王眾

CAR-T給無(wú)數(shù)的病患帶來(lái)了生的希望，UCART的通用性有利于CAR-T治療的標(biāo)準(zhǔn)化和平民化。

成立于1999年的Cellectis是一家以細(xì)胞免疫療法為技術(shù)手段的法國(guó)公司，擁有同種異源的CAR-T（Chimeric Antigen Receptor T-CellImmunotherapy，嵌合抗原受體T細(xì)胞免疫療法）技術(shù)平臺(tái)。該平臺(tái)可以改造單個(gè)供體的T細(xì)胞，并用于多個(gè)不同的患者。Cellectis讓細(xì)胞療法的適用性得以擴(kuò)展到一個(gè)人群，而不僅僅局限于單個(gè)個(gè)體，從而能夠?qū)崿F(xiàn)工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)，成為CAR-T領(lǐng)域的一匹黑馬。2014年，Cellectis和制藥巨頭輝瑞達(dá)成了關(guān)于CAR-T療法的合作協(xié)議。2015年，Cellectis上市成功，市值10億美元。

基因抗癌界的網(wǎng)紅

這個(gè)不明覺(jué)厲的CAR-T技術(shù)是近幾年基因抗癌界的網(wǎng)紅。這種免疫療法通過(guò)特異性修飾的T細(xì)胞，高效識(shí)別腫瘤細(xì)胞，能在治療腫瘤的同時(shí)避免了對(duì)正常組織的損傷。要建立治療性的CAR-T細(xì)胞，需要通過(guò)分離患者體內(nèi)的T細(xì)胞并在體外進(jìn)行特定腫瘤抗體的修飾，經(jīng)過(guò)擴(kuò)增后再回輸至患者體內(nèi)，整個(gè)過(guò)程耗時(shí)約兩周?？梢钥闯?，這是一個(gè)定制型療法，目前的戰(zhàn)績(jī)十分輝煌。

CAR-T治療的臨床研究始于2010年，當(dāng)時(shí)CAR-T的發(fā)明人、賓夕法尼亞大學(xué)教授CarlH.June利用CAR-T治療成功緩解了三位淋巴細(xì)胞白血病患者，其中有兩位患者維持了健康的狀態(tài)，沒(méi)有復(fù)發(fā)的跡象。2012年，身患急性淋巴細(xì)胞白血病的7歲小姑娘Emily Whitehead成為第一個(gè)接受CAR-T治療的兒童，當(dāng)時(shí)CAR-T治療技術(shù)尚處于臨床Ⅰ期。

2015年11月Waseem Qasia教授結(jié)合基因編輯與CAR-T技術(shù)，成功挽救了1歲小姑娘L(fēng)ayla的生命。在這次治療過(guò)程中，Qasia使用的T細(xì)胞株來(lái)自于Cellectis。這就引出了這個(gè)療法的另一個(gè)關(guān)鍵詞——T細(xì)胞株。

這個(gè)細(xì)胞株是在體外培養(yǎng)后植入患者體內(nèi)的。當(dāng)外源的物質(zhì)進(jìn)入人體之后，通常會(huì)激發(fā)人體強(qiáng)烈的排異反應(yīng)，最容易理解的例子是器官移植。T細(xì)胞株也是外來(lái)物質(zhì)，也很可能激發(fā)人體的排異反應(yīng)。所以在CAR-T免疫治療中，最好的辦法是收集患者自身的免疫細(xì)胞，體外改造后再輸回患者體內(nèi)，這樣做基本可以避免排異反應(yīng)。CAR-T療法的先驅(qū)諾華公司采用的就是個(gè)性化CAR-T免疫治療。但是，與個(gè)性化伴生的是高額的成本。

Cellectis公司的首席執(zhí)行官AndréChoulika認(rèn)為，個(gè)性化與高成本無(wú)疑阻礙工業(yè)化生產(chǎn)，也就相應(yīng)地阻礙了療法的推廣。值得慶幸的是，Cellectis成功破解了這個(gè)難題，也實(shí)現(xiàn)了彎道超車、后來(lái)居上。

基因療法也能量產(chǎn)

Cellectis的做法是用Talen基因編輯技術(shù)“關(guān)閉”導(dǎo)致人體排異反應(yīng)的基因，將CAR-T制成UCART（通用型CAR-T）。由于關(guān)閉了與CAR-T的排異相關(guān)的基因，理論上，Cellectis的T細(xì)胞株可以輸入到同類疾病的所有患者體內(nèi)，不需要做配型。

