朱宇旌，王博，李方方，鄭麗莉，高原，孟玲，郭福來，丁蘭，張勇

（1.沈陽農(nóng)業(yè)大學畜牧獸醫(yī)學院，遼寧沈陽110866；2.遼寧德寶農(nóng)牧集團有限公司，遼寧沈陽110171；3.沈陽?？缔r(nóng)牧科技有限公司，遼寧沈陽110164）

植物提取物在斷奶仔豬飼糧中的應用效果研究

朱宇旌1，王博1，李方方1，鄭麗莉1，高原2，孟玲2，郭福來2，丁蘭3，張勇1

（1.沈陽農(nóng)業(yè)大學畜牧獸醫(yī)學院，遼寧沈陽110866；2.遼寧德寶農(nóng)牧集團有限公司，遼寧沈陽110171；3.沈陽?？缔r(nóng)牧科技有限公司，遼寧沈陽110164）

試驗旨在研究植物提取物在仔豬生產(chǎn)中的應用效果。選用（10.30±1.13）kg大白斷奶仔豬240頭，隨機分為4組，每組4個重復，每個重復15頭豬，對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加植物提取物A（PE-A）500 mg/kg、植物提取物B（PE-B）500 mg/kg和植物提取物C（PE-C）250 mg/kg，試驗期28 d。結(jié)果表明：1）PE-A組第1～14天料重比比對照組顯著降低5.65%。2）與對照組相比，PE-A組仔豬血清IgM、IgG、T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率和血清總蛋白分別提高1.15%（P＞0.05）、1.38%（P＞0.05）、17.07%（P＜0.01）、6.46%（P＜0.01），尿素氮水平降低16.36%（P＜0.01）。3）PEA組腸道中大腸桿菌數(shù)量較對照組降低8.29%（P＜0.01），PE-B和PE-C組比對照組分別降低4.65%（P＜0.05）、3.39%（P＜0.05）；PE-A、PE-B、PE-C組腸道中乳酸桿菌數(shù)量分別比對照組提高5.65%（P＜0.01）、3.53%（P＜0.05）和3.11%（P＜0.05）；PE-A、PE-B、PE-C組雙歧桿菌菌落數(shù)分別比對照組提高5.76%（P＜0.01）、4.75%（P＜0.05）和3.89%（P＜0.05）。4）PE-A顯著提高干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、磷和鈣的表觀消化率（P＜0.05），分別提高2.91%、5.41%、5.62%、5.92%、6.08%。綜上所述，在仔豬飼糧中添加PE可以有效提高仔豬的生長性能、血液生理生化指標水平、飼料消化利用率，改善腸道微生物平衡。綜合試驗各項指標，仔豬飼糧中添加PE-A效果較好。

植物提取物；斷奶仔豬；生長性能；糞便微生物菌群

目前尋找可替代抗生素類的新型飼料添加劑已成為動物營養(yǎng)領(lǐng)域的研究熱點。植物提取物（plant extract,PE）是以物理、化學或生物學手段分離、提純天然植物性原料（根莖、花、葉、種子等）中的有效成分，以生物小分子形式存在的基團或高分子為主要成分的植物性產(chǎn)品[1]。大量的研究表明它能提高動物機體免疫力，促進生長，改善腸道微生物環(huán)境、抗氧化、抗菌效果顯著，且具有毒副作用和耐藥性較少等優(yōu)點[2-3]。但目前有關(guān)PE在仔豬生產(chǎn)中的應用效果及作用機制少有報道。因此本試驗以大白仔豬為試驗對象，通過在飼糧中添加不同的PE以研究其對仔豬生長性能、血液生理生化指標、免疫機能、養(yǎng)分消化率和糞便中微生物菌群的影響，為PE在實際生產(chǎn)中的應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

植物提取物A（PE-A）為黃芪、杜仲、金銀花、黃連等天然植物提取物復方，主要活性成分為植物類黃酮、有機酸、多糖、多酚類及生物堿。其中總多糖≥9.0%，總黃酮≥2.0%，總生物堿≥3.0%。

植物提取物B（PE-B）為苦木、甘草等植物提取物復方，主要活性成分為生物堿、皂甙、多糖。其中苦木總堿≥0.2%，甘草酸≥0.1%。

植物提取物C（PE-C）為止痢草、肉桂等天然植物提取物復方。主要活性成分為香芹酚和肉桂醛。其中總多糖≥4.0%，總黃酮≥1.0%，總生物堿≥2.0%。

1.2 試驗動物及飼糧

試驗于2014年4—6月在遼寧德寶農(nóng)牧集團艾德蒙種豬場進行。選用平均體重在（10.30±1.13）kg的大白仔豬?；A(chǔ)飼糧參考NRC（1998）配制，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎(chǔ)）

