周發(fā)為，喻 紅

武漢大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院(湖北 武漢 430071)

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白細(xì)胞酯酶檢測(cè)代替涂片細(xì)胞學(xué)計(jì)數(shù)評(píng)價(jià)痰液標(biāo)本質(zhì)量

周發(fā)為，喻 紅*

武漢大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院(湖北 武漢 430071)

目的 比較白細(xì)胞酯酶檢測(cè)和傳統(tǒng)涂片細(xì)胞計(jì)數(shù)評(píng)價(jià)痰液標(biāo)本質(zhì)量，并探討其臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 2015年6月—2016年3月湖北民族學(xué)院附屬民大醫(yī)院各臨床科室共4 571份細(xì)菌培養(yǎng)痰液標(biāo)本，根據(jù)臨床是否檢測(cè)白細(xì)胞酯酶分為兩組。臨床未篩檢組2 068份痰液標(biāo)本，在微生物實(shí)驗(yàn)室涂片染色細(xì)胞計(jì)數(shù)，并用兩種試劑檢測(cè)白細(xì)胞酯酶。臨床篩檢組2 503份痰液標(biāo)本，用一種試劑檢測(cè)白細(xì)胞酯酶，結(jié)果為陽(yáng)性者的標(biāo)本送至檢驗(yàn)科，在微生物實(shí)驗(yàn)室涂片細(xì)胞計(jì)數(shù)，結(jié)果為陰性的重新采集，比較兩組標(biāo)本質(zhì)量。結(jié)果 臨床未篩檢組2 068份痰液標(biāo)本，涂片細(xì)胞計(jì)數(shù)合格率為31.0%，白細(xì)胞酯酶檢測(cè)陽(yáng)性率(即合格率)為32.2%，兩種方法評(píng)價(jià)痰液標(biāo)本質(zhì)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；兩種國(guó)產(chǎn)白細(xì)胞酯酶檢測(cè)試劑之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。臨床篩檢組，涂片細(xì)胞計(jì)數(shù)，痰液標(biāo)本合格率為76%，與臨床未篩檢組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 ①白細(xì)胞酯酶檢測(cè)用于評(píng)價(jià)痰液標(biāo)本質(zhì)量，與傳統(tǒng)的痰液涂片細(xì)胞計(jì)數(shù)有相同的效果；②白細(xì)胞酯酶檢測(cè)用于評(píng)價(jià)痰液標(biāo)本質(zhì)量，是一種經(jīng)濟(jì)、快速、簡(jiǎn)便易行的方法，適宜在臨床推廣。

白細(xì)胞酯酶；痰液；顯微鏡檢查

合格痰液標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)對(duì)下呼吸道感染疾病的診斷有重要意義。但一般情況下，痰液標(biāo)本由患者自己采集，很多患者不能正確留取痰液，嚴(yán)重影響了痰液致病菌的檢出[1]。目前，評(píng)價(jià)痰液標(biāo)本是否合格，國(guó)內(nèi)外都采用痰液涂片革蘭染色后細(xì)胞計(jì)數(shù)，即計(jì)數(shù)每個(gè)低倍視野中白細(xì)胞和鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)量，來(lái)判斷痰液標(biāo)本是否合格。但該方法有不足，一是確認(rèn)標(biāo)本不合格后，信息反饋給臨床，患者再留取痰液標(biāo)本，整個(gè)周期較長(zhǎng)。二是涂片革蘭染色鏡檢過(guò)程比較復(fù)雜，影響工作效率。近年來(lái), 許多學(xué)者將尿液分析用的白細(xì)胞酯酶試紙用于腹水[2-3]、腦脊液[4]、尿液[5]、陰道分泌物[6]、骨骼系統(tǒng)疾病相關(guān)分泌物[7]和關(guān)節(jié)液[8-9]等細(xì)菌感染的快速診斷，該試紙條通過(guò)檢測(cè)標(biāo)本中白細(xì)胞酯酶而間接反映標(biāo)本中白細(xì)胞數(shù)量,可在床旁操作,在1～2 min內(nèi)即可得到結(jié)果。下呼吸道細(xì)菌感染，多形核白細(xì)胞(polymorphonuclearneutrophil,PMN)在病灶聚集而釋放大量白細(xì)胞酯酶，來(lái)自下呼吸道的合格痰液標(biāo)本，含有白細(xì)胞酯酶。本研究通過(guò)對(duì)痰液標(biāo)本白細(xì)胞酯酶檢測(cè)與傳統(tǒng)痰液涂片細(xì)胞計(jì)數(shù)兩種方法的比較,旨在探討簡(jiǎn)便易行的評(píng)價(jià)細(xì)菌培養(yǎng)痰液標(biāo)本質(zhì)量的方法。

