陳　娟，鄧　軍，周　佳，謝志軍，甘　靜，溫成平（.浙江中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，浙江杭州　30053；.浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院安全性評(píng)價(jià)研究中心，浙江杭州　3003）

青蒿-鱉甲藥對(duì)配伍治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡小鼠的代謝組學(xué)研究

陳娟1，鄧軍2，周佳1，謝志軍1，甘靜1，溫成平1
（1.浙江中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，浙江杭州310053；2.浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院安全性評(píng)價(jià)研究中心，浙江杭州310013）

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2016-4-26 11：06網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20160426.1106.052.html

目的研究系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）小鼠（MRL/lpr）經(jīng)青蒿-鱉甲藥對(duì)治療后血清代謝物的變化，探討SLE發(fā)病及藥物作用機(jī)制。方法采集對(duì)照組、SLE模型組和青蒿-鱉甲藥對(duì)治療組（低、高劑量組）小鼠的血清樣本，應(yīng)用高效液相色譜-四級(jí)桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)（HPLC-Q-TOF/ MS），對(duì)樣本進(jìn)行代謝圖譜分析。應(yīng)用Mass Hunter和MPP軟件處理數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)模式識(shí)別采用有監(jiān)督的偏最小二乘法-判別分析（PLS-DA）。結(jié)果代謝組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，SLE模型小鼠存在較明顯的脂代謝紊亂。與模型組相比，藥物組可以改善狼瘡鼠體內(nèi)脂質(zhì)代謝異常，影響SLE疾病血栓的發(fā)生發(fā)展；并且可以改善SLE小鼠急性期的炎癥反應(yīng)，減少其病理?yè)p害。結(jié)論青蒿-鱉甲藥對(duì)通過(guò)調(diào)節(jié)SLE小鼠的脂質(zhì)代謝及炎癥反應(yīng)對(duì)其發(fā)揮一定的治療作用。

青蒿-鱉甲藥對(duì)；系統(tǒng)性紅斑狼瘡；小鼠；血清；代謝組學(xué)；液相色譜-四級(jí)桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜

藥對(duì)是中藥配伍形式中的一種，從某種角度上講，藥對(duì)的配伍與應(yīng)用具有特別的意義。所謂中藥藥對(duì)又稱對(duì)藥、對(duì)子藥、姐妹藥，專指臨床上常用的相對(duì)固定的兩味藥物的配伍形式，是中藥配伍中的最小單位［1］。由于研究單味藥難以反映出其在復(fù)方中的真實(shí)作用，而復(fù)方由于藥味多，作用關(guān)系復(fù)雜，對(duì)其研究也難以得出準(zhǔn)確結(jié)論?！八帉?duì)”作為藥配伍中的雛形，對(duì)其研究恰好可以彌補(bǔ)上述不足。復(fù)方中的核心藥對(duì)，在中藥理論中具有相互增效并調(diào)和藥性，引藥歸經(jīng)的作用。

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種自身免疫性疾病。研究認(rèn)為，SLE的發(fā)生主要由于先天腎陰虧虛，以致五臟之精生化乏源，形成以陰虛內(nèi)熱為本的狼瘡體質(zhì)［2］。根據(jù)病因病機(jī)特點(diǎn)，結(jié)合癥狀分析，及古代醫(yī)家選方用藥特點(diǎn)，辨證論治，范永升等［3］確立了解毒祛瘀滋陰療法，按照以法制方的原則，通過(guò)處方、藥物篩選及臨床經(jīng)驗(yàn)，確立解毒祛瘀滋陰方，青蒿、鱉甲為該方的核心組分，兩藥相配，有“青蒿不能直入陰分，有鱉甲領(lǐng)之入也；鱉甲不能獨(dú)出陽(yáng)分，青蒿領(lǐng)之出也”之妙。

