王謙，史聰穎，張正，黃紫飄，宋倩

(河北大學生命科學學院食藥用真菌研究所,河北保定 071002)

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5種中草藥提取物對菇蠅的毒殺活性

王謙，史聰穎，張正，黃紫飄，宋倩

(河北大學生命科學學院食藥用真菌研究所,河北保定 071002)

采用藥膜法，以清水為陰性對照，測定了5種中草藥提取物對菇蠅的毒殺活性，結(jié)果顯示：在供試的5個濃度下，百部和苦參對菇蠅的毒殺活性顯著，在50 mg/mL質(zhì)量濃度下，處理12 h后，百部、苦參對菇蠅的毒殺活性分別是85.00%和81.67%，處理24 h，均達到了100.00%.川楝子、龍膽草、透骨草次之.通過LC50的測定，結(jié)果顯示，百部、苦參24 h毒殺LC50分別是13.790 mg/mL和18.668 mg/mL.田間防效試驗表明：百部和苦參提取物對菇蠅具有良好的藥效，用藥3天的防效分別達到73.66%和71.27%，用藥7天后維持在75.00 %左右，與清水對照相比防效顯著.建議在生產(chǎn)中輪流使用50 mg/mL的百部提取物和75 mg/mL的苦參提取物，在菇蠅發(fā)生初期及時噴霧防治.

中草藥；菇蠅；毒殺活性

在食用菌栽培過程中，菇蠅經(jīng)常發(fā)生[1-2]，其攜帶大量的病毒和病菌，在培養(yǎng)料或菇體上取食或產(chǎn)卵時，會傳播病毒病菌，病害侵染基質(zhì)和菇體，從而造成多種病蟲害交叉感染，影響了產(chǎn)量[3-4].為了提高產(chǎn)量,增加收益，大部分菇農(nóng)通過農(nóng)藥來抑制蟲害的發(fā)生[5-6],其中包括國家已經(jīng)明令禁止使用的農(nóng)藥如艾氏劑、狄氏劑、毒殺酚等.這些農(nóng)藥屬于有機氯農(nóng)藥和殺蟲劑，分解慢，極易在環(huán)境和食品中殘留，不僅影響人體健康，還影響外貿(mào)出口[7-8].因此，通過研究植物源材料[9-13]開發(fā)出環(huán)境友好型農(nóng)藥以提高生態(tài)效應成為熱點.為此，進行了5種中草藥提取物對菇蠅的毒殺活性研究，以期對食用菌生產(chǎn)中菇蠅的防治工作起到一定的技術支撐作用.

1 實驗材料

1.1 昆蟲

菇蠅，由河北大學食藥用真菌研究所實驗教學基地提供.

1.2 材料

百部、透骨草、龍膽草、川楝子、苦參(市購)，詳見表1.

表1 實驗植物樣品名錄

2 實驗方法

2.1 中草藥提取物的制備

將一定量的中草藥干品用10倍體積的水浸提，煮沸后采用文火繼續(xù)浸提15 min，過濾，收集濾液.將濾渣用8倍體積的水再次浸提，過濾收集濾液[14-16].合并2次過濾所得濾液，濃縮得到1 g/mL中草藥提取溶液，置于4 ℃低溫環(huán)境保存，備用.

2.2 中草藥提取物對菇蠅毒殺活性的觀察

菇蠅被有活性的化合物處理后，表現(xiàn)出中毒反應.其具體表現(xiàn)為：首先活動頻率增大增強；接著活動力減弱，漂浮于水面不動，對針觸反應敏捷；隨后顯示活力不足，幼蟲沉于水底，對針觸反應遲鈍；最后幼蟲軀體顏色發(fā)黑，身體萎縮，沉于水底不動，對針觸無反應，即死亡[17-18].

2.3 活性初篩 (藥膜法)

采用藥膜法[19]，在50 mL錐形瓶中加入5 mL稀釋好的藥液，迅速滾動形成均勻的藥膜，將剩下的藥液倒出.在出菇大棚內(nèi)，用捕蟲網(wǎng)隨機捕蟲，挑選20只形狀體重接近的菇蠅，放在盛有不同處理液的器皿內(nèi)，以清水做對照，每處理各重復3次，分別于12 h和24 h后觀察并記錄試蟲的狀態(tài)和死亡數(shù)，并計算試蟲的死亡率.

