魏?jiǎn)⑺?，?靜，王 琳，周 影，趙荷娟（．江蘇丘陵地區(qū)南京農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，江蘇南京0046；．江蘇省農(nóng)科院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所，江蘇南京004）

〈栽培技術(shù)〉

添加秸稈沼渣對(duì)銀耳生長(zhǎng)和生物轉(zhuǎn)化率的影響*

魏?jiǎn)⑺?，杜 靜2，王 琳1，周 影1，趙荷娟1
（1．江蘇丘陵地區(qū)南京農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，江蘇南京210046；2．江蘇省農(nóng)科院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所，江蘇南京210014）

為探索秸稈沼渣在食用菌栽培上的利用潛力，以棉籽殼為主的常規(guī)配方作為對(duì)照，研究不同比例的秸稈沼渣替代棉籽殼對(duì)銀耳菌絲、子實(shí)體生長(zhǎng)及絕對(duì)生物轉(zhuǎn)化率的影響，并監(jiān)測(cè)了培養(yǎng)料性質(zhì)的變化。結(jié)果表明，在供試培養(yǎng)料配方中，隨著秸稈沼渣比例增加，培養(yǎng)料的C/N遞減，而EC值遞增，銀耳菌絲生長(zhǎng)速度漸增，成耳率和絕對(duì)生物轉(zhuǎn)化率漸減；秸稈沼渣替代量為20%與40%的處理2、處理3的絕對(duì)生物轉(zhuǎn)化率與CK差異不顯著。但在銀耳的生長(zhǎng)過程中C/N和EC值都是逐漸下降的，而pH均在6～7之間。由此可見，秸稈沼渣可以部分代替棉籽殼進(jìn)行銀耳栽培，培養(yǎng)料中添加秸稈沼渣可促進(jìn)菌絲生長(zhǎng)，但配制培養(yǎng)料時(shí)必須調(diào)節(jié)好C/N，才能獲得更高的產(chǎn)量。秸稈沼渣在食用菌生產(chǎn)中具有較高的應(yīng)用價(jià)值。

秸稈沼渣；銀耳；培養(yǎng)料

隨著我國(guó)對(duì)農(nóng)作物秸稈綜合利用的重視，秸稈沼氣工程得到迅猛發(fā)展，而作為主要發(fā)酵殘留物的沼渣資源也越來(lái)越豐富。沼渣含有豐富的有機(jī)質(zhì)、腐殖酸、氮、磷、鉀元素及未腐熟原料等物質(zhì)[1-2]，是一種利用價(jià)值很高的廢棄物資源。目前國(guó)內(nèi)外綜合利用技術(shù)研究主要集中在生產(chǎn)有機(jī)肥和配制有機(jī)基質(zhì)[3-7]，在我國(guó)實(shí)際應(yīng)用中，沼渣基本以直接還田作肥料為主，方法簡(jiǎn)單粗放，一些無(wú)法及時(shí)利用的沼渣被丟棄田頭[8-9]，而有研究表明，沼渣潛在致病菌和植物毒性，好氧堆肥處理后再利用才是安全技術(shù)途徑[10-12]，簡(jiǎn)單利用和丟棄不僅會(huì)污染環(huán)境，而且也造成了資源浪費(fèi)。

秸稈沼渣是厭氧發(fā)酵的產(chǎn)物，發(fā)酵過程中，秸稈中的木質(zhì)素會(huì)在植物細(xì)胞壁中與纖維素和半纖維素等物質(zhì)結(jié)合在一起，形成“木質(zhì)素-碳水化合物聯(lián)合體”，這種聯(lián)合體的生物降解率較低[13]，因此造成秸稈沼渣中存在大量未被分解的木質(zhì)纖維素，而食用菌對(duì)木質(zhì)素、纖維素和半纖維素等物質(zhì)具有很強(qiáng)的分解和利用能力[14]，這些物質(zhì)是菌絲和子實(shí)體生長(zhǎng)的主要碳源，因此利用食用菌生產(chǎn)來(lái)消納沼渣具有很大的潛力。