代謝組學(xué)借助高通量、高靈敏度與高精確度的現(xiàn)代技術(shù)，分析生物樣本如血液、尿液中的內(nèi)源性代謝物，可以根據(jù)代謝物的變化，發(fā)現(xiàn)生物標(biāo)志物，闡明藥物作用的整體效應(yīng)，包括協(xié)同作用，其思想具有與中醫(yī)理論整體觀念相一致的特點(diǎn)。作為系統(tǒng)生物學(xué)的重要組成部分，代謝組學(xué)已被廣泛應(yīng)用于各類復(fù)雜疾病的作用機(jī)制研究［4］。其中，超高效液相質(zhì)譜聯(lián)用（UPLC/Q-TOFMS）是目前用于分析的一種強(qiáng)有力的方法［5］。本實(shí)驗(yàn)擬選擇解毒祛瘀滋陰方中的青蒿、鱉甲作為藥對(duì)配伍，應(yīng)用代謝組學(xué)技術(shù)研究其干預(yù)狼瘡鼠后血清代謝標(biāo)志物的變化規(guī)律，篩選、鑒定與疾病相關(guān)的代謝標(biāo)記物，探討青蒿-鱉甲藥對(duì)對(duì)SLE的治療機(jī)制。

1　材料

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物2月齡C57BL/6小鼠12只，MRL/ lpr狼瘡鼠36只，由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（滬）2012-0002，實(shí)驗(yàn)用基礎(chǔ)飼料由浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供［6］。

1.2實(shí)驗(yàn)藥品與試劑青蒿、鱉甲生藥材由浙江中醫(yī)藥大學(xué)飲片廠提供。青蒿鱉甲提取液由浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院制劑室制備（濃度：含生藥量0.5 g每毫升），-20℃保存?zhèn)溆茫?］。甲酸（分析純，阿拉丁公司），甲醇（色譜級(jí)，美國(guó)Tedia公司），乙腈（色譜級(jí)，美國(guó)Tedia公司），質(zhì)譜參比液和校準(zhǔn)液為美國(guó)安捷倫公司所提供。

1.3實(shí)驗(yàn)儀器1260 infinity高效液相色譜儀，E-clipse Plus C18色譜柱，Agilent 6520 Q-TOF/MS質(zhì)譜系統(tǒng)，均購(gòu)自美國(guó)Agilent公司；Centrifuge 5417R高速冷凍離心機(jī)（德國(guó)，Eppendorf公司）；Milli-Q Biocel純水儀（美國(guó)，Millipore公司）；Mass Hunter軟件（美國(guó)，Agilent Technologies公司）；Mass Profiler Professional（MPP）軟件（美國(guó)，Agilent Technologies公司）。

2　方法

2.1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)36只MRL/lpr小鼠♀，12只C57BL/6小鼠♀，由浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心飼養(yǎng)（SPF級(jí)）。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，分為對(duì)照組（C57BL/6小鼠）、模型組及青蒿-鱉甲治療組（低、高劑量）。對(duì)照組及模型組每日灌胃生理鹽水1次，每只0.5 mL。低、高劑量組以相當(dāng)于正常成人每日用量5、10倍劑量給藥，分別為0.1、0.2 mL· （10 g）-1（水煎液），每日1次，連續(xù)飼養(yǎng)用藥2個(gè)月。采血前小鼠禁食12 h，眼球取血，收集血液3 000 r·min-1離心15 min，分離血清，-80℃保存?zhèn)溆茫?］。

2.2血清樣本前處理血清樣本在室溫下解凍后，離心后取出100 μL，加入300 μL乙腈沉淀蛋白［7］，渦旋震蕩1 min，靜置10 min，然后4℃低溫高速離心10 min（12 000 r·min-1），400 μL血清樣品用0.22 μm微孔濾膜過(guò)濾，棄去初始濾液，樣品即可進(jìn)行液相質(zhì)譜分析。從4個(gè)實(shí)驗(yàn)組樣本中抽取等體積血清混合制成質(zhì)控樣本，前處理方法與待測(cè)樣本相同。

2.3色譜條件與質(zhì)譜條件依據(jù)本實(shí)驗(yàn)室前期建立的條件進(jìn)行優(yōu)化，最終確定的色譜條件：流動(dòng)相A 為0.1%甲酸水溶液，B為0.1%甲酸乙腈溶液，采用梯度洗脫（0～2 min，20%B；2～13 min，20%～75%B；13～18 min，75% ～85%B；18～25 min，85%～95%B），后運(yùn)行時(shí)間為5 min。自動(dòng)進(jìn)樣器溫度為4℃，柱溫為35℃。

