鄺紅芳，陳鳳鳴，葉 梅，黃文莉河源龍川婦幼保健院，廣東 河源 517300

臨床研究

無創(chuàng)產前基因檢測胎兒染色體非整倍體的臨床研究

鄺紅芳，陳鳳鳴，葉 梅，黃文莉
河源龍川婦幼保健院，廣東 河源 517300

目的 探討無創(chuàng)性產前基因檢測胎兒染色體非整倍體在臨床的應用。方法 選擇2015年1～12月在我院產科門診就診的孕婦920例，先行無創(chuàng)產前基因檢測（實驗組），對于無創(chuàng)產前基因檢測高風險和中等風險者再行羊水或臍血穿刺染色體核型分析（對照組）。兩組檢測結果為陰性的孕婦，出生后進行隨訪，確定是否有無漏診。通過兩組陽性結果的比較及出生后的觀察隨訪情況來衡量無創(chuàng)產前基因檢測的檢查胎兒非整倍體疾病的準確率，再來判斷其臨床應用價值。結果實施無創(chuàng)產前基因檢查920例，陽性結果為5例，其中21三體綜合征為3例，18三體綜合征為1例，13三體綜合征為1例，陰性為915例；陽性結果以羊水或臍血穿刺染色體核型分析的結果為金標準進行結果對照，21三體綜合征有1例假陽性，18三體綜合征與13三體綜合征無假陽性。檢查結果陰性的孕婦，經產后隨訪無漏診率。結論 無創(chuàng)產前胎兒非整倍體基因檢測可提高產前診斷效率，減少患兒的出生。該項技術具有最佳檢測時間、無創(chuàng)取樣、無流產風險、高靈敏度及準確度的特點，更適宜基層醫(yī)院開展。

關健詞：胎兒染色體；無創(chuàng)性基因檢測；臨床應用

隨著我國經濟快速發(fā)展，整體生活水平提高，人類正走向全力提高出生人口素質方向，特別是開放單獨二胎政策以來，某些特殊情況，如高齡產婦逐年增加，各種原因導致出生缺陷居高不下。最常見的染色體畸形是胎兒染色體非整倍體病變，其中尤以21-三體綜合征（唐氏綜合征）最常見［1］。據調查全國累積有近三千萬個家庭曾生育過缺陷患兒，對胎兒染色體異常的產前診斷可降低出生缺陷，所以推廣檢測胎兒染色體診斷迫在眉睫。目前研究人員推測染色體病發(fā)生頻率與染色體長度及其基因數量有關，長度越短、基因數目越少，染色體病發(fā)生機率越高，因此成功完成胚胎發(fā)育并順利進行早孕期和中孕期的異常胎兒以21、18、13-三體較為常見。患兒通常都存在學習障礙、智能障礙或伴有臟器畸形等問題。2015年1月我院開展了無創(chuàng)產前胎兒非整倍體基因檢測，可提高產前診斷效率，減少患兒的出生，是快捷、安全、較介入性產前診斷易于接受、值得推廣的安全可靠的產前診斷方法，效果顯著現匯報如下。

1　資料與方法

1.1臨床資料

選擇2015年1～12月來我院產科門診就診并要求產前DNA檢測的孕婦920例，12～26孕周，單胎妊娠的人群。納入標準：（1）12～26孕周，單胎妊娠的人群；（2）高齡（大于35歲）；（3）唐氏血清學篩查結果為高、中度風險；（4）孕期B超胎兒NT值增高，軟指標異常，超聲提示異常；（5）羊水穿刺培養(yǎng)失??；（6）不愿選擇穿刺或不適宜進行有創(chuàng)產前診斷的孕婦；（7）自愿選擇進行無創(chuàng)產前檢測的孕婦。

1.2方法

抽取孕婦外周血5 mL，提取血液中游離DNA，通過胎兒染色體非整倍體無創(chuàng)基因檢測，結合生物信息學分析的方法，即可準確判斷胎兒是否患唐氏綜合征（T21），愛德華氏綜合征（T18），帕陶氏綜合征（T13）3大染色體非整倍體疾病。T21檢出率可達99%以上，孕12周以上即可檢測，采血后10～12 d出報告。該技術安全性高，無創(chuàng)傷，無感染，無流產風險。對于無創(chuàng)產前基因檢測高風險和中等風險者再行羊水或臍血穿刺染色體核型分析［2-4］。

2　結果

實施無創(chuàng)產前基因檢查920例，陽性結果為5例，其中21-三體綜合征為3例，18-三體綜合征為1例，13-三體綜合征為1例，陰性為915例；陽性結果以羊水或臍血穿刺染色體核型分析的結果為金標準進行結果對照，21三體綜合征有1例假陽性，18三體綜合征與13三體綜合征無假陽性。

