辛少鯤+司南+王宏潔+楊健+高波+魏曉露+趙海譽(yù)+邊寶林

[摘要]綜合利用硅膠、ODS及正相、半制備高效液相等多種色譜技術(shù)，對(duì)蟾皮大孔樹脂15%乙醇洗脫部位進(jìn)行化學(xué)成分分離，運(yùn)用現(xiàn)代波譜學(xué)方法結(jié)合文獻(xiàn)對(duì)分離得到的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。該研究從蟾皮中共分離鑒定了15個(gè)親水性化合物，分別為：4，5-dimethyl-1，3，4，5-tetrahydropyrrolo[4，3，2-de]quinolin-6-ol（1），5-羥色胺（2），N-methyl serotonin（3），蟾蜍素（4），1，2，3，4-tetrahydro-6-hydroxy-β-carboline（5），5-甲氧基色胺（6），甜菜堿（7），咖啡因（8），蟾毒色胺（9），shepherdine（10），色氨酸（11），5-羧基吲哚-3-乙酸（12），5-羥基色醇（13），2-methyl-6-hydroxy-1，2，3，4-tetrahydro-β-carboline（14），蟾蜍噻嚀（15）。其中化合物1為新化合物，化合物5為新天然產(chǎn)物并首次報(bào)道其碳譜，化合物4～8，10～14為首次從蟾皮中分離得到。

[關(guān)鍵詞]蟾皮； 吲哚烷胺； 親水性成分

[Abstract]Fifteen compounds were isolated from the toad skin by a combination of various chromatographic methods including macroporous resin， silica gel， ODS and semi-preparative HPLC. Their structures were identified as 4，5-dimethyl-1，3，4，5-tetrahydropyrrolo[4，3，2-de]quinolin-6-ol（1）， serotonin（2），N-methyl serotonin（3），O-methyl bufotenine（4）， 1，2，3，4-tetrahydro-6-hydroxy-β-carboline（5），O-methylserotonin（6）， glycinebetaine（7）， caffeine（8）， bufotenine（9）， shepherdine（10）， tryptophan（11）， （5-hydroxy-1H-indol-3-yl）acetic acid（12）， 5-hydroxy tryptophol（13）， 2-methyl-6-hydroxy-1，2，3，4-tetrahydro-β-carboline（14）， bufothionine（15）. Among them， compound 1 was a new compound，compound 5 was a new natural product. Compounds 4-8 and 10-14 were separated from toad skin for the first time.

[Key words]toad skin； indolealkylamines； hydrophilic constituents

doi：10.4268/cjcmm20162011

蟾皮為蟾蜍科動(dòng)物中華大蟾蜍Bufo gargarizans Cantor或黑眶蟾蜍B. melanostictus Schneider的干燥皮。味辛，性涼，有小毒。為臨床常用中藥，應(yīng)用歷史悠久，有清熱解毒，利水消脹之功效，被廣泛用于華蟾素注射液、華蟾素口服液、鶴蟾片等多種中成藥中。臨床適用于癰疽瘡毒、疳積腹脹、瘰疬腫瘤等癥^[1]?，F(xiàn)代研究顯示蟾皮具有廣泛的藥理活性，包括抗腫瘤、抗乙肝病毒、免疫調(diào)節(jié)等，臨床常用于治療各種腫瘤、癌癥疼痛、乙型肝炎、腮腺炎、慢性氣管炎、帶狀皰疹、骨髓炎、咽喉腫痛、癰腫疔毒和體表感染等^[2-3]。化學(xué)研究表明蟾皮中主要含有氨基酸、核苷、多肽、吲哚類生物堿、蟾蜍甾烯、蟾蜍環(huán)酰胺、甾醇等成分^[3-4]。為進(jìn)一步明確蟾皮傳統(tǒng)功效的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，完善蟾皮及蟾皮制劑質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，本研究對(duì)蟾皮中親水性物質(zhì)進(jìn)行了分離，共得到并鑒定了15個(gè)化合物，其中化合物1為新化合物，化合物5為新天然產(chǎn)物并首次報(bào)道其碳譜數(shù)據(jù)，化合物4～8，10～14為首次從蟾皮中分離得到。其中以5-羥基色胺、蟾毒色胺、蟾毒噻嚀、N-甲基-5-羥色胺為代表的吲哚烷胺類化合物具有5-羥色胺樣活性，與循環(huán)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、中樞系統(tǒng)功能密切相關(guān)^[5-7]。5-羥色胺是體溫調(diào)節(jié)中樞發(fā)熱介質(zhì)^[8]，吲哚烷胺類化合物的5-HT樣活性可能是蟾皮清熱解毒功效的物質(zhì)基礎(chǔ)。同時(shí)，蟾皮中的咖啡因類生物堿可增加人類及大鼠的尿液和尿鈉排出量^[9]，與蟾皮利水消腫傳統(tǒng)功效相關(guān)。綜上，蟾皮中親水性物質(zhì)中與蟾皮清熱解毒、利水消脹等傳統(tǒng)功效具潛在關(guān)聯(lián)，有待進(jìn)一步深入研究。

