王敏 丁悅 駱海娟

宮頸癌血清精子相關抗原9的表達水平及臨床意義

王敏 丁悅 駱海娟

目的 檢測子宮頸癌患者血清精子相關抗原9（SPAG9）的表達水平，并分析其在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的作用及臨床意義。方法 宮頸癌患者96例為觀察組，臨床分期：I～Ⅱ期45例、Ⅲ～Ⅳ期51例。病理分級：中高分化40例，低分化56例。鱗癌、腺癌分別44例和52例。無淋巴結轉移患者54例，淋巴結轉移42例。選取正常宮頸婦女84例為對照組，主要觀察各組對象血清SPAG9水平，并檢測不同臨床分期、分化程度、腫瘤類型、淋巴結轉移及治療前后SPAG9水平。結果 觀察組患者血清SPAG9 OD值（193.80±13.61），高于對照組（65.73±11.85），差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。觀察組治療后SPAG9 OD值（117.69±12.30），低于治療前，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。宮頸癌患者Ⅲ～Ⅳ期、低分化、淋巴結轉移患者血清SPAG9 OD值分別為（227.61±13.21）、（213.19±12.86）和（219.85±12.93），均高于Ⅰ～Ⅱ期、中高分化及淋巴結未轉移患者，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論 宮頸癌患者血清SPAG9的表達顯著升高，并隨著臨床分期的增加、分化程度的降低及淋巴結轉移而呈現增高趨勢，宮頸癌患者治療后SPAG9顯著降低，SPAG9有可能作為宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展、轉移及預后的標記物。

宮頸癌 血清精子相關抗原9 臨床意義

宮頸癌也稱子宮頸癌，是發(fā)生在宮頸管及子宮陰道部的一種惡性腫瘤。目前尚無可靠的腫瘤標志物應用于治療前后的評估［1］。精子相關抗原-9（SPAG9）是一種腫瘤睪丸抗原，正常情況下特異性的表達于睪丸組織中，有研究認為SPAG9是一種臨床診斷﹑腫瘤侵襲性及預后評估的潛在分子標記物［2］。本資料通過檢測子宮頸癌患者血清精子相關抗原9（SPAG9）的表達水平，并分析其在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的作用及臨床意義。

1　臨床資料

1.1一般資料 2012年1月至2015年8月本院婦科收治的宮頸癌患者96例（觀察組），均經病理學確診。年齡35～66歲，平均（45.70±6.91）歲。按照國際婦產科聯盟（FIGO）臨床分期分為I～Ⅱ期45例﹑Ⅲ～Ⅳ期51例。病理分級：中高分化40例，低分化56例。鱗癌﹑腺癌分別44和52例。無淋巴結轉移患者54例，淋巴結轉移42例。并選取同期體檢婦女84例，均為正常宮頸，作為對照組，年齡34～67歲，平均（45.82±6.86）歲。觀察組和對照組人群年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。本研究經醫(yī)院倫理委員會審核批準，且納入研究對象均知情同意。

作者單位：518081 廣東省深圳市第七人民醫(yī)院 婦科

1.2方法和指標 兩組研究對象均抽取肘部靜脈血5ml，3000r/min 離心10min，取上清液置于-20℃冰箱待測，應用ELISA法采用 APAG9 重組蛋白作為抗原進行檢測。將血清加入96孔板，每個板孔內加入待測樣品 40μl﹑抗體20μl﹑鏈霉親和素 HRP 50μl，置于37℃水浴1～1.5h加入稀釋后的酶標記物 100μl，加顯色液和終止液，酶標儀檢測各孔的OD值［3，4］。主要觀察各組對象血清SPAG9水平，并檢測不同臨床分期﹑分化程度﹑腫瘤類型﹑淋巴結轉移及治療前后SPAG9水平。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS19.0對統(tǒng)計軟件。計量資料以表示，所有數據均呈正態(tài)分布﹑方差齊性，采用t檢驗，P＜0.05差異有統(tǒng)計學意義。

