賴茂++倪明

[摘要]目的 研究EV71感染手足口病患兒細胞免疫及體液免疫功能的臨床變化特點。方法 隨機選取2014年1月～2015年6月醫(yī)院收診的60例EV71感染手足口病患兒，按照《手足口病診療指南（2010版）》將患兒分為輕型（A組）和重型（B組），再隨機選取2014年1月～2015年6月至醫(yī)院體檢的30例正常兒童作為對照組（C組），觀察比較三組靜脈血淋巴細胞（Th細胞、Ts細胞、B細胞）、血清炎性介質(zhì)（TNF-α、IL-6、IL-10）、血清免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）及補體（C3、C4）表達水平。結果 ①靜脈血淋巴細胞表達水平：A、B兩組的Th細胞、Ts細胞表達水平顯著低于C組，B細胞表達水平高于C組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；②血清炎性介質(zhì)表達水平：A、B兩組的TNF-α、IL-6、IL-10表達水平顯著高于C組，且B組顯著高于A組（P<0.05）；③血清免疫球蛋白水平及補體水平：A、B兩組的IgA、IgG水平高于C組，且B組顯著高于A組（P<0.05）；三組的IgM水平比較差異無統(tǒng)計學意義；A、B兩組的C3、C4水平顯著高于C組，且B組顯著高于A組（P<0.05）。結論 EV71感染手足口病患兒呈細胞及體液免疫功能異常表現(xiàn)，且與患兒的病情有一定的相關性，檢測相關血清指標有助于提高臨床預后評估質(zhì)量。

[關鍵詞]EV71病毒；手足口?。患毎庖?；體液免疫

[中圖分類號] R725.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2016）06（b）-0008-03

Study the changes of cellular immunity and humoral immune function in children with hand-foot-mouth disease in EV71

LAI Mao NI Ming

Department of Paediatrics，Children′s Hospital of Dongguan City in Guangdong Province Institute of Pediatrics Dongguan City in Guangdong Province，Dongguan 523325，China

[Abstract]Objective To study the changes of cellular immunity and humoral immune function in children with hand-foot-mouth disease in EV71.Methods 60 hand-foot-mouth disease children with EV71 infection who received diagnostic hospital from January 2014 to June 2015 were randomly selected and divided into light（group A） and heavy（group B） according to "Hand-foot-mouth disease diagnosis and treatment guidelines （2010 version）"，and then 30 healthy children to the hospital for medical examination from January 2014 to June 2015 were randomly selected as control group（group C）.The three sets of blood lymphocytes（Th cells，Ts cells，B cells），expression the level of serum inflammatory mediators（TNF-α，IL-6，IL-10） expression levels，differences in serum immunoglobulins（IgA，IgG，IgM） and complement levels（C3，C4） skill were observed.Results ①Blood lymphocyte expression levels：the Th cells，Ts cells express terms in group A and group B was significantly lower than that of group C，in terms of expressing B cells was higher than that of group C，the difference was statistically significant（P<0.05）.②The expression level of serum inflammatory mediators：the expression levels of TNF-α，IL-6，IL-10 in group A and group B was significantly higher than that of group C respectively，and group B was significantly higher than that of group A（P<0.05）.③The level of serum immunoglobulin and complement levels：the level of IgA，IgG in group A and group B was higher than that in group C，and group B was significantly higher than that of group A（P<0.05）.The difference of the terms IgM among the three groups was not statistically significant.The levels of C3，C4 in group A and group B was significantly higher than that of group C，and group B was significantly higher than that in group A（P<0.05）.Conclusion EV71 hand-foot-mouth disease infection child presenting cell and humoral immune function abnormalities，and have some correlation with children′ condition to detect serum markers associated help improve the quality of clinical prognosis.

