趙　力　張智鵬　韋選民　李艷明　熊偉曼　劉　陽　張　靖

（陜西省漢中市動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心，陜西漢中 723000）

兩種O型口蹄疫滅活疫苗免疫豬抗體消長(zhǎng)規(guī)律比較

趙力張智鵬韋選民李艷明熊偉曼劉陽張靖

（陜西省漢中市動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心，陜西漢中 723000）

為準(zhǔn)確掌握豬O型口蹄疫滅活疫苗在免疫后抗體的消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)，在兩個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)各選擇4窩體質(zhì)健康、體重接近的仔豬，隨機(jī)分成4組，每組10頭，分別接種兩個(gè)不同廠家豬O型口蹄疫滅活疫苗，采用IHA方法檢測(cè)免疫前后抗體效價(jià)。結(jié)果顯示：兩種疫苗免疫機(jī)體后，都能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng)，但注射一次很難達(dá)到免疫效果，必須在首免后30天進(jìn)行二免，才能保證免疫抗體合格率達(dá)到70%以上的標(biāo)準(zhǔn)；M苗需要加大劑量免疫，才能滿足預(yù)防豬口蹄疫疫病的需要，而N苗用標(biāo)準(zhǔn)劑量免疫就可以對(duì)機(jī)體產(chǎn)生有效的保護(hù)作用，同時(shí)N苗免疫后刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體的速度快，可用于緊急免疫接種；另外在制定免疫程序前，必須對(duì)新生仔豬的母源抗體進(jìn)行監(jiān)測(cè)，掌握本場(chǎng)內(nèi)的母源抗體的消長(zhǎng)規(guī)律，以便確定合適的首免日齡。

豬O型口蹄疫滅活疫苗；免疫抗體；消長(zhǎng)規(guī)律

豬口蹄疫（Foot and mouth disease，F(xiàn)MD）是由口蹄疫病毒（Foot and mouth disease virus，F(xiàn)MDV）引起的一種急性、熱性和高度接觸傳染病，以口腔黏膜、鼻鏡、蹄部和乳房皮膚發(fā)生水泡和潰爛為特征［1］。本病傳染性極強(qiáng)，傳播迅速，感染和發(fā)病率很高，可引起仔豬大量死亡，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失［2］。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為必須報(bào)告的動(dòng)物傳染病，我國(guó)規(guī)定為一類動(dòng)物疫?。?］。

在我國(guó)，口蹄疫O型滅活苗是目前使用最普遍的疫苗，其免疫效果較好，免疫程序較簡(jiǎn)單，在口蹄疫的防制上發(fā)揮了重要作用，許多國(guó)家都是通過免疫滅活疫苗成功實(shí)現(xiàn)了對(duì)口蹄疫暴發(fā)流行的控制［4］。滅活疫苗也是最先研制用于防控口蹄疫的疫苗，是當(dāng)今使用最多、較為安全有效的疫苗［5，6］。為準(zhǔn)確掌握陜西省漢中市規(guī)模豬場(chǎng)使用量最大的兩種豬O型口蹄疫滅活疫苗在免疫后抗體的消長(zhǎng)規(guī)律，以期為今后制定豬O型口蹄疫滅活疫苗的免疫程序以及合理使用疫苗提供參考和借鑒，筆者在兩個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)，同時(shí)對(duì)兩種O型口蹄疫滅活疫苗進(jìn)行了分組試驗(yàn)研究，現(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。

1　材料和方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1試驗(yàn)豬

X場(chǎng)和Y場(chǎng)兩個(gè)生豬規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)里各選取的40頭保育仔豬，兩個(gè)豬場(chǎng)試驗(yàn)豬品種均為杜×長(zhǎng)×大。

1.1.2試驗(yàn)疫苗

采用漢中市規(guī)模豬場(chǎng)使用量最大的兩種口蹄疫滅活苗進(jìn)行比對(duì)。一種是政府統(tǒng)購疫苗，由M公司生產(chǎn)（毒株O/MYA98/XJ/2010株+O/GX/09-7，以下簡(jiǎn)稱 M苗），生產(chǎn)批號(hào)：1402004；另一種是規(guī)模場(chǎng)自行采購疫苗，由N公司生產(chǎn)（毒株O/MYA98/BY/2010，以下簡(jiǎn)稱N苗），生產(chǎn)批號(hào)：H140209J。

1.1.3試劑

豬O型口蹄疫正向間接血凝抑制檢測(cè)試劑盒。生產(chǎn)廠家：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所，生產(chǎn)批號(hào)：2014052304。

