黃進(jìn)鳳，涂秀英

（重慶市巴南區(qū)第二人民醫(yī)院，重慶400054）

204株大腸埃希菌感染的臨床分布及耐藥性分析

黃進(jìn)鳳，涂秀英

（重慶市巴南區(qū)第二人民醫(yī)院，重慶400054）

目的了解醫(yī)院大腸埃希菌感染的臨床分布及耐藥情況，為臨床合理用藥提供參考。方法回顧性分析2014年至2015年醫(yī)院臨床分離的204株大腸埃希菌的標(biāo)本來源及藥物敏感性（簡稱藥敏）試驗結(jié)果。結(jié)果204株大腸埃希菌標(biāo)本主要來源于膿液（31.37%）、痰液（28.43%）和尿液（13.73%），有90株大腸埃希菌產(chǎn)超廣譜 -內(nèi)酰胺酶（ESBLs），產(chǎn)酶率為44.12%，產(chǎn)酶菌株的耐藥性較非產(chǎn)酶菌株嚴(yán)重；產(chǎn)酶菌株對氨芐西林和哌拉西林完全耐藥，對第1～3代頭孢菌素類的耐藥率達(dá)95.00%以上，對頭孢吡肟、氨曲南、慶大霉素、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明的耐藥率均在50.00%以上，但對亞胺培南、哌拉西林他唑巴坦、頭孢哌酮舒巴坦、阿米卡星、呋喃妥因的耐藥率較低，分別為1.11%，2.22%，2.22%，5.56%，8.89%。結(jié)論大腸埃希菌是醫(yī)院呼吸道、泌尿道和外科感染的常見病原菌，產(chǎn)酶菌株的耐藥性較嚴(yán)重，臨床應(yīng)加強(qiáng)其耐藥性監(jiān)測，根據(jù)藥敏試驗結(jié)果合理選擇敏感的抗菌藥物。

大腸埃希菌；臨床分布；耐藥性；超廣譜 -內(nèi)酰胺酶

大腸埃希菌（ECO）是臨床常見的革蘭陰性桿菌，在腸桿菌科細(xì)菌分離中居第1位［1］。近年來，由于抗菌藥物的泛用、濫用，以及激素和免疫抑制劑的廣泛應(yīng)用，其耐藥菌株不斷出現(xiàn)，且呈現(xiàn)出耐藥越來越強(qiáng)，耐藥譜越來越廣，耐藥形成速度越來越快的趨勢［2］，給臨床治療帶來了嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。而由于不同地區(qū)、不同醫(yī)院的用藥習(xí)慣不完全相同，大腸埃希菌的流行及耐藥情況也各有特點。為此，筆者對我院臨床分離的204株大腸埃希菌的臨床分布及耐藥情況進(jìn)行了回顧性分析，現(xiàn)報道如下。

1　資料與方法

1.1菌株來源

2014年1月至2015年12月，我院臨床分離的大腸埃希菌204株，剔除同一患者同一部位重復(fù)菌株。

1.2細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定

將標(biāo)本接種于培養(yǎng)血平板、巧克力平板（鄭州博賽生物技術(shù)股份有限公司），放于35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，其中巧克力平板置5%CO2及35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24 h。觀察菌落形態(tài)，進(jìn)行革蘭染色和菌落計數(shù)。菌落計數(shù)不少于105個/mL的革蘭陰性桿菌和不少于104個/mL的革蘭陽性球菌，應(yīng)用合肥恒星HX-21型細(xì)菌鑒定/藥敏分析系統(tǒng)鑒定菌種。

1.3藥物敏感性（簡稱藥敏）試驗

采用合肥恒星HX-21型細(xì)菌鑒定/藥敏分析系統(tǒng)進(jìn)行藥敏試驗。藥敏試驗結(jié)果按美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會（CLSI）標(biāo)準(zhǔn)判斷，提供敏感（S）、中敏（I）、耐藥（R）3個結(jié)果并報告最低抑菌濃度（MIC）。質(zhì)控菌株：大腸埃希菌ATCC25922，葡萄球菌ATCC29213，金黃色葡萄球ATCC25923。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理

采用SAS 9.13統(tǒng)計軟件分析，率的比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1標(biāo)本來源及科室分布

我院臨床分離的204株大腸埃希菌標(biāo)本來自膿液64株（31.37%），痰液58株（28.43%），尿液28株（13.73%），傷口分泌物18株（8.82%），血液14株（6.86%），引流液9株（4.41%），膽汁5株（2.45%），其他部位8株（3.92%）。這些菌株主要分布于外科、呼吸內(nèi)科、兒科、婦產(chǎn)科等科室，其中外二科（泌尿外科和肝膽外科）分離率最高（72株，占35.29%）；其次為外一科（普外科和腦外科）38株（18.63%），兒科34株（16.67%）和呼吸內(nèi)科22株（10.78%）；其他為神經(jīng)內(nèi)科18株（8.82%），腫瘤科7株（3.43%），骨科5株（2.45%），消化內(nèi)分泌科4株（1.96%），婦產(chǎn)科4株（1.96%）。