2　結果

2.1各組血清SPAG9結果比較 觀察組患者血清SPAG9 OD值高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。觀察組治療后SPAG9 OD值低于治療前，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1　各組血清SPAG9 OD值結果比較

2.2觀察組患者不同程度﹑不同類型血清SPAG9 OD值比較 宮頸癌患者Ⅲ～Ⅳ期﹑低分化﹑淋巴結轉移患者血清SPAG9 OD值均高于Ⅰ～Ⅱ級﹑中高分化及淋巴未轉移患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；兩組患者鱗癌和腺癌SPAG9 OD值比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2　觀察組患者不同程度、不同類型血清SPAG9 OD值比較（±s）

表2　觀察組患者不同程度、不同類型血清SPAG9 OD值比較（±s）

注：與I～Ⅱ期﹑中﹑高分化﹑淋巴未轉移比較，*P＜0.05

類型　n　OD值（ng/ml）臨床分期?、瘛蚱凇?5　135.24±13.40Ⅲ～Ⅳ期　51　227.61±13.21*分化程度　中﹑高分化　40　148.50±14.17低分化　56　219.85±12.93*類型　鱗癌　44　192.26±14.28腺癌　52　200.12±11.76淋巴結轉移　未轉移　54　151.34±13.70轉移　42　213.19±12.86*

3　討論

宮頸癌是婦科常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病原因目前尚不明確。從分子生物學角度，宮頸癌的產生﹑發(fā)展與多種抑癌基因失活及癌基因激活相關，導致正常細胞增殖失控。SPAG9是一類新發(fā)現的睪丸癌抗原，有研究顯示［5］，SPAG9僅表達于正常睪丸的生殖細胞，在宮頸癌﹑卵巢癌﹑胰腺癌等不同組織來源的惡性腫瘤細胞中也呈現過度表達，并具有較強的免疫原性，可導致腫瘤患者產生較強的體液免疫反應，產生相應抗體，在患者血清中的陽性檢出率較高，目前越來越受到臨床關注［6］。

SPAG9定位于人類 17q21，相對分子質量為84000，其基因是單拷貝基因，SPAG9的特殊結構與腫瘤的發(fā)生高度相關［7］。本資料結果顯示，觀察組患者血清SPAG9 OD值高于對照組，且宮頸癌患者Ⅲ～Ⅳ期﹑低分化﹑淋巴結轉移患者血清SPAG9 OD值均高于Ⅰ～Ⅱ級﹑中高分化及淋巴結未轉移患者，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。提示宮頸癌患者血清SPAG9的表達顯著升高，并隨著臨床分期的增加﹑分化程度的降低及淋巴結轉移而呈現增高趨勢。SPAG9 與C-JUN-NH2（JNK）相互作用蛋白家族（JIP）具有結構同源性，有研究［8］認為，SPAG9與C-JUN-NH2末端激酶信號結合形成共同體，作為一種支架蛋白，通過細胞分裂活性蛋白激酶（MAPK）途徑發(fā)揮作用，參與調控多種機體生理功能，調控細胞的增殖﹑凋亡以及腫瘤的發(fā)生發(fā)展。SPAG 9的過表達能夠促進宮頸癌早期播散，促其增殖﹑侵襲﹑ 轉移，主要通過調節(jié)周期相關蛋白來實現，促使細胞從 G1期進入 G2/S期，加快細胞周期。SPAG9在腫瘤發(fā)展過程中起著關鍵作用［9，10］。本資料結果顯示，觀察組治療后SPAG9 OD值低于治療前，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。提示宮頸癌患者血清SPAG9的表達可反映患者的預后，SPAG9可作為宮頸癌的早期診斷﹑預后及靶向治療等方面具有潛在的臨床價值，對后續(xù)宮頸病變的治療具有指導作用。

綜上所述，宮頸癌患者血清SPAG9的表達顯著升高，并隨著臨床分期的增加﹑分化程度的降低及淋巴結轉移而呈現增高趨勢，宮頸癌患者治療后SPAG9顯著降低，SPAG9可作為宮頸癌的發(fā)生﹑發(fā)展﹑轉移及預后的標記物和分子靶向治療的潛在靶點。

1董有偉，婁閣. 液基細胞學、HPV 檢測及 hTERC、C-myc基因檢測在宮頸癌篩查中的臨床應用.中國腫瘤，2013，22（7）：547～550.

