黃 毅（福建農(nóng)林大學(xué)，福州 350000）

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圖解海鮮菇袋式栽培技術(shù)（五）

黃 毅
（福建農(nóng)林大學(xué)，福州 350000）

海鮮菇分瓶式栽培與袋式栽培兩種模式，瓶式栽培的廠家較少。由于缺乏與瓶栽培相適應(yīng)、成熟的枝條菌種接種設(shè)備，因此，瓶式栽培依然采用木屑菌種，近期，液體菌種也已開始嘗試。袋式栽培是海鮮菇栽培的主流，中小型袋式栽培企業(yè)已逐漸淘汰傳統(tǒng)木屑栽培種，改用枝條栽培種。枝條菌種具有制作簡便，便于流水線接種，接種速度快的特點(diǎn)，本節(jié)介紹并討論制作枝條菌種的核心技術(shù)，以供初學(xué)者參考。

6　海鮮菇枝條菌種制作

枝條菌種現(xiàn)已在多種菌類栽培上得到使用，是正在普及的主流菌種類型。其實(shí)質(zhì)是以枝條作為載體，經(jīng)接種、培養(yǎng)，讓菌絲纏繞在枝條表層，接種時使用鑷子將枝條直接送入栽培包中，接種速度快；接種后菌絲恢復(fù)快，并呈立體輻射狀蔓延，縮短培養(yǎng)時間，提高同步性。其菌種制作的工藝流程為，枝條浸泡24小時（圖1）→粘沾營養(yǎng)物質(zhì)（圖2）→扎捆（圖3）→置入低壓聚乙烯袋內(nèi)→充填木屑等（圖4）→套套圈、塞棉花塞→滅菌→接種、培養(yǎng)。

圖1　浸泡枝條與玉米漿

圖2　沾粘麥皮

圖3　枝條扎捆

圖4　震動填充木屑

為提高接種效率，枝條菌種制作企業(yè)制作菌種更規(guī)范，常選擇楊木等軟質(zhì)樹種，將枝椏等加工成7×7×140～160毫米規(guī)格的枝條。枝條長度因菌類不同而有異，海鮮菇的枝條菌種長約150毫米。

6.1枝條浸泡

使用對折徑為17～18厘米，厚0.048～0.052毫米（4.8～5.2絲）的聚丙烯塑料袋做容器。如果塑料袋過薄，需套2只。每袋填裝枝條60～72支，枝條總數(shù)是塑料周轉(zhuǎn)筐存放12袋的倍數(shù)。根據(jù)每天海鮮菇栽培包的制作數(shù)量，算出所需要枝條數(shù)總量，再增加 1%～2%（可能污染的數(shù)量），即為當(dāng)日枝條浸泡量，枝條須浸泡24小時。

枝條組織致密，浸泡 24小時可使其吸足水分，內(nèi)部沒有“白心”，保證滅菌時被濕熱蒸汽穿透，達(dá)到徹底滅菌。如使用高粱、蘆葦秸稈枝條（破成4瓣），須將枝條浸泡后再投入沸水鍋內(nèi)煮5分鐘，將海綿組織內(nèi)滯留的冷空氣團(tuán)趕出，此步驟不可省略。

6.2煮玉米糊

玉米糊的配料：水95%，玉米面4.7%，瓊脂粉末0.3%，按此比例計算并稱量。先用80%水量煮熟玉米面，裝盆備用。再把剩余的水倒入鍋內(nèi)，加入浸潤后的瓊脂粉末，待化開后，再倒入備好的玉米糊，用勺子攪勻，煮至冒泡，倒入盆內(nèi)（圖1）。泡透后的枝條放入玉米糊中攪拌，均勻沾滿玉米糊后撈出，置于桌面上，加麥麩（99.5%）和石灰（0.5%）的混合料（圖2），使枝條上均勻沾有麩皮，然后捋齊。

枝條菌種的枝條實(shí)質(zhì)上是菌絲的載體，粘玉米糊，既可提供菌絲營養(yǎng)，又便于菌絲纏繞在表面上。有的栽培者為了節(jié)省生產(chǎn)成本，使用竹片、高粱、蘆葦秸稈等材料制作枝條菌種，但由于靠近竹皮的枝條一側(cè)難以纏繞菌絲，需先將竹片一側(cè)輾壓出密集的痕跡，便于菌絲纏繞。而購買現(xiàn)成枝條，則更方便些。