1 資料與方法

1.1 一般資料 湖北民族學(xué)院附屬民大醫(yī)院2015年6月—2016年3月共4 571份細(xì)菌培養(yǎng)痰液標(biāo)本, 分別來(lái)自不同的臨床科室?；颊吣挲g(53.4±20.2)歲，男∶女為2 635∶1 936。4 571份細(xì)菌培養(yǎng)痰液標(biāo)本分為兩組，即臨床未篩檢組和臨床篩檢組，2015年6月至2015年10月2 068份痰液標(biāo)本為臨床未篩檢組，2015年11月—2016年3月2 503份痰液標(biāo)本為臨床篩檢組。臨床未篩檢組：臨床采集痰液標(biāo)本后，不檢測(cè)白細(xì)胞酯酶，直接送檢驗(yàn)科，再檢測(cè)白細(xì)胞酯酶和涂片細(xì)胞計(jì)數(shù)。臨床篩檢組：臨床采集痰液標(biāo)本后，及時(shí)檢測(cè)白細(xì)胞酯酶，結(jié)果為陽(yáng)性的直接送檢；若為陰性，則重新采集痰液標(biāo)本，該組痰液標(biāo)本在實(shí)驗(yàn)室僅涂片細(xì)胞計(jì)數(shù)。

1.2 痰液涂片革蘭染色 痰液涂片干燥后，根據(jù)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)，進(jìn)行革蘭染色。在顯微鏡下觀察，計(jì)數(shù)多個(gè)低倍視野白細(xì)胞和上皮細(xì)胞數(shù)。根據(jù)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)中《下呼吸道標(biāo)本的處理》，多個(gè)低倍視野鱗狀上皮細(xì)胞<10個(gè)、白細(xì)胞>25個(gè)為合格痰液標(biāo)本。

1.3 白細(xì)胞酯酶檢測(cè) 為避免不同廠家的干化學(xué)試紙條敏感性和特異性存在明顯差異，臨床未篩檢組同時(shí)應(yīng)用桂林優(yōu)利特和長(zhǎng)春迪瑞公司生產(chǎn)的尿干化學(xué)試紙條(包含白細(xì)胞酯酶檢測(cè))檢測(cè)痰液白細(xì)胞酯酶；臨床篩檢組采用同一種試紙條檢測(cè)白細(xì)胞酯酶，白細(xì)胞酯酶陽(yáng)性則視為合格痰液標(biāo)本。操作方法和結(jié)果判斷均嚴(yán)格按照各自操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1兩種不同方法評(píng)價(jià)痰液標(biāo)本質(zhì)量比較 臨床未篩檢組2 068份痰液標(biāo)本，在實(shí)驗(yàn)室涂片細(xì)胞計(jì)數(shù)和檢測(cè)白細(xì)胞酯酶，兩種檢測(cè)方法比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.21，P>0.05)，見(jiàn)表1。

表1 痰液標(biāo)本細(xì)胞計(jì)數(shù)和白細(xì)胞酯酶檢測(cè)結(jié)果

2.2 前后痰液標(biāo)本合格率比較 臨床未篩檢組2 068份痰液標(biāo)本，直接以傳統(tǒng)的細(xì)胞學(xué)計(jì)數(shù)為是否合格判斷依據(jù)。臨床篩檢組2 503份痰液標(biāo)本，白細(xì)胞酯酶檢測(cè)為陽(yáng)性視為合格，并送檢，再以細(xì)胞學(xué)計(jì)數(shù)進(jìn)行評(píng)價(jià)。兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=35.6，P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 兩組痰液標(biāo)本合格率比較

3 討論

下呼吸道細(xì)菌感染是常見(jiàn)病、多發(fā)病，其診斷主要依賴(lài)于實(shí)驗(yàn)室痰液細(xì)菌培養(yǎng)，培養(yǎng)出致病菌并發(fā)出鑒定和藥敏報(bào)告，指導(dǎo)臨床抗生素的使用。臨床采集合格的痰液標(biāo)本是分離出致病菌的關(guān)鍵。當(dāng)前，由于不熟悉標(biāo)本采集要求，以及對(duì)患者宣教不到位等因素的影響[10]，全國(guó)各醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室都面臨痰液標(biāo)本采集合格率很低下的情況，有報(bào)道從30.3%到34.0%[11]。有些患者的痰液標(biāo)本就是唾液[10]，以至于不能分離培養(yǎng)出致病菌，嚴(yán)重影響了下呼吸道細(xì)菌感染患者的及時(shí)治療。傳統(tǒng)的方法評(píng)價(jià)痰液標(biāo)本質(zhì)量，采用的是涂片革蘭染色，鱗狀上皮細(xì)胞<10個(gè)/低倍視野、白細(xì)胞>25個(gè)/低倍視野的標(biāo)本，視為合格標(biāo)本。這種評(píng)價(jià)方法有諸多不便之處。

