于凱王一宇 金仙花 李雪 朱文靜 夏建新

252000山東，聊城市人民醫(yī)院皮膚科（于凱）；吉林大學(xué)第二醫(yī)院皮膚科（王一宇、金仙花、李雪、朱文靜、夏建新）

阿維A與干擾素對(duì)人皮膚T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株Hut78細(xì)胞增殖及白細(xì)胞介素15表達(dá)的影響

于凱王一宇 金仙花 李雪 朱文靜 夏建新

252000山東，聊城市人民醫(yī)院皮膚科（于凱）；吉林大學(xué)第二醫(yī)院皮膚科（王一宇、金仙花、李雪、朱文靜、夏建新）

目的檢測不同濃度阿維A、干擾素α（IFN?α）單獨(dú)或聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人皮膚T細(xì)胞淋巴瘤Hut78細(xì)胞株的增殖抑制作用及白細(xì)胞介素15（IL?15）表達(dá)的影響。方法將Hut78細(xì)胞分為空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組、二甲基亞砜組（DMSO）和實(shí)驗(yàn)組，其中實(shí)驗(yàn)組分別用0.1～10μmol/L阿維A和5 000～20 000 IU/ml IFN?α單獨(dú)或1.0μmol/L阿維A聯(lián)合5 000～20 000 IU/m l IFN?α作用Hut78細(xì)胞，培養(yǎng)24、48、72 h后分別進(jìn)行測定。CCK8法檢測細(xì)胞增殖情況，ELISA檢測藥物處理后細(xì)胞的白細(xì)胞介素15（IL?15）表達(dá)情況。結(jié)果各濃度阿維A或聯(lián)合作用組與DMSO組相比及IFN?α組與陰性對(duì)照組相比，Hut78細(xì)胞增殖和IL?15表達(dá)均受到明顯抑制，抑制作用隨濃度增加和時(shí)間延長而增強(qiáng)。重復(fù)測量方差分析顯示，阿維A、IFN?α單獨(dú)或聯(lián)合作用不同時(shí)間，細(xì)胞增殖抑制率和IL?15表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），不同作用濃度之間差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），作用時(shí)間與藥物濃度之間存在交互作用（均P＜0.05）。1.0μmol/L阿維A＋10 000或20 000 IU/ml IFN?α組與相應(yīng)濃度藥物單獨(dú)作用組比較，細(xì)胞抑制率差異在24、48、72 h時(shí)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。1.0μmol/L阿維A+5 000 IU/m l IFN?α組在24、48、72 h時(shí)與5 000 IU/m l IFN?α組相比，IL?15表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；1.0μmol/L阿維A＋10 000或20 000 IU/ml IFN?α組與相應(yīng)濃度藥物單獨(dú)作用組之間IL?15表達(dá)差異在24、48、72 h時(shí)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論阿維A和IFN?α均對(duì)Hut78細(xì)胞的增殖有抑制作用，均可下調(diào)Hut78細(xì)胞IL?15的表達(dá)，這種作用隨著濃度的增加和時(shí)間的延長而增強(qiáng)，且兩者聯(lián)合用藥優(yōu)于單獨(dú)用藥。

淋巴瘤，T細(xì)胞，皮膚；阿維A；干擾素α；白介素15；細(xì)胞增殖；細(xì)胞系，腫瘤；Hut78細(xì)胞

維A酸類藥物是一組與天然維生素A結(jié)構(gòu)類似的化合物，可調(diào)節(jié)上皮細(xì)胞等的生長和分化，對(duì)惡性細(xì)胞生長有抑制作用，還可調(diào)節(jié)免疫和炎癥過程等。干擾素（IFN）是病毒或其誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)人體細(xì)胞產(chǎn)生的一種糖蛋白，有病毒抑制、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用。IFN?α?2b被廣泛用于皮膚T細(xì)胞淋巴瘤（CTCL）的治療，可以有效控制早期蕈樣肉芽腫，對(duì)腫瘤期患者及Sézary綜合征患者也是一線治療藥物［1］。我們通過體外培養(yǎng)人T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株Hut78，觀察阿維A和IFN?α對(duì)細(xì)胞生長的影響，初步探討其作用機(jī)制，為臨床治療皮膚T細(xì)胞淋巴瘤提供新的思路。