近年來(lái)沼渣栽培食用菌的研究逐漸增多，沼渣在平菇、蘑菇、金針菇、杏鮑菇、白黃側(cè)耳等食用菌上的應(yīng)用研究均有開展[15-20]，但在銀耳（Tremella fuciformis Berk．）栽培上還沒有相關(guān)報(bào)道，而銀耳的伴生菌香灰菌可以分解半纖維素、纖維素和木質(zhì)素等物質(zhì)[21]，銀耳栽培可有效利用各種廢棄物資源中的木質(zhì)纖維素，為此我們開展了本試驗(yàn)，研究不同比例的秸稈沼渣替代棉籽殼對(duì)銀耳菌絲、子實(shí)體及絕對(duì)生物轉(zhuǎn)化率的影響，并在培養(yǎng)料滅菌后、菌絲滿瓶后和銀耳采收后監(jiān)測(cè)了各處理培養(yǎng)料的C/N、pH值和EC值，對(duì)這些影響銀耳生長(zhǎng)的主要化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了比較，以期尋找出添加秸稈沼渣對(duì)銀耳生長(zhǎng)的影響因素，從而為秸稈沼渣在食用菌生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1．1．1 供試菌株

供試銀耳品種為雪杉耳，栽培種購(gòu)自福建古田雪杉耳珍稀食用菌研究所。

1．1．2 培養(yǎng)料基本原料

秸稈沼渣由江蘇省農(nóng)科院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所提供，棉籽殼、麩皮、玉米粉等配料從市場(chǎng)采購(gòu)所得。秸稈沼渣的理化性質(zhì)為：含水率（12．90± 0．51）%，pH為6．42±0．05，EC值為（2．71±0．09）ms·cm-1，半纖維素含量（19．59±0．12）%，纖維素含量（24．53±0．87）%，本質(zhì)素含量（23．59±0．95）%，有機(jī)碳含量（42．53±0．54）%，全氮含量（1．46± 0．06）%，C/N為29．2±1．4；棉籽殼的理化性質(zhì)為：含水率（15．21±0．21）%，pH為6．00±0．08，EC值為（2．10±0．07） ms·cm-1，半纖維素含量 （35．38± 0．38）%，纖維素含量（37．35±0．78）%，本質(zhì)素含量（17．46±0．35）%，有機(jī)碳含量（59．07±0．39）%，全氮含量（0．74±0．01）%，C/N為79．8±1．39。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

銀耳培養(yǎng)料以棉籽殼為主的常規(guī)配方作為對(duì)照（CK）[22]，然后以不同比例的秸稈沼渣替代棉籽殼設(shè)計(jì)4個(gè)處理，各原料均以干基計(jì)算，見表1。

表1 試驗(yàn)培養(yǎng)料配方Tab．1 The formula of different cultivation substrates

1.3 試驗(yàn)方法

1．3．1 試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)

試驗(yàn)于2015年8月28日接種，10月7日統(tǒng)一采耳測(cè)產(chǎn)。試驗(yàn)在江蘇丘陵地區(qū)南京農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所菇房?jī)?nèi)進(jìn)行。

1．3．2 原料處理與栽培管理

將秸稈沼渣和棉籽殼曬干，剔除混雜物，秸稈沼渣粉碎，以4目篩過篩備用。銀耳采用塑料瓶進(jìn)行栽培，每瓶裝料量350 g，每個(gè)處理栽培量為35瓶，根據(jù)試驗(yàn)用量及原料的含量水率，按試驗(yàn)設(shè)置配比計(jì)算出棉籽殼、沼渣、麩皮、玉米粉所需用量并稱量，加重量比1:1．1左右的水混合均勻，調(diào)節(jié)培養(yǎng)料含水率為60%。按常規(guī)方法進(jìn)行培養(yǎng)料滅菌、接種和栽培管理，接種量為7 g·瓶-1左右。

1．3．3 不同處理對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響

接種后每個(gè)處理隨機(jī)選擇5瓶，分別于8 d、11 d測(cè)量菌絲穿插入料的長(zhǎng)度，記錄菌絲滿袋時(shí)間，原基形成時(shí)間，并相互比較菌絲的長(zhǎng)勢(shì)情況。