1.3 試驗設計及飼養(yǎng)管理

選用體重相近、健康狀況良好的大白斷奶仔豬240頭，隨機分為4組，每組4個重復，每個重復15頭仔豬。飼喂期28 d。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加PE-A 500 mg/kg、PE-B 500 mg/kg和PE-C 250 mg/kg。

試驗開始前對保育豬舍進行沖洗及消毒，試驗仔豬采用高床飼養(yǎng)，自由采食及飲水。免疫和驅(qū)蟲程序按豬場常規(guī)程序進行，隨時觀察、記錄仔豬的采食和腹瀉情況以及每天的飼料消耗量。

1.4 樣品的采集和檢測

1.4.1 生長性能指標的測定分別在試驗第1、第14和第28天以個體為單位對所有試驗豬進行空腹稱重，試驗過程中以重復為單位記錄采食量，并測定仔豬的平均日采食量、平均日增重。根據(jù)平均日增重和平均日采食量計算料重比。

1.4.2 血清生理生化指標的測定采用日本日立7160全自動生化儀測定血清總蛋白（total protein,TP）、尿素氮（ureanitrogen,BUN）。采用比色法測定IgA、IgG、IgM含量，試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.4.3 T淋巴轉(zhuǎn)化率的測定取抗凝血3 mL，500 r/min離心10 min，小心取中層（血漿與血細胞之間的白色膜），用加Hank'S液2 mL，3 500 r/min離心10 min，取上清液，洗滌2次，用PRMI 1 640稀釋細胞用血球儀計數(shù)白細胞，使其密度為107/mL的白細胞懸液。分裝成2管。在一管中加10%小牛血清和10%植物血凝素各100 μL，另一管（對照管）加10%小牛血清和PRMI 100 mL，混勻。取上述100 μL加入96孔板細胞培養(yǎng)板內(nèi)，設2個重復管，在5%二氧化碳、37℃、飽和濕度下培養(yǎng)48 h，每孔加5 mg/mL MTT 10 μL培養(yǎng)4 h，再加10 mL 10%的SDS-0.04M HCl，培養(yǎng)2 h后取出，室溫放置5 min，采用酶聯(lián)免疫檢測儀檢測[2]。

1.4.4 養(yǎng)分消化率的測定飼料和糞樣中干物質(zhì)（DM）、粗蛋白質(zhì)（CP）、粗脂肪（EE）、鈣（Ca）和磷（P）的表觀消化率用酸不溶灰分（AIA）內(nèi)源指示劑法測定[3]。

1.4.5 糞中微生物菌群的測定測定大腸桿菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌菌落數(shù)量，采用平板涂布法計數(shù)[4]。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)經(jīng)Excel初步處理后用SPSS 19.0軟件進行單因素方差分析（one-way ANOVA），差異顯著時用鄧肯法（duncan）進行多重比較，P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著，結(jié)果以平均數(shù)±標準差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 植物提取物對仔豬生長性能的影響

由表2可知，與對照組相比，PE-A組仔豬中期重、末重分別提高2.65%（P>0.05）、4.21%（P>0.05）。PE-C組中期重、末重比對照組分別顯著降低5.64%、8.79%。試驗第1～14天仔豬日增重，PE-A組與對照組差異不顯著（P>0.05），PE-B組比對照組降低3.77%（P<0.05），PE-C組比對照組降低13.21%（P<0.01）；試驗第15～28天，PE-A組與對照組相比提高9.80%（P<0.05），PE-C組比對照組降低15.69%（P<0.01）。日采食量各試驗階段各試驗組與對照組相比均差異不顯著（P>0.05）。料重比在試驗第1～14天，PE-A組比對照組降低5.65%，但差異不顯著（P> 0.05）；PE-B組和PE-C組比對照組分別顯著提高8.87%、9.68%；試驗第15～28天和第1～28天各組差異不顯著（P>0.05）。

表2 植物提取物對仔豬生長性能的影響

2.2 植物提取物對仔豬血液生化指標的影響

2.2.1 植物提取物對仔豬蛋白質(zhì)代謝指標的影響

由表3可知，PE-A組、PE-B組、PE-C組尿素氮與對照組相比分別降低16.36%（P<0.01）、13.64%（P< 0.01）、4.55%（P＞0.05）。