對(duì)質(zhì)譜系統(tǒng)進(jìn)行優(yōu)化，優(yōu)化后的主要參數(shù)是：采用電噴霧離子源ESI正離子模式。掃描范圍m/z 50 ～1 000，干燥氣為N2，干燥氣溫度為350℃，正離子模式毛細(xì)管電壓分別為4 000 V，碎裂電壓為170 V，錐孔電壓為65 V，霧化器壓力為275.8 kPa。使用Centroid模式保存質(zhì)譜數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)采集速率為2 spectrum·s-1。數(shù)據(jù)采集過(guò)程中，參比液實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)校準(zhǔn)質(zhì)譜系統(tǒng)。二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集時(shí)，碰撞能分別設(shè)置為40 eV，二級(jí)質(zhì)譜采集速率為2 spectrum·s-1［8］。

2.4數(shù)據(jù)處理使用Agilent Mass Hunter分析軟

件中分子特征提取 （molecular feature extraction，MFE）處理代謝物信息。提取離子豐度閾值為200，基峰豐度閾值為1 000，正離子模式加和離子種類為［M+H］+。提取后代謝物信息包括保留時(shí)間、精確質(zhì)量數(shù)和豐度，將提取后的數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)存為CEF格式文件，利用MPP軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)預(yù)處理。使用PLS-DA的載荷圖篩選出對(duì)分類貢獻(xiàn)較大的化合物，進(jìn)一步通過(guò) VIP（variable importance in projection）值（＞1.5）確定生物標(biāo)志物，利用方差分析對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。利用PLS-DA對(duì)數(shù)據(jù)矩陣進(jìn)行模式識(shí)別。根據(jù)精確的質(zhì)量數(shù)和二級(jí)質(zhì)譜圖，利用METLIN、HMDB和PubChem等數(shù)據(jù)庫(kù)鑒定潛在標(biāo)記物。

3　結(jié)果

3.1LC-MS分析如Fig 1所示，實(shí)驗(yàn)得到各組血清樣本的TIC圖之間存在一定差異。為保證數(shù)據(jù)的可靠性，在采集過(guò)程中，每間隔8個(gè)樣本進(jìn)樣一次質(zhì)控樣本，以監(jiān)測(cè)系統(tǒng)的穩(wěn)定性。分析質(zhì)控樣本的TIC圖，分保留時(shí)間（前、中、后），采用5個(gè)特征峰的離子精確質(zhì)量、保留時(shí)間和峰面積數(shù)據(jù)。結(jié)果顯示，所選特征峰的保留時(shí)間偏移＜0.01 min，各個(gè)峰面積RSD＜10%，精確質(zhì)量的數(shù)漂移值小于2 ppm。由此可見(jiàn)，在血清樣本數(shù)據(jù)采集過(guò)程中，系統(tǒng)穩(wěn)定，采集數(shù)據(jù)可靠。

3.2數(shù)據(jù)分析對(duì)4組小鼠的代謝圖譜進(jìn)行PCA主成分分析（Fig 2），發(fā)現(xiàn)SLE模型組和對(duì)照組明顯地分離，說(shuō)明2組小鼠血清中代謝物種類或者數(shù)量上存在一定差異。在此基礎(chǔ)上，我們進(jìn)一步采用PLS-DA對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行分型，由得分圖結(jié)果可以看出（Fig 3），SLE組較對(duì)照組有明顯的向左偏移。青蒿-鱉甲配伍治療后，代謝圖譜偏移得到有效的緩解，治療組與對(duì)照組在得分圖中趨于靠近，表明代謝產(chǎn)物差異相對(duì)減小，說(shuō)明青蒿-鱉甲藥對(duì)配伍對(duì)SLE小鼠有治療作用。

