李翎　嚴群超

貞草痛風(fēng)消膠囊的抗炎鎮(zhèn)痛效果研究※

李翎1嚴群超2

（1廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院實驗中心，廣州510405；2暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院，廣州510632）

目的研究貞草痛風(fēng)膠囊的抗炎、鎮(zhèn)痛作用效果，為臨床用藥提供可靠依據(jù)。方法采用尿酸鈉致大鼠足腫脹、甲醛致大鼠足跖腫脹和小鼠腹腔毛細管通透性的實驗，觀察貞草痛風(fēng)消膠囊的抗炎作用；冰醋酸所致小鼠的扭體反應(yīng)及熱板致痛的方法觀察貞草痛風(fēng)的鎮(zhèn)痛效果。結(jié)果連續(xù)給藥5天，貞草痛風(fēng)消膠囊低、中、高劑量組可不同程度減輕大鼠后足腫脹程度，降低小鼠腹腔毛細血管通透性，并且能夠延長小鼠扭體發(fā)生的潛伏期，減少發(fā)生次數(shù)，但對熱板法的痛閾，沒有明顯的作用。結(jié)論貞草痛風(fēng)消膠囊抗炎、鎮(zhèn)痛作用良好

貞草痛風(fēng)消膠囊；痛風(fēng)；抗炎；鎮(zhèn)痛

痛風(fēng)是嘌呤長期代謝異常所致的疾病，臨床表現(xiàn)多為高尿酸血癥、急性關(guān)節(jié)炎的反復(fù)發(fā)作、痛風(fēng)石沉積、慢性關(guān)節(jié)炎和關(guān)節(jié)畸形、腎實質(zhì)性病變等。急性發(fā)作時主要表現(xiàn)為關(guān)節(jié)及周圍肌肉組織紅腫熱痛，故治療多以緩解患者癥狀抗炎鎮(zhèn)痛為主，發(fā)作間歇期和慢性期則側(cè)重于控制血尿酸水平及預(yù)防［1］。貞草痛風(fēng)消膠囊是由女貞子、決明子、車前草、烏梢蛇等藥材組成的復(fù)方制劑，對高尿酸血癥有良好的治療效果［2］。本文主要對貞草痛風(fēng)膠囊的抗炎、鎮(zhèn)痛效果進行實驗研究，為臨床治療應(yīng)用提供有效依據(jù)。

1　材料與方法

1.1動物SPF級SD大鼠，動物合格證號：2005A010；SPF級NIH小鼠，動物合格證號：2005A011，購自廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心，許可證號：SCXK（粵）2003-0002。

1.2藥物與試劑貞草痛風(fēng)消膠囊：廣州藍韻醫(yī)藥研究有限公司提供（批號：20050416）；消炎痛：江蘇亞邦藥業(yè)集團股份有限公司制造分公司（批號：0102081）；別嘌醇片：重慶青陽藥業(yè)有限公司（批號：040804）；尿酸鈉：SIGMA公司（批號：120K5305）；伊文氏蘭：上海行知校辦分廠（批號：821102）；乙酸：天津市福晨化學(xué)試劑廠（批號：20030726）。

1.3主要儀器6010紫外/可見分光光度計（惠普上海分析儀器公司）

1.4給藥劑量貞草痛風(fēng)消膠囊臨床用量：4.5g/日，按動物系數(shù)折算，大鼠等效劑量：0.42g/kg，小鼠等效劑量：0.90g/kg，此劑量的2倍為動物實驗低劑量，按2倍遞增設(shè)中劑量、高劑量，別嘌醇（大鼠：0.056g/kg），消炎痛（大鼠：56mg/kg；小鼠：15mg/kg），陰性對照（等體積基質(zhì)）。