表3 植物提取物對仔豬蛋白質(zhì)代謝的影響

2.2.2 植物提取物對仔豬免疫機能的影響由表4可知，各試驗組血液中IgA含量與對照組相比，差異不顯著（P>0.05）。PE-A組、PE-B組血液中IgM含量比對照組都提高1.15%（P>0.05），PE-C組血液中IgM含量比對照組顯著降低2.30%。與對照組相比，PE-C組血液中IgG含量降低2.88%（P<0.05），其余組間差異不顯著（P>0.05）。血液T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率，PE-A組比對照組極顯著提高17.07%，PE-B組、PE-C組比對照組極顯著降低14.63%、24.39%。PE-A組總蛋白比對照組極顯著提高6.46%。

表4 植物提取物對仔豬血液免疫指標的影響

2.3 植物提取物對仔豬養(yǎng)分消化率的影響

由表5可見，PE-A組干物質(zhì)消化率與對照組相比提高2.91%，差異顯著（P<0.05），其余各試驗組與對照組相比無顯著差異（P>0.05）。PE-A組粗蛋白質(zhì)與粗脂肪消化率顯著高于對照組，分別提高5.41%、5.62%，PE-C組粗脂肪消化率低于對照組5.76%（P< 0.05）。與對照組相比，PE-A組磷消化率提高5.92%（P<0.05），PE-C組降低6.90%（P<0.05）。與對照組相比，PE-A組鈣消化率比對照組提高6.08%（P<0.05），其余各組差異不顯著（P<0.05）。

表5 植物提取物對仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響

2.4 植物提取物對仔豬腸道微生物數(shù)量的影響

由表6可知，PE-A組腸道中大腸桿菌數(shù)量比對照組極顯著降低8.29%，PE-B和PE-C組比對照組分別顯著降低4.65%、3.39%。PE-A、PE-B、PE-C組腸道中乳酸桿菌數(shù)量分別比對照組提高5.65%（P< 0.01）、3.53%（P<0.05）、3.11%（P<0.05）。PE-A、PE-B、PE-C組雙歧桿菌菌落數(shù)分別比對照組提高5.76%（P<0.01）、4.75%（P<0.05）、3.89%（P<0.05）。

3 討論

3.1 植物提取物與仔豬生長性能的關(guān)系

植物提取物促進仔豬生長的作用機理可能是通過保證飼糧的衛(wèi)生安全促進腸道健康或者通過控制潛在的病原菌保持胃腸道中微生物菌落數(shù)的生態(tài)平衡實現(xiàn)的[5]。大多數(shù)植物提取物能起到防止胃腸脹氣、減緩食物在胃腸道中的排空速度、促進消化液的分泌和提高消化酶活性的作用[6]。如黃芪屬植物提取物能有效緩解應激、提高食欲、降低動物的腹瀉率[5]。本試驗研究表明，添加PE能提高仔豬日增重，降低料重比，但對日采食量無顯著影響，這與Ranucci等[5]試驗結(jié)果基本一致。

3.2 植物提取物與血清生理生化的關(guān)系

血清總蛋白含量和尿素氮濃度能夠比較準確地反映出動物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和飼糧氨基酸平衡的狀況[7]。本研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加PE-A能極顯著地提高仔豬血清中總蛋白水平，極顯著地降低仔豬血液中尿素氮水平，這與Coma等[8]研究結(jié)果相似。這是由于PE能促進蛋白質(zhì)在仔豬體內(nèi)的合成，降低體內(nèi)氨基酸的分解作用，從而改善了機體內(nèi)氨基酸的平衡狀態(tài)，促進機體蛋白質(zhì)的合成或減少體內(nèi)含氮物質(zhì)的分解，進而增加機體蛋白質(zhì)沉積。

陳艷珍[9]指出，斷奶會使仔豬腸絨毛萎縮、隱窩加深，保護仔豬的胃腸道黏膜可減弱應激對仔豬的損傷作用，而免疫球蛋白在保護腸道、呼吸道、泌尿生殖道、乳腺和眼睛抵抗微生物入侵方面起關(guān)鍵作用。研究表明，PE能夠增強動物的免疫系統(tǒng)，有效降低疾病的發(fā)生率，同時有效地緩解過敏癥、因應激產(chǎn)生的病理反應、炎癥及增強免疫應答[10-12]。據(jù)報道，將PE添加到仔豬飼糧中發(fā)現(xiàn)其具有提高抗逆性和免疫反應的作用，表現(xiàn)為仔豬血清中的IgG、IgA、C-反應蛋白（CRP）和干擾素-γ濃度都有了不同程度的提高[13]。本試驗研究表明，在仔豬飼糧中添加PE可以極顯著提高仔豬T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率，提高仔豬血清中IgG、IgM的水平，但對IgA無顯著影響，這與以上的報道一致。