1 材料

雙壓線性離子阱串聯(lián)高分辨質(zhì)譜Orbitrap Velos Pro（Thermo Fisher 公司）；戴安Ultimate3000超高效液相色譜儀；Avance型600 MHz核磁共振儀（TMS內(nèi)標(biāo)，瑞士Bruker公司）；Waters 600型液相色譜儀（Waters公司）；Agilent 1100型高效液相色譜儀（安捷倫公司）；X-4 顯微熔點(diǎn)儀（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；A22502 APV-plus高精度旋光儀（Rudolph Research Analytical公司）；Agilent，SB-C₁₈半制備色譜柱（9.4 mm×250 mm，5 μm）；TSK Amide-80半制備色譜柱（7.8 mm×300 mm，5 μm）；TSK Amide-80分析色譜柱（2 mm×150 mm，3 μm）；Waters HSST3 UPLC分析色譜柱（2.1 mm×100 mm，1.8 μm）；HPD-400型大孔樹脂（河北滄州寶恩化工有限公司）；柱色譜用硅膠及GF254薄層色譜板（青島海洋化工廠分廠）；ODS填料（50 μm，日本YMC公司）。色譜級(jí)甲醇、乙腈（美國(guó)Fisher公司）；其他試劑均為分析純?nèi)魺o(wú)特別說(shuō)明均購(gòu)自北京化工廠。

蟾皮藥材由安徽華潤(rùn)金蟾藥業(yè)股份有限公司提供，經(jīng)中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所王宏潔研究員鑒定為中華大蟾蜍B. gargarizans的干燥皮。蟾皮藥材憑證標(biāo)本（No.20141201-905）存放于中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所。

2 提取與分離

蟾皮12.0 kg，剪碎，用50%乙醇-水超聲提取2次，提取液過(guò)濾，合并，減壓濃縮至30 L。濾液以大孔吸附樹脂（8 L）分離，依次以水，15%乙醇，50%乙醇，95%乙醇梯度洗脫，洗脫液每8 L收集為1個(gè)流分，共收集16個(gè)流分。經(jīng)HPLC檢測(cè)，相同組分合并，減壓回收溶劑，共得15%乙醇洗脫部分4 L，4 ℃靜置24 h析出棕黃色沉淀，過(guò)濾，得沉淀部分（10.2 g），上清液減壓濃縮后得浸膏（170 g）。浸膏（170 g）經(jīng)硅膠柱（160～200目，1.2 kg）色譜分離，以氯仿-甲醇（9∶1），氯仿-甲醇（8∶2），氯仿-甲醇-水（7∶3∶0.5～5∶5∶1）梯度洗脫，洗脫液經(jīng)薄層色譜檢測(cè)，合并，回收溶劑得到8個(gè)組分A～H。

組分F（10.2 g）經(jīng)ODS柱分離，甲醇-水（2∶98～100∶0）梯度洗脫，洗脫液經(jīng)薄層色譜檢測(cè)合并得F1～F6，其中F2（7.3 g）用ODS柱分離，甲醇-水（2∶98～10∶90）梯度洗脫，洗脫液經(jīng)薄層色譜檢測(cè)合并得F2-1～F2-9。F2-1（0.95 g）經(jīng)正相HPLC半制備色譜（乙腈-水90∶10）等度洗脫，旋干，得到化合物6（8.6 mg），化合物7（7.2 mg），化合物8（2.9 mg）。F2-2（0.77 g）經(jīng)正相HPLC半制備色譜分離（乙腈-水 88∶12）得到化合物9（34.2 mg），化合物10（9.6 mg），化合物11（13.2 mg），化合物12（1.9 mg）。F2-3（0.45 g）經(jīng)正相HPLC半制備色譜（乙腈-水 88∶12）等度洗脫得到化合物13（1.5 mg），化合物14（1.9 mg）。

