周慶民，馮萬宇，徐馨，張艷，黃健

（黑龍江省獸醫(yī)科學(xué)研究所，齊齊哈爾 161006）

奶牛乳頭藥浴涂膜劑的研制及臨床應(yīng)用效果試驗

周慶民，馮萬宇，徐馨，張艷，黃健

（黑龍江省獸醫(yī)科學(xué)研究所，齊齊哈爾 161006）

研制奶牛乳頭藥浴涂膜劑，并對其進(jìn)行臨床應(yīng)用效果試驗。采用SCC法和CMT法對空白對照組、4%次氯酸鈉組、0.5%洗必泰組、1%碘伏組和奶牛乳頭藥浴涂膜劑組5組進(jìn)行牛乳中體細(xì)胞數(shù)測定，對施藥后乳汁中主要成分（包括乳蛋白、乳脂、乳糖、乳汁比重）和泌乳量的變化差異進(jìn)行對比。結(jié)果表明：奶牛乳頭藥浴涂膜劑降低體細(xì)胞數(shù)效果最為明顯，且營養(yǎng)物質(zhì)均高于其他治療組；90 d時各組對奶牛隱性乳房炎的治愈率分別為25.00%、48.00%、65.52%、63.33%、86.67%；對奶牛乳房炎的預(yù)防效果顯示：對照組、洗必泰藥浴組和乳頭藥浴涂膜劑藥浴組的奶牛乳房炎發(fā)病率分別為69.49%、32.20%和8.47%，乳頭藥浴涂膜劑藥浴組預(yù)防率顯著高于其他各組（P＜0.01）。表明在奶牛生產(chǎn)中使用乳頭藥浴涂膜劑防治奶牛乳房炎，可顯著降低其發(fā)病率，顯著提高其治愈率。

乳頭藥浴涂膜劑；奶牛乳房炎；乳質(zhì)；體細(xì)胞數(shù)；泌乳量；治療；預(yù)防

奶牛乳房炎發(fā)病原因復(fù)雜，治療困難且治愈率低，導(dǎo)致奶牛產(chǎn)奶量大幅降低，治療費用和養(yǎng)殖成本卻顯著增加，還可能出現(xiàn)病原菌污染奶和抗生素治療奶，引起食品安全問題[1-2]。因此，對奶牛乳房炎應(yīng)以防治相結(jié)合的方式進(jìn)行控制。目前最主要的預(yù)防方法是乳頭藥浴，這是預(yù)防乳房炎最直接、最簡單、最有效和最經(jīng)濟(jì)的方法。生產(chǎn)中常用的藥浴消毒劑均為水溶液型[3-5]，其殺菌力維持時間短，有的對乳頭皮膚有刺激作用或腐蝕作用，引起乳頭皮膚皸裂，寒冷天氣還容易結(jié)冰而凍傷乳頭等不足。為此，黑龍江省獸醫(yī)科學(xué)研究所牛病研究室研制了一種新型的奶牛乳頭藥浴消毒劑——奶牛乳頭藥浴涂膜劑[6]。

為了驗證其臨床應(yīng)用效果，對奶牛乳頭藥浴涂膜劑與其他常用藥物同步進(jìn)行體細(xì)胞數(shù)測定、乳汁中主要成分和泌乳量含量測定，并對比其治療和預(yù)防效果差異，為臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)和理論基礎(chǔ)，對其對奶品質(zhì)、產(chǎn)奶量影響，及預(yù)防奶牛乳房炎的臨床應(yīng)用效果做出科學(xué)客觀評價。

1 材料和方法

1.1 主要試劑和試劑盒

聚乙烯醇、聚維酮碘、甘油、次氯酸鈉、洗必泰、碘伏均為分析純；乳成分檢測液、甘油三酯試劑盒、總蛋白測定試劑盒、葡萄糖測定試劑盒、奶牛體細(xì)胞檢測試劑盒。

1.2 試驗動物

患有隱性乳房炎的中國荷斯坦奶牛60頭：選自齊齊哈爾市某規(guī)?；膛雒谌榕Ｈ骸?～6歲、產(chǎn)犢2～5個月的中國荷斯坦奶牛177頭：選自齊齊哈爾市富裕縣某大型奶牛場。