3.3差異代謝物的鑒定根據(jù)差異代謝物的精確相對(duì)分子質(zhì)量和二級(jí)質(zhì)譜圖，鑒定差異代謝物。其中10種差異代謝物得到鑒定（Tab 1），各個(gè)差異代謝物在各組中的峰面積變化如Fig 4所示。

3.4代謝物變化趨勢(shì)血清中代謝物的變化趨勢(shì)反映了機(jī)體代謝變化，SLE發(fā)病或藥物干預(yù)都可能會(huì)引起正常代謝圖譜的改變。對(duì)照組和SLE模型組的PLS-DA分析，鑒定出10個(gè)SLE的代謝標(biāo)記物（Tab 1），分析這些代謝標(biāo)記物在給藥前后相對(duì)含量的變化（Fig 4），發(fā)現(xiàn)在SLE模型組中代謝標(biāo)記物含量與對(duì)照組相比差異有顯著性（P＜0.05），說(shuō)明SLE對(duì)小鼠血清中代謝物含量有較大的影響。青蒿-鱉甲藥對(duì)治療組小鼠代謝標(biāo)記物中，血小板活化因子（Lyso-PAF C-16，enantio-PAF C-16）、L-α-溶血卵磷脂（L-α-Lyso phosphatidylcholine）、G9a/ GLP組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑（UNC0638）、L-丁酰基肉堿（Butyryl-L-carnitine，C4）、前列腺素 B3 （PGB3）和乙烷磺酸［（Z）-2-tetracos-15-enamido ethanesulfonic acid］較SLE模型組含量差異有顯著性（P＜0.05），代謝標(biāo)記物含量回調(diào)作用明顯。這些代謝標(biāo)記物含量的回調(diào)，體現(xiàn)了青蒿-鱉甲藥對(duì)配伍對(duì)SLE模型小鼠疾病代謝的調(diào)節(jié)作用。

Tab 1　Identification results of differential metabolites

Fig 1　Representative TIC chromatograms of control group（A），SLE model group（B）and Qinghao-Biejia treatment group［low（C）and high（D）dose］

Fig 2　Score plots of PCA analysis in positive ion mode

Fig 3　Score plots of PLS-DA analysis in positive ion mode

4　討論

正常組小鼠、模型狼瘡鼠及給藥組狼瘡鼠的血清經(jīng)過(guò)PCA和PLS-DA分析，結(jié)合圖譜表明，與模型組相比，青蒿-鱉甲治療組可以降低狼瘡鼠體內(nèi)L-α-溶血卵磷脂（溶血磷脂1，LPC）的含量。溶血磷脂是磷脂的降解產(chǎn)物，由于最常用的磷脂為卵磷脂，因而溶血磷脂一般是指LPC，其具有高度細(xì)胞毒性，可破壞細(xì)胞膜的磷脂層。體內(nèi)卵磷脂代謝產(chǎn)生LPC的過(guò)程由磷脂酶A1和磷脂酶A2催化。磷脂酶A2可催化甘油磷脂的第2位酯鍵斷裂，生成溶血磷脂

Fig 4Charts of different metabolite peak area*P＜0.05，**P＜0.01 vs SLE model 1，即L-α-溶血卵磷脂。磷脂酶A2參與自身免疫病的病理?yè)p傷過(guò)程，它又與自由基的產(chǎn)生密切相關(guān)。有研究表明，SLE患者體內(nèi)磷脂酶A2活性較正常人升高，且活動(dòng)期較非活動(dòng)期增高，可能的機(jī)制為磷脂酶A2水解膜磷脂產(chǎn)生的LPC及其代謝產(chǎn)物，產(chǎn)生多器官損害［9-10］。本研究結(jié)果顯示，模型組血清中LPC含量較正常組明顯升高，結(jié)合以上觀點(diǎn)，可以判斷與SLE疾病的發(fā)展有密切關(guān)系，青蒿-鱉甲治療組干預(yù)后LPC水平明顯下調(diào)，說(shuō)明該藥對(duì)的干預(yù)可以減弱LPC對(duì)細(xì)胞的毒性作用和對(duì)器官的損害，有助于SLE疾病的緩解和治療。