2.4 LC50的測定

依據(jù)初篩實驗結(jié)果，選擇活性較高的中草藥進行LC50的測定[20].應用SPSS 19.0對殺蟲活性的實驗數(shù)據(jù)進行毒力回歸分析，求得LC50等值.如果測試組的空白死亡率<5%，則實驗組死亡率不進行校正；如果測試組的空白死亡率>5%，則采用 Abbott 公式對各實驗組死亡率進行校正.

試蟲的死亡率和校正死亡率按照下列公式進行計算：

死亡率 =(死亡蟲數(shù)/總蟲數(shù))×100%[21],

校正死亡率 =(處理死亡率-對照死亡率)/(1-對照死亡率)×100%[21].

2.5 田間藥效試驗

田間藥效試驗在河北大學食藥用真菌研究所實驗教學基地平菇出菇棚進行.對初篩篩選出的藥劑進行田間藥效試驗.每種藥劑選擇 1 個田間推薦劑量，另設清水為空白對照.小區(qū)面積(5 m ×4 m)，每處理重復4次.分別將各藥劑對水攪拌均勻，用工農(nóng)16-型背負式手動噴霧器進行均勻噴霧1次.藥前采用5點取樣法進行取樣，每點選取2個平菇菌袋，做上標記，調(diào)查記錄活菇蠅蟲數(shù)，作為蟲口基數(shù)，藥后 3、7、10天統(tǒng)計標記菌袋菇蠅數(shù)量.計算蟲口減退率和校正防效.

蟲口減退率 = (施藥前蟲數(shù)-施藥后蟲數(shù))/施藥前蟲數(shù)×100%[22]，

校正防效 =(處理區(qū)蟲口減退率-對照區(qū)蟲口減退率)/(1-對照區(qū)蟲口減退率)×100%[22].

3 結(jié)果與分析

3.1 5種中草藥提取液對菇蠅的毒殺作用

采用藥膜法測定5種中草藥提取物對菇蠅的毒殺活性，具體情況如下.

表2是百部提取液對菇蠅的殺蟲活性結(jié)果.由表2可知，不同質(zhì)量濃度的百部對菇蠅均具有殺蟲活性，隨著質(zhì)量濃度的升高殺蟲活性增強，且隨著時間的延長也增強.處理12 h后，質(zhì)量濃度在100 mg/mL 下試蟲就全部死亡，殺蟲活性達到了100.00%；50 mg/mL下，殺蟲活性為85.00%，但是處理24 h后試蟲全部死亡，殺蟲活性達到了100.00%.綜上所述，在供試質(zhì)量濃度內(nèi)，用50 mg/mL的百部提取液處理菇蠅24 h，殺蟲活性即可達到100.00%.

由表3可知，在供試質(zhì)量濃度內(nèi)，用50 mg/mL的苦參提取液處理菇蠅24 h，殺蟲活性即可達到100.00%.

表2 百部提取液的殺蟲活性

表中數(shù)據(jù)均為3次重復的平均值.

表3 苦參提取液的殺蟲活性

表中數(shù)據(jù)均為3次重復的平均值.

同上，由表4可知，在供試質(zhì)量濃度內(nèi),用75 mg/mL的川楝子提取液處理菇蠅24 h，殺蟲活性即可達到100.00%.

由表5可知，在供試質(zhì)量濃度內(nèi),用75 mg/mL的龍膽草提取液處理菇蠅24 h，殺蟲活性即可達到100.00%.

表4 川楝子提取液的殺蟲活性

表中數(shù)據(jù)均為3次重復的平均值.

表5 龍膽草提取液的殺蟲活性

表中數(shù)據(jù)均為3次重復的平均值.

同上，由表6可知，在供試質(zhì)量濃度內(nèi),用100 mg/mL的透骨草提取液處理菇蠅24 h，殺蟲活性即可達到100.00%.

表6 透骨草提取液的殺蟲活性

表中數(shù)據(jù)均為3次重復的平均值.