1．3．4 不同處理對(duì)子實(shí)體生長(zhǎng)的影響

子實(shí)體生長(zhǎng)過程中每個(gè)處理選取1瓶有代表性的銀耳進(jìn)行拍照記錄，每7天1次，共3次，子實(shí)體成熟后統(tǒng)計(jì)各處理銀耳的污染瓶數(shù)，計(jì)算出污染率、出耳率和成耳率，每個(gè)處理隨機(jī)采收3朵子實(shí)體，烘干成恒重，測(cè)定銀耳的絕對(duì)生物轉(zhuǎn)化率，絕對(duì)生物轉(zhuǎn)化率為銀耳子實(shí)體干重除以接種前栽培料干重乘以100%。1．3．5 不同生長(zhǎng)階段培養(yǎng)料化學(xué)性質(zhì)的監(jiān)測(cè)

銀耳栽培過程中，在培養(yǎng)料滅菌、菌絲滿瓶后和銀耳采收后3個(gè)階段進(jìn)行破壞性采樣，每個(gè)處理隨機(jī)選取3瓶，剪破塑料瓶，倒出培養(yǎng)料，將培養(yǎng)料混合均勻后烘干粉碎，測(cè)定有機(jī)碳、全氮、pH值及EC值等，并計(jì)算出C/N。有機(jī)碳采用重鉻酸鉀容量法-稀釋熱法、全氮采用硫酸-過氧化氫消煮，凱氏定氮法測(cè)定[23]。

1.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)方差分析采用SPSS 19．0軟件進(jìn)行，Duncan多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加秸稈沼渣對(duì)銀耳菌絲生長(zhǎng)的影響

各處理銀耳菌絲生長(zhǎng)情況見表2。表2中料面長(zhǎng)度是栽培瓶外測(cè)量的瓶壁菌絲穿插入料的長(zhǎng)度，菌絲長(zhǎng)勢(shì)“＋”越多表示菌絲越濃密。

表2 不同配方培養(yǎng)料銀耳菌絲生長(zhǎng)情況Tab．2 Mycelial growth of Temella fucifomis on different substrates

從表2可知，銀耳菌絲在各處理中均可生長(zhǎng)，但生長(zhǎng)存在差異。在所設(shè)處理間，接種后8 d和11 d菌絲料面長(zhǎng)度有顯著差異，處理5生長(zhǎng)最快，處理1（CK）最慢，表現(xiàn)為隨著秸稈沼渣含量的增加，銀耳菌絲的生長(zhǎng)速度遞增，而菌絲長(zhǎng)勢(shì)則呈遞減趨勢(shì)；處理4菌絲最先滿瓶，原基形成最早，而處理1（CK）則呈相反結(jié)果。

2.2 添加秸稈沼渣對(duì)銀耳子實(shí)體生長(zhǎng)的影響

各處理銀耳子實(shí)體生長(zhǎng)情況見表3和圖1。表3中成耳率是能夠正常生長(zhǎng)發(fā)育銀耳比例。

表3 不同配方培養(yǎng)料銀耳子實(shí)體生長(zhǎng)情況Tab．3 Fruit body growth of Temella fucifomis on different substrates

圖1 不同配方培養(yǎng)料銀耳子實(shí)體的生長(zhǎng)情況Fig．1 The pictures of Temella fucifomis fruit body growth on different substrates

由表3可知，處理3、處理4有一定的污染率，但觀察后發(fā)現(xiàn)均為栽培瓶出現(xiàn)破損造成，不應(yīng)是添加秸稈沼渣的原因；處理5沒有出耳，所以出耳率與成耳率均為0，其他處理中，出耳率均達(dá)到93%以上，而成耳率隨著秸稈沼渣含量的增加而下降。由圖1可見，處理2、處理3銀耳子實(shí)體前期長(zhǎng)勢(shì)具有優(yōu)勢(shì)，但后期生長(zhǎng)中，處理1（對(duì)照）表現(xiàn)更好，處理5一直處在原基分化狀態(tài)，沒有形成子實(shí)體。

2.3 不同生長(zhǎng)階段培養(yǎng)料化學(xué)性質(zhì)的變化

圖2為銀耳生長(zhǎng)不同階段各處理培養(yǎng)料的C/N、pH值和EC值的變化情況見圖2～圖4。

由圖2可見，由于秸稈沼渣C/N較棉籽殼低，不同處理間，隨著秸稈沼渣含量的增加，培養(yǎng)料的C/N逐漸變小。在銀耳生長(zhǎng)的不同時(shí)期，各處理C/N均呈下降趨勢(shì)，其中處理1～3菌絲滿瓶后和子實(shí)體采收后C/N顯著下降，處理5由于沒有形成子實(shí)體，菌絲滿瓶后和子實(shí)體采收后C/N差異不顯著。