1.5實驗方法

1.5.1尿酸鈉致大鼠足腫脹實驗SD大鼠50只，雄性，體重180～200g，隨機均分五組：貞草痛風(fēng)消膠囊高、中、低劑量組、別嘌醇組、陰性對照組。按上述劑量分別灌胃給予相應(yīng)藥物，連續(xù)給藥5d，第5d給藥0.5h后，用10%水合氯醛麻醉大鼠，測量各組大鼠右后足正常體積（于足正面作一清晰標線），在右后肢足跖皮下注入0.1m1尿酸鈉2.5g/100m1后，再分別測量致炎后0.5、1.5、3、4.5h、24h的右后肢體積［3］。計算大鼠右后足腫脹度（大鼠右后足腫脹度=至炎后右后足體積-致炎前右后足體積）。

1.5.2甲醛致大鼠足跖腫脹實驗SD大鼠50只，雄性，體重180～200g，隨機均分五組：貞草痛風(fēng)消膠囊高、中、低劑量組、消炎痛組、陰性對照組。各組大鼠分別灌胃給予相應(yīng)藥物，連續(xù)給藥5d。在第3d給藥后，用10%水合氯醛麻醉大鼠，測量各組大鼠右后足正常體積（于足正面作一清晰標線），在右后肢足跖皮下注入0.1m12.5%甲醛后，再分別測量致炎后第2、3、4、5、6、8d的右后肢體積［3］。計算大鼠右后足腫脹度（大鼠右后足腫脹度=至炎后右后足體積-致炎前右后足體積）。

1.5.3小鼠毛細血管通透性實驗NIH小鼠50只，雌雄各半，體重18～22g，隨機均分五組：貞草痛風(fēng)消膠囊高、中、低劑量組、消炎痛組、陰性對照組。各組小鼠分別灌胃給予相應(yīng)藥物，連續(xù)藥5d，于末次藥后1h，小鼠尾靜脈注射0.5%伊文氏蘭（0.1m1/10g），后立刻腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.2m1/只，20min后斷頭處死動物，剪開腹部皮膚肌肉，用6m1生理鹽水分數(shù)次洗滌腹腔，合并洗滌液加入生理鹽水至10m1，離心（3000rPm，30min），取上清，在590nm處測定OD值［3］。

1.5.4鎮(zhèn)痛實驗-扭體法NIH小鼠50只，雌雄各半，體重18～22g，隨機均分五組：貞草痛風(fēng)消膠囊高、中、低劑量組、消炎痛組、陰性對照組。各組小鼠按照給藥劑量連續(xù)給藥5d.最后一次給藥后0.5h，腹腔注射0.6%冰醋酸溶液（0.2m1/20g），觀察并記錄1h內(nèi)各小鼠發(fā)生扭體反應(yīng)（腹部內(nèi)凹、軀干與后腿伸張、臀部高起）的潛伏期和發(fā)作次數(shù)［4］。

1.5.5鎮(zhèn)痛實驗-熱板法NIH小鼠，雌性，體重18～22g。實驗前對受試動物進行篩選：將小鼠置于（55±0.2）℃的熱板上，以放置于熱板上至小鼠首次舔后足所需時間為該鼠正常痛閾，痛閾<5s或>30s及跳躍的小鼠棄用。選擇50只小鼠（正常痛閾在5～30s內(nèi)），隨機分為5組，即：貞草痛風(fēng)消膠囊高、中、低劑量組、消炎痛組、陰性對照組，重新測正常痛閾，記錄并作為該鼠的藥前痛閾。各組小鼠按照給藥劑量連續(xù)給藥5d，于末次藥后第30、60、90min分別測小鼠痛閾，比較給藥前后各組小鼠痛閾變化［4］。

1.6統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。

2　結(jié)果

2.1貞草痛風(fēng)消膠囊對尿酸鈉致大鼠足腫脹的影響

表1　貞草痛風(fēng)膠囊對尿酸致大鼠足腫脹的影響

表1　貞草痛風(fēng)膠囊對尿酸致大鼠足腫脹的影響

注：與陰性對照組比較：*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001

組別致炎后不同時間的右后足腫脹度0.5h 1.5h3h4.5h24h高劑量組中劑量組低劑量組別嘌醇組陰性對照組0.305±0.12***0.655±0.1510.690±0.200.352±0.11***0.580±0.110.325±0.15***0.655±0.130.705±0.150.420±0.15*0.573±0.150.266±0.10***0.425±0.15*0.467±0.160.395±0.17**0.590±0.130.195±0.13***0.435±0.200.350±0.180.255±0.13***0.470±0.120.130±0.14*0.075±0.07**0.140±0.11*0.155±0.110.290±0.18