2.2對抗菌藥物的耐藥情況

大腸埃希菌對我院臨床常用21種抗菌藥物耐藥率見表1。204株大腸埃希菌檢出產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）90株（44.12%）。產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌對多種抗菌藥物的耐藥率明顯高于非產(chǎn)酶菌株。產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌對氨芐西林和哌拉西林完全耐藥；對第1～3代頭孢菌素類的耐藥率達(dá)95.00%以上；對頭孢吡肟、氨曲南、慶大霉素、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明的耐藥率均在50.00%以上，但對亞胺培南、哌拉西林他唑巴坦、頭孢哌酮舒巴坦、阿米卡星、呋喃妥因仍保持著較高的敏感性，耐藥率較低，分別為1.11%，2.22%，2.22%，5.56%，8.89%。

3　討論

表1　204株大腸埃希菌對常用抗菌藥物的耐藥情況［例（%）］

204株大腸埃希菌分離自膿液、尿液、痰液、傷口分泌物、血液、引流液等標(biāo)本，其中以膿液標(biāo)本分離出的大腸埃希菌最多，為64株（31.37%），其次為痰液58株（28.43%），第3為尿液28株（13.73%）。這些菌株主要分布于肝膽外科、泌尿外科、普外科、呼吸內(nèi)科、兒科等科室，提示大腸埃希菌是引起膽道、尿路、傷口及呼吸道等感染常見的致病菌，與文獻(xiàn)［3］報道一致。

本調(diào)查結(jié)果顯示，我院大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs的檢出率為44.12%，低于2012年中國CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測報道的55.3%［4］，這可能與地區(qū)差異有關(guān)。近年來，關(guān)于大腸埃希菌耐藥機(jī)制的研究有了新的進(jìn)展，主要為產(chǎn)生滅活抗生素的酶，改變藥物的作用靶位，減少藥物的攝取吸收（細(xì)菌外膜通透性的改變、細(xì)菌藥物外排泵）及最新發(fā)現(xiàn)的質(zhì)粒介導(dǎo)的耐藥性等［5］，其中產(chǎn)ESBLs是大腸埃希菌對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物耐藥的主要原因。ESBLs是絲氨酸蛋白酶的衍生物，其能水解青霉素、廣譜及超廣譜頭孢菌素類及單環(huán)β-內(nèi)酰胺類抗生素，其基因由質(zhì)粒介導(dǎo)，可通過多種形式在細(xì)菌間引起擴(kuò)散。本調(diào)查結(jié)果顯示，不產(chǎn)ESBLs菌株除對氨芐西林、哌拉西林耐藥率較高之外，對其余抗菌藥物保持著較高的敏感性。而產(chǎn)ESBLs菌株對多種抗菌藥物的耐藥性顯著高于不產(chǎn)ESBLs菌株。對青霉素類的氨芐西林、哌拉西林完全耐藥，對第1～4代頭孢菌素的耐藥率在50.00%以上，但對哌拉西林他唑巴坦、頭孢哌酮舒巴坦鈉敏感性較高，可能與ESBLs能被β-內(nèi)酰胺酶抑制劑所抑制有關(guān)。（氟）喹諾酮類臨床上常用來治療腸桿菌科細(xì)菌感染，特別是治療尿路感染中使用較多，近年來大腸埃希菌對其耐藥性呈現(xiàn)逐年升高趨勢。本調(diào)查結(jié)果顯示，產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌對（氟）喹諾酮類耐藥率達(dá)50.00%以上，這主要與臨床廣泛使用該類抗菌藥物有關(guān)，其次為大腸埃希菌中存在質(zhì)粒傳導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因，提示（氟）喹諾酮類藥物已不適合作為治療大腸埃希菌感染的經(jīng)驗性用藥，尤其不適合作為大腸埃希菌泌尿道感染的首選藥物［6］。

慶大霉素和阿米卡星同為氨基苷類抗菌藥物，本調(diào)查結(jié)果顯示，大腸埃希菌對阿米卡星的耐藥性很低，僅5.56%，但對慶大霉素的耐藥性達(dá)35.29%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），主要與阿米卡星近年來在我院臨床較少使用，而慶大霉素廣泛用于霧化治療相關(guān)，可能也與這些菌株攜帶了不同的氨基苷類修飾酶基因，而阿米卡星經(jīng)過結(jié)構(gòu)改造對修飾酶具有一定的穩(wěn)定性有關(guān)［7］。提示在注意阿米卡星不良反應(yīng)情況下，可將其用于治療敏感的大腸埃希菌感染。呋喃妥因在血中的濃度較低，在尿中的濃度較高，故主要用于治療單純的下尿路感染，本調(diào)查中大腸埃希菌對其耐藥性維持在較低水平（僅9.31%），可能因其價格低廉，臨床因某些利益因素而使用較少。