2曹敏敏，張璐，李春艷，等.精子相關抗原9在宮頸腺癌中的表達及其臨床意義.中國婦產科臨床雜志，2014，15（4）：，333～336.

3葉倩，饒金，李輝斌，等.宮頸上皮內瘤變中精子相關抗原 9 的表達及意義.中國計劃生育學雜志，2013，21（12）：803～806.

4Kawamura M， Taki T， Kaku H，et al.Identification of SPAG9 as a novel JAK2 fusion partner gene in pediatric acute lymphoblastic leukemia with t（9，17）（p24，q21） . Genes Chromosomes Cancer，2015，54（7）：401～408.

5王敏，李楊，普英杰.SPAG9在子宮內膜癌中的表達及意義.西南軍醫(yī)，2014，16（5）：497～500.

6Seleit I， Bakry OA， Samaka RM，et al.Immunohistochemical expression of sperm-associated antigen 9 in nonmelanoma skin cancer.Am J Dermatopathol， 2015，37（1）：38～45.

7張璐，顏磊，張輝，等.精子相關抗原 9 在宮頸癌及宮頸上皮內瘤變中的表達及意義.山東大學學報（醫(yī)學版），2014，52（6）：67～72.

8馮元元，何學軍，楊峰濤，等.精子相關抗原9在膀胱移行細胞癌中的表達及臨床意義.癌變畸變突變，2013，25（1）：35～39.

9熊孟祥.抗 SPAG9 自身抗體在腫瘤患者外周血中的表達分析.現代中西醫(yī)結合雜志，2014，23（3）：261～262.

10Saini，Nirmala Jagadish，Abdul S Ansari，et al.Down regulation of SPAG9 reduces growth and invasive potential of triple-negative breast cancer cells： possible implications in targeted therapy. J Exp Clin Cancer Res. 2013， 32（1）： 69～75.

Objective The detection of serum sperm related antigen expression level 9（SPAG9）in patients with cervical cancer，and analyze its role in occurrence and development of cervical cancer and its clinical significance.Methods 96 patients with cervical cancer（the observation group）were selected in our hospital from January in 2012 to August in 2015.The clinical stages：I～stage Ⅱ 45 cases，Ⅲ～Ⅳ 51 cases. Pathology classifi cation：high differentiation 40 cases，56 cases of low differentiation.Squamous carcinoma 44 cases and adenocarcinoma 52 cases respectively.54 patients withoutt lymph node metastasis，42 cases with lymph node metastasis. 84 women（the control group）with normal cervix cases were selected. the main object of observation group study，serum levels of SPAG9 and testing different clinical stage，differentiation，tumor type，lymph node metastasis and SPAG9 level before and after treatment.Results The serum SPAG9 OD value of the observation group 193.80±13.61，higher than the control group 65.73 ±11.85，there were statistically signifi cant difference（P＜0.05）.The SPAG9 OD value of the observation group after treatment was 117.69±12.30，lower than before treatment，the difference was statistically signifi cant（P＜0.05）. The serum SPAG9 OD values of the patients with cervical cancer Ⅲ～Ⅳ period，low differentiation and lymph node metastasis were 227.61±13.21，213.19±12.86 and 12.86±12.93，higher than the patients withⅠ～Ⅱ level，high differentiation and the patients without lymphatic metastasis，there was statistically signifi cant difference （P＜0.05）.Conclusion The expression of the serum SPAG9 in patients with cervical cancer increased significantly，and with the increase of clinical stage，low differentiation degree and lymph node metastases and showed a trend of increase signifi cantly.The expression of the serum SPAG9 signifi cantly reduced after treatment of cervical cancer patients，SPAG9 can be used as the markers of the occurrence，development，metastasis and prognosis of cervical cancer.

Cervical cancer Serum sperm related antigen 9（SPAG9） Clinical signifi cance