倪自翔，謝瓊，易旭夫

（1.四川大學(xué)華西基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)院，四川成都　610041；2.新疆新醫(yī)司法鑒定所，新疆烏魯木齊　830054）

成都市主城區(qū)水中尸體多發(fā)河流區(qū)段硅藻分布

倪自翔1，2，謝瓊2，易旭夫1

（1.四川大學(xué)華西基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)院，四川成都610041；2.新疆新醫(yī)司法鑒定所，新疆烏魯木齊830054）

目的研究成都市主城區(qū)水中尸體多發(fā)河流區(qū)段所含硅藻的種屬分布。方法采集2014年10月成都市（錦江區(qū)、金牛區(qū)、青羊區(qū)、武侯區(qū)、成華區(qū)）5條河流區(qū)段共39個采水點水樣標(biāo)本，制作硅藻涂片后運用生物顯微鏡及數(shù)碼顯微采集系統(tǒng)對水樣中硅藻種屬分布及構(gòu)成比進行研究。結(jié)果成都主城區(qū)所檢水域共檢見硅藻種屬21種，各水域硅藻優(yōu)勢種屬及構(gòu)成比存在差異。各河流區(qū)段上、中、下游采樣點均存在差異藻屬。結(jié)論初步建立了成都主城區(qū)河流區(qū)域性硅藻種屬圖譜及區(qū)段性種屬分布構(gòu)成比數(shù)據(jù)庫，對分析評價硅藻檢測在案件偵查中推斷落水點具有特殊意義。

法醫(yī)病理學(xué)；溺水；硅藻類；成都

硅藻的細胞壁由無結(jié)晶、不易破壞的含水硅酸鹽構(gòu)成，在尸體高度腐敗時也能保持原形，自1904年以來，硅藻檢驗作為個體溺死的診斷證據(jù)，一直沿用至今［1-5］。Ludes等［6-7］對連續(xù)河段的硅藻種群進行檢測并與死者組織中所檢出硅藻對比研究，認為通過檢出的優(yōu)勢性藻屬可以推斷溺水點，Thakar等［8］還制作了當(dāng)?shù)夭煌竟?jié)硅藻種屬分布圖用于區(qū)分不同特征性水體，更利于推斷溺水點。目前在國內(nèi)，北京、上海、蘇州、武漢、重慶、武漢等地已有當(dāng)?shù)啬骋粫r段城區(qū)水域硅藻種屬分布的研究［9-17］，因此本研究收集成都市主城區(qū)中錦江區(qū)、金牛區(qū)、青羊區(qū)、武侯區(qū)、成華區(qū)公安分局近年水中尸體案件資料，篩選出水中尸體多發(fā)河流，分區(qū)段采樣進行硅藻種屬及構(gòu)成比例進行統(tǒng)計。通過分析不同區(qū)段硅藻分布特點，制作硅藻圖譜，為當(dāng)?shù)厮惺w的法醫(yī)學(xué)檢驗提供新平臺。

1　材料與方法

1.1樣本采集

于2014年10月10日至17日在成都主城區(qū)（錦江區(qū)、金牛區(qū)、青羊區(qū)、武侯區(qū)、成華區(qū)）三環(huán)路內(nèi)清水河、南河、府河、沙河及成華區(qū)轄區(qū)內(nèi)東風(fēng)渠河段水中尸體多發(fā)地段進行水樣采集。每條河以2km為單位距離就近的橋面中央水域及沿岸水深1 m處各取水樣250mL混合（不足1m處取近河底處）為1份。5條河段共取水39份，樣本加4%水合氯醛1 mL固定，編號記錄。

1.2儀器

Leica DM500光學(xué)生物顯微鏡（德國Leica公司）；L-530多管架自動平衡離心機（湖南湘儀實驗儀器開發(fā)有限公司）。

1.3硅藻檢驗

水樣靜置12 h，將下層沙土沉淀棄去，上層河水搖勻后取10mL，離心后，棄上清液，留1mL沉淀液。加水樣至10mL再次離心并重復(fù)上述步驟2次。最后吸取沉淀液50μL涂片，常規(guī)封片。

1.4硅藻鑒定與分析

采用Leica DM500光學(xué)生物顯微鏡及數(shù)碼顯微采集系統(tǒng)，用油鏡在硅藻涂片全部范圍內(nèi)尋找硅藻并拍攝，通過數(shù)碼照片進行人工計數(shù)，各樣本取3張涂片計數(shù)取平均值，并對硅藻種屬［18-20］進行鑒別，對硅藻數(shù)目及構(gòu)成比進行統(tǒng)計。