碳青霉烯類抗菌藥物作為治療腸桿菌科細(xì)菌感染最強(qiáng)有力的藥物，已成為臨床上治療產(chǎn)ESBLs細(xì)菌感染的最后一道防線，但近年來出現(xiàn)了對碳青霉烯類抗菌藥物敏感性降低的腸桿菌科細(xì)菌［8］，我院體外藥敏試驗也檢測出了1株對其耐藥的菌株，應(yīng)引起臨床醫(yī)生的高度重視。

綜上所述，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌在我院耐藥情況較為嚴(yán)重，臨床醫(yī)生在對大腸埃希菌引起的相關(guān)感染進(jìn)行經(jīng)驗性用藥治療時，除了熟悉和了解國內(nèi)流行病學(xué)的情況，還應(yīng)掌握本地區(qū)、本院近年來大腸埃希菌的流行特點，及時留取標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗，根據(jù)藥敏試驗結(jié)果選擇敏感的抗菌藥物治療。同時，在同一病區(qū)不宜長期使用同一類型抗菌藥物，可采用策略性換藥，輪換使用抗菌藥物［9］，減少ESBLs陽性大腸埃希菌的產(chǎn)生和播散，延緩多重耐藥菌株的產(chǎn)生。

［1］呂媛，王珊.衛(wèi)生部全國細(xì)菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)2011年度腸桿菌科細(xì)菌耐藥檢測［J］.中國臨床藥理學(xué)雜志，2012，28（12）：937-940.

［2］曹弟勇，徐彬，陳大斌.大腸埃希菌臨床感染分布特征及耐藥性分析［J］.檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7（2）：98-100.

［3］廖智香，廖漢文.大腸埃希菌感染的臨床分布與耐藥性［J］.檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9（21）：2 692-2 693.

［4］汪復(fù)，朱德妹，胡付品，等.2012年中國CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測［J］.中國感染與化療雜志，2013，13（5）：321-330.

［5］趙慶英，劉德夢.大腸埃希菌耐藥機(jī)制研究進(jìn)展［J］.國外醫(yī)藥：抗生素分冊，2010，31（4）：190.

［6］周俊，蒿菡，劉勤.尿液標(biāo)本培養(yǎng)中大腸埃希菌的耐藥性分析［J］.檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7（12）：1 192-1 193.

［7］吳彪，符娟，符健，等.2006-2010年我院臨床分離大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐藥性監(jiān)測［J］.海南醫(yī)學(xué)，2012，23（18）：12-14.

［8］姜梅杰，趙書平，孫啟英.兒童患者臨床標(biāo)本中產(chǎn)KPC碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的耐藥性分析［J］.中華臨床醫(yī)師雜志：電子版，2011，5（18）：5 446-5 448.

［9］周鐵麗，王賽芳，李超，等.醫(yī)院感染敗血癥病原菌8年變遷及耐藥性分析［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2006，16（7）：825-827.

Clinical Distribution and Resistance of 204 Escherichia Coli Strains

Huang Jinfeng，Tu Xiuying
（Banan District Second People′s Hospital，Chongqing，China400054）

ObjectiveTo investigate the clinical distribution and drug resistance of Escherichia coli infection in the hospital to provide the reference for the clinical rational drug use.MethodsThe retrospective analysis was conducted with the sources and drug sensitivity test results of the 204 strains of Escherichia coli isolated from 2014 to 2015.ResultsThe 204 strains of Escherichia coli samples were mainly from the pus（31.37%），sputum（28.43%）and urine（13.73%），90 strains of Escherichia coli produced extended spectrum lactamases（β-ESBLs），the enzyme production rate was 44.12%and the drug resistance of enzyme producing strain was more serious than non enzyme producing strain；enzyme producing strain was 100.00%resistant to ampicillin and piperacillin，and the resistant rates of first to third-generation cephalosporins were above 95.00%，and resistance rates to cefepime，aztreonam，gentamicin，ciprofloxacin，levofloxacin，and co-trimoxazole were above 50.00%，but the resistant rates of imipenem，piperacillin/tazobactam，cefoperazone/sulbactam，amikacin，and nitrofurantoin were lower，i.e.，1.11%，2.22%，2.22%，5.56%，8.89%.ConclusionEscherichia coli is a common pathogen of urinary tract infections and surgery in the hospital and drug resistance rate of respiratory tract infection，enzyme producing strains is more serious.The clinic should strengthen its monitoring of drug resistance according to the results of drug sensitive test，and make reasonable selection of sensitive antibiotics.

Escherichia coli；clinical distribution；drug resistance；β-ESBLs

R969.3；R978.1；R915

A

1006-4931（2016）18-0034-03

黃進(jìn)鳳（1983-），女，大學(xué)本科，醫(yī)師，研究方向為小兒呼吸系統(tǒng)疾病，（電子信箱）22514097@ qq.com；涂秀英（1970-），女，大學(xué)本科，副主任醫(yī)師，研究方向為小兒呼吸系統(tǒng)疾病，本文通訊作者，（電子信箱）18983919122@163.com。

（2016-04-01）