對化合物結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定。結(jié)果表明，從辣木莖葉95%乙醇提取物中分離得到11個(gè)單體化合物，分別鑒定為多萜醇（1）、植醇（2）、鄰苯二甲酸-雙（2-乙基庚基）酯（3）、鄰苯二甲酸-雙（2-乙基辛基）酯（4）、杜葉醇（5）、N苯乙基乙酰酸（6）、順-3，4-二羥基-β-紫羅蘭酮（7）、4[（4′OacetylαLrhamnosyloxy）benzyl]isothiocyanate（8）、甘油亞麻酸酯（9）、β谷甾醇（10）、胡蘿卜苷（11），且化合物2、5、7為首次從辣木中分離得到。

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