1.2方法

1.2.1分組

X場(chǎng)和Y場(chǎng)各選擇4窩體質(zhì)健康、體重接近的仔豬，隨機(jī)分成4組，每組10頭，具體分組見表1。按常規(guī)進(jìn)行飼養(yǎng)管理，其他疫苗的免疫程序不變。

表1　試驗(yàn)分組

1.2.2免疫注射

仔豬40日齡進(jìn)行首免，首免30天后進(jìn)行二免。

1.2.3樣品采集

試驗(yàn)過程中共采血四次，第一次采血在首免當(dāng)天，主要是查明仔豬的母源抗體情況；第二次采血在首免后30天，檢測(cè)首免后30天的免疫抗體效價(jià)情況，看是否達(dá)標(biāo)；第三次和第四次采血分別在二免后30天和二免后60天。經(jīng)前腔靜脈逐頭采血，按常規(guī)方法分離保存血清。

1.2.4結(jié)果判定

采用正向間接血凝試驗(yàn)（IHA）檢測(cè)抗體效價(jià)，按農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)，正向間接血凝試驗(yàn)（IHA）抗體效價(jià)≥1∶32（即5 1og2）為免疫合格，群體合格率≥70%為合格。

1.2.5數(shù)據(jù)處理

采用SPSS軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，抗體效價(jià)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示；抗體效價(jià)差異性的分析采用t檢驗(yàn)。

2　結(jié)果與分析

2.1X場(chǎng)試驗(yàn)組

X場(chǎng)試驗(yàn)結(jié)果見表2。A組在免疫后抗體水平整體較低，到二免后60天抗體合格率才達(dá)到70%，在二免后60天平均抗體效價(jià)較免疫前高1.5個(gè)滴度，差異顯著（＜0.05）；B組在免疫后抗體水平整體較高，到二免后30天抗體合格率達(dá)到100%，在二免后30天平均抗體效價(jià)較免疫前高1.5個(gè)滴度，差異極顯著（＜0.01）。

C組在免疫后抗體水平整體較高，到二免后30天抗體合格率達(dá)到80%，在二免后30天平均抗體效價(jià)較免疫前高2.6個(gè)滴度，差異極顯著（＜0.01），在二免后60天平均抗體效價(jià)較免疫前高2.4個(gè)滴度，差異極顯著（＜0.01）；D組在免疫后抗體水平整體較高，到二免后30天抗體合格率達(dá)到90%，在二免后60天平均抗體效價(jià)較免疫前高2.7個(gè)滴度，差異極顯著（＜0.01）。

2.2Y場(chǎng)試驗(yàn)組

Y場(chǎng)試驗(yàn)結(jié)果見表3。A組在首免后30天抗體合格率達(dá)到70%，在二免后30天平均抗體效價(jià)較首免前高2.1個(gè)滴度，差異極顯著（＜0.01）；B組在首免后30天抗體合格率為30%，在二免后30天和二免后60天的抗體合格率分別為90%和100%，但抗體水平整體不高，免疫后3次的平均抗體效價(jià)和首免前相比，差異均不顯著（＞0.05）。

C組在二免后30天抗體合格率達(dá)到100%，抗體水平整體不高，在二免后30天平均抗體效價(jià)較免疫前高1.2個(gè)滴度，差異顯著（＜0.05）；D組在免疫后抗體水平整體較較高，到首免后30天抗體合格率達(dá)到100%，在首免后30天平均抗體效價(jià)較免疫前高2.3個(gè)滴度，差異極顯著（＜0.01），二免后30天平均抗體效價(jià)較免疫前高3.4個(gè)滴度，差異極顯著（＜0.01），在二免后60天平均抗體效價(jià)較免疫前高1.7個(gè)滴度，差異顯著（＜0.05）。

表3　Y場(chǎng)免疫抗體檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

3　討論與結(jié)論

從母源抗體水平方面分析來看，兩場(chǎng)的抗體水平在首免后30天，上升幅度不大，甚至出現(xiàn)下降的情況，尤其是Y場(chǎng)的B、C兩組下降非常明顯。表明在仔豬母源抗體水平處于較高水平時(shí)接種口蹄疫疫苗，免疫效果會(huì)受到母源抗體的干擾，同時(shí)母源抗體也會(huì)被中和，影響免疫效果。這也與薛新梅的報(bào)道一致［7］。因此，規(guī)?；i場(chǎng)在制定本場(chǎng)免疫程序前，必須對(duì)新生仔豬的母源抗體進(jìn)行監(jiān)測(cè)，掌握本場(chǎng)內(nèi)的母源抗體的消長(zhǎng)規(guī)律，以便確定合適的首免日齡（圖1、2）。

