鄧艷玲，劉又嘉，肖新云，譚周進(jìn)（湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長(zhǎng)沙 410208）

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抗生素相關(guān)性腹瀉對(duì)小鼠血常規(guī)的影響

鄧艷玲，劉又嘉，肖新云，譚周進(jìn)
（湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長(zhǎng)沙 410208）

摘 要：以小鼠為對(duì)象，通過抗生素混合液灌胃5 d建立小鼠腸道菌群失調(diào)模型，以等量生理鹽水為對(duì)照，研究抗生素相關(guān)腹瀉對(duì)小鼠血常規(guī)的影響。結(jié)果表明：抗生素相關(guān)性腹瀉使小鼠血小板數(shù)量及平均體積均顯著小于對(duì)照組（P＜0.05），紅細(xì)胞分布寬度顯著大于對(duì)照組（P＜0.05），其余各項(xiàng)指標(biāo)均與對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。這表明抗生素相關(guān)性腹瀉可顯著降低血小板計(jì)數(shù)、血小板平均體積和紅細(xì)胞分布寬度，對(duì)小鼠的凝血功能有顯著的影響。

關(guān)鍵詞：抗生素；血常規(guī)；抗生素相關(guān)性腹瀉；菌群失調(diào)

調(diào)查顯示，近年來由抗生素引起的相關(guān)性腹瀉發(fā)病率越來越高，約有15%～30%的病人在抗生素治療期間或停止后2個(gè)月內(nèi)發(fā)生過腹瀉［1］。這種現(xiàn)象將嚴(yán)重影響疾病的治療進(jìn)程及預(yù)后，降低患者的生活質(zhì)量。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，血液主要由營氣和津液所組成?！鹅`樞·決氣》指出：中焦受氣取汁，變化而赤，是謂血?！鹅`樞·平人絕谷篇》中說：血脈和利，精神乃居。人體精血充足，則精神飽滿，思維敏捷?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為血細(xì)胞是血液系統(tǒng)的重要組成部分。血常規(guī)是當(dāng)前臨床檢測(cè)最常用的方式［2］，主要針對(duì)患者血液中的白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白和血小板等進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)疾病診斷和治療具有重要的指導(dǎo)意義。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的進(jìn)步和發(fā)展，臨床檢驗(yàn)結(jié)果在疾病的診斷、治療和搶救方面發(fā)揮著重要作用。研究以小鼠為對(duì)象進(jìn)行抗生素造模試驗(yàn)，探討抗生素相關(guān)腹瀉對(duì)小鼠血常規(guī)的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

選用SPF級(jí)昆明小鼠12只，1月齡，雌雄各半，重量（20±2）g/只，購自湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，合格證號(hào)：SCXK（湘）2013-0004。飼料由湖南中醫(yī)藥大學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

供試抗生素有頭孢拉定膠囊（山西纖源制藥股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：110804）和硫酸慶大霉素注射液（宜昌人福藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)，批號(hào)：5120106），用無菌生理鹽水配成62.5 g/L混合液［3］，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 動(dòng)物分組 12只小鼠在23～25 ℃、相對(duì)濕度50%～70%、清潔安靜環(huán)境飼養(yǎng)2 d后，按完全隨機(jī)設(shè)計(jì)法分成正常對(duì)照組（6只）、模型組（6只），雌雄各半。1.2.2 造模方法 對(duì)照組灌胃生理鹽水，模型組灌胃抗生素混合液，各0.4 mL/（只·次），每天2次，連續(xù)5 d，模型組小鼠在造模的第3～4 d出現(xiàn)腹瀉［4］。

1.2.3 采 血 采血前禁食12 h，禁水1 h，眼球采血1.0～1.5 mL，注入EDTA-K2抗凝管中，混勻后，2 h內(nèi)送檢，4 h內(nèi)完成檢測(cè)。

1.2.4 血樣檢測(cè) 采用阻抗法，使用CA-500血液自動(dòng)分析儀檢測(cè)。

1.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”模式表示，用SPSS 19.0軟件進(jìn)行分析，組間差異分析采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 抗生素相關(guān)性腹瀉對(duì)小鼠血小板的影響

從表1中可以看出，抗生素造模后，血小板計(jì)數(shù)極顯著小于對(duì)照組（P＜0.01）；血小板平均體積顯著小于對(duì)照組（P＜0.05）；而血小板比容小于對(duì)照組，血小板體積分布寬度大于對(duì)照組，但這兩項(xiàng)指標(biāo)的差異不顯著（P＞0.05）。血小板是一種具有免疫活性的細(xì)胞［5］，主要促進(jìn)止血和加速凝血?？股卦炷：螅∈笱褐醒“逵?jì)數(shù)、比容和平均體積指數(shù)均減小，這可能與小鼠凝血功能下降有關(guān)。

表1 抗生素相關(guān)性腹瀉對(duì)小鼠血小板的影響

2.2 抗生素相關(guān)性腹瀉對(duì)小鼠紅細(xì)胞的影響

由表2可知，模型組小鼠紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞平均體積均小于對(duì)照組，紅細(xì)胞比容大于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05），紅細(xì)胞分布寬度小于對(duì)照組 （P ＜0.01），說明抗生素造模對(duì)紅細(xì)胞分布寬度有極顯著影響，對(duì)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞比容、紅細(xì)胞平均體積無顯著影響。

表2 抗生素相關(guān)性腹瀉對(duì)小鼠紅細(xì)胞的影響

2.3 抗生素相關(guān)性腹瀉對(duì)小鼠血紅蛋白影響

由表3可知，抗生素造模后，小鼠血紅蛋白及紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量上升，紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度下降，但與對(duì)照組相比差異均不顯著（P＞0.05）。紅細(xì)胞運(yùn)輸O2和CO2的功能主要由血紅蛋白來完成，抗生素造模對(duì)血紅蛋白諸指標(biāo)均無顯著影響，說明抗生素造模對(duì)血液的運(yùn)載功能無顯著影響。