組分G（13.8 g）經(jīng)ODS柱色譜分離，甲醇-水（2∶98～100∶0）梯度洗脫，洗脫液經(jīng)薄層色譜檢測(cè)合并得G1～G4，G2（6.2 g）以O(shè)DS柱分離，甲醇-水（1∶99～20∶80）梯度洗脫，洗脫液經(jīng)薄層色譜檢測(cè)合并得G2-1～G2-8。G2-1（584.2 mg）以薄層硅膠H柱色譜分離異丙醇-28%氨水（20∶1）等度洗脫，洗脫液經(jīng)薄層色譜檢測(cè)合并得G2-1～G2-8。其中G2-3，G2-8析出棕色沉淀，重結(jié)晶得化合物4（11.1 mg），化合物5（3.4 mg）。

組分H（9.3 g）經(jīng)ODS柱分離，甲醇-水（2∶98～100∶0）梯度洗脫，洗脫液經(jīng)薄層色譜檢測(cè)合并得H1～H4，H2（6.8 g）用ODS柱分離，甲醇-水（2∶98～40∶60）梯度洗脫，洗脫液經(jīng)薄層色譜檢測(cè)合并得H2-1～H2-5。H2-2（1.24 g）經(jīng)反相HPLC半制備色譜（甲醇-水-三氟乙酸 4∶96∶0.05）等度洗脫得到化合物1（15.6 mg），化合物2（12.2 mg），化合物3（5.1 mg）。

棕色沉淀部分（10.2 g）經(jīng)硅膠柱色譜（三氯甲烷-甲醇 9∶1～8∶2）洗脫除去雜質(zhì)，經(jīng)薄層板檢測(cè)合并，ODS柱（甲醇-水20∶80）等度洗脫，得化合物15（506.1 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 黃色針晶（甲醇）；mp：154.9～157.2；[α]+59.9（c 0.05，DMSO）；HR-ESI-MS顯示其準(zhǔn)分子離子峰m/z 203.118 2[M+H]⁺（計(jì)算值為203.117 9）確定分子式為C₁₂H₁₄ON₂；¹H-NMR（DMSO-d₆， 600 MHz）譜中可見3個(gè)吲哚母核氫信號(hào)δ6.99（1H，s），6.62（1H，d），6.98（1H，d），低場(chǎng)可見δ10.51（1H，s）為吲哚環(huán)上NH信號(hào)。且¹³C-NMR（DMSO-d₆，150 MHz）可見δ145.8，110.8，109.0，121.8，112.9，116.0，130.9，126.3；8個(gè)碳信號(hào)提示存在吲哚母核。同時(shí)，與已知成分蟾蜍色胺核磁數(shù)據(jù)對(duì)比，吲哚環(huán)上C-5a的氫信號(hào)消失，吲哚環(huán)上C-7位氫信號(hào)失去遠(yuǎn)程耦合，判斷5-羥基吲哚環(huán)上C-5a發(fā)生取代，推測(cè)結(jié)構(gòu)應(yīng)為為胺基與5-羥基吲哚環(huán)上C-5a成環(huán)。HSQC譜提示δ3.96（3H，s）與δ58.0（C-9）的碳直接相關(guān)，δ58.0為連接在吸電子原子N上的甲基碳信號(hào)。HMBC表明其與δ145.8（C-6），116.0（C-5a），126.3（C-1b），56.7（C-4），44.4（C-10）的碳存在遠(yuǎn)程相關(guān)見圖1，確證了胺基與5-羥基吲哚環(huán)上4位取代成環(huán)。同時(shí)，HSQC譜顯示δ2.93（2H，d）與δ26.6（C-3）的碳直接相關(guān)，為C-3上氫。HMBC譜顯示該氫與δ112.9（C-2a），126.3（C-1b），56.7（C-4）存在相關(guān)，提示C-3直接與吲哚母核相連。且δ2.95（1H，t）與δ56.7（C-4）的碳直接相關(guān)，提示為C-4上氫信號(hào)，HMBC譜顯示其與δ26.6（C-3），44.4（C-10）相關(guān)。綜上，確定了化合物1的結(jié)構(gòu)見圖1，其中C-4為手性碳原子，但是其立體構(gòu)型尚未確定，經(jīng)SciFinder數(shù)據(jù)庫(kù)檢索為一未知結(jié)構(gòu) 4，5-dimethyl-1，3，4，5-tetrahydropyrrolo[4，3，2-de]quinolin-6-ol，命名為蟾蜍環(huán)色胺（cyclobufotenine），其核磁信號(hào)歸屬見表1。