[Key words]EV71 virus；Hand-foot-mouth disease；Cellular immunity；Humoral immunity

手足口病是一種臨床常見的傳染性疾病，主要由腸道薩科奇病毒及EV71病毒感染而導致的，且該病具有較強的傳染性，在我國各個區(qū)域都有出現(xiàn)[1]。EV71感染后，病毒繁殖迅速導致出現(xiàn)病毒血癥，對患兒組織及器官都有一定的影響，可能引發(fā)患兒出現(xiàn)多器官功能障礙，甚至出現(xiàn)功能衰竭等嚴重并發(fā)癥狀[2-3]。該病主要出現(xiàn)于手、足、口等部位的黏膜中及組織受壓位置，病毒聚集、繁殖從而導致局部組織出現(xiàn)病變[4]。隨著臨床醫(yī)學對手足口病的深入研究，發(fā)現(xiàn)病毒感染引起患兒機體內(nèi)的細胞免疫及體液免疫在疾病進展以及組織損傷中發(fā)揮了一定的作用[5]。文章主要就EV71感染手足口病患兒細胞免疫及體液免疫功能的臨床變化特點展開研究。

1資料與方法

1.1一般資料

隨機選取2014年1月～2015年6月醫(yī)院收診的60例EV71感染手足口病患兒，按照《手足口病診療指南（2010版）》[6]將患兒分為輕型（A組）和重型（B組），其中A組36例、B組24例；隨機選取2014年1月～2015年6月至醫(yī)院體檢正常的30例兒童作為對照組（C組）。所有患兒均經(jīng)PCR核酸檢驗證實為EV71病毒感染[7]。A組36例患兒中男16例、女20例；年齡1～6歲，平均（3.4±0.6）歲；病程2～7 d，平均（3.1±1.0）d。B組24例患兒中男13例、女11例；年齡0.7～7歲，平均（3.6±0.5）歲；病程1～6 d，平均（3.6±1.1）d。C組30名兒童中男16例、女14例；年齡0.8～6歲，平均（3.5±0.3）歲。本次研究觀察排除應用免疫抑制劑、結核性疾病、其他病毒感染疾病及免疫性疾病患兒。

1.2方法

1.2.1靜脈血淋巴細胞檢測方法 清晨空腹取血2 ml，加入淋巴細胞分離液后震蕩，離心淋巴細胞，將淋巴細胞放入PBS緩沖液后進行上機檢驗。

1.2.2血清炎性介質(zhì)檢測方法 清晨空腹取血2 ml，離心血清后低溫保存，并采用蒸餾水為空白對照，采用TNF-α、IL-10及IL-6檢測試劑盒進行檢驗。

1.2.3血清免疫球蛋白水平及補體檢驗方法 清晨空腹取血2 ml，離心血清后低溫保存，并依次加入一抗及二抗后室溫孵育，采用IgA、IgG、IgM、C3、C4檢測試劑盒進行檢驗。

1.3觀察指標

觀察三組患者靜脈血淋巴細胞（Th細胞、Ts細胞、B細胞）、血清炎性介質(zhì)（THF-α、IL-6、IL-10）、血清免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）及補體（C3、C4）的表達水平。分別應用血液檢測儀、比色法及放射免疫法進行檢測[8-10]。

1.4統(tǒng)計學方法

采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，采用t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1三組患者靜脈血淋巴細胞表達水平的比較

A組患者的Th細胞表達水平顯著低于C組（P<0.05）；B組患者的Th細胞、Ts細胞表達水平顯著低于C組（P<0.05），B細胞表達水平高于C組（P<0.05）；B組患者的Th細胞、Ts細胞表達水平顯著低于A組（P<0.05），B細胞表達水平高于A組（P<0.05）（表1）。

2.2三組患者血清炎性介質(zhì)表達水平的比較

A、B兩組患者的TNF-α、IL-6、IL-10表達水平顯著高于C組，且B組顯著高于A組（P<0.05）（表2）。

2.3三組血清免疫球蛋白水平及補體水平的比較

A、B兩組患者的IgA、IgG水平明顯高于C組，且B組顯著高于A組（P<0.05）；三組在IgM方面比較差異無統(tǒng)計學意義；A、B兩組在C3、C4水平方面顯著高于C組，且B組高于A組（P<0.05）（表3）。