1.3 方法

1.3.1 奶牛乳頭藥浴涂膜劑的研制[7]

成膜基質(zhì)制備：取125 g PVA加入1 000 mL純化水中浸泡12 h使其充分溶脹，將其轉(zhuǎn)入3 000 mL三角瓶中，再加入1 000 mL純化水，加熱4 h使其溶解成膠漿液。補足純化水至2 000 mL，繼續(xù)加熱2 h，密封，陰涼處靜置至室溫。

藥物有效成分預(yù)處理：用200 mL純化水溶解PVP-I 25 g。

藥物有效成分溶合：將200 mL PVP-I溶液緩慢勻速倒入PVA溶液中，用150 mL純化水分三次溶洗盛放PVP-I溶液的燒杯，每次溶洗后都將溶液緩慢勻速倒入PVA溶液中100 r·min-1的速度攪拌2 h，以確保兩者充分混合。

增塑劑添加：取125 mL甘油緩慢勻速加入磁力攪拌器上的PVA溶液中，再以150 mL純化水分三次溶洗盛放甘油的燒杯，每次溶洗后都將溶液緩慢勻速倒入PVA溶液中，使三者充分?jǐn)噭蚣吹谩?/p>

1.3.2 對奶品質(zhì)及產(chǎn)奶量影響效果試驗

試驗動物分組與給藥：將60頭檢測為隱性乳房炎陽性的中國荷斯坦奶牛，依據(jù)年齡、胎次、泌乳量和泌乳期相近的原則隨機分為5組，每組12頭。試驗I組為空白對照組，擠奶前用溫水擦洗乳區(qū)，不使用消毒劑；Ⅱ組在擠奶前用溫水擦洗乳區(qū)，擠奶后用4%次氯酸鈉浸泡乳頭；ⅡI組在擠奶前用溫水擦洗乳區(qū)，擠奶后使用0.5%洗必泰浸泡乳頭；IV組在擠奶前用溫水擦洗乳區(qū)，擠奶后用1%碘伏浸泡乳頭；Ⅴ組在擠奶前用溫水擦洗乳房，擠奶后用奶牛乳頭藥浴涂膜劑浸泡乳頭，試驗期90 d。在0、30、60、90 d采用SCC法和CMT法檢測牛乳中體細(xì)胞數(shù)，乳汁主要成分（包括乳蛋白、乳脂、乳糖、乳汁比重和乳汁酸度）的變化，同時記錄各組奶牛的日泌乳量。

數(shù)據(jù)處理：試驗數(shù)據(jù)采用SPSS軟件進(jìn)行單因素方差分析，結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

1.3.3 對奶牛隱性乳房炎的治療效果試驗

試驗方法同1.3.2，并在試驗第0、30、60、90 d各進(jìn)行隱性乳房炎檢測。根據(jù)乳汁體細(xì)胞計數(shù)結(jié)合CMT檢測結(jié)果對藥物的藥效做出判定，分為治愈、有效和無效，試驗期隱性乳房炎病例具有明顯的臨床癥狀則判定轉(zhuǎn)為臨床性乳房炎。記錄發(fā)病乳區(qū)數(shù)、治愈乳區(qū)數(shù)、有效乳區(qū)數(shù)和無效乳區(qū)數(shù)，并計算有效率（%）和治愈率（%）。