2　結(jié)果

成都主城區(qū)所檢水域檢見硅藻種屬2綱6目 9科21屬。其中，中心綱占37.4%，包括圓篩藻屬、小環(huán)藻屬、冠盤藻屬、直鏈藻屬；羽紋綱占62.6%，包括針桿藻屬、脆桿藻屬、菱形藻屬、菱板藻屬、卵形藻屬、舟形藻屬、羽紋藻屬、異極藻屬、短縫藻屬、曲殼藻屬、橋彎藻屬、布紋藻屬、等片藻屬、雙壁藻屬、彎楔藻屬、蛾眉藻屬、雙菱藻屬。種類豐富，總體硅藻種群中小環(huán)藻屬（29.9%）、菱形藻屬（18.6%）、舟形藻屬（13.4%）屬優(yōu)勢藻屬。但每條受檢河流優(yōu)勢藻屬及硅藻種屬分布亦有不同。

清水河所檢區(qū)段為西三環(huán)橋下至百花潭公園，6處采樣點共檢出14種硅藻藻屬，其中優(yōu)勢藻屬為小環(huán)藻屬（23.1%）、舟形藻屬（21.0%）、菱形藻屬（19.5%）。南河所檢區(qū)段為百花潭橋至興安橋，6處采樣點共檢出17種硅藻藻屬，其中優(yōu)勢藻屬為舟形藻屬（27.3%）、菱形藻屬（19.4%）、小環(huán)藻屬（13.1%）。府河所檢區(qū)段為金府路府河橋至高攀東路府河橋，9處采樣點共檢出19種硅藻藻屬，其中優(yōu)勢藻屬為菱形藻屬（24.8%）、小環(huán)藻屬（16.6%）、舟形藻屬（16.3%）。沙河所檢區(qū)段自沙河進水閘至成龍路沙河橋，10處采樣點共檢出19種硅藻藻屬，其中優(yōu)勢藻屬為小環(huán)藻屬（42.7%）。東風(fēng)渠8處采樣點所見區(qū)段優(yōu)勢藻屬為舟形藻屬（29.3%）、卵形藻屬（20.9%）。所檢河流各區(qū)段硅藻構(gòu)成比統(tǒng)計分析結(jié)果見表1～5。

表1　清水河各采樣點硅藻構(gòu)成比（%）

表2　南河各采樣點硅藻構(gòu)成比（%）

表3　府河各采樣點硅藻構(gòu)成比（%）

表4　沙河各采樣點硅藻構(gòu)成比（%）

3　討論

硅藻依據(jù)形態(tài)結(jié)構(gòu)及紋飾的不同，可分為中心綱和羽紋綱兩大類，約200屬。中心綱硅藻細胞殼面的紋飾多呈同心放射狀排列，無假殼縫或殼縫；羽紋綱硅藻殼面的紋飾多呈兩側(cè)對稱、羽紋狀排列，有假殼縫或殼縫。硅藻分布極為廣泛，個體大小差異很大，大多為40～80 μm，國外報道［18］硅藻類的種類已超過10000種。本研究引用“優(yōu)勢種屬”［9］這一概念，通過描述硅藻種群、數(shù)量以及某種藻屬占所檢水域總體硅藻數(shù)量的構(gòu)成百分比，直觀反映各水域硅藻構(gòu)成的差異特性。