一、材料和方法

1.細(xì)胞、試劑和儀器：人T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株Hut78來自中國科學(xué)院上海細(xì)胞庫。培養(yǎng)基為含20%胎牛血清的IMDM（Iscove′smodified Dulbeccomedium，美國Gibco公司），并添加100 U/m l青霉素和100 g/L鏈霉素（上海譜振生物科技有限公司）。阿維A膠囊（重慶華邦公司惠贈(zèng)，規(guī)格：10mg，產(chǎn)品批號(hào)：2012034），重組人IFN?α?2b注射液（天津華立達(dá)生物工程有限公司惠贈(zèng)，規(guī)格：300萬IU/ml，批號(hào)：sa120601），CCK8細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒、人白細(xì)胞介素15（IL?15）ELISA試劑盒（武漢博士德生物有限公司），二甲基亞砜（DMSO）來自北京化學(xué)試劑公司。

2.藥物配制：避光條件下稱取阿維A粉末（純度＞99.0%），用DMSO配制成10mmol/L，吹打混勻，過濾除菌，分裝于1.5ml Eppendorf管中，置于-20℃冰箱避光儲(chǔ)存。使用前用IMDM培養(yǎng)液稀釋成3個(gè)濃度：0.1、1.0、10μmol/L，即配即用。用IMDM培養(yǎng)基稀釋IFN?α至終濃度5 000、10 000、20 000 IU/ml，即用即配。

3.細(xì)胞分組及處理：設(shè)空白對(duì)照組（只加入培養(yǎng)基）、陰性對(duì)照組（只加入單細(xì)胞懸液）、DMSO組（加入單細(xì)胞懸液，DMSO體積分?jǐn)?shù)為0.1%）和實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組又分為阿維A組、IFN?α組、聯(lián)合組，阿維A組細(xì)胞分別用0.1、1.0、10μmol/L阿維A處理［2］，IFN?α組分別用5 000、10 000、20 000 IU/ml IFN?α處理［3］；預(yù)實(shí)驗(yàn)中10μmol/L阿維A對(duì)細(xì)胞增殖抑制作用極其明顯，為避免其掩蓋不同濃度IFN?α所產(chǎn)生的影響，故聯(lián)合組細(xì)胞分別用1.0μmol/L阿維A＋5 000 IU/ml IFN?α、1.0μmol/L阿維A＋10 000 IU/m l IFN?α、1.0μmol/L阿維A＋20 000 IU/ml IFN?α處理。各組每個(gè)藥物濃度分別設(shè)3個(gè)復(fù)孔，各孔最終體積均為100μl，細(xì)胞濃度為4×104個(gè)/ml。將細(xì)胞置于96孔板上，在37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，直到細(xì)胞胞質(zhì)飽滿、均勻懸浮于視野方可加藥，聯(lián)合組兩種藥物同時(shí)加入。加藥后于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24、48、72 h后分別進(jìn)行測定。

4.電鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)：于藥物干預(yù)后24、48、72 h在電鏡下觀察各組細(xì)胞形態(tài)，并拍照。

5.CCK8法檢測細(xì)胞增殖：在細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束前1 h，每孔加入10μlCCK?8溶液，繼續(xù)孵育1 h。用全自動(dòng)酶標(biāo)儀于波長450 nm處測定吸光度（A值），根據(jù)以下公式計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率，抑制率（%）=（1-試驗(yàn)組A值/陰性對(duì)照組A值）×100%。

6.ELISA測定阿維A及IFN?α作用前后人Hut78細(xì)胞IL?15表達(dá)情況：將藥物干預(yù)后的細(xì)胞懸液吸出、離心，按原分組將90μl上清液置于已包被抗體的酶標(biāo)板孔中，并增加1孔作為空白顯色孔，同時(shí)設(shè)不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照孔和調(diào)零孔，按照試劑盒說明書操作，最后用酶標(biāo)儀在450 nm波長處測定A值。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線確定樣品IL?15表達(dá)水平。

