趙 虎 ， 王啟軍 ， 姜 維 ， 張 璐 ， Andy Kouba ， Ruth Marcec ， 張紅星 ， 錢(qián)永華

(1.陜西省動(dòng)物研究所 ， 陜西西安710032 ； 2.西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院 ， 陜西楊凌712100；3.美國(guó)孟菲斯動(dòng)物園 ， 田納西州38112 ； 4.美國(guó)密西西比州立大學(xué) ， 密西西比州39762)

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大鯢腹部手術(shù)及術(shù)后觀(guān)察

趙 虎1，2， 王啟軍1， 姜 維1， 張 璐3，4， Andy Kouba3，4， Ruth Marcec4， 張紅星1， 錢(qián)永華2

(1.陜西省動(dòng)物研究所 ， 陜西西安710032 ； 2.西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院 ， 陜西楊凌712100；3.美國(guó)孟菲斯動(dòng)物園 ， 田納西州38112 ； 4.美國(guó)密西西比州立大學(xué) ， 密西西比州39762)

探索大鯢腹部手術(shù)方法，觀(guān)察術(shù)后情況。4.7齡東河大鯢和2.7齡黑河大鯢各16尾，麻醉消毒后向大鯢體內(nèi)放入無(wú)線(xiàn)電發(fā)射裝置，觀(guān)測(cè)創(chuàng)口愈合、存活等情況并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。大鯢術(shù)后75.80±31.96min麻醉清醒開(kāi)始活動(dòng)。手術(shù)后10周，創(chuàng)口愈合完整，東河組存活率(100%)高于黑河組(68.75%)(χ2=5.93，P<0.05)。存活率與年齡和恢復(fù)時(shí)間呈顯著的正相關(guān)關(guān)系(R=0.430)。大鯢手術(shù)后恢復(fù)、存活與個(gè)體大小、暫養(yǎng)時(shí)間、手術(shù)操作等相關(guān)。

大鯢 ； 手術(shù) ； 腹部 ； 無(wú)線(xiàn)電裝置

大鯢(Andrias davianus)是我國(guó)特有的世界上現(xiàn)存體型最大的兩棲動(dòng)物，屬于水生脊椎動(dòng)物向陸生動(dòng)物過(guò)渡的類(lèi)群，具有非常重要的保護(hù)價(jià)值。隨著科學(xué)研究和生產(chǎn)開(kāi)發(fā)的需要，開(kāi)展大鯢體內(nèi)植入、縫合等手術(shù)顯得十分必要。在魚(yú)類(lèi)[1-2]監(jiān)測(cè)上已有手術(shù)應(yīng)用，大鯢手術(shù)尚屬首例。本研究通過(guò)大鯢腹部手術(shù)植入無(wú)線(xiàn)電發(fā)射裝置，為手術(shù)操作提供相關(guān)的臨床資料。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 16尾4.7齡大鯢來(lái)自寧陜東河，16尾2.7齡大鯢來(lái)自周至黑河。1.2 藥品器械95%乙醇、MS-222、蘇打(Arm & Hammer，USA)、磷酸鹽緩沖液片(MP Biomedicals，USA)、組織膠(Vetbond，USA)、恩諾沙星注射液(Bayer HealthCare LLC，USA)、洗必泰藥巾(PD IInc，USA)、手術(shù)刀、手術(shù)剪、手術(shù)鑷、止血鉗、持針鉗、3-0 FS-1縫合線(xiàn)(Ethicon，USA)、3-0 NFS-1縫合線(xiàn)(Oasis，USA)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 術(shù)前準(zhǔn)備 術(shù)前24h禁食，稱(chēng)量體重、全長(zhǎng)、體長(zhǎng)。手術(shù)器械高壓滅菌，無(wú)線(xiàn)電發(fā)射裝置經(jīng)酒精消毒水浸泡處理，消毒酒精、麻醉劑、磷酸鹽緩沖液等試劑配制。

1.3.2 麻醉 養(yǎng)殖用井水水溫11℃～12℃，MS-222和蘇打0.6g/L，浸泡麻醉，每3尾更換1次麻醉劑。11～30 min達(dá)到深度麻醉[3]。

1.3.3 手術(shù) 大鯢腹部向上平放于手術(shù)托盤(pán)中，托盤(pán)中放入少量麻醉劑(MS-222和蘇打0.1g/L)，每3尾更換1次。手術(shù)部位為后肢向頭部方向2 cm腹部中線(xiàn)稍偏右側(cè)，用洗必泰消毒。依次打開(kāi)腹部表皮層、肌肉層、內(nèi)部黏膜，切口長(zhǎng)2.0～2.5 cm，方向與體中線(xiàn)平行。用磷酸鹽緩沖液沖洗創(chuàng)口，消毒紗布止血、除污物。將消毒后的無(wú)線(xiàn)電發(fā)射裝置(ATS Inc.，USA)(4g，24×14×7 mm)放入腹腔。用3-0 FS-1縫合線(xiàn)單純間斷縫合肌肉層，用3-0 NFS-1縫合線(xiàn)間斷水平褥式外翻縫合表皮層，用組織膠粘合不足縫合一次的表皮。