1.3.4 對奶牛乳房炎的預(yù)防效果試驗

在奶牛所處飼養(yǎng)環(huán)境、人員管理、擠奶等條件一致下，將試驗?zāi)膛＿M(jìn)行分組，隨機平均分成三組，每組奶牛59頭。A為對照組，擠奶前后不使用任何消毒殺菌藥物，只在擠奶前后用溫水擦洗乳房及奶頭即可；B組在擠奶前使用溫水擦洗乳房及奶頭，并在擠奶前后用0.3%～0.5%洗必泰溶液對乳頭進(jìn)行藥浴處理；C組也用溫水擦拭乳房及乳頭，并在擠奶后用奶牛乳頭藥涂膜劑浸泡奶頭。試驗周期為50 d，每天都要對試驗?zāi)膛Ｈ榉窟M(jìn)行觀察，每隔3 d對試驗組的牛乳進(jìn)行凝乳檢測，進(jìn)而查看試驗組奶牛乳房炎的發(fā)病情況，并對奶牛乳頭藥浴涂膜劑預(yù)防奶牛乳房炎的效果進(jìn)行分析評定。

2 結(jié)果與分析

2.1 對奶品質(zhì)及產(chǎn)奶量影響效果試驗結(jié)果

2.1.1 對乳汁中體細(xì)胞數(shù)的影響試驗

由表1可見，試驗Ⅰ組與試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組相比，乳汁中體細(xì)胞數(shù)較多，隨著時間延長，體細(xì)胞數(shù)整體呈現(xiàn)上升趨勢，但經(jīng)藥物處理的Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組體細(xì)胞數(shù)均顯著低于I組。經(jīng)藥物處理的各試驗組，在試驗30、60、90 d，隨著時間的增加，體細(xì)胞數(shù)逐漸降低，特別是試驗Ⅳ、Ⅴ組差異較顯著。上述結(jié)果表明，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組乳汁體細(xì)胞數(shù)均發(fā)生降低，但以試驗Ⅲ、Ⅴ組最為明顯，尤以Ⅴ組降低體細(xì)胞數(shù)最多。說明五組中奶牛乳頭藥浴涂膜劑降低體細(xì)胞數(shù)效果最為明顯，最能降低患乳受感染程度，最能抵制日產(chǎn)奶量下降，降低了奶損失量，且延長了乳制品的貨架期。同時，奶牛乳頭藥浴涂膜劑也最能抵抗酪蛋白質(zhì)含量的下降，保證奶質(zhì)[7-8]。

2.1.2 對乳成分的影響試驗乳蛋白含量變化試驗結(jié)果見表2，乳脂含量變化試驗結(jié)果見表3，乳糖含量變化試驗結(jié)果見表4，乳汁比重變化試驗結(jié)果見表5。

表1 各組奶牛乳汁體細(xì)胞數(shù)變化Table 1 Changes of dairy cattle milk somatic cell numbers in each group

表2 乳蛋白含量變化試驗結(jié)果Table 2 Test results of lactoprotein content change

表3 乳脂含量變化試驗結(jié)果Table 3 Test results of butterfat content change

表4 乳糖含量變化試驗結(jié)果Table 4 Test results of lactose content change

表5 乳汁比重變化試驗結(jié)果Table 5 Test results of milk proportion change

由表2、3、4、5可見，試驗30 d時，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組與試驗Ⅰ組相比，乳蛋白、乳脂、乳糖、乳比重差異均不顯著（P＜0.05），而至試驗60 d、90 d時，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組與試驗Ⅰ組相比，乳蛋白、乳脂、乳糖、乳比重均有一定上升，差異顯著（P＜0.05），其中試驗Ⅴ組與試驗Ⅰ組相比差異極顯著（P＜0.01）試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各組之間，差異不顯著。在整個試驗期內(nèi)，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組同試驗Ⅰ組相比，奶牛乳汁中乳脂、乳蛋白、乳糖及比重均有一定的提高，差異顯著或極顯著，并以試驗Ⅴ組提高最為顯著。乳蛋白、乳脂、乳糖是牛乳中主要的營養(yǎng)物質(zhì)，奶牛乳頭藥浴涂膜劑組此三種主要營養(yǎng)物質(zhì)高于其他治療組，說明奶牛乳頭藥浴涂膜劑最能夠保持營養(yǎng)物質(zhì)含量，保證了有效期內(nèi)乳制品的風(fēng)味口感[9]。