二、結(jié)果

1.阿維A、IFN?α對(duì)Hut78細(xì)胞增殖的影響：見表1。

（1）阿維A組：與DMSO組相比，阿維A組Hut78細(xì)胞增殖受到明顯抑制，隨著濃度的增加和時(shí)間的延長，抑制作用逐漸增強(qiáng)，以10.0μmol/L阿維A作用72 h的抑制率最高。不同作用時(shí)間之間增殖抑制率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=1 261.413，P＜0.05），作用時(shí)間與藥物濃度之間存在交互作用（F=16.879，P＜0.05），不同藥物濃度之間增殖抑制率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=92.503，P＜0.05）。

（2）IFN?α組：與陰性對(duì)照組相比，IFN?α組Hut78細(xì)胞增殖受到明顯抑制，隨著濃度的增加和時(shí)間的延長，抑制作用逐漸增強(qiáng)，且以20 000 IU/m l IFN?α組作用72 h的抑制率最高。不同作用時(shí)間之間及不同藥物濃度之間增殖抑制率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=744.426、165.536，P＜0.05），作用時(shí)間與藥物濃度之間存在交互作用（F=21.300，P＜0.05）。

（3）阿維A和IFN?α聯(lián)合組：與DMSO組相比，1.0μmol/L阿維A聯(lián)合不同濃度IFN?α對(duì)Hut78細(xì)胞有明顯的增殖抑制作用，隨著IFN?α濃度增加和藥物作用時(shí)間延長，抑制作用逐漸增強(qiáng)，且以阿維A+20 000 IU/ml IFN?α組作用72 h的抑制率最高。不同作用時(shí)間之間及不同藥物濃度之間增殖抑制率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=2 927.877、417.025，P＜0.05），作用時(shí)間與藥物濃度之間存在交互作用（F=66.586，P＜0.05）。

1.0 μmol/L阿維A＋5 000 IU/ml IFN?α組與1.0μmol/L阿維A組及5 000 IU/ml IFN?α組之間細(xì)胞抑制率差異在24、48、72 h時(shí)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；1.0μmol/L阿維A＋10 000 IU/ml IFN?α組與1.0μmol/L阿維A組及10 000 IU/ml IFN?α組之間、1.0μmol/L阿維A＋20 000 IU/m l IFN?α組與1.0μmol/L阿維A組及20 000 IU/m l IFN?α組之間細(xì)胞抑制率差異在24、48、72 h時(shí)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化：陰性對(duì)照組細(xì)胞生長良好，大小較一致，部分抱團(tuán)生長，呈圓形或橢圓形，胞質(zhì)飽滿，細(xì)胞膜完整，折光性好，圓形胞核居胞質(zhì)中央；經(jīng)阿維A和IFN?α作用后，細(xì)胞生長慢，細(xì)胞形態(tài)發(fā)生顯著變化，細(xì)胞皺縮、破碎，部分形成細(xì)胞碎片，失去原有的形態(tài)，折光性差，隨著作用時(shí)間的延長，細(xì)胞數(shù)明顯減少。見圖1。

表1 阿維A和干擾素（IFN）?α單獨(dú)或聯(lián)合作用不同時(shí)間對(duì)Hut78細(xì)胞增殖以及白細(xì)胞介素15（IL?15）蛋白表達(dá)的影響（±s）

表1 阿維A和干擾素（IFN）?α單獨(dú)或聯(lián)合作用不同時(shí)間對(duì)Hut78細(xì)胞增殖以及白細(xì)胞介素15（IL?15）蛋白表達(dá)的影響（±s）

注：n=3。a：與二甲基亞砜組相比，P＜0.05；b：與陰性對(duì)照組相比，P＜0.05；c：與1.0μmol/L阿維A組及10 000 IU/ml干擾素組相比，P＜0.05；d：與1.0μmol/L阿維A組及20 000 IU/m l干擾素組相比，P＜0.05