6.3扎捆枝條及裝袋

用橡皮筋將固定數(shù)量的枝條捆綁成束（圖3），便于快速將枝條裝入塑料袋內(nèi)。整捆枝條裝袋后，因枝條間存在空隙，須充填木屑培養(yǎng)基（木屑90%，麥皮9%，輕質(zhì)碳酸鈣1%，含水量55%，下同），以減少菌種包內(nèi)冷空氣的量。有的廠家在裝袋時，枝條捆底部及周圍都會添加木屑培養(yǎng)基并充分震動（圖4），上部也會填加木屑培養(yǎng)基作為“過橋”（圖5）。隨后，套上塑料套圈，塞上棉花塞，用牛皮紙與橡皮筋扎口。建議使用植物棉花塞，因其彈性及氣體交換性較海綿塞等好。由于枝條菌種接入栽培包時，還在料面上撒以袋內(nèi)的木屑菌種封面，因此接種的海鮮菇多從老菌絲上先出菇。

圖5　枝條菌種“過橋”

有的企業(yè)直接使用生產(chǎn)海鮮菇栽培包時的木屑-棉籽殼栽培料作為填充培養(yǎng)基，作為“過橋”（圖5）。工廠化栽培，枝條菌種料包和栽培包同時置于高壓鍋內(nèi)滅菌，按常規(guī)高壓鍋滅菌程序進(jìn)行滅菌，所不同的是：當(dāng)鍋內(nèi)溫度上升至100 ℃后至少穩(wěn)定1小時再升壓，原因是利用空氣熱漲原理將包內(nèi)枝條間的冷空氣排出，便于濕熱蒸汽穿透，滅菌徹底。初次制作時，應(yīng)認(rèn)真做好“回接”試驗(yàn)，以判斷其滅菌是否徹底（參考第四講中的“回接”）。

圖6　玻璃瓶枝條菌種

圖7　接種箱、傳遞窗、移動小車

枝條菌種開發(fā)初期，多使用玻璃瓶為容器（圖6），但枝條不容易塞入菌種瓶內(nèi)，操作速度緩慢，玻璃瓶破損率較高。玻璃瓶體積固定，而塑料袋因體積不定，在檢查翻動菌種時，容易出現(xiàn)氣壓差，導(dǎo)致污染，因此以往使用塑料袋制作枝條菌種一直不成功。經(jīng)過不斷改進(jìn)，發(fā)現(xiàn)塑料袋枝條菌種制作成功的關(guān)鍵在于：枝條浸泡時間要達(dá)24小時；袋內(nèi)枝條間隙盡量填入木屑等培養(yǎng)基；滅菌過程鍋內(nèi)溫度上升至100 ℃后維持1小時，再升壓，按常規(guī)高壓鍋類型及相應(yīng)的高壓滅菌程序進(jìn)行滅菌。因此，現(xiàn)今塑料袋枝條菌種能成功制備，且已完全取代玻璃瓶枝條菌種，在金針菇、杏鮑菇、黑木耳等栽培菌種上得到廣泛應(yīng)用。

7　菌種接種區(qū)和培養(yǎng)區(qū)的設(shè)置

7.1接種區(qū)設(shè)計原則

無論企業(yè)大小，菌種制作流程的各功能區(qū)都應(yīng)設(shè)置齊全，包括預(yù)備區(qū)，木屑原種、枝條栽培種接種區(qū)、菌種培養(yǎng)區(qū)（1～2間），所添置的設(shè)備不盡相同。還應(yīng)增強(qiáng)安全意識，在適當(dāng)?shù)奈恢迷O(shè)置逃生門或者逃生窗。地面采用擠塑板隔斷防潮，上鋪設(shè)30×30（厘米）鋼筋網(wǎng)格，澆灌6厘米厚水泥層，2厘米厚磨面層，盡量光滑，減少細(xì)微小孔，預(yù)防雜菌滋生。采用10厘米厚添加有阻燃劑材料的彩鋼自熄聚苯乙烯冷庫板，豎立分割成不同功能區(qū)。頂板厚15厘米，密度25千克/立方米，坡度1.5%。

7.2各功能區(qū)劃分及應(yīng)置設(shè)備

（1）預(yù)備區(qū)。用于試管菌種制作，置有工作臺（廚），工作服凈化廚，進(jìn)水、排水、大功率電源供給端。從預(yù)備區(qū)間進(jìn)入枝條菌種接種間前應(yīng)更換工作服及菌種接種庫、培養(yǎng)庫專用的拖鞋，拖鞋要保證每天工作結(jié)束之后清洗，晾干。

（2）枝條菌種接種區(qū)。使用傳統(tǒng)接種箱（圖7）比使用凈化臺更安全，可降低因人體操作產(chǎn)生空氣渦流而增加接種污染的概率。接種區(qū)上端安裝抽煙霧風(fēng)機(jī)、補(bǔ)新風(fēng)自凈器、空調(diào)、櫥柜等。要求接種區(qū)環(huán)境極干凈，絕不允許直接穿鞋進(jìn)入。海鮮菇企業(yè)多使用棉籽殼作為主要栽培原料，廠區(qū)難免存在大量螨蟲，如忽視其存在與快速擴(kuò)散，將會導(dǎo)致嚴(yán)重?fù)p失。