表1結(jié)果表明高劑量組能降低尿酸鈉致炎后各時間段的大鼠足腫脹程度，與陰性組比較有顯著差異，有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001，P<0.05），中劑量組在致炎后3h、24h，低劑量組在致炎后24h有一定的降低足腫脹作用。

2.2貞草痛風(fēng)消膠囊對甲醛致大鼠足腫脹的影響

表2　貞草痛風(fēng)消膠囊對甲醛致大鼠足腫脹程度不同時間的影響（n=10，x±S）

實驗結(jié)果表明：高劑量組在甲醛致炎后的第4～8d，有降低足腫脹的作用，與陰性組比較有顯著差異（P<0.05，P<0.01），有統(tǒng)計學(xué)意義，其它劑量組無明顯作用。

2.3貞草痛風(fēng)消膠囊對小鼠毛細血管通透性的影響表3結(jié)果表明：貞草痛風(fēng)消膠囊高、中劑量組有明顯降低毛細血管通透性作用，與陰性對照組比較有顯著差異（P<0.05，P<0.01），具有統(tǒng)計學(xué)意義，低劑量組無明顯作用。

表3　貞草痛風(fēng)消膠囊對小鼠毛細血管通透性的影響

表3　貞草痛風(fēng)消膠囊對小鼠毛細血管通透性的影響

組別高劑量組中劑量組低劑量組別嘌醇組陰性對照組劑量（g/kg）OD值7.23.61.80.015等體積0.061±0.07**0.088±0.08*0.103±0.100.064±0.07**0.159±0.06

2.4扭體法實驗結(jié)果表2結(jié)果表明受試藥物能延長小鼠扭體潛伏期，減少扭體次數(shù)，各劑量組與陰性組比較有顯著差異（P<0.05，P<0.01，P<0.001），具有統(tǒng)計學(xué)意義，但作用強度不如消炎痛組。

表4　貞草痛風(fēng)消膠囊對小鼠扭體的影響

表4　貞草痛風(fēng)消膠囊對小鼠扭體的影響

注：與陰性對照組比較：*P<0.05，**P<0.01.***P<0.001；與消炎痛組比較：###P<0.001

組別高劑量組中劑量組低劑量組別嘌醇組陰性對照組劑量（g/kg）扭體潛伏期7.6±3.49**###8.3±5.92*###4.3±1.89###22.7±8.46***3.6±1.107.23.61.80.015等體積扭體次數(shù)29.4±15.20*###26.3±12.78**###26.5±9.68**###6.20±6.03***46.4±17.38

2.5熱板法實驗結(jié)果實驗結(jié)果表明貞草痛風(fēng)消膠囊中、高劑量組與陰性對照組比較痛域稍有延長，但效果并不顯著，不具有統(tǒng)計學(xué)意義。

表5　不同時間貞草痛風(fēng)消膠囊對小鼠熱刺激痛閾的影響

表5　不同時間貞草痛風(fēng)消膠囊對小鼠熱刺激痛閾的影響

注：與陰性對照組比較：*P<0.05，**P<0.01

組別劑量（g/kgbW）30min 60min90min高劑量組中劑量組低劑量組別嘌醇組陰性對照組7.23.61.80.015等體積2.00±2.753.85±4.531.00±4.3518.80±15.55**1.15±2.881.30±3.534.15±5.003.70±4.769.70±11.74*1.05±1.621.50±3.863.25±5.372.00±6.349.50±11.31*0.35±4.26

