石會勇　甄亞男　王斌　霍守俊　徐忠法

【摘要】 胃癌是我國高發(fā)的惡性腫瘤之一， 占全世界發(fā)病患者的40%左右， 年發(fā)病在20/10萬。目前就診的胃癌患者大部分為中晚期， 占70%以上， 5年生存率在10%左右， 患者死亡的主要原因為浸潤及轉(zhuǎn)移。對于晚期胃癌， 目前主要應用化療結(jié)合生物靶向治療等手段。但胃癌對于化療存在多藥耐藥， 使得針對胃癌的治療存在困難， 缺乏有效的治療手段。針對胃癌浸潤轉(zhuǎn)移及多藥耐藥的相關(guān)分子機制目前仍不甚明確。本文對RhoA與胃癌的相關(guān)研究進展展開一綜述。

【關(guān)鍵詞】 RhoA；胃癌；多藥耐藥

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.22.202

RhoA為Ras GTP酶超家族的成員之一， 通過其分子開關(guān)作用， 參與調(diào)節(jié)細胞的運動、粘附及細胞骨架重排， 是下游基因調(diào)節(jié)信號通路的重要組分， 在胃癌細胞的浸潤、轉(zhuǎn)移及多藥耐藥機制中發(fā)揮了重要作用。

1 RhoA的結(jié)構(gòu)和功能

1. 1 RhoA的結(jié)構(gòu) RhoA是Ras超家族小GTP酶組分之一， 分子量21～25 kDa。以GTP結(jié)合的活性形式及GDP結(jié)合的失活形式存在， 起到細胞進程中轉(zhuǎn)導通路的分子開關(guān)作用。

1. 2 RhoA的功能 RhoA在人類癌癥中常過表達[1]。鳥嘌呤核苷交換因子（GEFs）促進GDP結(jié)合狀態(tài)轉(zhuǎn)換為GTP結(jié)合狀態(tài)， 而GTP酶激活蛋白（GAPs）強化內(nèi)在的GTP酶活性， 從而使其失活。其靜息時， 與GDP結(jié)合滯留于胞質(zhì)中， 呈無活性狀態(tài)。當受到細胞外刺激時， GDP轉(zhuǎn)變?yōu)镚TP， RhoA獲得活性， 轉(zhuǎn)位到細胞膜上， 從而發(fā)揮細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導作用。RhoA活性及失活狀態(tài)可被GDP/GTP交換蛋白或GTP酶活化蛋白調(diào)節(jié)。研究發(fā)現(xiàn)RhoA活性增強可明顯促進腫瘤細胞生長， 這可能跟CyclinD1的表達因RhoA的過度激活而被促進有關(guān)， 提示胃癌的發(fā)生、發(fā)展與可能與RhoA過度激活有關(guān)[2]。

2 RhoA與胃癌

2. 1 RhoA與胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移 胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移是一個復雜的多步驟過程， 主要包括細胞粘附、基質(zhì)降解及遠處侵襲3個環(huán)節(jié)。在胃癌組織中， RhoA的表達據(jù)報道與腫瘤發(fā)生、發(fā)展和浸潤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。RhoA在腫瘤形成過程中是過表達的， 有報道稱RhoA與胃癌的增殖及浸潤有關(guān)[3]。

RhoA活化后作用于下游效應蛋白Rho相關(guān)激酶（Rho associated kinase， ROCK）或mDia， 進而調(diào)節(jié)細胞骨架重組， 使腫瘤發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移。此外， 活化的RhoA通過級聯(lián)反應激活MMP-2、cyclin D1、E-cadherin、uPAR等因子， 這些因子的活化與腫瘤細胞凋亡、增殖、粘附密切相關(guān)。研究顯示RhoA在胃癌中的表達明顯高于癌旁和正常胃黏膜， 并且其表達僅與胃癌患者的浸潤深度有關(guān)[4]。Xu等[5]的研究顯示W(wǎng)nt5a可以通過PI3K/GSK3β/RhoA信號通路促進胃癌細胞的遷移。在胃癌標本TNM分期研究中， RHOA高表達者五年生存率為28%， 低表達者為62%。RhoA表達與胃癌分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學類型顯著相關(guān)。近年認為轉(zhuǎn)錄因子NF-KB和AP21的轉(zhuǎn)錄水平因RhoA的激活被促進， RhoA的激活還可以調(diào)節(jié)增強p27， p21， cyclinD1的活性， 導致細胞的增殖[6]。研究發(fā)現(xiàn)RhoA活性增強導致的p27， p21， cyclinD1的活性的增強可明顯促進胃癌細胞SGC7901細胞生長。腫瘤細胞的一個重要特點是細胞周期異常。研究發(fā)現(xiàn)胃癌細胞進入S期比例可因正顯性突變V14RhoA蛋白的表達明顯增大。