1.3.4 術(shù)后處理 尾部肌肉注射恩諾沙星(10 mg/kg)后，將大鯢放回空盒或少量清水中，待蘇醒后運(yùn)回養(yǎng)殖池，觀(guān)察創(chuàng)口愈合、活動(dòng)情況。水溫12℃～14℃，術(shù)后第2天開(kāi)始投喂餌料，每天1次，投飼量以其體重的1%～2%為宜，根據(jù)水溫和攝食情況及時(shí)調(diào)節(jié)投餌量和頻率。每天清池一次，保持水質(zhì)清新，及時(shí)清除殘餌、糞便。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 利用SPSS22.0軟件計(jì)算形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)及相關(guān)系數(shù)、回歸分析，組間比較采用t檢驗(yàn)，創(chuàng)口愈合與存活情況采用卡方檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 活動(dòng)及進(jìn)食 術(shù)后75.80±31.96 min(31～156 min)大鯢麻醉清醒開(kāi)始活動(dòng)，東河組平均蘇醒時(shí)長(zhǎng)83.30±37.10 min，黑河組68.40±24.81 min，兩組差異不顯著(P>0.05)。蘇醒效應(yīng)時(shí)間隨體重、水溫及個(gè)體而有差異。術(shù)后第2天，大鯢開(kāi)始進(jìn)食，進(jìn)食情況基本正常。

2.2 創(chuàng)口愈合 兩組大鯢術(shù)后當(dāng)日創(chuàng)口無(wú)滲血；術(shù)后5d，表現(xiàn)炎癥反應(yīng)，局部紅腫；術(shù)后2周，表皮縫合線(xiàn)斷裂，中間被大鯢自身分泌白色漿液填充；術(shù)后4周，肉芽組織形成；術(shù)后6周，創(chuàng)口逐漸密合；術(shù)后8周，已基本愈合；術(shù)后10周，愈合完整。手術(shù)后6周兩組創(chuàng)口愈合情況，經(jīng)卡方檢驗(yàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=7.38，P<0.01)，見(jiàn)表1。

表1 術(shù)后6周2組創(chuàng)口愈合情況

2.3 存活與體重、全長(zhǎng)的關(guān)系 兩組大鯢的體重、體長(zhǎng)、全長(zhǎng)之間的差異達(dá)到極顯著水平(P<0.01)，見(jiàn)表2。對(duì)兩組大鯢手術(shù)前后第0、6、8、10周的形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)比較發(fā)現(xiàn)，東河組大鯢體重略有減輕，全長(zhǎng)和體長(zhǎng)略有增加，但差異不顯著(P>0.05)；黑河組基本恒定。手術(shù)后6周，東河組均存活。黑河組6尾創(chuàng)口開(kāi)裂，其中4尾為放流后開(kāi)裂，二次縫合后死亡，另外2尾在養(yǎng)殖場(chǎng)開(kāi)裂，1尾腸斷裂后死亡，另1尾腸暴露，二次縫合后暫養(yǎng)；11尾存活，見(jiàn)表3。體重大、全長(zhǎng)長(zhǎng)的東河組大鯢存活率100%，反之個(gè)體小的黑河組存活率68.75%，兩組經(jīng)卡方檢驗(yàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.93，P<0.05)，個(gè)體大較為適合開(kāi)展手術(shù)。

表2 大鯢形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)

**：差異極顯著

表3 6周2組存活情況

2.4 存活率的相關(guān)性及回歸分析 存活率與年齡和恢復(fù)時(shí)間存在顯著的正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)均為0.430，見(jiàn)表4。回歸分析排除年齡因素，將恢復(fù)時(shí)間(X)代入回歸方程，得到存活率(Y)與恢復(fù)時(shí)間的回歸方程Y=0.219+0.078X。顯著水平為0.014，達(dá)到顯著水平(P<0.05)?；貧w方程的相關(guān)系數(shù)R為0.430，決定系數(shù)R2為0.185。

表4 大鯢存活率相關(guān)性狀之間的相關(guān)系數(shù)

*：相關(guān)顯著，**：相關(guān)極顯著

2.5 腹部手術(shù)對(duì)腸道的影響 腹部手術(shù)過(guò)程中造成腸道打結(jié)堵塞，或在縫合過(guò)程中操作不當(dāng)引起粘連壞死，本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)3例，直接影響大鯢術(shù)后的恢復(fù)與存活。

3 討論

3.1 術(shù)前禁食與手術(shù)時(shí)間選擇 術(shù)前24 h禁食，避免胃腸內(nèi)食物積壓與嘔吐。季節(jié)、水溫對(duì)手術(shù)效果有一定影響。氣溫、水溫高，細(xì)菌微生物繁殖快極易感染。選擇溫度適宜的季節(jié)開(kāi)展手術(shù)，注意無(wú)菌操作，保證手術(shù)后正?；顒?dòng)、進(jìn)食和體況恢復(fù)。