化合物2 無(wú)色方晶（甲醇）；HR-ESI-MSm/z177.102 5[M+H]⁺；¹H-NMR（CD₃OD，600 MHz）δ：7.08（1H，s，H-2），6.91（1H，d，J=1.8 Hz，H-4），6.68（1H，dd，J=8.6，1.8 Hz，H-6），7.18（1H，d，J=8.6 Hz，H-7），3.02（2H，t，J=7.2 Hz，H₂-10），3.17（2H，t，J=7.2 Hz，H-11）；¹³C-NMR（CD₃OD，150 MHz） δ：124.9（C-2），109.2（C-3），103.3（C-4），151.3（C-5），112.7（C-6），113.0（C-7），132.8（C-8），128.7（C-9），24.6（C-10），40.9（C-11）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道對(duì)比，故鑒定為5-羥色胺。

化合物3 無(wú)色方晶（甲醇）；HR-ESI-MS m/z191.118 3[M+H]⁺；¹H-NMR（CD₃OD，600 MHz） δ：7.10（1H，s，H-2），6.90（1H，d，J=1.8 Hz，H-4），6.68（1H，dd，J=8.6，1.8 Hz，H-6），7.16（1H，d，J=8.6 Hz，H-7），3.04（2H，m，H-10），3.23（2H，m，H-11），2.65（3H，s，H₃-13）。¹³C-NMR（CD₃OD，150 MHz） δ：125.2（C-2），109.2（C-3），103.3（C-4），157.1（C-5），113.0（C-6），113.2（C-7），132.4（C-8），128.9（C-9），23.5（C-10），50.8（C-11），41.9（C-13）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道對(duì)比，故鑒定為N-methyl serotonin。

化合物4 無(wú)色方晶（甲醇）；HR-ESI-MS m/z219.148 7[M+H]⁺；¹H-NMR （CD₃OD，600 MHz） δ：2.36（6H，s，H-13，14），2.65（2H，t，J=6.0 Hz，H-10），2.90（2H，t，J=6.0 Hz，H-11），3.82（3H，s，-OCH₃），6.75（1H，dd，J=8.6，2.4 Hz，H-6），7.02（1H，d，J=2.4 Hz，H-7），7.21（1H，d，J=8.6 Hz，H-4）。¹³C-NMR（CD₃OD，150 MHz） δ：124.0（C-2），112.6（C-3），101.4（C-4），155.2（C-5），113.0（C-6），113.4（C-7），133.6（C-8），129.1（C-9），24.4（C-10），56.5（C-11），45.5（2C，C-13，C-14），61.4（-OCH₃）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]報(bào)道對(duì)比，故鑒定為蟾蜍素。

化合物5 無(wú)色方晶（甲醇）；HR-ESI-MS m/z189.101 2[M+H]⁺；¹H-NMR（CD₃OD，600 MHz） δ：2.72（2H，t，J=5.9 Hz，H-4），3.15（2H，t，J=5.9 Hz，H-3），3.98（2H，s，H-1），6.60（1H，dd，J=2.4，8.4 Hz，H-7），6.78（1H，d，J=2.4 Hz，H-8），7.09（1H，d，J=8.4 Hz，H-5）；¹³C-NMR（CD₃OD，150 MHz）δ：22.1（C-4），43.6（C-1），44.7（C-3），103.2（C-8），107.7（C-11），111.7（C-7），112.3（C-5），129.4（C-12），132.7（C-13），133.9（C-10），151.2（C-6）。該化合物為新天然產(chǎn)物，僅在文獻(xiàn)[12]有報(bào)道其氫譜，但未給出碳譜數(shù)據(jù)。根據(jù)HSQC，HMBC歸屬其碳?xì)湫盘?hào)與遠(yuǎn)程相關(guān)，見圖1，并結(jié)合文獻(xiàn)[12]的氫譜數(shù)據(jù)鑒定為1，2，3，4-tetrahydro-6-hydroxy-β-carboline。

