王金君 辛萍萍 孫黎明 胡士林

摘要：通過閱讀大量參考文獻及調(diào)查多個奶牛場實際治療情況，特篩選蒲公英、金銀花、連翹、黃連、大黃、王不留行、通草、魚腥草、紫花地丁、決明子等十味中藥，研制而成中藥方劑，經(jīng)臨床治療試驗證明，自我研制的中藥方劑對奶牛乳房炎的治愈率達到83.33%，總有效率達到91.67%，在2個療程6次用藥后，治愈率達到71.88%，臨床治療效果比較理想。

關鍵詞：奶牛；乳房炎；中藥方劑；臨床治療；治愈率

中圖分類號：S853.7 文獻標識碼：A文章編號：2095-9737（2016）05-0001-02

隨著社會的高速發(fā)展，人民物質生活水平越來越高，對食品安全也更加關注，因此乳品加工廠、奶站對牛奶檢測也非常嚴格，“抗生素奶”就是主要檢測內(nèi)容之一。而在奶牛養(yǎng)殖過程中，治療奶牛乳房炎通常選擇西藥治療，即抗生素療法，雖然其治療見效快，但因牛奶中容易出現(xiàn)藥物殘留而導致牛奶無法賣出，造成經(jīng)濟損失[1] 。

中草藥資源豐富，成本低廉，使用方便，毒副作用小，且無藥物殘留，因此中草藥治療奶牛乳房炎越來越受到人們的重視[2]。在借鑒已有中草藥組方基礎上，選擇清熱解毒、活血化瘀、瀉火通經(jīng)、下乳消腫的10種中草藥，篩選出有效可行的組方治療奶牛乳房炎，縮短病程，提高治療效果，減少經(jīng)濟損失。

1 中草藥選擇

蒲公英、金銀花、連翹、黃連、大黃、王不留行、通草、魚腥草、紫花地丁、決明子，附各中草藥功效（表1）。

2 中草藥組方

蒲公英60g、金銀花60g、連翹30g、黃連30g、大黃15g、王不留行15g、通草15g、魚腥草15g、紫花地丁10g、決明子10g，混拌均勻，加水2000g浸泡60min，放于火爐上燒沸后，將爐火調(diào)至文火煎熬40min即成。

3 中藥組方對各種乳房炎病原菌的耐藥性試驗

3.1 試驗材料

3.1.1 主要試劑

培養(yǎng)基：犢牛血清、5%綿羊血培養(yǎng)基、營養(yǎng)肉湯、麥凱康瓊脂、營養(yǎng)瓊脂、生化管、微量發(fā)酵管和藥敏試紙等均購自杭州天和微生物試劑有限公司[3-4]。

乳房炎診斷液：北京亞臨床乳房炎快速診斷液（BMT），購于北京市奶牛新技術公司。

單味中藥（對照）：黃連、大黃、連翹、紫花地丁、魚腥草。

中藥方劑：蒲公英、金銀花、黃連、大黃、通草、王不留行、連翹、紫花地丁、魚腥草、決明子共10味中藥。

3.1.2 病料來源及采集方法

臨沂某奶牛場患乳房炎奶牛40頭，用無菌離心管取患病乳區(qū)奶樣6～8mL，標明牛只編號、日期?；疾∪閰^(qū)，2h內(nèi)送實驗室保存。

3.1.3 中藥液提取方法

3.1.3.1 單味中草藥液提取方法

取黃連、大黃、連翹、魚腥草、紫花地丁各20g，各用200g水浸泡2h，強火煮沸后，溫火維持45min，過濾剩渣，再加800g水進行第二煎，方法同上，維持30min，合并兩次濾液，溫火濃縮成相當于含生藥1g/mL，高溫高壓滅菌后4℃儲存，備用。

3.1.3.2 中藥方劑液提取方法

取中草藥方劑100g加水1000mL，浸泡6h，然后煎50min，過濾藥液后再加水500mL，煎30min，再次過濾藥液，合并上次過濾藥液一起煎，用慢火濃縮到100mL左右，即100mL里每毫升含1g生藥。

3.2 試驗方法

3.2.1 細菌分離培養(yǎng)鑒定

細菌分離純化、培養(yǎng)、鑒定：將無菌采集的病牛奶樣搖勻，取1mL加入10mL含犢牛血清的肉湯里，用接種環(huán)劃線于血瓊脂培養(yǎng)基，做需氧培養(yǎng)（37℃， 18～24h），挑取平皿上典型單菌落進行分離純化[5]。根據(jù)菌落的形態(tài)、革蘭氏染色的特性等對細菌初步分類，然后通過選擇性培養(yǎng)基結合生化反應管進一步鑒定。

3.2.2 藥敏性試驗

應用試管二倍稀釋法和打孔法進行藥物體外抗菌試驗[6]。分別將細菌接種于營養(yǎng)肉湯中，37℃搖床培養(yǎng)12～14h，生理鹽水稀釋至適當濃度，取菌液10μL，均勻涂布于普通營養(yǎng)瓊脂平板。用直徑5mm的滅菌打孔器在每個平皿內(nèi)均勻打5個孔，挑去孔內(nèi)的瓊脂，加熱封底后注入中藥液30μL （以剛滿為標準），一孔注入生理鹽水為空白對照，37℃恒溫培養(yǎng)18～24h。觀察并測量，分別記錄抑菌圈直徑大?。╩m），每孔取不同方向測2次，取平均值。

3.3 試驗結果與分析

3.3.1 細菌分離鑒定結果

對40頭病牛提供的40份乳樣進行細菌分離培養(yǎng)，共檢測出7種共38株病菌，其中鏈球菌最多，共13株，占34.24%，葡萄球菌跟大腸桿菌較多，葡萄球菌占21.05%，大腸桿菌占18.42%，見表2。