綜上所述，在供試的5個質(zhì)量濃度下，百部和苦參對菇蠅的毒殺活性顯著，在50 mg/mL下，處理12 h后，百部、苦參對菇蠅的毒殺活性分別是85.00%、81.67%，處理24 h，均達到了100.00%.川楝子、龍膽草、透骨草次之.

3.2 百部、苦參提取物對菇蠅的毒力測定

測定百部、苦參24 h對菇蠅的LC50，結(jié)果見表7.由表7可以看出，百部對菇蠅具有較高的殺蟲活性，24 h的LC50為13.790 mg/mL，苦參的為18.668 mg/mL.

表7 百部、苦參提取物對菇蠅24 h 的毒力

3.3 田間防治效果

在平菇菇蠅發(fā)生期，將百部、苦參提取物按設計劑量兌水噴施平菇出菇袋，噴藥后于不同天數(shù)進行調(diào)查，結(jié)果經(jīng)整理、計算，列于表8.

表8 百部、苦參提取物防治菇蠅田間藥效試驗結(jié)果

由表8可以看出，50 mg/mL的百部提取物在藥后3、7、10天的蟲口減退率分別是70.43%、76.81%、57.89%，校正防效分別是73.66%、78.95%、63.05%；75 mg/mL的苦參提取物在藥后3、7、10天的蟲口減退率分別是67.74%、70.32%、56.35%，校正防效分別是71.27%、73.06%、61.70%；百部提取物的防效均高于苦參提取物.但是二者在藥后10天均出現(xiàn)了防效降低的現(xiàn)象.與清水對照相對比，百部、苦參對菇蠅均有較強的防效.

4 結(jié)論

不同中草藥對菇蠅的毒殺作用不同，隨著質(zhì)量濃度的增大毒殺作用增強.本實驗報道了應用中草藥對菇蠅進行防治的研究.結(jié)果表明：在藥膜法測定中，百部、苦參對菇蠅的毒殺活性最高，24 h毒殺LC50分別是13.790 mg/mL和18.668 mg/mL.川楝子、龍膽草、透骨草次之.

田間防效試驗表明：百部和苦參提取物對菇蠅具有良好的藥效，用藥3天的防效分別達到73.66%和71.27%，用藥7天后維持在75.00%左右，與清水對照相比防效顯著.建議在生產(chǎn)中使用50 mg/mL的百部提取物和75 mg/mL的苦參提取物，在菇蠅發(fā)生初期及時噴霧防治.為避免長期使用一種藥物使菇蠅產(chǎn)生抗藥性，因此建議百部和苦參輪流使用.

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(責任編輯：趙藏賞)

Insecticidal acticity of the botanical extracts from 5 Chinese herbs against phorid flies

WANG Qian,SHI Congying,ZHANG Zheng,HUANG Zipiao,SONG Qian

(Institute of Edible and Medicinal Fungi,College of Life Science,Hebei University,Baoding 071002,China)

Using the residue method,with water as the negative control,we measured the insecticidal acticity of the botanical extracts from 5 Chinese herbs against phorid flies.The results showed that in the selected five concentrations,the insecticidal activity ofStemonajaponicaandSophoraflavescensis significant,under 50 mg/mL mass concentration,12 h after treatment,the insecticidal activity were 85.00%,81.67%,after 24 h,reached 100.00%.Meliatoosendan、Gentianascabra,Phrymaleptostachya,take second place.Through LC50determination,the results showed that the 24 h LC50ofSt.japonicaandSo.flavescenswere 13.790 mg/mL and 18.668 mg/mL.Field control effect test showed that the extract ofSt.japonicaandSo.flavescenshas good efficacy against phorid flies,the control effect is 73.66% and 71.27% after three days,around 75.00% after 7 days,compared with clear water control.We recommend in production to use 50 mg/mLSt.japonicaand 75 mg/mLSo.flavescensalternatively, at the beginning of the phorid flies season.

Chinese herbs; phorid flies; insecticidal acticity

10.3969/j.issn.1000-1565.2016.06.011

2016-04-25

河北省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術體系食用菌創(chuàng)新團隊項目

王謙(1962-)，男，北京人，河北大學研究員，主要從事食藥用真菌研究與開發(fā)工作.E-mail:wq6203_cn@126.com

Q93-335

A

1000-1565(2016)06-0635-06