2.1.3 對泌乳量的影響試驗對泌乳量的影響試驗結(jié)果見表6。

表6 泌乳量影響試驗結(jié)果Table 6 Test result of lactation quantity affect

由表6可知，試驗30 d時，各試驗組奶牛的日泌乳量與試驗0 d比無明顯變化，但略高于試驗前；試驗90 d時，試驗Ⅰ組產(chǎn)奶量提高11.11%、試驗Ⅱ組產(chǎn)奶量提高7.95%、試驗Ⅲ組產(chǎn)奶量提高10.13%、試驗Ⅳ組產(chǎn)奶量提高11.57%、試驗Ⅴ組產(chǎn)奶量提高14.84%，乳頭藥浴涂膜劑組比對對照組提高3.73%，表明奶牛乳頭藥浴涂膜劑可顯著地提高隱性乳房炎奶牛的泌乳量。

2.2 對奶牛隱性乳房炎的治療效果試驗

對奶牛隱性乳房炎的治療效果試驗結(jié)果見表7。

表7 治療效果試驗結(jié)果Table 7 Test results of treatment effect

由表7可見，各用藥組在用藥后有很好的療效，試驗Ⅴ組在用藥后有效率和治愈率分別為96.67%和86.67%，其效果明顯優(yōu)于其他各試驗組。結(jié)果表明：奶牛乳頭藥浴涂膜劑對奶牛隱性乳房炎具有良好的預(yù)防效果。

2.3 對奶牛乳房炎的預(yù)防效果試驗對奶牛乳房炎的預(yù)防效果試驗結(jié)果見表8。

表8 預(yù)防效果試驗結(jié)果Table 8 Test results of prevention effect

由表8可知，對照組奶牛乳房炎發(fā)病率為69.49%，洗必泰藥浴組奶牛乳房炎發(fā)病率為32.20%，乳頭藥浴涂膜劑藥浴組奶牛乳房炎發(fā)病率為8.47%，乳頭藥浴涂膜劑藥浴組奶牛乳房炎發(fā)病率比對照組降低61.01%，比洗必泰藥浴組降低23.73%，奶牛乳頭藥浴涂膜劑應(yīng)用效果理想。

3 討論

試驗應(yīng)用乳頭藥浴涂膜劑防治奶牛隱性乳房炎，對降低乳汁中體細(xì)胞數(shù)效果明顯。由試驗可看出，試驗90 d后，奶牛乳頭藥浴涂膜劑將隱性乳房炎奶牛乳區(qū)體細(xì)胞數(shù)從1.40±0.09×106個·mL-1下降至0.55±0.06×106個·mL-1，效果明顯優(yōu)于其他試驗各組。乳頭藥浴涂膜劑防治隱性乳房炎的作用優(yōu)于其他藥物，是因為奶牛乳頭浸蘸藥物后在其表面既形成了一種維持時間長，作用持久的膜性物理防御屏障，同時其主要成分聚維酮碘也是一種優(yōu)良的皮膚消毒藥物，對病原微生物消殺效果好且極少產(chǎn)生毒副作用，同時對環(huán)境也幾乎沒有污染。五組中奶牛乳頭藥浴涂膜劑降低體細(xì)胞數(shù)效果最為明顯，最能降低患乳受感染程度，最能抵制日產(chǎn)奶量下降，降低了奶損失量，且延長了乳制品的貨架期。同時，奶牛乳頭藥浴涂膜劑也最能抵抗酪蛋白質(zhì)含量的下降，保證奶質(zhì)。