由圖3可知，各處理培養(yǎng)料經(jīng)過菌絲生長(zhǎng)后和子實(shí)體生長(zhǎng)后，pH出現(xiàn)顯著變化，但測(cè)試結(jié)果沒有規(guī)律性，銀耳菌絲適宜的pH為5．2～7．2[21]，各處理培養(yǎng)料pH在6～7之間變化，均是適宜菌絲生長(zhǎng)范圍之內(nèi)。

圖2 不同生長(zhǎng)階段各處理培養(yǎng)料的C/N變化Fig．2 The C/N change of substrates during different growth period of Temella fucifomis

圖3 不同生長(zhǎng)階段各處理培養(yǎng)料的pH值變化Fig．3 The pH change of substrates during different growth period of Temella fucifomis

圖4 不同生長(zhǎng)階段各處理培養(yǎng)料的EC值變化Fig．4 The EC change of substrates during different growth period of Temella fucifomis

由圖4可知，由于秸稈沼渣EC值較棉籽殼高，不同處理間，隨著秸稈沼渣含量的增加，培養(yǎng)料EC值逐漸變大。在銀耳生長(zhǎng)的不同時(shí)期，各處理EC值均呈下降趨勢(shì)，其中處理1～處理4菌絲滿瓶后和子實(shí)體采收后培養(yǎng)料EC值均有顯著下降，處理5由于沒有形成子實(shí)體，菌絲滿瓶后和子實(shí)體采收后EC值差異不顯著。

2.4 添加秸稈沼渣對(duì)銀耳生物轉(zhuǎn)化率影響

不同處理培養(yǎng)料栽培銀耳的絕對(duì)生物轉(zhuǎn)化率情況見表4。

表4 不同配方培養(yǎng)料銀耳絕對(duì)生物轉(zhuǎn)化比較Table4 The comparison of Temella fucifomis biological efficiency on different substrates

由表4可見，在不同處理間，隨著秸稈沼渣含量的增加，絕對(duì)生物轉(zhuǎn)化率逐漸減小，處理1（CK）絕對(duì)生物轉(zhuǎn)化率最高，與處理4之間存在極顯著差異，但與處理2、處理3之間無(wú)顯著差異，處理5因沒有出耳，絕對(duì)生物轉(zhuǎn)化率為0。

3 討論

培養(yǎng)料的碳氮比是食用菌生長(zhǎng)極其重要的指標(biāo)，有研究表明，在氮含量固定情況下，C/N比值越大，銀耳菌絲體生長(zhǎng)越好[24]，而在一般情況下，碳源不足，食用菌菌絲容易早衰，不利積累代謝產(chǎn)物[25]，這些結(jié)果也在試驗(yàn)中得到印證。由于秸稈沼渣的含碳量較棉籽殼高，含氮量低，造成秸稈沼渣的C/N遠(yuǎn)低于棉籽殼。因此，在不改變其他配料比例的情況下，可添加秸稈沼渣會(huì)降低培養(yǎng)料的C/N。試驗(yàn)中隨著秸稈沼渣含量的增加，培養(yǎng)料的C/N遞減，銀耳菌絲長(zhǎng)勢(shì)、成耳率及絕對(duì)生物轉(zhuǎn)化率均遞減。

食用菌菌絲代謝需要較高的營(yíng)養(yǎng)成分，在適宜范圍內(nèi)，培養(yǎng)料的EC值越高，菌絲生長(zhǎng)越快[26]。秸稈沼渣是經(jīng)過發(fā)酵形成的產(chǎn)物，其EC值比棉籽殼高，并且秸稈中的大分子物質(zhì)已經(jīng)分解，更利于被食用菌菌絲利用[18,20]。試驗(yàn)中隨著秸稈沼渣含量的增加，培養(yǎng)料的EC值增加，銀耳菌絲的生長(zhǎng)速度呈遞增趨勢(shì)。