組別二甲基亞砜組陰性對(duì)照組阿維A組0.1μmol/L 1.0μmol/L 10μmol/L干擾素組5 000 IU/m l 10 000 IU/m l 20 000 IU/m l 1.0μmol/L阿維A聯(lián)合組+5 000 IU/m l干擾素+10 000 IU/ml干擾素+20 000 IU/m l干擾素24 h增殖抑制率（%）0.08±0.005-11.21±0.89a 19.01±3.23a 25.99±2.33a 12.23±1.58b 18.12±1.26b 24.33±1.86b 17.89±2.58a 29.66±1.32ac 40.33±1.55ad IL?15（ng/L）606.23±9.41 613.81±8.24 548.46±5.66a 497.61±6.25a 461.32±4.22a 535.69±6.55b 488.03±5.33b 450.73±5.68b 491.95±6.34a 450.30±5.22ac 394.79±4.89ad 48 h增殖抑制率（%）0.04±0.003-27.89±2.11a 36.33±3.56a 44.82±2.25a 19.75±1.33b 28.22±2.01b 41.86±3.24b 38.20±1.35a 51.09±1.76ac 69.02±3.09ad IL?15（ng/L）701.30±8.27 691.36±10.25 486.15±5.33a 448.25±4.39a 402.63±6.33a 472.95±5.66b 439.97±2.32b 395.09±5.42b 444.33±5.95a 380.28±4.95ac 339.32±5.02ad 72 h增殖抑制率（%）0.03±0.001-35.69±1.98a 45.88±2.26a 60.95±4.32a 27.96±2.25b 40.32±1.66b 49.28±3.01b 43.52±2.21a 69.49±2.12ac 80.11±3.21ad IL?15（ng/L）760.27±11.18 780.68±12.33 399.01±4.92a 358.36±2.62a 293.14±4.23a 380.72±6.52b 338.02±3.72b 280.07±3.55b 342.68±6.22a 275.71±5.32ac 194.68±3.33ad

3.Hut78細(xì)胞IL?15表達(dá)情況：見表1。

（1）阿維A組：與DMSO組相比，阿維A在0.1～10.0μmol/L濃度范圍內(nèi)對(duì)Hut78細(xì)胞IL?15的表達(dá)有明顯抑制作用，隨著濃度增加和時(shí)間延長，抑制作用逐漸增強(qiáng)，且以10.0μmol/L濃度組作用72 h的抑制率最高。不同作用時(shí)間之間及不同藥物濃度之間IL?15表達(dá)水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=24 269.350、260.245，P＜0.05），作用時(shí)間與藥物濃度之間存在交互作用（F=87.572，P＜0.05）。

圖1不同組Hut78細(xì)胞培養(yǎng)48 h后生長情況（×100）1A：陰性對(duì)照組細(xì)胞生長良好，大小較一致，部分抱團(tuán)生長，呈圓形或橢圓形，胞質(zhì)飽滿，胞膜完整，折光性好，圓形胞核居胞質(zhì)中央；1B～1D：分別為1.0μmol/L阿維A組、10 000 IU/m l干擾素α組、1.0μmol/L阿維A+10 000 IU/m l干擾素α組，細(xì)胞形態(tài)發(fā)生顯著變化，細(xì)胞皺縮、破碎，部分形成細(xì)胞碎片，失去原有的形態(tài)，折光性差。聯(lián)合組細(xì)胞皺縮、破碎的程度更加明顯

（2）IFN?α組：與陰性對(duì)照組相比，IFN?α對(duì)Hut78細(xì)胞IL?15的表達(dá)有明顯抑制作用，隨著濃度增加和時(shí)間延長，抑制作用逐漸增強(qiáng)，且以20 000 IU/ml濃度組作用72 h的抑制率最高。不同作用時(shí)間之間及不同藥物濃度之間IL?15表達(dá)水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=3 524.983、390.785，P＜0.05），作用時(shí)間與藥物濃度之間存在交互作用（F=9.553，P＜0.05）。