3　討論

我國為出生缺陷的高發(fā)國家，降低出生缺陷，以預防為主。目前我國以產前血清學篩查、超聲檢測和產前診斷技術為主要預防手段，隨著母體外周血中游離DNA的發(fā)現和基因測序技術的發(fā)展，無創(chuàng)胎兒染色體非整倍體檢測技術集合了多項優(yōu)勢，為臨床提供新的技術支持，本研究對近年來無創(chuàng)產前診斷國內外發(fā)展狀況進行綜述，為進一步臨床研究與應用提供參考。目前對于該疾病的檢測主要是基于血清學和超聲診斷學檢查的無創(chuàng)產前篩查和有創(chuàng)取樣的產前診斷，根據檢測結果對患胎采取選擇性流產的方法，以達到優(yōu)生優(yōu)育的目的。傳統產前篩查方法的假陽性和假陰性比例均較高，且檢測時間有所限制，在有創(chuàng)取樣過程中存在一定的流產、致畸等風險，這使得目前的產前檢測方法的患者依從性較差，從而導致許多21、18、13-三體等非整倍體患兒出生。該項技術具有無創(chuàng)取樣、無流產風險、高靈敏度及準確度的特點，更易被廣大孕婦接受檢測。

從以上研究結果可以表明無創(chuàng)性產前基因檢測胎兒染色體非整倍體在臨床的應用是可行的適用于孕周在12～24周的孕婦進行胎兒21、18、13等染色體非整倍體檢測。適應癥：（1）所有希望進行21、18、13-三體產前篩查的孕婦；（2）孕婦年齡達到35歲或以上的高齡孕婦，拒絕做羊水穿刺者；（3）孕早、中期血清篩查21、18、13-三體高危者；（4）早期超聲提示胎兒異常者；（5）有穿刺禁忌癥孕婦（胎盤前置、流產征兆、感染乙肝、HIV、TP等）；（6）IVF、習慣性流產及其他原因的“珍貴兒”。無創(chuàng)性產前篩查和診斷非整倍體疾病將是未來產前診斷的發(fā)展方向。1997年Lo等［5］在懷有男胎的母體血漿和血清中檢測到了性別決定區(qū)基因Y，證實了胎兒游離DNA存在于母體外周血中，從而為無創(chuàng)性產前診斷提供了一個可供選擇的胎兒遺傳物質源［6］。胎兒染色體非整倍體無創(chuàng)基因檢測技術是以胎兒游離DNA為檢測原料。Guibert等［7］發(fā)現胎兒游離DNA可出現于胚胎檢查植入后18～37 d，其可懷孕早期即可檢測到，在分娩后，它將迅速從母體中被清除掉，從而能成為妊娠的特異性標志［8］。故運用該技術，能更早發(fā)現胎兒異常，為早期流產手術做好準備。且因該操作為無創(chuàng)技術，能有效減少對孕婦及胎兒造成的創(chuàng)傷的風險，從而降低孕婦的心理及精神負擔。

研究結果表明無創(chuàng)性產前基因檢測胎兒染色體非整倍體在臨床的應用是可行的適用于孕周在12～24周的孕婦進行胎兒21、18、13等染色體非整倍體檢測。更適宜在基層醫(yī)院開展。

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Clinical application of non-invasive prenatal gene detection for fetal chromosomal aneuploid

KUANG Kongfang，CHEN Fengming，YE Mei，HUANG Wenli
Longchuan Maternal and Child Health Care Hospital，Heyuan 517300，China

Objective To investigate the clinical application of non-invasive prenatal gene detection for fetal chromosomal aneuploidy.Methods We recruited 920 pregnant women who visited the Obstetrics Department of our hospital from January 2015 to December 2015.The experimental group were consisted of who received non-invasive prenatal gene detection.The control group were consisted of those who are determined as high-risk and medium-risk pregnant woman by non-invasive prenatal gene detection and received chromosome karyotype analysis of amniotic fluid and umbilical cord blood.Pregnant women whose test results were both negative were followed up after giving birth，in order to determine whether there is missed diagnosis.The Diagnostic accuracy and clinical application value of non-invasive prenatal gene detection for fetal chromosomal aneuploidy is determined by comparison of positive results in both group and the follow-up after birth.Results A total of 920 cases received non-invasive prenatal gene detection，5 positive results（3 cases of trisomy 21 syndrome，1 case of trisomy 18 syndrome，1 case of trisomy 13 syndrome）and 915 negative results.The results of chromosome karyotype analysis of amniotic fluid and umbilical cord blood as gold standard，comparison study were carried out.There was a false positive in trisomy 21 syndrome and no false positive in trisomy 18 syndrome and trisomy 13 syndrome.Follow-up study showed no missed diagnosis for negative results.Conclusion Non-invasive prenatal gene detection for fetal chromosomal aneuploid can improve the efficiency of prenatal diagnosis and reduce the birth of defective baby.The technology has characteristics of best detection time，non-invasive sampling，no abortion risk，high sensitivity and accuracy，which are more suitable for primary hospital.

fetal chromosome；non-invasive；gene detection；clinical application

2016-05-11

鄺紅芳，副主任醫(yī)師，E-mail:18028677813@163.com