王錦鋒，林占熺

(1.福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院，福建福州 350002；2.國(guó)家菌草工程技術(shù)研究中心，福建福州 350002)

菌草栽培赤芝培養(yǎng)基配方篩選

王錦鋒1,2，林占熺2*

(1.福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院，福建福州 350002；2.國(guó)家菌草工程技術(shù)研究中心，福建福州 350002)

[目的]篩選合適的菌草栽培赤芝培養(yǎng)基配方。[方法]采用試管法對(duì)6種菌草、2種輔料進(jìn)行配方篩選優(yōu)化。對(duì)篩選配方中菌絲和子實(shí)體生長(zhǎng)狀況進(jìn)行觀察。[結(jié)果]適合菌草栽培Ga0801(赤芝)的 配方是1號(hào)(78%芒萁+20%麩皮+2%石膏)、2號(hào)(78%五節(jié)芒+20%麩皮+2%石膏)、6號(hào)(78%綠洲1號(hào)+20%麩皮+2%石膏)和10號(hào)(30%芒萁+48%類蘆+20%麩皮+2%石膏)配方，其中6號(hào)配方最優(yōu)，該配方菌絲生長(zhǎng)旺盛，原基形成時(shí)間早，子實(shí)體壯實(shí)，生物轉(zhuǎn)化率高。[結(jié)論]該試驗(yàn)為菌草栽培赤芝的大規(guī)模市場(chǎng)栽培提供了科學(xué)依據(jù)。

菌草；靈芝；培養(yǎng)基；配方

靈芝(GanodermaLucidum)屬擔(dān)子菌綱多孔菌目多孔菌科靈芝屬[1]，是我國(guó)著名的藥用菌。隨著野生數(shù)量的日益減少，靈芝人工栽培技術(shù)已成為當(dāng)前的研究重點(diǎn)[2-3]。傳統(tǒng)的椴木栽培對(duì)森林損耗非常大，考慮到環(huán)保和節(jié)約資源，靈芝的生產(chǎn)已由傳統(tǒng)的椴木栽培逐漸轉(zhuǎn)向代料栽培，而現(xiàn)今普遍用于栽培食用菌的棉籽殼農(nóng)藥殘留過(guò)高或重金屬超標(biāo)[4-5]，不符合綠色食品的要求且影響出口，制約了靈芝產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。為了解決“菌林矛盾”這一問(wèn)題，該試驗(yàn)采用林占熺等[6-7]發(fā)明的菌草技術(shù)來(lái)栽培赤芝。已篩選出的可用于人工栽培食藥用菌的菌草多達(dá)46種，已篩選出適合菌草栽培的主要菌類品種有55種[8-10]?，F(xiàn)在用于栽培靈芝的菌草主要是五節(jié)芒和芒萁，其他菌草栽培靈芝鮮見(jiàn)報(bào)道，因此關(guān)于其他菌草栽培培養(yǎng)基配方的篩選就顯得極為重要。筆者根據(jù)靈芝對(duì)培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)要求并結(jié)合前人總結(jié)的經(jīng)驗(yàn)[11]，設(shè)計(jì)篩選方案并確定最佳菌草栽培赤芝的培養(yǎng)基配方，以期為其大規(guī)模市場(chǎng)栽培提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌。供試材料為芒萁、五節(jié)芒、象草、巨菌草、類蘆和綠洲1號(hào)。供試菌株Ga0801(赤芝)由福建農(nóng)林大學(xué)菌草所提供。

1.1.2 儀器。SW-CJ-1F型超凈工作臺(tái)購(gòu)于蘇州集團(tuán)蘇州安泰技術(shù)有限公司。Blue pard生化培養(yǎng)箱購(gòu)于上海一恒科學(xué)儀器有限公司。分析天平、立式滅菌鍋購(gòu)于山東新華醫(yī)療器械股份有限公司。

1.2 方法 試驗(yàn)于2015年在福建農(nóng)林大學(xué)菌草研究所進(jìn)行。菌草配方見(jiàn)表1。其中7號(hào)配方為已用于市場(chǎng)栽培的配方，此試驗(yàn)中作為對(duì)照(CK)。

參照表1配制的16個(gè)配方，含水量控制在65%左右，拌料后裝入22 cm×19 cm試管，每支試管裝干料10 g，每個(gè)配方設(shè)5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3支。放入立式高壓鍋中121 ℃滅菌2 h，冷卻至室溫接種，接種時(shí)利用打孔器接種，保證接種的菌塊大小相同。接完種將試管放入25 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)。每3 d劃線1次，測(cè)定菌絲生長(zhǎng)速度，記錄菌絲體長(zhǎng)勢(shì)及原基形成時(shí)間。原基形成后，將試管移入溫度28 ℃、濕度85%的人工氣候室中培養(yǎng)，觀察并記錄子實(shí)體生長(zhǎng)情況。

1.3 數(shù)據(jù)處理 利用SPSS 20軟件對(duì)菌絲生長(zhǎng)速度進(jìn)行單因素試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 培養(yǎng)基配方篩選 由表2可見(jiàn)，1號(hào)、2號(hào)、6號(hào)、10號(hào)配方與7號(hào)配方之間差異不顯著，菌絲生長(zhǎng)旺盛，其中2號(hào)配方菌絲日均長(zhǎng)速最大，生長(zhǎng)最快。15號(hào)、3號(hào)、13號(hào)、14號(hào)、9號(hào)、12號(hào)、5號(hào)、11號(hào)、4號(hào)配方與7號(hào)配方之間存在顯著性差異，4號(hào)配方菌絲根本不吃料。6號(hào)配方與7號(hào)配方原基形成時(shí)間相同，為25 d，其他配方原基形成時(shí)間均大于25 d，但1號(hào)配方晚1 d，2號(hào)和10號(hào)配方晚2 d，與7號(hào)配方差異不明顯。其他配方均比7號(hào)配方晚至少3 d，差異較明顯，其中3號(hào)、4號(hào)及12號(hào)配方不形成原基。在生物轉(zhuǎn)化率方面，1號(hào)、2號(hào)、5號(hào)、6號(hào)、10號(hào)、11號(hào)、15號(hào)及16號(hào)配方生物轉(zhuǎn)化率均大于7號(hào)配方，其中6號(hào)配方生物轉(zhuǎn)化率最高，達(dá)52.78%。綜合分析顯示，1號(hào)、2號(hào)、6號(hào)和10號(hào)配方比較適合用于栽培，可進(jìn)行下一步研究。

