張建勛，劉耀川，宋淑英，董素鳳，張 輝

（遼寧省重大動物疫病應急中心，遼寧 沈陽 110161）

遼寧地區(qū)新生仔豬豬瘟隱性感染情況的血清學調(diào)查

張建勛，劉耀川，宋淑英，董素鳳，張 輝

（遼寧省重大動物疫病應急中心，遼寧 沈陽 110161）

豬瘟能夠造成生豬養(yǎng)殖業(yè)巨大經(jīng)濟損失，隱性感染病豬成為豬群的潛在風險因素。本試驗對遼寧地區(qū)15家規(guī)?；B(yǎng)殖場的150頭1月齡未免疫仔豬進行豬瘟隱性感染情況血清學調(diào)查，為我省豬瘟防控、凈化提供幫助。結(jié)果顯示，我省豬瘟隱性感染率為36%，屬中等偏高水平，建議調(diào)查養(yǎng)殖場及時對豬群進行凈化處理。

豬瘟；隱性感染；感染率；凈化

豬瘟為一種急性、烈性傳染病，能給生豬養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。自對豬瘟實行強制免疫以來，該病已得到有效控制。但在高密度的疫苗免疫壓力下[1]，豬瘟病毒出現(xiàn)了許多適應性的變異，低致病力、低致死性的毒株不斷出現(xiàn)，導致遲發(fā)性、慢性、亞急性豬瘟病例不斷增多[2-4]。隱性感染，持續(xù)帶毒、散毒的病豬是豬群的潛在風險因素[5]。因此，對豬群中豬瘟的隱性感染情況進行調(diào)查、及時清除隱性感染病豬、凈化豬群，對集約化養(yǎng)殖場防控豬瘟具有重要的現(xiàn)實意義。本研究在遼寧地區(qū)11個市、縣選取15家規(guī)?；i養(yǎng)殖場，對150頭1月齡仔豬的豬瘟隱性感染情況進行血清學調(diào)查，為全省防控、凈化豬瘟提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 采樣養(yǎng)殖場 在遼寧鞍山、本溪、錦州、盤錦、阜新、營口、鐵嶺、遼陽、綏中、葫蘆島及昌圖地區(qū)，選取具有代表性的規(guī)模化生豬養(yǎng)殖場進行采樣。地區(qū)選場情況見表1。

1.2 試驗動物 每場選取不同群、1月齡、未免疫的仔豬各10頭。仔豬親代健康，無異?，F(xiàn)象。選取的仔豬體重、體長適中，出生后表現(xiàn)正常。

1.3 試劑與儀器 豬瘟抗原檢測ELISA試劑盒購于上海牧仁生物科技有限公司，W D-2102A全自動酶標儀。

表1 樣品采集地區(qū)分布情況Table1 The hog breeding farm

1.4 血液采集 使用滅菌注射器，于仔豬前腔靜脈采血10 mL，靜置，待其析出血清后，將血清分裝于滅菌離心管中，-20℃保存待用。

1.5 豬瘟抗原EELLIISSAA檢測 豬瘟抗原檢測按照試劑盒說明書進行。試驗步驟為：①取50 μL樣品稀釋液加入酶標板各孔中；②取50 μL參照血清稀釋液1加入第1孔（A1）和第2孔（B1）中；③取50 μL參照血清稀釋液2加入C1和D1孔中；④取50 μL參照血清稀釋液3加入E1和F1孔中；⑤取50 μL待檢血清加入其它孔中，蓋好酶標板，輕輕振蕩混勻，室溫（20～25℃）孵育180±5 min；⑥棄去孔內(nèi)液體，甩干，用300 μL洗液洗滌6次。最后1次洗滌后盡量將酶標板拍干；⑦每孔加入100 μL酶標結(jié)合物工作液，蓋好后室溫（20～25℃）靜置孵育60±5 min；⑧重復步驟⑥每孔加入100 μL底物液，室溫（20～25℃）孵育15 min；⑨每孔加入100 μL終止液；⑩混勻后測定O D450值。

1.6 結(jié)果讀取及有效性判定 在終止液反應15 min內(nèi)測定O D450，取C1和D1孔的O D450平均值為空白值，取A1和B1孔的O D450平均值為參照血清稀釋液1的O D450，取其他樣品孔O D450與O D450空白值的差值為樣品校正值，并根據(jù)下列公式計算參照血清稀釋液3（E1和F1孔的平均值）和檢測樣品的陽性率（PP）。

數(shù)據(jù)有效性判定，必須同時滿足：①O D450空白值＜0.350；②O D450參照血清稀釋液1≥0.750；③參照血清稀釋液3（E1和F1孔的O D450平均值）的陽性率（PP）＞20%。

圖1 遼寧地區(qū)仔豬豬瘟隱性感染情況分布圖Fig.1 The distribute chart of swine fever inapparent infection on piglet in Liaoning area

2 結(jié)果與分析

此次血清學調(diào)查結(jié)果表明，遼寧地區(qū)豬瘟隱性感染率為36%。其中，鞍山0%、本溪15%、錦州40%、盤錦40%、阜新10%、營口100%、鐵嶺30%、遼陽30%、綏中20%、葫蘆島50%、昌圖80%。具體隱性感染情況見表2。

表2 遼寧地區(qū)仔豬豬瘟隱性感染情況Table2 The inapparent infection situation of swine fever on piglet in Liaoning area