3　討論

目前臨床上用于治療痛風(fēng)的藥物主要有秋水仙堿、非甾體抗炎藥、別嘌呤醇等，其中秋水仙堿因應(yīng)用劑量和中毒劑量較接近，較易出現(xiàn)明顯的不良反應(yīng)［5］，尋找安全有效的治療藥物勢在必行。貞草痛風(fēng)消膠囊作為中藥復(fù)方制劑，方中女貞子有抗炎、調(diào)節(jié)免疫功能等藥理作用［6］，烏梢蛇提取液具有良好的消炎鎮(zhèn)痛作用［7］，車前草對腎炎、肝炎等多種炎癥有效［8］。本實驗研究結(jié)果表明，貞草痛風(fēng)消膠囊能夠減輕尿酸鈉引起的大鼠足腫脹程度，并且對甲醛引起的大鼠足腫脹也有緩解作用，說明該復(fù)方制劑對特異性炎癥、慢性炎癥都有一定效果，同時能夠降低毛細管通透性，降低炎癥的滲出率，與痛風(fēng)發(fā)作期的治療目標相吻合，故本制劑對痛風(fēng)發(fā)作期的治療具有一定療效。

［1］青玉鳳，周京國.痛風(fēng)發(fā)病機制及藥物治療研究現(xiàn)狀及展望［J］.中華臨床醫(yī)師雜志（電子版），2012，6（10）:128-131.

［2］李翎，方永奇，鄒衍衍.貞草痛風(fēng)消膠囊治療高尿酸血癥的藥效研究［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2008，14（7）:48-50.

［3］陳奇.中藥藥效研究思路與方法［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2005.

［4］徐淑云.藥理實驗方法學(xué)［M］.3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002.

［5］張玉梅，王薈.痛風(fēng)發(fā)病機制的研究進展［J］.醫(yī)學(xué)綜述，2012，15:2441-2444.

［6］金芝貴，金劍，肖忠革，等.女貞子的藥理作用及其臨床應(yīng)用進展［J］.藥學(xué)服務(wù)與研究，2011（3）:189-192.

［7］馬哲龍，梁家紅，陳金印，等.烏梢蛇的抗炎鎮(zhèn)痛作用［J］.中藥藥理與臨床，2011（6）:58-60.

［8］劉力豐，車前草研究進展［J］.中國醫(yī)藥指南（學(xué)術(shù)版），2009，7（5）:40-41.

LI Ling1， YANQUnchao2
（1. Experiment Center， The First Affiliated Hospital of GUangzhou University of Chinese Medicine， GUangzhou 510405， China；2. Medical College of Ji'nan University， GUangzhou 510632， China）

Objective To study the anti-inf1ammatory and ana1gesic effect of Zhencao Tongfengxiao caPsu1e，and to Provide re1iab1e basis for chinica1medication.Methods Using the uric acid sodium rats foot sWe11ing forma1dehyde to foot metatarsus sWe11ing in rats and ce1iac caPi11ary Permeabi1ity in mice，the anti-inf1ammatory effect of Zhencao Tongfengxiao caPsu1e Was observed.The ana1gesic effect of Zhencao Tongfengxiao caPsu1e on mice acetic acid Writhing and hot P1ate method Was observed.Results After five days，the high medium grouPand 1ow dose grouPcan reduce rats foot sWe11ing degree after different 1eve1and the b1ood caPi11ary Permeabi1ity of the abdomina1cavity，Pro1ong the mice torsion e1imination of the incubation Period，and reduce the frequency，but the Pain thresho1d of hot P1ate method have no significant effect.Conclusion The anti-inf1ammatory and ana1gesic effect of Zhencao Tongfengxiao caPsu1e is good.

Zhencao Tongfengxiao caPsu1e；gout；anti-inf1ammatory；ana1gesic

10.3969/j.issn.1672-2779.2016.09.058

1672-2779（2016）-09-0133-03

廣東省省部產(chǎn)學(xué)研結(jié)合項目（No：201B090400227）

（本文編輯：張文娟本文校對：曹晴2016-02-15）