從免疫抗體水平分析來看，兩場(chǎng)的抗體水平在首免后30天，上升幅度不大，只有個(gè)別組的抗體平均水平達(dá)到了5log2，很難起到保護(hù)作用，在二免后30天，抗體水平上升明顯，除了X場(chǎng)的A組外，抗體平均水平都高于5log2，且抗體合格率都在70%以上，起到了很好的保護(hù)作用，在二免后60天，除了Y場(chǎng)的A組外，抗體平均水平同樣高于5log2，抗體合格率都在70%以上。表明：豬O型口蹄疫滅活疫苗注射一次很難達(dá)到免疫效果，必須要在首免后30天進(jìn)行二免，才能保證免疫抗體合格率達(dá)到70%以上的標(biāo)準(zhǔn)，這與韋顯凱的報(bào)道一致［8］。所以，為了獲得較好的口蹄疫免疫效果，對(duì)豬群進(jìn)行加強(qiáng)免疫是非常有必要的（圖1、2）。

從兩種疫苗免疫效果對(duì)比分析來看，N苗免疫后，刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體的速度比M苗快，在進(jìn)行緊急免疫接種時(shí)，效果較好。M苗用標(biāo)準(zhǔn)劑量免疫后，很難對(duì)豬群產(chǎn)生保護(hù)作用，加大劑量免疫后，能滿足預(yù)防豬口蹄疫疫病的需要，而N苗用標(biāo)準(zhǔn)劑量免疫就可以對(duì)機(jī)體產(chǎn)生有效的保護(hù)作用。表明兩種豬O型口蹄疫滅活疫苗免疫機(jī)體后，都能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng)，M苗需要加大劑量免疫，才能滿足預(yù)防豬口蹄疫疫病的需要，而N苗用標(biāo)準(zhǔn)劑量免疫就可以對(duì)機(jī)體產(chǎn)生有效的保護(hù)作用，同時(shí)N苗免疫后刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體的速度快，可用于緊急免疫接種（圖1、2）。

在實(shí)際生產(chǎn)中，規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)可參考上述結(jié)論，根據(jù)本場(chǎng)的實(shí)際情況，科學(xué)合理選擇使用疫苗。在免疫前，監(jiān)測(cè)母源抗體水平，以便確定合適的首免日齡，避免母源抗體對(duì)免疫效果的干擾；免疫后，測(cè)定抗體水平以評(píng)價(jià)免疫效果，并對(duì)抗體不達(dá)標(biāo)動(dòng)物及時(shí)補(bǔ)免，同時(shí)持續(xù)進(jìn)行周期性抗體水平監(jiān)測(cè)，還可對(duì)本場(chǎng)的免疫程序修正提供數(shù)據(jù)支持。另外血樣采集要具代表性，不同種類、用途、時(shí)段的都應(yīng)列為監(jiān)測(cè)對(duì)象，避免因采樣不全而帶來測(cè)定差異。

［1］陳溥言.獸醫(yī)傳染病學(xué) ［M］.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2006：73-78.

［2］何長(zhǎng)生，王軍，王非，等.不同廠家豬O型口蹄疫滅活疫苗免疫效果監(jiān)測(cè)［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2012，33（7）：134-136.

［3］陳繼明.重大動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)指南［M］.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社，2008：169-181.

［4］易悅，王利娜，徐志文，等.豬口蹄疫疫苗的研究進(jìn)展及其應(yīng)用［J］.豬業(yè)科學(xué)，2011（2）：44-48.

［5］Li ZY，Liu JX.The current state of vaccines used in the field for foot and mouth disease virus in China［J］.Expert Review of Vaccines，2011，10（1）：13-15.

［6］Rodriguez L，Gay C.Development of vaccines toward the global control and eradication of foot and mouth disease［J］. Expert Review of Vaccines，2011，10（3）：377-387.

［7］薛新梅，魯夢(mèng)婷，薛琴.口蹄疫母源抗體對(duì)仔豬疫苗免疫的影響［J］.中國(guó)獸醫(yī)雜志，2014，50（8）：56-58.

［8］韋顯凱，鄭敏，趙國(guó)明，等.不同規(guī)模豬場(chǎng)O型口蹄疫免疫抗體監(jiān)測(cè)和效果分析［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2013，45（1）：46-47.

S858.28

A

1673-4645（2016）09-0072-03

2016-07-19

趙力（1987-），男，陜西人，本科，助理獸醫(yī)師，主要從事動(dòng)物疫病防控工作，E-mail：aibpmj@163.com