Cellectis公司的執(zhí)行副總裁David Sourdive在聲明中說(shuō)：“以往的細(xì)胞療法都屬于自體移植范疇。基于Talen的基因編輯方法，使得細(xì)胞療法的適用性得以擴(kuò)展到一個(gè)人群，而不僅僅局限于單個(gè)個(gè)體，從而能夠?qū)崿F(xiàn)工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)?！惫I(yè)化生產(chǎn)讓Cellectis公司有信心獲得90%的毛利潤(rùn)。

不過(guò)，這并不是說(shuō)，UCART本身是抗癌良藥，事實(shí)上，它是一招緩兵之計(jì)?；氐絃ayla的案例。Layla所患的急性淋巴細(xì)胞性白血病，其主要特征為，免疫淋巴細(xì)胞在骨髓內(nèi)異常增生，導(dǎo)致人體造血功能紊亂，以及大量器官被侵犯。

醫(yī)生發(fā)現(xiàn)，在異常增殖的免疫淋巴細(xì)胞（也就是癌細(xì)胞）表面有CD19蛋白，這個(gè)蛋白可以被CAR19蛋白識(shí)別，但是Layla的體內(nèi)沒(méi)有攜帶CAR19蛋白的合適供體。UCART19細(xì)胞（有CAR19蛋白），盡管不是合適的配型，但成為了Layla唯一的希望。

Qasim利用ZFNs基因編輯技術(shù)“關(guān)閉”了導(dǎo)致排異反應(yīng)的關(guān)鍵基因，將UCART19安全輸入Layla體內(nèi)。UCART19將Layla體內(nèi)惡性增殖細(xì)胞消滅干凈，讓Layla能接受新一輪骨髓移植（此時(shí)有沒(méi)有CAR19蛋白已經(jīng)不重要了），目前恢復(fù)良好。當(dāng)然，是不是完全康復(fù)，還需要時(shí)間的考驗(yàn)。

從目前的臨床試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，即使是已經(jīng)獲得FDA“突破性”稱號(hào)的諾華CTL019，盡管治療結(jié)束后，患者的完全緩解率較高，但是在1年時(shí)間之內(nèi)會(huì)有1/4左右的患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)的現(xiàn)象。

CAR-T的局限

另外，盡管CAR-T的格局是抗癌，但目前的局限性和風(fēng)險(xiǎn)性也是不容忽視的。

首先，該技術(shù)的治療主要集中在血液癌癥。對(duì)付血液癌癥，只需要干掉血液中的癌細(xì)胞；但實(shí)體腫瘤是長(zhǎng)在固定組織或者器官上的腫塊，治療難度要大得多。而且目前大多數(shù)的CAR-T針對(duì)的是CD19這個(gè)抗原，CD19只作用在B淋巴細(xì)胞上，所以它能夠殺死B淋巴細(xì)胞衍生出的急性淋巴細(xì)胞白血病和非霍奇金淋巴瘤。如果患者的白血病細(xì)胞因?yàn)榛虻耐蛔儧](méi)有生成CD19抗原，也是無(wú)效的。

另外，由于CAR-T見(jiàn)效過(guò)快，會(huì)產(chǎn)生一種嚴(yán)重的副作用，叫做細(xì)胞因子風(fēng)暴（也稱“細(xì)胞因子釋放綜合癥”），病癥表現(xiàn)為高熱。當(dāng)T細(xì)胞在殺死白血病細(xì)胞時(shí)，會(huì)釋放很多蛋白，叫作細(xì)胞因子，它們的作用是激活更多的免疫細(xì)胞來(lái)一起對(duì)抗這些病原體，就是我們?nèi)粘Ｊ煜さ难装Y反應(yīng)。

但是，由于CAR-T細(xì)胞過(guò)于高效，能夠瞬間在局部產(chǎn)生超大量的細(xì)胞因子，引起驚人的免疫反應(yīng)，可能產(chǎn)生的癥狀有發(fā)熱、心動(dòng)過(guò)速、低血壓、毛細(xì)血管滲透綜合癥，以及呼吸系統(tǒng)癥狀。這些副作用對(duì)于身體機(jī)能已經(jīng)衰弱的癌癥患者來(lái)說(shuō)，是非常危險(xiǎn)的。

盡管如此，CAR-T，尤其是Cellectis的UCART仍然給無(wú)數(shù)的病患帶來(lái)了生的希望，UCART的通用性，更有利于CAR-T治療的標(biāo)準(zhǔn)化和平民化。