賈兵

（四川省達(dá)州市環(huán)境監(jiān)測(cè)站四川達(dá)州635000）

高效液相色譜技術(shù)在水質(zhì)多環(huán)芳烴檢測(cè)中的應(yīng)用

賈兵

（四川省達(dá)州市環(huán)境監(jiān)測(cè)站四川達(dá)州635000）

隨著現(xiàn)代生活水平的不斷提高，人們對(duì)水質(zhì)安全問題關(guān)注度不斷增加，本文結(jié)合高效液相色譜技術(shù)對(duì)6種多環(huán)芳烴質(zhì)量濃度進(jìn)行了檢測(cè)，希望能夠?qū)λ|(zhì)檢測(cè)相關(guān)工作提供一定的參考。

高效液相色譜法；水質(zhì)檢測(cè)；多環(huán)芳烴

高效液相色譜是色譜法的重要分支技術(shù)，該技術(shù)通過高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或者不同比例的混合溶液、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各部分被分離后，進(jìn)入到檢測(cè)器檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。從當(dāng)前的實(shí)踐應(yīng)用情況來看，該技術(shù)具有分離效能高、選擇性高、檢測(cè)靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，能夠很好的滿足水質(zhì)檢測(cè)要求。

多環(huán)芳烴是重要的環(huán)境和食品污染物，到目前為止已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了超過200種多環(huán)芳烴，其中有相當(dāng)部分存在致癌性，比如苯并芘等。多環(huán)芳烴廣泛分布在環(huán)境中，是水質(zhì)檢測(cè)的重要內(nèi)容之一。

1　材料與試劑

（1）6種多環(huán)芳烴，熒蒽（FLU）、苯并（b）熒蒽（BbF）、苯并（k）熒蒽（BkF）、苯并（a）芘（BaP）、苯并（ghi）苝（BPer）、茚并（1,2,3-cd）芘（IP）標(biāo)準(zhǔn)溶液；（2）乙腈：色譜純；（3）二氯甲烷：色譜純；（4）異丙醇：色譜純；（5）高純水：電阻率＞18MΩ；（6）富集小柱：艾杰爾C18 5mL，500g。

2　試驗(yàn)儀器

（1）高效液相色譜儀：美國戴安ULTIMATE3000；（2）固相萃取儀：美國.吉爾森GX-271；（3）色譜柱：Waters PAH C18 5μm 4.6×250mmColumn。

3　固相萃取步驟

（1）取1000mL水樣，如果水樣渾濁則先濾清，然后將水樣中加入濃度為10%的異丙醇作為改性劑；（2）用5mL甲醇浸泡富集凈化柱，然后抽濾，并利用10mL的高純水過柱，然后抽濾；（3）裝載樣品，并控制流速，將1000mL水樣在3h左右裝載完畢；（4）在樣品完成抽濾之后，用10mL的高純水對(duì)柱體進(jìn)行清洗；（5）抽空固相萃取富集凈化柱30min，保證能夠使柱體完全干燥；（6）用20mL二氯甲烷分兩步洗脫然后定容為1mL，接著用氮?dú)獯抵两?，并用乙腈或者甲醇將其定容?mL。

整個(gè)固相萃取過程中，需要注意在對(duì)SPE柱活化處理時(shí)，最好不要將柱床抽干，避免填料層產(chǎn)生裂隙而影響回收率。

4　儀器條件

（1）柱體溫度：30℃；（2）流動(dòng)相：高純水（A）、色譜純乙腈（B），梯度洗脫程序見表1；（3）色譜時(shí)間：30min；（4）檢測(cè)器：熒光檢測(cè)器（波長(zhǎng)設(shè)置見表2）；（5）進(jìn)樣量：100μL。

表1　多環(huán)芳烴梯度洗脫程序

表2　多環(huán)芳烴熒光檢測(cè)器波長(zhǎng)設(shè)置（單位：nm）

5　繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

5.1制備多環(huán)芳烴混合標(biāo)準(zhǔn)溶液用乙腈配制多環(huán)芳烴標(biāo)準(zhǔn)混合溶液，混合標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度見表3。

表3　多環(huán)芳烴配置系列混合濃度（單位：μg/L）

5.26種多環(huán)芳烴回歸方程

以質(zhì)量濃度作為橫坐標(biāo)，同時(shí)對(duì)峰面積進(jìn)行測(cè)量，并將其作為縱坐標(biāo)，繪制多環(huán)芳烴標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到如表4所示的6種多環(huán)芳烴的回歸方程。

表4　6種多環(huán)芳烴回歸方程

6　色譜峰分析

6.1圖1給出了標(biāo)準(zhǔn)色譜圖

圖1　多環(huán)芳烴標(biāo)準(zhǔn)色譜圖

6.2以保留時(shí)間進(jìn)行定性分析

具體組分出峰順序如下：FLU、BbF、BkF、BaP、BPer、IP；保留時(shí)間分別為：12.4min、16.4min、17.2min、18.0,min、20.2min、21.3min。

7　外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定多環(huán)芳烴質(zhì)量濃度

通過色譜峰面積，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出水樣萃取濃縮液中目標(biāo)物質(zhì)的質(zhì)量濃度，然后根據(jù)下面的公式對(duì)水樣中的6種多環(huán)芳烴的質(zhì)量濃度進(jìn)行計(jì)算。

公式中的表示水樣中6種多環(huán)芳烴的質(zhì)量濃度值；ρ1表示標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出的水樣萃取濃縮液中6種多環(huán)芳烴的質(zhì)量濃度值；V1表示水樣中萃取液的體積；V表示水樣的體積。

8　精密度和準(zhǔn)確度試驗(yàn)

表5　6種多環(huán)芳烴相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差及回收率測(cè)定結(jié)果

對(duì)7組實(shí)際水樣分別重復(fù)測(cè)試6次，同時(shí)對(duì)7組水樣進(jìn)行不同加標(biāo)量的平行加標(biāo)回收試驗(yàn)，分別重復(fù)測(cè)試6次。各組分相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均在4%以下，回收率在81.9%～105%之間，見表5。

9　方法檢出限

取6個(gè)空白水樣1000mL，采用固相萃取方法將其洗脫濃縮到1mL，進(jìn)樣量100μL，按照公式，將六種多環(huán)芳烴檢出限計(jì)算出來，如表6所示。

表6　六種多環(huán)芳烴檢出限

10　結(jié)語

通過本文的分析討論可以發(fā)現(xiàn)，水質(zhì)分析中高效液相色譜法是一種高效能、高敏捷度以及高精度的新方法，同時(shí)，固相萃取技術(shù)取代傳統(tǒng)的液-液萃取技術(shù)是未來樣品預(yù)處理發(fā)展的必然趨勢(shì)，通過文中的數(shù)據(jù)可以看出，用固相萃取法回收水樣中多環(huán)芳烴時(shí)穩(wěn)定且重現(xiàn)性較好。

[1]洪蕾潔.固相萃取-高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定水體中的10種磺胺類抗生素[J].環(huán)境科學(xué),2012（02）：652-657.

[2]王妮婭.環(huán)境水樣中多環(huán)芳烴的預(yù)處理及色譜分析技術(shù)研究[D].湖南大學(xué),2014.