（3）菌種培養(yǎng)庫（區(qū)）。培養(yǎng)庫應(yīng)配置空氣凈化器、制冷機(jī)組、內(nèi)循環(huán)風(fēng)機(jī)、排氣扇等設(shè)備及培養(yǎng)架（圖8）。使枝條菌種在凈化環(huán)境、溫度22～25 ℃、濕度55%～70%、二氧化碳體積濃度低于0.2%的條件下培養(yǎng)。

培養(yǎng)架：一般菌種庫寬6米，長10米，高4米以上，空庫體積以240立方米左右為宜。庫內(nèi)使用固定培養(yǎng)架，擺放方式有“非”“川”字形等，主要從制冷機(jī)組運(yùn)行時氣流的運(yùn)動方向、穩(wěn)定性、均勻性，移動小車進(jìn)出方便、操作方便等方面綜合考慮，合理擺放。培養(yǎng)架通常7層，寬136厘米，長度由培養(yǎng)庫建筑結(jié)構(gòu)及設(shè)備排列情況而定。每層可放置3排規(guī)格為50×38×10（厘米）的周轉(zhuǎn)筐，每排周轉(zhuǎn)筐間距10厘米左右作為氣流通道，7層培養(yǎng)架的通道盡量處于同一垂直線上。層間距36厘米，過道寬度80厘米，兩側(cè)離墻11厘米左右。使用“田”字形支撐架及網(wǎng)格做隔層板（圖8）。

圖8　培養(yǎng)庫、內(nèi)循環(huán)風(fēng)機(jī)

圖9　管道式風(fēng)管

溫度控制設(shè)備：由于海鮮菇培養(yǎng)庫房內(nèi)試管母種、原種、枝條栽培種同庫培養(yǎng)，菌種包在培養(yǎng)過程中的包溫逐漸上升，因此，應(yīng)將培養(yǎng)庫溫度設(shè)置在 21～23 ℃，較最佳培養(yǎng)溫度24～25 ℃低2 ℃。有的企業(yè)采用側(cè)向送風(fēng)制冷機(jī)組，運(yùn)行時設(shè)定溫度范圍。但空氣柔性壓縮比很大，空氣阻力大，不可能長距離送風(fēng)，往往產(chǎn)生前、后因風(fēng)量差異而導(dǎo)致溫差，影響菌絲發(fā)育的同步性。因此有的企業(yè)在走道上方安裝內(nèi)循環(huán)風(fēng)機(jī)，與制冷機(jī)組風(fēng)機(jī)聯(lián)動“接力”，但溫度均勻性依然不佳。日本采用軟布管送風(fēng)方式（圖9），靠近風(fēng)機(jī)一端連接PVC管，PVC管另一端套軟布管，軟布管兩側(cè)有出風(fēng)的小孔，其可大幅度減少溫差，使庫內(nèi)溫度穩(wěn)定、均勻。

二氧化碳濃度控制設(shè)備：當(dāng)培養(yǎng)庫二氧化碳體積濃度上升至0.5%時，菌種包內(nèi)至少在1%以上，顯著影響菌絲蔓延速度。因此，應(yīng)間歇對培養(yǎng)庫補(bǔ)充新風(fēng)并排出混合廢氣。為保證培養(yǎng)庫內(nèi)空氣的潔凈度，使用自凈器與制冷機(jī)組進(jìn)行聯(lián)動，可通過控制使用時間控制新風(fēng)補(bǔ)充量，再通過制冷機(jī)組對新風(fēng)降溫（可降低4～5 ℃，減小溫差）。近期有人使用四面出風(fēng)的吸頂式空調(diào)進(jìn)行降溫，建議在出風(fēng)口下端添加導(dǎo)流板，減少“氣流短路”。該設(shè)備是通過安裝在側(cè)墻上配置有時間控制器的自凈器補(bǔ)充新風(fēng)，通過風(fēng)管將新風(fēng)送至吸頂式空調(diào)下端吸風(fēng)口。排氣采用小型負(fù)壓風(fēng)機(jī)排氣扇排氣系統(tǒng)，安裝在靠近庫外的側(cè)墻中部，由時間控制器控制，間隔排出混合廢氣。