在供試培養(yǎng)料配方中，即便在沒有C/N調(diào)節(jié)情況下，20%和40%替代量處理的銀耳絕對(duì)生物轉(zhuǎn)化率已與對(duì)照差異不顯著。但由于初始C/N較低，子實(shí)體生長(zhǎng)后期，碳源不足，子實(shí)體停止生長(zhǎng)，產(chǎn)量均沒有超過CK。處理4因秸稈沼渣含量過高，碳源無(wú)法滿足子實(shí)體的正常生長(zhǎng)，導(dǎo)致成耳率大幅下降，極大影響了最終產(chǎn)量，處理5則因秸稈沼渣完全替代棉籽殼，培養(yǎng)料碳源嚴(yán)重不足，銀耳僅能長(zhǎng)出菌絲，盡管生長(zhǎng)速度最快，但菌絲長(zhǎng)勢(shì)過弱，無(wú)法形成子實(shí)體。

因此可以推斷，銀耳培養(yǎng)料在添加秸稈沼渣后，若能加大蔗糖比例來(lái)提高培養(yǎng)料的碳氮比，應(yīng)能獲得更高的產(chǎn)量。綜上結(jié)果，我們認(rèn)為培養(yǎng)料中添加秸稈沼渣可促進(jìn)食用菌菌絲生長(zhǎng)，但比例不宜過高，為保證獲得較高的產(chǎn)量，應(yīng)根據(jù)不同種類食用菌的生長(zhǎng)習(xí)性調(diào)節(jié)培養(yǎng)料的C/N。

目前我國(guó)食用菌生產(chǎn)的原料主要為棉籽殼，近年來(lái)食用菌產(chǎn)業(yè)得到飛速發(fā)展，許多地區(qū)棉籽殼已處于供不應(yīng)求的狀態(tài)，嚴(yán)重影響了食用菌的穩(wěn)定生產(chǎn)[27]。利用秸稈沼渣栽培食用菌，形成食用菌培養(yǎng)料新配方，可降低食用菌生產(chǎn)對(duì)棉籽殼的依賴程度，保障食用菌產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展，大量消納沼渣，綜合效益十分理想，具有較高的應(yīng)用價(jià)值。

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Effect on Tremella fuciformis Growth and Biological Efficiency Using Straw Biogas Residue as a Substitute for Cottonseed Hull in Substrate Formulae

WEI Qi-shun1,DU Jing2,WANG Lin1,ZHOU Ying1,ZHAO He-juan1
（1．Nanjing Institute of Agricultural Sciences in Jiangsu Hilly Area,Nanjing 210046,China; 2．Jiangsu Academy of Agricultural Sciences Institute of Agricultural Resources and Environment,Nanjing 210014,China）

To explore the potential of straw biogas residue utilization in edible fungi,the effect of hypha growth,fruit body development and biological efficiency of Tremella fuciformis were investigated using straw biogas residue as a substitute for portions of cottonseed hull in substrate formulae．The conventional formula with cotton seed hull was used as control．The physical and chemical properties change of substrate was also monitored．The results showed that with increasing proportion of straw biogas residues in substrate,the ratio of C/N decreased,while the EC value increased,T.fucifomis hypha growth rate increased too, but the fruit body mature rate and the biological efficiency decreased gradually,and the pH valuea was stable between 6-7．However the biological efficiency of treatment 2 and 3（the proportion of straw biogas residues were 20%and 40%respectively）was not significantly different from CK．In general the C/N and EC value were decreasing during the growth of T.fucifomis. Therefore,Straw biogas residue can partially replace cottonseed hull in T.fuciformis cultivation．Adding straw biogas residue in substrate could promote the growth of mycelia．The ratio of C/N must be adjusted correctly in the preparing substrates to get higher yield．Straw biogas residue has an important application value in the edible fungus production．

straw biogas residue;Tremella fuciformis;substrate

S646.9

A

1003-8310（2017）01-0014-05

10．13629/j．cnki．53-1054．2017．01．004

南京市科技計(jì)劃項(xiàng)目（201505023）。

魏?jiǎn)⑺矗?973-），男，本科，助理研究員，主要從事廢棄物綜合利用、食用菌栽培研究。E-mail:hhzx．w＠163．com

2016-12-01