表3 抗生素相關(guān)性腹瀉對(duì)小鼠血紅蛋白的影響

2.4 抗生素相關(guān)性腹瀉對(duì)小鼠白細(xì)胞的影響

由表4可知，抗生素造模后，模型組淋巴細(xì)胞百分比、單核細(xì)胞百分比較對(duì)照組上升，白細(xì)胞數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比則較對(duì)照組下降，但差異均不顯著（P＞0.05）。白細(xì)胞主要參與機(jī)體的防御和免疫反應(yīng)，防治病源微生物的入侵。上述數(shù)據(jù)表明抗生素造模對(duì)小鼠自身的防御和免疫功能無顯著影響。

3 討 論

表4 抗生素相關(guān)性腹瀉對(duì)小鼠白細(xì)胞的影響

“血”是循行于脈中而富有營養(yǎng)的紅色液態(tài)物質(zhì)，是構(gòu)成人體和維持人體生命活動(dòng)的基本物質(zhì)之一［6］，具有營養(yǎng)、滋潤(rùn)和化神的功能?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，血是一種在心血管系統(tǒng)內(nèi)循環(huán)流動(dòng)的液體組織，由血漿和血細(xì)胞組成，有運(yùn)輸、緩沖、防御等多種功能［7］。紅細(xì)胞是血液中數(shù)量最多的血細(xì)胞，主要功能是運(yùn)輸O2和CO2以及緩沖血液酸堿度。紅細(xì)胞運(yùn)輸O2主要依賴血紅蛋白來完成。試驗(yàn)結(jié)果表明，抗生素造模對(duì)小鼠體內(nèi)O2和CO2的運(yùn)送以及血液的酸堿平衡無顯著影響。

試驗(yàn)結(jié)果顯示，抗生素造模后，小鼠血小板計(jì)數(shù)、血小板比容及血小板平均體積均有所減少。有研究表明，抗生素可以抑制骨髓中的巨核細(xì)胞系統(tǒng)作用，從而減少血小板的生成［8］。還有研究表明，抗生素可降低血小板的聚集、黏附功能從而引發(fā)出血［9］。這與試驗(yàn)過程中部分小鼠出現(xiàn)血便有重要的關(guān)聯(lián)。

抗生素造模后，小鼠的血紅蛋白和血紅蛋白濃度均上升，但差異不顯著（P＞0.05），說明抗生素造模對(duì)血液的運(yùn)載功能無影響。造模后，小鼠紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞平均體積、紅細(xì)胞分布寬度均小于對(duì)照組。研究表明，當(dāng)骨髓造血功能減退或者造血原料不足時(shí)，出現(xiàn)紅細(xì)胞生成障礙，紅細(xì)胞的數(shù)量減少［10］。臨床上紅細(xì)胞分布體積和分布寬度主要用于貧血的分型［11］。紅細(xì)胞平均體積降低常見于小細(xì)胞低色素性貧血和全身性溶血性貧血［12］。

抗生素造模后，小鼠淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞百分比均升高，白細(xì)胞數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比下降，但與對(duì)照組比較差異不顯著（P＞0.05）。

綜上所述，抗生素相關(guān)性腹瀉可顯著降低血小板計(jì)數(shù)、血小板平均體積和紅細(xì)胞分布寬度，對(duì)小鼠的凝血功能有顯著的影響。這可能主要與長(zhǎng)期抗生素灌胃導(dǎo)致小鼠腸道菌群失調(diào)和免疫功能下降有關(guān)［13-14］。但曾奧等［15］的研究表明，抗生素造模顯著影響血小板計(jì)數(shù)、血小板平均體積和紅細(xì)胞分布寬度，但對(duì)小鼠的凝血功能無影響。而此次試驗(yàn)在抗生素造模的第5 d，小鼠出現(xiàn)的精神萎靡、畏寒、腹瀉等癥狀與以往抗生素造模小鼠相類似，這與以往研究表明的抗生素造模會(huì)影響小鼠腸道菌群及免疫功能的結(jié)果相一致，抗生素造模對(duì)小鼠的凝血功能的影響還有待進(jìn)一步的研究。

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（責(zé)任編輯：成 平）

中圖分類號(hào)：R969.3

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-060X（2016）06-0023-03

DOI:10.16498/j.cnki.hnnykx.2016.06.008

收稿日期：2016-03-31

基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81573951）

作者簡(jiǎn)介：鄧艷玲（1989-），女，湖南邵東縣人，碩士研究生，主要從事中醫(yī)微生態(tài)學(xué)研究。

通訊作者：肖新云

Effect of Antibiotic Associated Diarrhea in Mice Blood

DENG Yan-Ling，LIU You-Jia，XIAO Xin-Yun，TAN Zhou-Jin
（Hunan University of Chinese Medicine， Changsha 410208， PRC）

Abstract:Taking mice as the object， established dysbacteria mice model by antibiotic mixture gavage for 5 days， with the same amount of normal saline as the control， and studied the effect of antibiotic associated diarrhea in mice blood. The results showed that the antibiotic associated diarrhea made the number and the average volume of platelets in mice were signifcantly less than those of the control group （P ＜0.05）， red cell distribution width was signifcantly greater than that of the control group （P＜0.05）， the other indexes were not statistically signifcant （P＞0.05）. This showed that antibiotic associated diarrhea can signifcantly reduce the platelet count， mean volume and red blood cell distribution width， and has a signifcant impact on the blood coagulation function of mice.

Key words:antibiotics； blood routine； antibiotic associated diarrhea； fora imbalance