化合物6 無(wú)色方晶（甲醇）；HR-ESI-MS m/z191.117 0[M+H]⁺；¹H-NMR（DMSO-d₆，600 MHz） δ：2.71（2H，t，J=6.6 Hz，CH₂-10），2.79（2H，t，J=6.6 Hz，H-11），3.75（3H，s，OMe），6.70（1H，dd，J=8.6，2.4 Hz，H-6），7.21（1H，d，J=8.6 Hz，H-4），6.98（1H，d，J=2.4 Hz，H-7），7.07（1H，s，H-2）；¹³C-NMR（DMSO-d₆，150 MHz） δ：29.6（C-10），42.6（C-11），55.3（OMe），101.2（H-4），110.9（H-3），111.9（H-6），112.4（C-7），123.3（H-2），127.6（C-9），131.4（C-8），152.9（C-5）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]報(bào)道對(duì)比，故鑒定為5-甲氧基色胺。

化合物7 白色粉末（甲醇）；HR-ESI-MS m/z118.085 6[M+H]⁺；¹H-NMR（CD₃OD，600 MHz） δ：4.33（2H，s，H-2），3.34（9H，s，H-3，4，5）；¹³C-NMR（CD₃OD，150 MHz） δ：167.3（C-1），64.3（C-2），54.5（C-3～5）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]報(bào)道對(duì)比。且高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)顯示其碎片離子為m/z 59.072 6（C₃H₉N），表明其脫落碎片為59.015 2（C₂H₃O₂），與甜菜堿結(jié)構(gòu)相符，故鑒定為甜菜堿。

化合物8 白色粉末（甲醇）；HR-ESI-MS m/z195.086 7[M+H]⁺；¹H-NMR（CD₃OD，600 MHz） δ：7.85（1H，s，H-2），3.86（3H，s，H-1），3.51（3H，s，H-3），3.33（3H，s，H-7）；¹³C-NMR（CD₃OD，150 MHz）δ：30.3（C-1），153.4（C-2），34.1（C-3），108.9（C-4），144.1（C-5），156.8（C-6），28.4（C-7），149.9（C-8）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]報(bào)道對(duì)比，且高分辨二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)給出其碎片離子138.066 3（C₆H₈ON₃），脫落C₂H₄ON₂碎片，符合咖啡因結(jié)構(gòu)特征，故鑒定為咖啡因。

化合物9 無(wú)色方晶（甲醇）；HR-ESI-MS m/z192.065 2[M+H]⁺；¹H-NMR（CD₃OD，600 MHz） δ：7.10（1H，s，H-2），6.93（1H，d，J=2.4 Hz，H-4），6.68（1H，dd，J=2.4，8.6 Hz，H-6），7.17（1H，d，J=8.6 Hz，H-7），3.65（1H，s，H-10）；¹³C-NMR（CD₃OD，150 MHz）δ：125.2（C-2），108.2（C-3），103.8（C-4），151.4（C-5），112.8（C-6），112.6（C-7），133.1（C-8），129.5（C-9），32.3（C-10），176.6（C-11）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]報(bào)道對(duì)比，故鑒定為5-羧基吲哚-3-乙酸。

化合物10 無(wú)色方晶（甲醇）；HR-ESI-MS m/z205.133 3[M+H]⁺；¹H-NMR（CD₃OD，600 MHz） δ：7.05（1H，s，H-2），6.81（1H，d，J=2.4 Hz，H-4），6.58（1H，dd，J=8.6，2.4 Hz，H-6），7.11（1H，d，J=8.6 Hz，H-7），2.70（2H，m，H-10），2.79（2H，m，H-11），2.39（6H，s，H-13，14）；¹³C-NMR（CD₃OD，150 MHz） δ：123.1（C-2），110.5（C-3），102.2（C-4），150.1（C-5），111.2（C-6），111.6（C-7），130.7（C-8），127.7（C-9），22.3（C-10），59.1（C-11），24.3（C-13， 14）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道對(duì)比，故鑒定為蟾毒色胺。