3討論

手足口病是一種常見的兒科傳染性疾病，該病發(fā)病隱匿、傳染迅速，且多種腸道病毒都可導致兒童患有手足口病，除了典型的皮膚皰疹及神經(jīng)系統(tǒng)癥狀外，呈現(xiàn)多器官影響的特點，如心肌損傷等，重型患兒的生存率較低[11-12]。相關文獻[13]研究指出，手足口病患兒存在免疫因子及炎性因子表達異常的現(xiàn)象。因此，可以得出結論：免疫細胞及炎性因子參與了手足口病的發(fā)作及進展。相關學者指出，手足口病患兒Th細胞出現(xiàn)免疫漂移現(xiàn)象，Th1向Th2細胞轉變從而產(chǎn)生了免疫抑制效果，其同時也是促進手足口病發(fā)展的重要機制之一[14]。健康人體中的Th1/Th2細胞處于動態(tài)平衡狀態(tài)，兩者之間的免疫應答存在交互負反饋現(xiàn)象[15]。Th1細胞因子增長或Th2細胞因子降低都會導致免疫細胞對念珠菌的抑制效果受到影響。Th1細胞因子能夠通過激活巨噬細胞及中性粒細胞從而提高免疫功能；Th2細胞因子則能通過抑制Th1細胞因子的介導作用提高機體對致病菌的易感性[16]。

相關研究[17]指出，EV71感染手足口病患兒存在細胞免疫以及體液免疫異常的現(xiàn)象，患兒Th細胞以及Ts細胞表達下降，而B細胞上升，與本次研究調(diào)查結果一致。Th細胞具有激活免疫細胞及介導的作用，是維持人體免疫細胞系統(tǒng)正常運作的重要調(diào)節(jié)機制之一；Ts細胞能夠激活Th細胞及B細胞，從而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)機制，Th細胞及Ts細胞表達能夠反映患者的免疫狀況，Th細胞及Ts細胞下降能反映患者免疫能力受到抑制，且與患者的病情有一定的關聯(lián)[18]。

本研究觀察發(fā)現(xiàn)，患兒TNF-α、IL-6、IL-10表達水平較高。TNF-α、IL-6、IL-10是被激活的免疫細胞所釋放的介質(zhì)，TNF-α、IL-6能夠?qū)е聶C體產(chǎn)生較強烈的炎癥反應，且能夠?qū)е陆M織、器官損傷，甚至出現(xiàn)功能衰弱和組織損壞等嚴重后果；同時，TNF-α、IL-6對中性粒細胞等炎性細胞具有介導及激活的效果，能夠激活炎性細胞產(chǎn)生炎癥反應。IL-10能夠調(diào)節(jié)T細胞免疫功能，該細胞的異常表達表明患兒體內(nèi)出現(xiàn)細胞免疫異常[19]。IgA、IgG對巨噬細胞及免疫細胞功能具有增強的效果，IgA能夠通過經(jīng)典途徑提高機體免疫功能[20]。補體C3、C4是肽類分子的一種，其能夠通過免疫細胞的激活，參與機體的非特異性免疫。

文章通過分析發(fā)現(xiàn)，EV71感染手足口病患兒Th細胞、Ts細胞表達水平顯著低于正常兒童，B細胞表達高于正常兒童；TNF-α、IL-6、IL-10表達水平顯著高于正常兒童；IgA、IgG水平高于正常兒童；且IgM水平比較差異無統(tǒng)計學意義；C3、C4水平顯著高于正常兒童。說明EV71感染手足口病患兒呈現(xiàn)細胞及體液免疫功能異常表現(xiàn)，與患兒的病情呈一定的相關性，具有重要的現(xiàn)實意義。

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（收稿日期：2016-02-02 本文編輯：王紅雙）