補(bǔ)體系統(tǒng)是機(jī)體免疫應(yīng)答過(guò)程中的一個(gè)重要的效應(yīng)系統(tǒng)，具有溶病毒、溶細(xì)胞、溶菌等免疫調(diào)節(jié)作用，并有清除免疫復(fù)合物以及炎癥介質(zhì)作用。C4是補(bǔ)體經(jīng)典激活途徑的一個(gè)重要組分。補(bǔ)體的各組分在不同激活物的作用下，可循經(jīng)典途徑或替代途徑被順序活化，參與機(jī)體的特異性和非特異性效應(yīng)機(jī)制；同時(shí)，補(bǔ)體活化也可能導(dǎo)致對(duì)機(jī)體組織的損傷。研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)體異常與SLE疾病的發(fā)生發(fā)展有密切的關(guān)系。無(wú)論臨床觀察還是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均證實(shí)，補(bǔ)體成分在SLE發(fā)病中的作用具有雙重性，一方面補(bǔ)體蛋白缺陷或水平低下個(gè)體易患SLE，補(bǔ)體的存在對(duì)抵抗SLE的發(fā)生提供一定的保護(hù)作用；另一方面，補(bǔ)體活化的直接作用和對(duì)免疫細(xì)胞功能的影響可加重SLE的病理?yè)p害，影響SLE病程的發(fā)展和臨床表現(xiàn)［11］。本研究結(jié)果表明，模型組小鼠C4表達(dá)水平升高，C4含量升高常見(jiàn)于風(fēng)濕熱的急性期。經(jīng)典理論認(rèn)為，自身抗原和抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物，進(jìn)而激活補(bǔ)體，造成炎癥反應(yīng)和組織損傷。提示可能與狼瘡鼠急性期炎癥相關(guān)，而青蒿-鱉甲治療組尤其是高劑量組明顯降低了C4的含量，提示青蒿鱉甲藥對(duì)可以改善SLE小鼠急性期的炎癥反應(yīng)，減少其病理?yè)p害。該結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了我們前期的研究成果［6］，發(fā)現(xiàn)青蒿-鱉甲藥對(duì)能抑制小鼠血清中炎性因子IL-6的分泌，明顯降低血清中IFN-γ的水平，從而減少了因自身免疫復(fù)合物的分泌而造成的病理性損害［12］。

血小板活化因子（platelet activating factor，PAF）主要由中性粒細(xì)胞、血小板和巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生，是具有廣泛生物活性的磷脂類遞質(zhì)，參與人體多種生理、病理過(guò)程。PAF需和PAF受體結(jié)合才能產(chǎn)生生物活性。SLE患者經(jīng)常合并動(dòng)、靜脈血栓形成，是血栓栓塞性疾病的高危因素。2009年，美國(guó)研究1 930例SLE病例的結(jié)果顯示，22%的SLE患者合并動(dòng)、靜脈血栓。SLE發(fā)生血栓性疾病的危險(xiǎn)性是其它風(fēng)濕性疾病的9.6倍［13-14］。臨床和實(shí)驗(yàn)證實(shí)，血栓形成的病理過(guò)程會(huì)伴有不同程度的血小板活化，活化的血小板釋放出許多生物活性物質(zhì)，這些活性物質(zhì)可以使SLE體內(nèi)的免疫復(fù)合物沉積于小血管內(nèi)膜、腎小球基底膜、關(guān)節(jié)等部位，激活補(bǔ)體引起炎癥等［13］。且有報(bào)道研究發(fā)現(xiàn)，PAF水平與SLE疾病活動(dòng)性指數(shù)相關(guān)，可作為評(píng)估SLE病情活動(dòng)性的指標(biāo)之一［15］。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，高劑量藥物治療組可以明顯降低Lyso-PAF C-16和enantio-PAF C-16的水平，因此推測(cè)青蒿-鱉甲干預(yù)后可以抑制PAF的活化，從而影響SLE血栓的發(fā)生發(fā)展。