成都市地處岷江沖積平原，境內(nèi)河網(wǎng)密布，主城區(qū)主要河流有府河、南河、沙河三條河流，支流眾多。水中尸體的檢驗也是當(dāng)?shù)胤ㄡt(yī)學(xué)檢案的重要部分。本研究發(fā)現(xiàn)，成都主城區(qū)各水域硅藻種類較豐富，共檢出21種種屬。每條所檢河流均有十余種，各受檢河流優(yōu)勢種屬及種屬構(gòu)成比均有不同。我國其他地區(qū)水域的硅藻分布也有差異。北京中心城區(qū)水域秋季檢出硅藻藻屬10種［9］，硅藻種群中小環(huán)藻屬、針桿藻屬、直鏈藻屬等為優(yōu)勢藻屬；上海地區(qū)夏季檢出硅藻藻屬6種［10］、秋季檢出12種［11］，主要有脆桿藻屬、舟形藻屬、橋彎藻屬、小環(huán)藻屬、圓篩藻屬、直鏈藻屬。蘇州中心城區(qū)水域春季檢出硅藻藻屬10種［12］，以舟形藻屬最為常見，其次為直鏈藻屬、小環(huán)藻屬多見。武漢中心城區(qū)水域春季檢出硅藻藻屬14種［13］，其中小環(huán)藻屬、直鏈藻屬、舟形藻屬、針桿藻屬等為優(yōu)勢藻屬。重慶12月檢出硅藻藻屬24種［14］，其中小環(huán)藻屬、菱形藻屬、曲殼藻屬、舟形藻屬、橋彎藻屬、直鏈藻屬占優(yōu)勢。東莞夏秋季檢出硅藻藻屬21種［15］，其中舟形藻屬、菱形藻屬、直鏈藻屬、曲殼藻屬、異極藻屬出現(xiàn)較多?？梢娖喜砍鞘兴蚬柙宸N屬要比偏北方豐富。各地硅藻優(yōu)勢種屬分布均有各自特點，區(qū)別主要為內(nèi)陸水系與上海［11］、廣州［16］等沿海水系河流近出海段由于潮汐影響而獨有的半咸屬性的圓篩藻屬。各地硅藻種屬構(gòu)成均有差異，但總體均為我國淡水藻類常見種屬。

賴小平等［15］研究表明，通過建立區(qū)域性溺死多發(fā)河段硅藻數(shù)據(jù)庫，利用相似系數(shù)、差異系數(shù)及聚類分析進行落水地點推斷具有一定可行性。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)的河段存在硅藻種屬分布差異，可作為進行相關(guān)系數(shù)計算的依據(jù)。此外，5條受檢河段所檢樣本中均可發(fā)現(xiàn)部分區(qū)段或采樣點獨有硅藻種屬。如清水河受檢上游區(qū)段見特殊的蛾眉藻屬，下游區(qū)段見圓篩藻屬。南河上游區(qū)段見圓篩藻屬、彎楔藻屬，僅彩虹橋采樣點見菱板藻屬，直鏈藻屬出現(xiàn)在錦官橋和錦江橋采樣點。府河受檢河段中曲殼藻屬和雙菱藻屬僅出現(xiàn)在下游。沙河自上游至下游小環(huán)藻屬構(gòu)成比呈下降趨勢而菱形藻屬構(gòu)成比呈上升趨勢，彎楔藻屬只出現(xiàn)在上游采樣點。東風(fēng)渠受檢河段中橋彎藻屬及圓篩藻屬出現(xiàn)在下游河段，彎楔藻屬分布于中游河段。由此可見所檢河流區(qū)段具有一定變化特殊性，硅藻的種屬及構(gòu)成比的區(qū)段研究對于溺死檢案的落水點準(zhǔn)確推斷顯得更為重要。由表4可知沙河河段優(yōu)勢藻屬為小環(huán)藻屬（42.7%），但在分段數(shù)據(jù)中，到了中游槐樹店路沙河橋采水點數(shù)據(jù)體現(xiàn)為小環(huán)藻屬構(gòu)成比下降為31.4%，菱形藻屬構(gòu)成比上升至28.5%，兩者接近。此后下游區(qū)段河段變?yōu)樾…h(huán)藻屬與菱形藻屬的雙優(yōu)勢藻屬狀態(tài)?？梢?，河流硅藻總體構(gòu)成比并不完全代表各個河流區(qū)段或采樣點的硅藻構(gòu)成比狀態(tài)，在檢案中需重點關(guān)注。本研究發(fā)現(xiàn)，分段樣本中存在的特殊藻屬不失為鑒定的一個新方向，具體案件的對比內(nèi)容除了種屬構(gòu)成，還應(yīng)該注意該區(qū)段或采樣點是否存在特殊藻屬。特殊藻屬可以作為推斷落水點的重要證據(jù)［7］，但可行性需進一步研究驗證。