同其他各組相比，乳頭藥浴涂膜劑治療隱性乳房炎效果確實，而且提高了隱性乳房炎陽性奶牛泌乳量?；茧[性乳房炎乳區(qū)泌乳量可降低10%以上，乳汁中體細(xì)胞數(shù)與泌乳量呈負(fù)相關(guān)。有文獻(xiàn)報道奶牛日均泌乳量與隱性乳房炎發(fā)病程度呈極顯著負(fù)相關(guān)。試驗證明乳頭藥浴涂膜劑可以提高患隱性乳房炎奶牛泌乳量，試驗0 d的泌乳量為17.79±2.38 kg·d-1，而至試驗90 d時已達(dá)到20.43±2.26 kg·d-1，產(chǎn)奶量提高14.84%，對照組產(chǎn)奶量提高11.11%、乳頭藥浴涂膜劑組比對對照組提高3.73%，表明奶牛乳頭藥浴涂膜劑可顯著地提高隱性乳房炎奶牛的泌乳量。

乳蛋白、乳脂、乳糖是牛乳中主要的營養(yǎng)物質(zhì)，患隱性乳房炎奶牛乳汁的乳糖、乳脂含量會有所降低，乳糖及乳脂降低與乳汁體細(xì)胞數(shù)呈負(fù)相關(guān)。隱性乳房炎雖然可使乳汁總蛋白（主要是酪蛋白）數(shù)升高，但卻使乳汁中人體必需氮基酸等含量降低，試驗結(jié)果證實乳頭藥浴涂膜劑除對奶牛隱性乳房炎有顯著療效，同時改善乳汁質(zhì)量，提高乳脂、乳糖量，使乳蛋白質(zhì)恢復(fù)正常。五組中奶牛乳頭藥浴涂膜劑最能夠保持營養(yǎng)物質(zhì)含量，保證了有效期內(nèi)乳制品的風(fēng)味口感。

整個試驗期內(nèi)，次氯酸鈉、洗必泰、碘伏和奶牛乳頭藥浴涂膜劑均顯著降低了隱性乳房炎病牛體細(xì)胞數(shù)，但以乳頭藥浴涂膜劑效果最為明顯。在進(jìn)行奶牛隱性乳房炎臨床治療試驗時，奶牛乳頭藥浴涂膜劑對隱性乳房炎的治愈率和有效率分別為77.78%、88.89%，遠(yuǎn)高于其他各組。而用于預(yù)防奶牛隱性乳房炎時，奶牛乳頭藥浴涂膜劑藥浴組乳房炎發(fā)病率比對照組降低61.01%，比洗必泰藥浴組降低23.73%，差異極顯著（P＜0.05），奶牛乳頭藥浴涂膜劑對隱性乳房炎的預(yù)防效果最為顯著。

4 結(jié)論

對奶品質(zhì)及產(chǎn)奶量影響效果試驗結(jié)果表明：奶牛乳頭藥浴涂膜劑降低體細(xì)胞數(shù)效果最為明顯，最能降低患乳受感染程度，最能抵制日產(chǎn)奶量下降，也最能抵抗酪蛋白質(zhì)含量的下降，保證奶質(zhì)；且奶牛乳頭藥浴涂膜劑組三種主要營養(yǎng)物質(zhì)均高于其他治療組，說明奶牛乳頭藥浴涂膜劑最能夠保持營養(yǎng)物質(zhì)含量，保證了有效期內(nèi)乳制品的風(fēng)味口感；且奶牛乳頭藥浴涂膜劑可顯著地提高隱性乳房炎奶牛的泌乳量。

對奶牛隱性乳房炎的治療效果試驗結(jié)果表明：90 d時各組對奶牛隱性乳房炎的治愈率分別為25.00%、48.00%、65.52%、63.33%、86.67%，有效率分別為42.86%、72.00%、82.76%、73.33%、96.67%。其中奶牛乳頭藥浴涂膜劑的治療效果明顯優(yōu)于其他各試驗組。