數(shù)據(jù)分析可見，此次調(diào)查遼寧地區(qū)仔豬豬瘟隱性感染率為0～100%之間，主要分布于30%～50%之間，屬于中等偏高水平。同一地區(qū)的不同規(guī)模場中，感染率不盡相同。如本溪2場的感染率分別為0%及30%，差別較大。一些地區(qū)的差別則不明顯，如綏中2場的感染率分別為10%及30%、葫蘆島2場分別為40%和60%。而如錦州地區(qū)2場，隱性感染率則完全相同，均為40%。具體隱性感染率分布情況見圖1。

3 討論

豬瘟是造成養(yǎng)殖業(yè)巨大經(jīng)濟損失的疾病之一。隱性感染病豬則能長期帶毒、排毒，是豬瘟病毒潛在的傳染源，對豬群健康造成威脅[6]。而隱性感染的妊娠母豬則能夠?qū)@種隱性感染、長期排毒的狀況起到放大的作用[7-9]。因此對豬瘟隱性感染情況進行常規(guī)性調(diào)查，對豬瘟防控、凈化均有較實際的意義。

本試驗對遼寧地區(qū)150頭、1月齡未免疫仔豬進行豬瘟隱性感染情況調(diào)查，數(shù)據(jù)在反應該豬場豬瘟隱性感染情況的同時，也能在一定程度上反應妊娠母豬的隱性感染情況[10]，可作為豬瘟凈化工作的指導依據(jù)。

本試驗發(fā)現(xiàn)，遼寧地區(qū)豬瘟隱性感染率為36%。與國內(nèi)其他地區(qū)研究結(jié)果相比，遼寧地區(qū)感染率數(shù)中等偏高水平。如山東地區(qū)調(diào)查結(jié)果，陽性率為16.2%[11]；福建地區(qū)為70.59%[12]、陜西地區(qū)陽性率為3.13%[13]、河南地區(qū)陽性率為36.9%[14]、新疆地區(qū)陽性率為78.5%[15]。而就省內(nèi)調(diào)查結(jié)果而言，并未見明顯的流行趨勢或感染規(guī)律，各地區(qū)之間、相同地區(qū)的不同規(guī)模場之間，感染情況也較為獨立。而在鞍山、本溪的飼養(yǎng)場中，有0%隱性感染的情況，與該場的飼養(yǎng)、免疫、繁育等因素有關(guān)，可以進行推廣、學習。建議參與調(diào)研的飼養(yǎng)場，及時對隱性感染的豬進行凈化，確保豬群潔凈度，防止豬瘟病毒進一步擴散。

[1]朱建國，原泉水.疫區(qū)豬場豬瘟隱性感染母豬的診斷與淘汰[J].中國獸醫(yī)雜志，2000，26（12）：15-16.

[2]劉向鵬，馬長賓，吳挺，等.豬瘟免疫誘發(fā)隱性感染豬發(fā)病死亡診斷報告[J].當代畜牧，2015，8：65-66.

[3]周廣森，王學玲，苗志蘭，等.用單克隆抗體純化酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測豬瘟抗體發(fā)現(xiàn)隱性豬瘟[J].天津農(nóng)學院院報，1995，2（3）：14-20.

[4]姚文生，范學政，王琴，等.我國豬瘟流行現(xiàn)狀與防控措施建議[J].中國獸藥雜志，2011，45（9）：44-47.

[5]寧宜寶，吳文福.我國豬瘟流行特點與疫苗免疫研究[J].中國獸藥雜志，2011，45（8）：33-37.

[6]涂長春.豬瘟國際流行態(tài)勢、我國現(xiàn)狀及防治對策[J].中國農(nóng)業(yè)科學，2003，36（8）：955-960.

[7]毛澤明，加春生，毛澤天，等.規(guī)模化豬場豬瘟發(fā)病新特征及預防[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2014，1：46-47.

[8]張秀峰，劉玉茹，高云航.規(guī)?；i場豬瘟超前免疫對抗體水平的影響[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2013，2：84-85.

[9]于立權(quán)，崔玉東，樸范澤.豬瘟流行病學研究概況[J].動物醫(yī)學進展，2003，24（2）：52-54.

[10]陳果亮.規(guī)?；i場豬瘟疫苗群體免疫程序的研究[D].長沙：湖南農(nóng)業(yè)大學，2013.

[11]葉丙鑫.山東省豬瘟流行病學調(diào)查[D].蘭州：甘肅農(nóng)業(yè)大學，2009.

[12]李曉華.龍巖市規(guī)模化豬場豬瘟流行病學調(diào)查及其控制[D].福州：福建農(nóng)林大學，2010.

[13]趙光明.陜西省豬瘟流行情況的病原學檢測及其免疫效果分析[D].楊凌：西北農(nóng)林科技大學，2013.

[14]郭占達.河南省豬瘟流行病學調(diào)查及綜合防控措施研究[D].鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學，2014.

[15]許追.石河子地區(qū)豬瘟病毒的免疫抗體水平監(jiān)測及實驗室診斷[D].石河子：石河子大學，2014.

Serological investigation on inapparent infection of swine fever on newly born piglet in Liaoning province

Zhang Jianxun,Liu Yaochuan,Song Shuying,Dong Sufeng,Zhang Hui
(Emergency center for significant animal epidemic disease of Liaoning province, Liaoning Shenyang 110161)

Swine fever causes a enormous economic losses in hog breeding industry, and the inapparentinfection pigs are the potential risk factors. In this study, 150 1 month old piglets werechosen to detect the inapparent infection situation in Liaoning area, to provide theory help forswine fever prevention and purification. The results showed that the inapparent infection ratewas 36%, suggesting the breeding farms invested eliminate the pig group as soon as possible.

Swine fever; Inapparent infection; Infection rate; Purification

S858.28

B

1672-9692(2016)03-0035-04

2016-02-02

張建勛（1973-），男，博士，畜牧師，主要從事重大動物疫病防控工作。