由必需脂肪合成而來(lái)的前列腺素，可以使細(xì)胞對(duì)激素變得敏感。必需脂肪的缺乏，或者將必需脂肪轉(zhuǎn)換成前列腺素的營(yíng)養(yǎng)素（如維生素B3、維生素C和生物素等）的缺乏，都會(huì)造成與激素失調(diào)相關(guān)的癥狀。狼瘡鼠模型組前列腺素B3（PGB3）與正常對(duì)照組相比明顯降低，但藥物組干預(yù)后PGB3水平明顯升高，恢復(fù)正常，提示青蒿-鱉甲可以改善SLE引起的激素水平紊亂的狀況。

綜上所述，通過(guò)運(yùn)用代謝組學(xué)技術(shù)鑒定疾病及用藥后狼瘡鼠血清差異代謝物，發(fā)現(xiàn)青蒿-鱉甲藥對(duì)配伍作用后影響了體內(nèi)一些疾病相關(guān)代謝物，尤其是脂質(zhì)代謝和免疫相關(guān)因子，推測(cè)其可能為藥物作用的關(guān)鍵靶點(diǎn)，為治療SLE疾病復(fù)方的開(kāi)發(fā)和進(jìn)一步研究奠定了理論基礎(chǔ)。

（致謝：本文實(shí)驗(yàn)在浙江中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院中醫(yī)臨床基礎(chǔ)研究所完成，在整個(gè)研究完成過(guò)程中得到了溫成平教授、丁興紅教授、孔宏偉副研究員及謝志軍副研究員的悉心指導(dǎo)和熱忱幫助，在此深表謝意?。?/p>

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Metabonomic study of traditional Chinese herb pair，
Qinghao-Biejia in treating systemic lupus erythematosus mice

CHEN Juan1，DENG Jun2，ZHOU Jia1，XIE Zhi-jun1，GAN Jing1，WEN Cheng-ping1
（1.College of Basic Medical Science，Zhejiang Chinese Medical University，Hangzhou310053，China；2.Safety Evaluation Research Center，Zhejiang Academy of Medical Sciences，Hangzhou310013，China）

AimsTo study the changes of serum metabolites in systemic lupus erythematosus（SLE）mice （MRL/lpr）by treatment of Qinghao-Biejia and to explore the pathogenesis of SLE and mechanism of drug action.MethodsThe serum samples of control group，SLE model group and Qinghao-Biejia treatment group （low and high dose）were collected，the metabolic profile of samples was analyzed by high performance liquid chromatography-quadrupole-time of flight mass spectrometry system（HPLC-Q-TOF/MS）.Software of Mass Hunter and Mass Profiler Professional（MPP）were used to process the data.A supervised mode of partial least squares-discriminant analysis（PLS-DA）was applied to recognize the data pattern.Results There were obvious disorders of lipid metabolism in SLE model.Compared with control group，Qinghao-Biejia treatment group improved lipid metabolism，affected the thrombosis development of SLE；and Qinghao-Biejia treatment group reduced the pathological damage by improving inflammatory acute phase of SLE in mice.ConclusionQinghao-Biejia treatment plays a therapeutic role in repairing the imbalance by multidimensional metabolic pathways in SLE mice.

traditional Chinese herb pair，Qinghao-Biejia；systemic lupus erythematosus；mice；serum；metabonomics；high performance liquid chromatography coupled with Q-TOF/MS

10.3969/j.issn.1001-1978.2016.05.026

A

1001-1978（2016）05-0727-06

R-332；R282.74；R289.1；R344；R364.5；R446.11；R593.241.053.1

2016-01-08，

2016-02-06

國(guó)家公益性行業(yè)科研專項(xiàng)（No 2015468001）；國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No 81373633，81273680）；浙江省重大科技專項(xiàng)（No 2014C03062-1）；浙江省科技廳公益性應(yīng)用研究計(jì)劃項(xiàng)目（No 2013C37100）

陳娟（1984-），女，博士，講師，研究方向：中西醫(yī)藥理學(xué)，中醫(yī)藥系統(tǒng)生物學(xué)，E-mail：mytw_00@163.com；溫成平（1972-），男，博士，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：中醫(yī)防治風(fēng)濕性免疫疾病，通訊作者，E-mail：wengcp@ 163.com