對奶牛乳房炎的預(yù)防效果試驗結(jié)果表明：對照組、洗必泰藥浴組和乳頭藥浴涂膜劑藥浴組的奶牛乳房炎發(fā)病率分別為69.49%、32.20%和8.47%，乳頭藥浴涂膜劑藥浴組奶牛乳房炎發(fā)病率比對照組降低61.01%，比洗必泰藥浴組降低23.73%，將健康奶牛隱性乳房炎發(fā)病率控制在8.47%，顯著低于其他各組（P＜0.01）。結(jié)論：在奶牛生產(chǎn)中使用乳頭藥浴涂膜劑防治奶牛乳房炎，可顯著降低其發(fā)病率，顯著提高其治愈率。

奶牛乳頭藥浴涂膜劑是將消毒殺菌、成膜和護(hù)膚技術(shù)相結(jié)合，研制的一種新型奶牛乳頭藥浴消毒劑，具有三大功能，既可殺滅乳頭皮膚上的細(xì)菌，又可成膜封住乳頭防止病原菌的侵入，同時潤膚，代替了傳統(tǒng)的乳頭藥浴藥物，改變了傳統(tǒng)、單一藥浴作用，使乳頭藥浴功能擴(kuò)大化。同時對乳頭皮膚起到保健護(hù)理和防止皸裂作用，從而對乳房進(jìn)行全面的保護(hù)，有效地預(yù)防奶牛乳房炎的發(fā)生，提升了奶牛乳房炎防治水平。與其他傳統(tǒng)技術(shù)相比，此項技術(shù)更簡單、確實，作用時間更長，效果更好。

我省奶牛數(shù)量較多，乳頭藥浴已經(jīng)納入奶牛擠奶技術(shù)操作規(guī)程，是奶牛生產(chǎn)過程中的一個主要環(huán)節(jié)，奶牛擠奶后必須進(jìn)行乳頭藥浴，乳頭藥浴藥物使用范圍和市場需求量相當(dāng)大。奶牛乳頭藥浴涂膜劑的作用是多方面的，其使用效果大大高于目前市場上常用的藥浴藥物，顯示出絕對優(yōu)勢，在奶牛生產(chǎn)中廣泛使用乳頭藥浴涂膜劑防治奶牛乳房炎，可顯著降低其發(fā)病率，顯著提高其治愈率。

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Development and Clinical Application Experiment of Medicated Plastics Film-former for Dairy Cattle Nipples

Zhou Qingmin，F(xiàn)eng Wanyu，Xu Xin，Zhang Yan，Huang Jian
（Heilongjiang Institute of Veterinary Science，Qiqihar 161006）

The medicated plastics for cattle nipples and its clinical application experiment was studied.The somatic numbers in milk were determined for groups of control，4%chlorinated soda，0.5%chlorhexidine，1%Iodophors，and medicated plastics for cattle nipples by SCC and CMT methods.The changes of lactating amount and main components including lactoprotein，butterfat，lactose，and specific density of milk were compared after drug delivery.The results showed that the decrease of lactating amount was remarkable using medicated plastics for cow nipples and the main nutrient substances were higher than the other treatment group.The cure rate of recessive character garget under different groups were 25.00%，48.00%，65.52%，63.33%，and 86.67%respectively in 90 days.The disease incidence of garget in control group，chlorhexidine，medicated plastics for cow nipples was 69.49%，32.20%and 8.47%respectively.The prevention rate of the group of medicated plastics for cow nipples was significantly higher than other group（P＜0.01）.The results indicated that the medicated plastics for cow nipples could cut down the disease incidence significantly at accouchement，and could increase cure rate predominately.

medicated plastics for cow nipples；garget；galact quality；somatic number；lactating amount；cure；prevention

S854.5

A

1002-2090（2016）06-0059-06

10.3969/j.issn.1002-2090.2016.06.012

2015-07-16

黑龍江省科技廳課題（GC12B302）。

周慶民（1964-），男，研究員，東北農(nóng)業(yè)大學(xué)畢業(yè)，現(xiàn)主要從事臨床診療與新獸藥開發(fā)方面的研究工作。