3.3 植物提取物與仔豬營養(yǎng)消化利用率的關(guān)系

仔豬消化酶活性越高，消化吸收能力越好。添加PE能提高十二指腸蛋白酶、淀粉酶活性，從而提高營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收[14-15]。本試驗結(jié)果表明，PE具有促進仔豬對飼料中氮的沉積和提高蛋白質(zhì)表觀消化率的作用。Kiarie等[16]試驗發(fā)現(xiàn)，中藥制劑能顯著提高仔豬對飼糧粗蛋白質(zhì)和粗脂肪消化率。Ranucci等[5]研究表明，PE能夠改善腸道環(huán)境，減少腹瀉率，顯著地提高仔豬營養(yǎng)消化利用率[14]。本試驗結(jié)果表明，PE-A能顯著地提高干物質(zhì)、鈣、磷、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪消化率，這與以上報道基本一致。

3.4 植物提取物與糞便微生物菌群數(shù)的關(guān)系

本試驗表明，PE-A能極顯著降低大腸桿菌的數(shù)量，極顯著地提高腸道乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量，這與Manzanilla等[2]、Ranucci等[5]研究結(jié)果基本一致。仔豬早期斷奶后受到各種應激影響，腸道微生物菌群嚴重失調(diào)，斷奶后2 d內(nèi)回腸中乳酸桿菌的數(shù)量幾近消失，而大腸桿菌的數(shù)量顯著增加，且pH越高，大腸桿菌的數(shù)量越多，而大腸桿菌是引起仔豬斷奶后腹瀉的主要病原菌[16]。由此可見，植物提取物可改善消化道菌群平衡狀態(tài)，降低仔豬腹瀉發(fā)生率。

4 結(jié)論

（1）在仔豬飼糧中PE-A能提高仔豬的平均日增重，降低料重比，有利于提高仔豬的生長性能；添加PE-A可以顯著提高仔豬干物質(zhì)、鈣、磷、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪消化率，有利于提高仔豬的飼料轉(zhuǎn)化率。

（2）添加PE-A能夠極顯著提高仔豬血液中T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率，提高IgG和IgM水平，使仔豬免疫機能得到改善。

（3）添加PE-A可以極顯著降低仔豬糞便中大腸桿菌數(shù)量，極顯著增加乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量，間接反映了其能夠抑制腸道大腸桿菌的生長和繁殖，增加有益菌數(shù)量，維持腸道微生態(tài)平衡。

[1]Tang M,Laarveld B,Van Kessel A G,et al.Effect of segregated early weaning on postweaning small intestinal development in pigs[J].Journal of Animal Science,1999,77(12)：3191-3200.

[2]Manzanilla E G,Perez J F,Martin M,et al.Effect of plant extracts and formic acid on the intestinal equilibrium of early-weaned pigs[J].Journal of Animal Science,2004,82(11)：3210-3218.

[3]William H,Latimer G W.Official methods of analysis[M].Association of Official Agriculture Chemists(US),2005：248.

[4]Zhang L,Xu Y Q,Liu H Y,et al.Evaluation of Lactobacillus rhamnosus GG using an Escherichia coli K88 model of piglet diarrhoea：effects on diarrhoea incidence,faecal micrflora and immune responses[J].Veterinary Microbiology,2010,141(1-2)：142-148.

[5]Ranucci D,Beghelli D,Trabalza-Marinucci M,et al.Dietary effects of a mix derived from oregano(Origanum vulgare L.)essential oil and sweet chestnut(Castanea sativa Mill.)wood extract on pig performance,oxidative status and pork quality traits[J].Meat Science,2015,100：319-326.

[6]Chen X,Zhu F,Cao Y,et al.Novel expression vector for secretion of cecropin AD in bacillus subtillis with enhanced antimicrobial activity[J].Antimicrobial Agents and Chemotherapy,2009,53(9)：3683-3689.

[7]Fujiwara Y,Kaji T.Possible mechanism for lead inhibition of vascular endothelial cell proliferation：a lower response to basic fibroblast growth factor through inhibition of heparan sulfate synthesis[J].Toxicology,1999,133(2)：144-157.

[8]Coma J,Carrion D,Zimmerman D R.Use of plasma urea nitrogen as a rapid response criterion to determine the lysine requirement of pigs[J].Journal of Animal Science,1995,73(2)：472-481.