從表3可以看出所選中藥方劑對所檢測出的各種常見菌都達到了極敏效果。對治療奶牛乳房炎有很大幫助。

4 復方中草藥對奶牛乳房炎的臨床治療試驗

4.1 材料與方法

4.1.1 試驗對象及分組

產(chǎn)后泌乳奶牛，確診為奶牛乳房炎的病例，分為復方中藥治療組奶牛24頭，西藥治療對照組奶牛32頭，未用藥對照組奶牛8頭。

4.1.2 治療藥物

復方中藥由蒲公英60g、金銀花60g、 連翹30g、黃連30g、大黃15g、王不留行15g、通草15g、魚腥草15g、紫花地丁10g、決明子10g組成，將上述各藥過60目篩粉碎，混合均勻，即成復方中藥散劑，加水2000g浸泡60min，放于火爐上燒沸后，將爐火調(diào)至文火煎熬40min即成。

西藥以常用抗生素為主。

4.1.3 給藥方式與劑量

用復方中藥治療時，將中藥散劑用煎熬制成后，候溫灌服，視病情每頭牛每次給藥300～500g，每天給藥1次，連用3次為1個療程，連續(xù)用藥不超過3個療程。

西藥治療時，以乳房內(nèi)灌注為主，重癥輔以全身治療。

4.1.4 藥物療效判定標準

治愈：臨床癥狀紅、腫、熱、痛消失，乳房泌乳機能恢復正常，乳汁無任何異?，F(xiàn)象，實驗室檢測細菌及體細胞數(shù)量均符合要求。

好轉：臨床癥狀消失，乳汁無異?，F(xiàn)象，但乳汁中體細胞數(shù)量及細菌指標較高。

無效：臨床癥狀仍然存在，乳汁異常，無法作為商品乳出售。

4.1.5 數(shù)據(jù)分析

用SPSS 13.0對試驗所得數(shù)據(jù)分析。

4.2 結果與分析

4.2.1 復方中草藥對奶牛乳房炎的臨床治療試驗結果

由表4可以看出：復方中藥共治療患乳房炎奶牛24頭，治愈20頭，治愈率83.33%；有效22頭（治愈20頭，好轉2頭），有效率91.67%；無效2頭，占8.33%。其中用藥1～3次后治愈4頭，治愈率16.67%；用藥4～6次后治愈13頭，治愈率54.17%；用藥7～9次后治愈3頭，治愈率12.50%。西藥對照組共治療患乳房炎奶牛32頭，治愈23頭，治愈率71.88%；有效29頭（治愈23頭，好轉6頭），有效率90.63%；無效3頭，占9.38%。復方中藥對奶牛乳房炎的總治愈率比西藥治療組高11.45%，差異顯著（P<0.05），總有效率比西藥治療組高1.04%，但差異不顯著（P>0.05）。可見二者在治療奶牛乳房炎方面總有效率相當，但總治愈率卻有明顯差別，說明西藥雖然可以基本消除乳房炎的臨床癥狀，但乳汁性狀仍然不太理想，相比而言，復方中藥不但有效率較高，而且治愈率也較高，復發(fā)率低。未治療組的8頭奶牛中，3例出現(xiàn)癥狀好轉，總治愈率也遠遠低于中藥治療組和西藥治療組，差異極顯著（P<0.01），如果不及時治療，有被淘汰的危險。

注：有相同小寫字母表差異不顯著（P>0.05），不同小寫字母表差異顯著（P<0.05），大寫字母表示差異極顯著（P<0.01）。

4.2.2 臨床用藥量的初步確定

分析試驗數(shù)據(jù)可知，多數(shù)奶牛乳房炎病例在用藥4～6次后治愈，與其他兩組相比，差異極顯著（P<0.01），并且用藥1～3次的治愈率比用藥7～9次的治愈率高，差異顯著（P<0.05），用藥2個療程后有70.84%的奶牛達到治愈的目的，2個療程后仍不能治愈的病例所占百分比較小，由此可以初步認定該藥在臨床使用中用藥量暫定為2個療程為宜。

5 討論

中草藥制劑應向高效、速效、微量方向發(fā)展。除尋找用量小、效果好的中草藥外，要適應現(xiàn)代生產(chǎn)工藝的要求，在中草藥有效成分分離提取方法、中草藥藥效、作用機制方面作進一步研究，提高提取效率和產(chǎn)物有效濃度，研制開發(fā)出高效、安全、穩(wěn)定的中草藥制劑，以便使中草藥在奶牛乳房炎防治方面發(fā)揮更大的作用。

中草藥在防治奶牛乳房炎上具有廣闊的應用前景，應該加強研究工作，研制開發(fā)作用廣泛、價格便宜的奶牛用中草藥制劑，以期早日取代廣泛應用的抗生素和化學藥物，實現(xiàn)綠色養(yǎng)殖，生產(chǎn)無抗生素奶。

參考文獻：

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[2] 耿光瑞，耿永鑫.奶牛乳房炎的研究進展[J].河北北方學院學報，2007，23（2）：44-49.

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[4] 馬保臣，李建基，王春敖.奶牛急性乳腺炎病原菌的分離與鑒定[J].中國獸醫(yī)雜志，2004，40（11）：22-24.

[5] 邱立，張耀相，楊增岐.奶牛乳房炎病原菌的分離與鑒定[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2006（2）∶63-64.

[6] 代敏，王雄清，王紅寧，等.綿陽市奶牛乳房炎病原菌的分離鑒定及耐藥性分析[J].中國獸醫(yī)雜志，2007，43（3）∶33-34.