本研究對象為成都主城區(qū)的5條河流，不同季節(jié)中環(huán)境因素和水體的自身理化因素（水體溫度、優(yōu)勢離子、酸堿度、透明度、含氧量等）都存在差異，再加上浮游藻類自身生活周期的變化，水體中硅藻的優(yōu)勢種屬存在一定變化［8］。杜宇等［17］研究表明，一年中相同河段硅藻數(shù)量、種群及優(yōu)勢種群均隨時間、地點而變化；有時同一采樣點優(yōu)勢藻屬在相鄰兩周時間就可發(fā)現(xiàn)明顯變化，而在汛期時因為水流流速過快等原因，不同觀測點之間硅藻種屬差別又很小。Singh等［21］在2011—2012年在同樣地點對2005—2007年所做硅藻種屬分布調(diào)查進行對比研究，發(fā)現(xiàn)所檢水體主體硅藻種屬分布及變化屬性沒有改變，但仍有一些指示性的硅藻發(fā)生了變化，對于水體硅藻種屬分布的法醫(yī)學(xué)分型需要進行持續(xù)性的研究。本研究由于時間所限，只對秋季樣本進行采集和分析，作為一個用來對比實用的數(shù)據(jù)庫還遠遠不夠，硅藻種屬分布數(shù)據(jù)庫的建立需要集合不同季節(jié)等因素影響下的全面數(shù)據(jù)，需長期取樣，除了考慮季節(jié)變化，還應(yīng)加入河流自身汛期等影響因素，進行更廣泛深入的研究。

綜上所述，不僅需要在建立硅藻種屬數(shù)據(jù)庫方面進行更廣泛深入的研究，找出硅藻數(shù)量及種群構(gòu)成比的變化規(guī)律。更要在實際檢案中進一步驗證硅藻種屬區(qū)段性分布及特殊硅藻種屬特異性鑒定的適用性。在檢案時全面細致分析實驗數(shù)據(jù)，結(jié)合偵查案情，充分考慮，做出合理推斷。故筆者建議：（1）需普遍建立各地區(qū)硅藻種屬及分布情況的數(shù)據(jù)庫，常見案發(fā)河段需作為重點檢查對象。（2）結(jié)合當(dāng)?shù)厮蚯闆r，進行河流分區(qū)段、湖泊分區(qū)域并分季節(jié)檢測。（3）考慮可能由于城市建設(shè)、河流污染、氣候改變等多種影響因素作用于硅藻生長導(dǎo)致硅藻種群可能存在變化，間隔3～5年對當(dāng)?shù)厮蛟俅芜M行系統(tǒng)檢驗，對出現(xiàn)變化的數(shù)據(jù)進行補充和更新。（4）在檢案中對依據(jù)不同水體硅藻種屬分布及特殊硅藻的特點而推斷尸體落水點的方法進行驗證。

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（本文編輯：劉寧國）

Distribution of Diatoms in Main Sections of Urban District Rivers with Drowningprone in Chengdu

NI Zi-xiang1，XIE Qiong2，YI Xu-fu1
（1.West China of Pre-clinical and Forensic Medicine，Sichuan University，Chengdu 610041，China；2.Xinjiang Xinyi Forensic Judicial Appraisal Institute，Urumqi 830054，China）

Objective To explore the species distribution and constituent ratio of diatoms in main sections of urban district rivers where drowning occurs frequently in Chengdu.Methods Total 39 water samples from the sampling points of 5 rivers（Jinjiang，Jinniu，Qingyang，Wuhou and Chenghua districts）in October 2014 were collected.The diatoms smear were made and the species distribution and constituent ratio of diatoms from the water samples were analyzed using biological microscope and acquisition system of digital microscope.Results Total 21 species of diatoms were detected in main sections of urban district rivers in Chengdu.Significant differences in the dominant diatom species and proportions of the different rivers were observed，and there were different species existed in all sampling points of the upstream，midstream and downstream of the rivers.Conclusion The database of species map，species distribution and constituent ratio of diatoms in main sections of urban district rivers in Chengdu are preliminarily established，which has special meaning for the analysis and evaluation of falling location inference using diatoms test in case investigation.

forensic pathology；drowning；diatoms；Chengdu

DF795.1

A

10.3969/j.issn.1004-5619.2016.05.004

1004-5619（2016）05-0332-06

倪自翔（1989—），男，碩士研究生，主要從事法醫(yī)病理學(xué)、法醫(yī)臨床學(xué)研究；E-mail：ni_zixiang@qq.com

易旭夫，男，副教授，碩士研究生導(dǎo)師，主要從事法醫(yī)病理學(xué)教學(xué)、科研及檢案工作；E-mail：yixufu@tom.com

（2015-03-13）