8　菌種制作流程

海鮮菇菌種制作分三級：PDA試管母種、木屑-棉籽殼原種、枝條栽培種，多是在極干凈環(huán)境下以周轉(zhuǎn)筐為流轉(zhuǎn)單位運(yùn)行。每筐存放枝條包12包，從強(qiáng)冷間通過可正反向運(yùn)轉(zhuǎn)的傳送帶、傳遞窗，進(jìn)入菌種接種間，置于移動小車層架上。小車專門用于接種箱、菌種培養(yǎng)庫菌種包進(jìn)、出，傳運(yùn)。

8.1母種接種

無論哪里獲得原始出發(fā)母種，都先做測試，排除隱性污染。具體做法：準(zhǔn)備細(xì)菌培養(yǎng)基，配方為1 000毫升水，10克蛋白胨、3克牛肉浸膏、5克食鹽；在接種箱內(nèi)，按照無菌操作要求，將外來試管種取1～2平方厘米，接入細(xì)菌培養(yǎng)基，置于35 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48小時，觀察是否出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象。如出現(xiàn)渾濁，則表明有隱性污染；未出現(xiàn)渾濁，則可按常規(guī)方法，將其進(jìn)一步接種擴(kuò)大，培養(yǎng)后再用于生產(chǎn)原種。

8.2原種接種

海鮮菇采用木屑-棉籽殼培養(yǎng)基制作原種。使用對折徑15×28（厘米）的聚丙烯塑料袋做容器。按常規(guī)方法制作菌種包（中間插有塑料棒）、滅菌、冷卻。接種時，原種菌種包和純正、無隱性污染的試管母種，置于接種箱內(nèi)，按照常規(guī)無菌操作要求，消毒30分鐘后，使用接種針，鉤取2小塊試管菌塊，拔出原種包塑料棒，分別接入包內(nèi)預(yù)留孔洞和料面上，周而復(fù)始。接種后，每一菌包都應(yīng)搖晃一下，使接種塊菌絲面朝上，再放入周轉(zhuǎn)小車的周轉(zhuǎn)筐內(nèi)，推入培養(yǎng)庫內(nèi)，置于層架上。使原種包內(nèi)菌絲上、下同時蔓延（圖 10），有效縮短菌種培養(yǎng)時間。

圖10　菌絲上、下蔓延

通常，菌種培養(yǎng)時要檢查2次，一次為接種后第6天：如果棉花受潮，此時容易出現(xiàn)紅色鏈孢霉污染，產(chǎn)生酒石酸酸味；第2次為第12天：雜菌孢子萌發(fā)需要吸濕過程，還需要增殖時間，大致第12天前后才能夠看清是否存在污染。檢查時，頭戴充電式頭燈，拉出塑料周轉(zhuǎn)筐，仔細(xì)檢查，盡量不要提棉花塞，因?yàn)榫N包的提起和放下，會產(chǎn)生氣壓差，可能增加污染率。

8.3枝條栽培種接種

枝條菌種接種時，在接種箱內(nèi)進(jìn)行無菌操作，常規(guī)做法是將木屑菌種或木屑-棉籽殼菌種打碎，撒在枝條菌種包的表面。培養(yǎng)時，菌絲從上逐漸往下蔓延，枝條菌種就會出現(xiàn)上、下菌齡差異。筆者認(rèn)為可適當(dāng)改進(jìn)：在制作枝條栽培種時，在扎捆整束枝條時，中間插入一支塑料棒做“?！?，接種時，將塑料棒“?！背槌?，使部分原種碎落入預(yù)留孔洞內(nèi)。培養(yǎng)時，菌絲將呈立體“T”字形，“四面開花”式蔓延，上下菌絲的菌齡相同，可提高栽培包培養(yǎng)的同步性。和原種制作要求相同，接種后第6天、第12天檢查是否有污染。

8.4討 論

庫區(qū)的環(huán)境衛(wèi)生關(guān)系到企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益，不可等閑視之。每天工作結(jié)束前至少留下1小時做好清潔工作，地板要拖至一塵不染；經(jīng)常更換初效過濾器濾布；每周1次使用拖把浸三氯殺螨醇液擰干后擦地面，預(yù)防螨蟲為害。一旦出現(xiàn)比較嚴(yán)重的螨害，要降低溫度至18 ℃以下，減緩螨蟲繁殖速度。螨蟲為害菌種大多顯現(xiàn)一窩一窩，如果菌種非用不可，應(yīng)選擇沒有螨蟲為害、袋壁表面菌絲沒有出現(xiàn)斷裂的枝條菌種，其余銷毀。遭受螨害的玻璃瓶枝條菌種，應(yīng)置于42 ℃以上熱水中浸泡2小時，再挖出銷毀，否則任其蔓延將造成難以收拾的局面。清洗培養(yǎng)庫，并使用電爐或煤爐加溫至42 ℃以上保持2小時，使螨蟲的呼吸酶變性而致死，可徹底杜絕螨蟲為害。（待續(xù)）