（3）阿維A和IFN?α聯(lián)合組：與DMSO組相比，阿維A聯(lián)合IFN?α對(duì)Hut78細(xì)胞IL?15的表達(dá)有明顯的抑制作用，隨著濃度增加和時(shí)間延長，抑制作用逐漸增強(qiáng)，且以1.0μmol/L阿維A和20 000 IU/ml IFN?α聯(lián)合作用72 h的抑制率最高。不同作用時(shí)間之間及不同藥物濃度之間IL?15表達(dá)水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=133 039.386、336.793，P＜0.05），作用時(shí)間與藥物濃度之間存在交互作用（F=1 158.045，P＜0.05）。

1.0 μmol/L阿維A＋5 000 IU/m l IFN?α組在24、48 h時(shí)與1.0μmol/L阿維A組相比IL?15表達(dá)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），在24、48、72 h時(shí)與5 000 IU/ml IFN?α組相比IL?15表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；1.0μmol/L阿維A＋10 000 IU/ml IFN?α組與1.0μmol/L阿維A組及10 000 IU/ml IFN?α組之間、1.0μmol/L阿維A＋20 000 IU/ml IFN?α組與1.0μmol/L阿維A組及20 000 IU/m l IFN?α組之間IL?15表達(dá)在24、48、72 h時(shí)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

三、討論

阿維A臨床上主要用于治療各型銀屑病和角化性皮膚病等［4?5］。近年來，其抗腫瘤作用日益受到重視［6］。某些類型腫瘤對(duì)維A酸的敏感性低，探索其他藥物與維A酸的聯(lián)合應(yīng)用是必要的。IFN?α通過介導(dǎo)抗血管生成作用和激活免疫反應(yīng)，發(fā)揮抗增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用［7?8］，IFN?α?2b已被廣泛用于治療CTCL，但其具體治療機(jī)制尚未明確。我們體外評(píng)估阿維A和IFN?α單獨(dú)或聯(lián)合應(yīng)用對(duì)Hut78細(xì)胞增殖的影響，并初步探討其作用機(jī)制。

我們發(fā)現(xiàn)，阿維A和IFN?α均可抑制Hut78細(xì)胞增殖，并且呈濃度依賴性。隨著作用時(shí)間延長，阿維A和IFN?α對(duì)Hut78細(xì)胞的增殖抑制作用逐漸增強(qiáng)，表現(xiàn)出時(shí)間依賴性。而且，阿維A聯(lián)合IFN?α的抑制率高于二者單獨(dú)用藥，表明兩藥聯(lián)合應(yīng)用有協(xié)同作用，可有效抑制CTCL的生長。

有文獻(xiàn)報(bào)道，人急性T淋巴細(xì)胞白血病、CTCL腫瘤細(xì)胞表達(dá)IL?15Rα，IL?15能夠和其受體結(jié)合，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖［9］。研究發(fā)現(xiàn)，CTCL中IL?15和IL?16過度表達(dá)［10］。但也有文獻(xiàn)報(bào)道，IFN通過上調(diào)IL?15發(fā)揮抗腫瘤作用［11］。本研究結(jié)果顯示，阿維A、IFN?α均可抑制Hut78細(xì)胞表達(dá)IL?15，并呈劑量依賴性。隨著作用時(shí)間延長，不同濃度阿維A和IFN對(duì)Hut78細(xì)胞IL?15表達(dá)的抑制作用逐漸增強(qiáng)。并且阿維A與IFN?α聯(lián)合應(yīng)用有協(xié)同作用。本研究結(jié)論與IFN可作用于多種細(xì)胞產(chǎn)生IL?15的結(jié)論［11］相反，推測原因可能是：①阿維A與IFN?α誘導(dǎo)Hut78細(xì)胞的凋亡作用大于促進(jìn)IL?15表達(dá)的作用，從而間接導(dǎo)致Hut78細(xì)胞表達(dá)IL?15的總量減少；②體內(nèi)外環(huán)境不同導(dǎo)致IFN抗腫瘤的機(jī)制產(chǎn)生變化。