化合物11 無(wú)色方晶（甲醇）；HR-ESI-MS m/z203.118 30[M+H]⁺；¹H-NMR（CD₃OD，600 MHz） δ：1.49（3H，s，H₃-1′），2.68（2H，m，H-4），3.39（2H，m，H-3），4.40（q，J=6.6 Hz，H-1），6.58（1H，dd，J=2.4，8.6 Hz，H-7），6.70（1H，d，J=2.4Hz，H-8），7.10（1H，d，J=8.6 Hz，H-5）；¹³C-NMR（CD₃OD，150 MHz） δ：18.2（C-1′），19.7（C-4），48.0（C-1），40.9（C-3），101.9（C-8），104.8（C-10），111.1（C-7），111.4（C-5），127.0（C-11），130.3（C-122），133.8（C-9），150.6（C-6）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]報(bào)道對(duì)比，故鑒定為shepherdine。

化合物12 淡黃色粉末；HR-ESI-MS m/z205.097 2[M+H]⁺；¹H-NMR（DMSO-d₆，600 MHz） δ：10.93（1H，s，-COOH），7.57（1H，d，J=7.4 Hz，H-4），7.35（1H，d，J=8.0 Hz，H-7），7.22（1H，s，H-2），7.06（1H，t，J=7.4 Hz，H-6），6.98（1H，t，J=7.4 Hz，H-5），3.49（1H，dd，J=8.6，4.6 Hz，H-2′），3.31（1H，dd，J=12.9，4.6 Hz，H-1′），2.97（1H，dd，J=12.9，8.6 Hz，H-1′）；¹³C-NMR（DMSO-d₆，150 MHz） δ：170.1（C-3′），136.8（C-8），127.7（C-9），124.5（C-2），121.4（C-6），118.8（C-5），118.8（C-4），111.8（C-7），110.3C-4），55.2（C-2′），28.0（C-1′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[18]報(bào)道對(duì)比，故鑒定為色氨酸。

化合物13 無(wú)色方晶（甲醇）；HR-ESI-MS m/z178.086 1[M+H]⁺；¹H-NMR（CD₃OD，600 MHz） δ：7.01（1H，s，H-2），6.92（1H，d，J=2.4 Hz，H-4），6.66（1H，dd，J=2.4，8.4 Hz，H-6），7.15（1H，d，J=8.4 Hz，H-7），3.79（1H，t，H-10），2.90（1H，t，H-11）；¹³C-NMR（CD₃OD，150 MHz） δ：122.9（C-2），110.5（C-3），102.1（C-4），149.6（C-5），111.2（C-6），110.8（C-7），133.6（C-8），128.2（C-9），28.5（C-10），62.2（C-11）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]報(bào)道對(duì)比，故鑒定為5-羥基色醇。

化合物14 無(wú)色方晶（甲醇）；HR-ESI-MS m/z203.118 30[M+H]⁺；¹H-NMR （CD₃OD，600 MHz） δ：2.42（3H，s，N-CH₃），3.52（2H，s，H-1），2.68（2H，t，J=5.4 Hz，H-3），2.61（2H，t，J=5.4 Hz，H-4），6.66（1H，d，J=8.4 Hz，H-5），6.51（1H，dd，J=2.4，8.4 Hz，H-7），7.04（1H，d，J=2.4 Hz，H-8）；¹³C-NMR（CD₃OD，150 MHz） δ：45.2（N-CH₃），51.8（C-1），52.2（C-3），20.9（C-4），101.6（C-5），150，2（C-6），110.0（C-7），110.9（C-8），105.2（C-4a），127.4（C-4b），132.8（C-9a）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[19]報(bào)道對(duì)比，故鑒定為2-methyl-6-hydroxy-1，2，3，4-tetrahydro-β-carboline。

化合物15 黃色針晶（甲醇）；HR-ESI-MS m/z283.072 7[M+H]⁺；¹H-NMR（DMSO-d₆，600 MHz） δ：11.35（1H，br s，H-1），7.45（1H，d，J=8.7 Hz，H-7），7.33（1H，d，J=8.7 Hz，H-8），7.32（1H，s，H-2），4.05（2H，t，J=5.4 Hz，H-4），3.73（6H，s，CH₃），3.25（2H，t，J=5.4 Hz，H-3）；¹³C-NMR（DMSO-d₆，150 MHz） δ：136.9（C-6），124.9（C-5a），120.3（C-2a），121.9（C-7），118.7（C-8），113.5（C-2），104.7（C-1b），67.8（C-4），54.0（CH₃-N⁺-CH₃），131.6（C-1a），18.2（C-3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[20]報(bào)道對(duì)比，故鑒定為蟾蜍噻嚀。

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[責(zé)任編輯 丁廣治]