2. 2 RhoA與胃癌化療的多藥耐藥 化療耐藥是胃癌化療效果的主要障礙， 對于是否RhoA的表達影響了胃癌細胞對化療的反應值得研究。樊代明領(lǐng)銜的項目組對胃癌細胞MDR的分子機制進行了長期研究， 首次報道了RhoA參與胃癌MDR的調(diào)控。王旭青等[8]研究發(fā)現(xiàn)胃癌細胞SGC7901生長可明顯因RhoA活性增強而得到促進。引人注意的是：與對照細胞相比， 轉(zhuǎn)染V14RhoA的細胞可降低胃癌細胞對化療藥物的敏感性， 這一點提示不僅胃癌的發(fā)生有RhoA參與， 還可能參與胃癌多藥耐藥機制調(diào)控也有RhoA參與， 但需進一步研究其作用機理， 作者的研究顯示RhoA在胃癌細胞中的過表達導致了其對泰素及長春新堿的耐藥， 從而與不良預后有關(guān)。

RhoA調(diào)節(jié)細胞凋亡的確切機制還不清楚， 但其耐藥性針對化療藥物種類的不同而不同。為鑒定RhoA引起化療耐藥的確切靶點， 對于親本及RhoA轉(zhuǎn)染的細胞提取RNA進行cDNA微陣列分析。鑒定了許多轉(zhuǎn)錄的改變， 大部分與化療耐藥無明顯相關(guān)。但是， 抗氧化相關(guān)蛋白及NF-KB信號通路被認識。特別是超氧化物歧化酶基因的表達與RhoA表達相關(guān)。該研究顯示：RhoA表達受到干擾后不僅Bcl2家族分子被抑制， 并且激活了凋亡誘導因子及大量的caspase家族分子， 這表明腫瘤凋亡的趨勢可因胃癌細胞RhoA表受抑制明顯增強。也有研究顯示轉(zhuǎn)染顯性活性RhoA突變體的NIH3T3細胞， 或者過表達RhoA蛋白在血清饑餓條件下與對照組細胞相比， 細胞凋亡增加， 這也說明在腫瘤的凋亡調(diào)控機制中RhoA起著不可忽視的作用[8]。

抑癌基因是通過基因編碼的蛋白特異性使細胞接受負增長信號， 最總導致腫瘤細胞過度生長、增值受到抑制的基因。細胞會因為抑癌基缺失或者因失去活性而持續(xù)生長， 最后轉(zhuǎn)化成惡性細胞。部分抑癌基因可因RhoA的表達被抑制后表達明顯上調(diào)， 因此抑制RhoA的表達可以成為分子靶向治療腫瘤的新的可能， 并未其提供指導[9]。

EGFR是erbB家族的一員， 配體包括EGF及TGFα等。細胞的凋亡、增值及血管生成等是通過配體與受體結(jié)合后下游一系列信號轉(zhuǎn)導通路被激活實現(xiàn)的。EGFR異常表達或者高表達存在于很多腫瘤中。有研究表明[10]， EGFR信號轉(zhuǎn)導通路與腫瘤的耐藥有關(guān)。近期的一項研究結(jié)果提示：在胃癌患者中， 與癌旁組織相比EGFR的表達顯著升高。EGFR表達水平與其他臨床病理參數(shù)無關(guān)卻與胃癌遠處轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)。胃癌患者因EGFR陽性生存時間短， 預后差。因此EGFR表達在預示胃癌的轉(zhuǎn)移、預后好壞中發(fā)揮舉足輕重的作用。早期EGFR分子靶向治療EGFR陽性或強陽性的患者很有可能非常有效。該項研究發(fā)現(xiàn)EGFR與TopoⅡ表達相關(guān)。

綜上所述， RhoA作為信號開關(guān)， 在胃癌的浸潤、轉(zhuǎn)移中起重要的作用。同時， 近期的研究表明RhoA表達與胃癌的多藥耐藥相關(guān)。對于RhoA的進一步研究， 探討其能否作為胃癌浸潤轉(zhuǎn)移及多藥耐藥的預測指標， 針對RhoA的靶向治療能否改善胃癌的多藥耐藥值得進一步研究。

參考文獻

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[收稿日期：2016-03-21]