本研究表明，阿維A可協(xié)同IFN?α對(duì)人皮膚T細(xì)胞淋巴瘤Hut78的增殖產(chǎn)生抑制作用，為皮膚T細(xì)胞淋巴瘤的臨床治療提供了新的思路和理論依據(jù)。

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Effects of acitretin and interferon on the proliferative activity of and interleukin?15 expression in a human cutaneous T?cell lymphoma cell lineHut78

Yu Kai,Wang Yiyu,Jin Xianhua,LiXue,ZhuWenjing,Xia Jianxin

Department ofDermatology,Liaocheng People′s Hospital,Liaocheng 252000,Shandong,China（Yu K）;Department of Dermatology,The Second Hospital ofJilin University,Changchun 130041,China（Wang YY,Jin XH,LiX,ZhuWJ,Xia JX）

Xia Jianxin,Email:911469806@qq.com

Objective To evaluate effects of acitretin and interferon?α（INF?α）alone or in combination on the proliferative activity of and interleukin?15 expression in human cutaneous T?cell lymphoma Hut78 cells.M ethods Cultured Hut78 cellswere divided into severalgroups,including blank controlgroup,negative control group,dimethyl sulphoxide（DMSO）group and experimental groups.Cells in experimental groups were additionally classified into severalsubgroups tobe treatedwith acitretin（0.1-10μmol/L,acitretin groups）or INF?α（5 000-20 000 IU/ml,INF?α groups）alone,or the combination of 1.0μmol/L acitretin and IFN?αat concentrations of 5 000-20 000 IU/m l（combination groups）,for24,48 and 72 hours.Subsequently,cell counting kit8（CCK8）assaywasperformed toassess the proliferative activity ofHut78 cells,and enzyme?linked immunosorbentassay（ELISA）tomeasure the expression of IL?15 in these cells.Results The proliferative activity of and IL?15 expression in Hut78 cellswere both obviously suppressed in the acitretin groups and combination groups compared with the DMSO group,aswell as in the INF?α groups compared with the negative control group,and the inhibitory effects gradually increased with the increase in acitretin or INF?αconcentrations and treatment durations.As repeatedmeasures analysis of variance revealed,there wasasignificantdifference in both proliferation inhibition ratesand IL?15 expression amongdifferent treatmentdurations and among different concentrations of acitretin or INF?α（allP＜0.05）,and there was an interaction effect between treatment durations and drug concentrations（allP＜0.05）.A significant differencewas observed in both proliferation inhibition rates and IL?15 expression at 24,48 and 72 hourswhen the 1.0?μmol/L acitretin+10 000/20 000?IU/ml IFN?αgroup was compared with the 1.0?μmol/L acitretin group and 10 000/20 000 IU/ml IFN?αgroup（allP＜0.05）.There was also a significantdifference in IL?15 expression at24,48 and 72 hours between the 1.0?μmol/L acitretin+50 000?IU/ml IFN?αgroup and 5 000?IU/ml IFN?αgroup（allP＜0.05）.Conclusions Acitretin and IFN?αboth can inhibit the proliferation ofand IL?15 expression in Hut78 cells,the inhibitory effects are enhanced with the increase in drug concentrations and treatment durations,and the combination of acitretin and IFN?αappears to have stronger inhibitory effects than acitretin or IFN?αalone.

Lymphoma,T?cell,cutaneous;Acitretin;Interferon?alpha;Interleukin?15;Cell proliferation;Cell line,tumor;Hut78 cells

夏建新，Email：911469806@qq.com

10.3760/cma.j.issn.0412?4030.2016.11.013

吉林省科技發(fā)展項(xiàng)目（20130413015GH）

Fund program:Science and Technology DevelopmentProjectof Jilin Province（20130413015GH）

2015?09?11）

（本文編輯：尚淑賢）