2.2 篩選配方中菌絲和子實(shí)體生長(zhǎng)狀況 由圖1可知，對(duì)于Ga0801菌株，各配方表現(xiàn)都很好，菌絲濃密且白。不同配方栽培的菌株子實(shí)體生長(zhǎng)狀況是有區(qū)別的(圖2)，成熟后都會(huì)產(chǎn)生孢子粉。

表1 菌草的培養(yǎng)基配方

表2 菌草培養(yǎng)基配方篩選結(jié)果(n=5)

注：同列不同小寫字母表示在0.05水平差異顯著，同列不同大寫字母表示在0.01水平差異顯著。“-”表示菌絲不生長(zhǎng)，“+”表示菌絲的旺盛程度，越多表示越旺盛。

Note:Different lowercases and capital letters in the same column indicated significant differences at 0.05 and 0.01 levels,respectively.“-” indicated no growth.“+” represented the growth vigorous degree of mycelium and more “+” indicated more vigorous growth.

3 結(jié)論與討論

傳統(tǒng)的靈芝栽培采用椴木栽培。目前，靈芝栽培原料主要為雜木屑、棉籽殼、玉米芯等[12-13]。隨著靈芝產(chǎn)業(yè)規(guī)模的不斷擴(kuò)大，原料短缺現(xiàn)象逐漸凸顯，木屑、棉籽殼等價(jià)格逐步攀升[14-16]，靈芝生產(chǎn)成本大幅提高，嚴(yán)重降低了芝農(nóng)們的生產(chǎn)積極性。此外，大量的木屑需求間接地對(duì)森林資源和生態(tài)環(huán)境構(gòu)成了威脅[17]，尋找新型代替原料就顯得極為重要。隨著菌草技術(shù)的發(fā)明，用菌草栽培靈芝不僅使生產(chǎn)成本大幅降低，還解決了“菌林矛盾”的問(wèn)題。林占熺等[7]對(duì)菌草栽培靈芝可行性進(jìn)行了研究。李娜[18]用菌草成功栽培了紫芝，并進(jìn)行了營(yíng)養(yǎng)成分的分析。王凱等[19]利用菌草栽培并觀察9種靈芝菌株的生長(zhǎng)情況及成分研究。該試驗(yàn)在前人的經(jīng)驗(yàn)基礎(chǔ)上采用新的菌草栽培靈芝。試驗(yàn)結(jié)果表明，除了芒萁、五節(jié)芒外，類蘆和綠洲1號(hào)也適合用于靈芝栽培，且6號(hào)配方為單一菌草配方，簡(jiǎn)單易于操作，很有發(fā)展前景，但是否可推向市場(chǎng)還需進(jìn)一步研究。

圖1 1號(hào)、2號(hào)、6號(hào)、7號(hào)及10號(hào)配方菌絲生長(zhǎng)情況Fig.1 Mycelium growth situations of formulas No.1,2,6,7 and 10

注：a.子實(shí)體成熟期；b.子實(shí)體生長(zhǎng)期。Note:a.Mature stage of fruiting bodies; b.Growth stage of fruiting bodies.圖2 子實(shí)體生長(zhǎng)情況Fig.2 Growth situation of the fruiting bodies

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Screening of Culture Medium Formula forGanodermalucidumCultivated by JUNCAO

WANG Jin-feng1,2,LIN Zhan-xi2*

(1.College of Horticulture,Fujian Agriculture and Forestry University,Fujian,Fuzhou 350002; 2.China National Engineering Research Center of JUNCAO Technology,Fujian,Fuzhou 350002)

[Objective] To screen the culture medium formula forGanodermalucidumcultivated by JUNCAO.[Method] Six kinds of JUNCAO and two auxiliary materials were screened by test-tube method. The growth situations of hypha and fruiting body in selected formulas were observed.[Result] The suitable formulas forGanodermalucidum(Ga0801) cultivated by JUNCAO were No.1(78%D.dichotoma+20%bran+2% gesso), 2(78%M.floridulus+20% bran+2% gesso),6(78%P.oasis1+20% bran+2% gesso) and 10(30%D.dichotoma+48%N.regnaudiana+20% bran+2% gesso). Among them,formula No.6 was the optimal,which had vigorous mycelium growth,early formation of primordium,strong fruiting body and high biotransformation rate.[Conclusion] This research provides scientific basis for the large-scale market cultivation ofGanodermalucidumby JUNCAO.

JUNCAO;Ganodermalucidum; Culture medium; Formula

福建省科技廳重大專項(xiàng)(2014NZ0002-1)；福建省菌草生態(tài)產(chǎn)業(yè)協(xié)同創(chuàng)新中心攻關(guān)項(xiàng)目(JCXTGG08)。

王錦鋒(1990- )，男，福建寧德人，碩士研究生，研究方向：菌草栽培食藥用菌。*通訊作者，研究員，從事菌草技術(shù)研究和推廣工作。

2016-10-26

S 567.3+1

A

0517-6611(2016)35-0029-03