3.2 手術(shù)注意事項(xiàng)與藥品的使用 手術(shù)前準(zhǔn)確掌握動(dòng)物內(nèi)部器官位置，選擇合適的部位開(kāi)口。開(kāi)口大小適宜，減少二次創(chuàng)傷。切劃皮膚、肌肉過(guò)程中，創(chuàng)口一旦出血先用止血鉗和紗布止血，再尋找其他部位開(kāi)口，或終止手術(shù)另覓時(shí)機(jī)。縫合方法按不同組織有所區(qū)別[4]。單純間斷縫合，多用在皮膚、皮下組織、肌肉的縫合，本試驗(yàn)中用于肌肉層。間斷水平褥式外翻縫合用于皮膚?？p合時(shí)減少牽拉，松緊適度且嚴(yán)密。選用合適的縫合線(xiàn)，減少線(xiàn)斷創(chuàng)口開(kāi)裂，內(nèi)層建議使用可吸收的縫合線(xiàn)，避免縫合線(xiàn)保留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，使得創(chuàng)口愈合延緩而誘發(fā)組織感染，在鯉魚(yú)[5]等研究中也有類(lèi)似報(bào)道。手術(shù)后應(yīng)單池放養(yǎng)，避免爭(zhēng)斗和侵?jǐn)_，保持水質(zhì)清新、溫度適宜。保證其足夠的活動(dòng)空間，可降低創(chuàng)口裂開(kāi)、腸梗阻、粘連[6]的風(fēng)險(xiǎn)。

縮短手術(shù)時(shí)間，降低感染風(fēng)險(xiǎn)。手術(shù)時(shí)間延長(zhǎng)使創(chuàng)面的細(xì)菌數(shù)量增多，每增加1h，相對(duì)危險(xiǎn)度增加1.451倍[7]。本試驗(yàn)平均手術(shù)時(shí)間46.00±8.90 min，其中麻醉26.70±8.10 min，切口6.50±4.40 min，縫合12.80±2.70 min。術(shù)后大鯢狀態(tài)基本良好，手術(shù)時(shí)間基本合理。

適合的藥品保證創(chuàng)口潔凈、減少病菌侵入。手術(shù)前用含3.15%洗必泰的70%異丙醇藥巾擦拭手術(shù)部位，有殺菌作用，對(duì)皮膚無(wú)刺激，不染色，該效果有過(guò)類(lèi)似報(bào)道[8]。手術(shù)中用磷酸鹽緩沖液沖洗創(chuàng)口，保持滲透壓調(diào)節(jié)pH值?？p合時(shí)使用3M組織膠，即氰基丙烯酸正丁酯粘合劑，不再需要縫線(xiàn)，用來(lái)粘合組織、保護(hù)傷口及止血，此法在其他手術(shù)中也有應(yīng)用[9]。手術(shù)后注射恩諾沙星，預(yù)防切口感染。同時(shí)根據(jù)易感染病原菌和致病菌，合理選擇抗菌藥物。3.3 術(shù)后采食與創(chuàng)口愈合 手術(shù)后大鯢體重減輕可能與應(yīng)激、攝食量減少有關(guān)。采食餌料應(yīng)規(guī)格稍小，避免硬刺等，投喂量相對(duì)減少并保證餌料新鮮。由于放流，黑河組創(chuàng)口觀(guān)察只進(jìn)行了6周。術(shù)后10周創(chuàng)口愈合與草魚(yú)術(shù)后30 d愈合存在差異[1]。水環(huán)境使創(chuàng)口延遲愈合，可能引起全身性感染、器官功能障礙，乃至死亡。愈合時(shí)間較長(zhǎng)與大鯢生活的水環(huán)境有關(guān)。

個(gè)體與術(shù)后暫養(yǎng)是影響術(shù)后存活的主要因素。本研究中，存活率與年齡和恢復(fù)時(shí)間之間顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)0.430。東河組大鯢高存活率已印證。

志謝：感謝香港海洋公園保育基金、美國(guó)森林服務(wù)國(guó)際計(jì)劃、洛杉磯動(dòng)物園、奧馬哈亨利多利動(dòng)物園、孟菲斯動(dòng)物園、沃思堡動(dòng)物園、密西西比州立大學(xué)為大鯢保護(hù)研究提供經(jīng)費(fèi)。

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2016-01-22

陜西省科學(xué)院重點(diǎn)項(xiàng)目(2015K-03)；國(guó)際民間科技交流服務(wù)提升計(jì)劃項(xiàng)目(DH2015-19)；陜西省科技廳國(guó)際合作項(xiàng)目(2013KW20)

趙虎(1984-)，男，助理研究員，博士生，主要從事水生動(dòng)物保護(hù)與養(yǎng)殖工作，E-mail：zhaohu2007@126.com

張紅星，E-mail：837164197@qq.com；錢(qián)永華，E-mail：gyh@nwsuaf.edu.cn

S917.4；S857.12+5

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0529-6005(2016)10-0104-03