[9]陳艷珍.環(huán)境條件對早期斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響[J].養(yǎng)豬，1995（4）：23.

[10]Fujikawa T,Yamaguchi A,Morita I,et al.Protective effects of acanthopanax senticosus harms from hokkaido and its components on gastric ulcer in restrained cold water stressed rats[J].Biological and Pharmaceutical Bulletin,1996,19(9)：1227-1230.

[11]Bontempo V,Jiang X R,Cheli F,et al.Administration of a novel plant extract product via drinking water to post-weaning piglets：effects on performance and gut health[J].Animal,2014, 8(5)：721-730.

[12]Turner J L,Dritz S S,Higgins J J,et al.Effects of a extract on growth performance and immune function of weanling pigs challenged with Salmonella typhimurium[J].Journal of Animal Science,2002,80(7)：1939-1946.

[13]Ilsley S E,Miller H M,Kamel C.Effects Of dietary Quillaja saponinand curcuminon the performance and immune status of weaned piglets[J].Journalof Animal Science,2005,83(1)：82-88.

[14]Pirgozliev V,Murphy T C,Owens B,et al.Fumaric and sorbic acid as additives in broiler feed[J].Research in Veterinary Science,2008,84(3)：387-394.

[15]Gerritsen R,Van Dijk A J,Rethy K,et al.The effect of blends of organic acids on apparent faecal digestibility in piglets[J].Livestock Science,2010,134(1)：246-248.

[16]Kiarie E,Nyachoti C M,Slominski B A,et al.Growth performance,gastrointestinal microbial activity,and nutrient digestibility in early-weaned pigs fed diets containing flaxseed and car bohydrase enzyme[J].Journal of Animal Science,2007,85(11)：2982-2993.

（編輯：富春妮）

The Research and Application of Plant Extract in Piglets

ZHU Yujing1,WANG Bo1,LI Fangfang1,ZHENG Lili1,GAO Yuan2,MENG Ling2,GUO Fulai2,DING Lan3,ZHANG Yong1
(1.College of Animal Sciences and Veterinary Sciences,Shenyang Agricultural University,Shenyang 110866, China;2.Liaoning Debao Argi-animal Husbandry Co.,Ltd.,Shenyang 110171,China; 3.Shenyang Fukang Agriculture and Animal Husbandry Technology Co.,Ltd.,Shenyang 110164,China)

This test was designed to study the effects of plant extracts(PE)in pig production.240 pigs(10.30± 1.13)kg and randomly divided into 4 groups,and each group 4 repeats,each repeat 15 pigs.The control group was fed based diet;the experimental groups were fed basic diet with 500 mg/kg PE-A,500 mg/kg PE-B and 250 mg/ kg PE-C,respectively.Experiment lasted for 28 days.Results showed that：1)Compared with control group,PE-A group decrease the F/G 5.65%(P＜0.05)during the first fourteen day;2)compared with control group,the PE-A group improve piglests'serum IgM,IgG,T lymphatic conversion rates and TP 1.15%(P＞0.05),1.38%(P＞0.05), 17.07%(P＜0.01),6.46%(P＜0.01)respectively,and reduce BUN 16.36%(P＜0.01);3)PE-A,PE-B and PE-C were able to dramatically reduce E.coli colony count in pig manure 8.29%(P＜0.01),4.65%(P＜0.05)and 3.39%(P＜0.05)respectively;increase Lactobacillus 5.65%(P＜0.01),3.53%(P＜0.05)and 3.11%(P＜0.05);increase bifidobacterium colony count 5.76%(P＜0.01),4.75%(P＜0.05)and 3.89%(P＜0.05)respectively;4)PE-A group was able to respectively significantly improve DM digestion rate,CP apparent digestion rate,EE absorption rate,P digestion rate and Ca absorption rate 2.91%(P＜0.05),5.41%(P＜0.05),5.62%(P＜0.05),5.92%(P＜0.05),6.08%(P＜0.05)compared with control group.Adding PE in diet can effectively improve pig growth performance,blood physiological, biochemical indicators,feed digestion utilization and improve intestinal microbial balance.The results indicate that adding PE-A is best in all three groups.

plant extracts;weaning pig;production performance;fecal microflora

S858.28

A

1002-1957(2016)01-0009-05

2015-11-24

國家自然科學基金（31440082和31101253）

朱宇旌（1972-），女，遼寧彰武人，副教授，博士，主要從事動物營養(yǎng)與飼料科學研究工作.E-mail：syndzhyj＠163.com

張勇，教授，碩士生導師.E-mail：syndzhy＠126.com