白細(xì)胞酯酶是PMN，即中性粒細(xì)胞釋放的羧酸酯酶，在發(fā)生炎癥時(shí)，多形核白細(xì)胞在病灶聚集而大量釋放白細(xì)胞酯酶。細(xì)菌及真菌、霉菌感染均可見(jiàn)明顯多形核白細(xì)胞。下呼吸道感染時(shí)，白細(xì)胞會(huì)明顯增加，并釋放出白細(xì)胞酯酶到痰液中。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外廣泛將白細(xì)胞酯酶檢測(cè)應(yīng)用于快速鑒別尿液、腦脊液、胸水、腹水和關(guān)節(jié)液等樣本細(xì)菌感染，說(shuō)明在這些標(biāo)本中，白細(xì)胞酯酶與細(xì)菌的相關(guān)性非常高。下呼吸道細(xì)菌感染，痰液含有大量病原菌，白細(xì)胞和白細(xì)胞酯酶的量也相應(yīng)增多。本研究顯示，痰液白細(xì)胞酯酶檢測(cè)合格率與涂片細(xì)胞計(jì)數(shù)合格率有高度的符合性。在研究中，我們通過(guò)比較，不同廠家生產(chǎn)的白細(xì)胞酯酶試紙條，對(duì)痰液白細(xì)胞酯酶檢測(cè)結(jié)果沒(méi)有差異，這與其他人員研究一致[12]。

經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)，臨床未篩檢組和篩檢組的合格率有明顯區(qū)別。由此可以說(shuō)明，采集患者痰液標(biāo)本后檢測(cè)白細(xì)胞酯酶，結(jié)果可以作為評(píng)價(jià)痰液標(biāo)本是否合格的依據(jù)。如果痰液標(biāo)本不合格，可以指導(dǎo)患者按照采集要求，重新留取痰液，直到合格為止。這樣既符合分析前質(zhì)量保證的要求，也為及時(shí)診斷和救治患者提供了保障。

痰液白細(xì)胞酯酶檢測(cè)，操作簡(jiǎn)單、方便快捷，不需要借助任何設(shè)備。經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單的培訓(xùn)后，護(hù)理人員就能正確的操作和判斷，這為該技術(shù)的推廣提供了保證。同時(shí)，白細(xì)胞酯酶試紙條可以保存在室溫下，在有效期內(nèi)使用就能確保檢測(cè)結(jié)果可靠。市場(chǎng)上，每份白細(xì)胞酯酶試紙條價(jià)格在1元左右，不會(huì)明顯增加痰液標(biāo)本檢測(cè)的成本。因?yàn)榘准?xì)胞酯酶檢測(cè)結(jié)果靠肉眼判斷，不同的操作人員的判斷結(jié)果可能有小的差異，但檢測(cè)結(jié)果在兩個(gè)及以上“+”時(shí)，這種差異就可以忽略不計(jì)。

綜上所述，白細(xì)胞酯酶檢測(cè)評(píng)價(jià)痰液標(biāo)本質(zhì)量，與傳統(tǒng)的痰液涂片革蘭染色細(xì)胞計(jì)數(shù)相比，簡(jiǎn)便易行，有同樣的效果，適合在采集患者痰液標(biāo)本后，及時(shí)評(píng)價(jià)是否合格，值得在臨床推廣使用。但痰液涂片革蘭染色細(xì)胞計(jì)數(shù)是經(jīng)典的方法，可以用來(lái)定期評(píng)價(jià)白細(xì)胞酯酶檢測(cè)結(jié)果是否有偏差；如果有試劑過(guò)期、試劑保存不當(dāng)或操作人員沒(méi)有經(jīng)過(guò)培訓(xùn)等異常情況，可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)并糾正。

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責(zé)任編輯：牟冬生

Comparison of Leukocyte Esterase Test with Conventional Smear Cytological Examination for Evaluation of Sputum Specimens

Zhou Fawei,Yu Hong*

(TheBasicMedicalSciencesSchoolofWuhanUniversity,Wuhan430071,China)

Objective To compare Leukocyte Esterase test with conventional smear cytological examination for evaluation of sputum specimens and explore its clinical values.Methods 4571 sputum samples in the Affiliated Hospital of Hubei University for Nationalities (June 2015 to March 2016) were divided into two groups.The non-screening Group (2 068 sputum specimens) was gram-stained at the microbiological laboratory and examined for Leukocyte Esterase by two detection reagents.The screening Group (2 503 sputum specimens) was examined for Leukocyte Esterase.The positive specimens were sent to the laboratory.The negative specimens were collected again.The specimens′ qualities of the two groups were compared.Results The qualified rate of sputum specimens was 31.0% by conventional smear cytological examination and positive rate was 32.2% by Leukocyte Esterase test in the non-screening Group.There were no statistical differences between the two methods for evaluation of sputum specimens (P>0.05).The qualified rate of sputum specimens was 76% by conventional smear cytological examination in the screening Group.There were statistically significant differences between the two groups (P<0.05).Conclusions ①The Leukocyte Esterase test and conventional smear cytological examination have the same effects for evaluation of sputum specimens.②The Leukocyte Esterase test for evaluation of sputum specimens is simple, economic and effective,so it is worth to be widely applied.

leukocyte esterase;sputum;microscopy

周發(fā)為(1971- )，男，湖北鶴峰人，副主任技師，研究方向：細(xì)菌耐藥機(jī)制；*

R

A

1008-8164(2016)04-0045-03

2016-08-23